嚴(yán)俊杰 黃桂平 謝寶貴 鄧優(yōu)錦
(福建農(nóng)林大學(xué)菌物研究中心,福州 350002)
棉籽殼營(yíng)養(yǎng)豐富,透氣性好,使用方便,是食用菌栽培的理想原料,應(yīng)用廣泛。[1]但在生產(chǎn)實(shí)踐中,純棉籽殼配制的培養(yǎng)料菌絲生長(zhǎng)較慢 (如金針菇),添加適量的木屑或甘蔗渣,可明顯提高菌絲的生長(zhǎng)速度。為了解釋這一現(xiàn)象,我們開展了棉籽殼提取物對(duì)主要食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響研究,以期為高效利用棉籽殼栽培食用菌提供參考。
1.1 供試菌株 本試驗(yàn)選用的18種主栽食用菌菌種均由福建省食用菌種質(zhì)資源保藏與管理中心提供,各菌株的保存編號(hào)及來(lái)源列于表1。
1.2 培養(yǎng)基 PDA固體培養(yǎng)基:去皮馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂20 g,水1 000 mL,pH值自然。
1.3 試驗(yàn)方法
(1)菌絲培養(yǎng)。將活化后的菌種接入PDA平板上,于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10~15天。使用內(nèi)徑為8 mm的無(wú)菌打孔器切取相同大小的菌種塊,接種到PDA平板培養(yǎng)基中央,于25℃培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng) 。[2]
(2)棉籽殼提取物的制備。選用新鮮棉籽殼,使用前在烈日下曝曬1~2天。稱取曝曬過(guò)的棉籽殼,加清水淹沒(méi)棉籽殼浸泡12 h,用紗布過(guò)濾棄水分,適當(dāng)擠壓排水,使棉籽殼的含水量在65%左右,分裝于塑料袋內(nèi),套上塑料環(huán)口,塞好棉花塞,分別置于高壓消毒鍋內(nèi),在不同溫度下處理3 h。本試驗(yàn)設(shè)置4個(gè)處理溫度,分別是110℃、115℃、120℃和125℃。處理結(jié)束并且冷卻后,從塑料袋中取出棉籽殼,用兩層紗布包好,重壓擠出的汁液,即為棉籽殼提取物,將提取物收集于瓷盤內(nèi),置于80℃下烘至恒重并研磨成粉末備用。
表1 試驗(yàn)菌株的信息
(3)棉籽殼提取物對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)。稱取125℃處理3 h制備的棉籽殼提取物,添加到PDA培養(yǎng)基中,125℃滅菌20 min,倒平板。冷卻后接種,在室溫25~28℃下培養(yǎng),測(cè)量生長(zhǎng)速度。
棉籽殼提取物添加量每升PDA培養(yǎng)基設(shè)置低劑量4.25 g和高劑量42.5 g 2個(gè)處理,以不添加為對(duì)照。每個(gè)處理3次重復(fù)。
(4)不同溫度處理的棉籽殼提取物對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響試驗(yàn)。PDA培養(yǎng)基滅菌后,冷卻到80℃,每升培養(yǎng)基加入42.5 g棉籽殼提取物,混勻后倒平板。按上述方法測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度。每個(gè)處理3次重復(fù)。
2.1 棉籽殼提取物得率 15 kg棉籽殼 (含水量11.7%),清水浸泡后撈起,擠去多余水分,得到41.79 kg的濕料,按食用菌袋栽的方法裝袋,分裝于60個(gè)塑料袋中,125℃處理3 h,擠出2.28kg汁液,80℃烘干得到30.62 g黑褐色的提取物。在41.79 kg濕料中,棉籽殼13.245 kg、水28.545 kg,擠出的汁液僅占水分的8%。如果能把濕料中的水分全部擠出 (實(shí)際上不可能),則可得到383.4 g提取物,提取得率為2.89%。
2.2 棉籽殼提取物對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響 本試驗(yàn)測(cè)定了棉籽殼提取物對(duì)18種食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響,試驗(yàn)結(jié)果列于表2。
從表2可以看出,棉籽殼提取物對(duì)18種食用菌菌絲生長(zhǎng)的作用可分為4類。第1類,低劑量不影響,高劑量有抑制作用,如金耳、香菇、平菇、雞腿菇、真姬菇、茶樹菇;第2類,低劑量和高劑量都有抑制作用,高劑量的抑制作用更強(qiáng),如金針菇、杏鮑菇、黑木耳、草菇;第3類,低劑量對(duì)菌絲生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,但高劑量有抑制作用,如滑菇、秀珍菇、金福菇、赤芝、灰樹花、阿魏菇、大杯蕈;第4類,低劑量和高劑量都有促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)的作用,高劑量的促進(jìn)作用更強(qiáng),如猴頭菇。
試驗(yàn)結(jié)果表明,棉籽殼中存在影響食用菌菌絲生長(zhǎng)的物質(zhì)。
2.3 不同溫度處理的提取物對(duì)草菇菌絲生長(zhǎng)的影響 棉籽殼提取物對(duì)不同食用菌菌絲的生長(zhǎng)有不同的影響,為了研究提取物對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響,本試驗(yàn)選用草菇作為材料,測(cè)定分別經(jīng)110℃、115℃、120℃和125℃處理的棉籽殼提取物與菌絲生長(zhǎng)的關(guān)系,以不加提取物為對(duì)照(CK)。試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。當(dāng)加入經(jīng)110℃處理棉籽殼制備的提取物時(shí),菌絲生長(zhǎng)速度為0.64 cm/天,與對(duì)照相比減少0.37 cm/天,抑制率 36.6%,差異達(dá)到極顯著水平。當(dāng)加入經(jīng)120℃處理棉籽殼制備的提取物時(shí),菌絲生長(zhǎng)速度為0.29 cm/天,與對(duì)照比,抑制率達(dá)71.3%。加入經(jīng)125℃處理棉籽殼制備的提取物時(shí),菌種不萌發(fā),抑制率100%??梢?jiàn),處理溫度越高,對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用越強(qiáng)。
表2 棉籽殼提取物對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響
已有報(bào)道,棉籽殼中的棉酚能夠調(diào)控果樹和煙草腋芽的發(fā)育,降低植物種子的萌發(fā)率,抑制植物幼苗生長(zhǎng),降低植物過(guò)氧化物酶活性。[3~4]在動(dòng)物體內(nèi)棉酚也會(huì)產(chǎn)生較大的毒性,對(duì)動(dòng)物的生殖細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷作用。[5]曾有學(xué)者提出棉籽殼中的棉酚可以抑制食用菌菌絲的生長(zhǎng),但沒(méi)有進(jìn)行較深入的研究。棉酚對(duì)堿、光、熱均不穩(wěn)定,高溫下易被氧化,[6]通過(guò)延長(zhǎng)處理時(shí)間或提高處理溫度可以減少棉酚含量。[7]而本研究結(jié)果則是,棉籽殼在經(jīng)過(guò)高溫處理后對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用更強(qiáng)。因此筆者認(rèn)為,棉酚并不是棉籽殼中抑制食用菌菌絲生長(zhǎng)的主要物質(zhì),具體是何物質(zhì)有待探明。
在試驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn)棉籽殼中存在某些可以促進(jìn)猴頭菇菌絲生長(zhǎng),并能使多種食用菌菌絲分支增多的物質(zhì),這對(duì)提高食用菌的產(chǎn)量具有一定的作用??梢酝ㄟ^(guò)進(jìn)一步的分離提取實(shí)驗(yàn),獲得能促進(jìn)食用菌菌絲生長(zhǎng)的物質(zhì),應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)中。
圖1 不同溫度處理棉籽殼制備的提取物與草菇菌絲生長(zhǎng)的關(guān)系
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