黃翠波

（廣西壯族自治區(qū)民族醫(yī)院檢驗科，廣西南寧 530001）

M蛋白是多發(fā)性骨髓瘤（MM）的特征之一，它是由單細(xì)胞系漿細(xì)胞株所合成的單一免疫球蛋白，免疫固定電泳（IFE）是免疫球蛋白增殖病鑒定的一項新技術(shù)，它包括瓊脂凝膠電泳和免疫沉淀兩個過程的操作，它能對M蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確分型和鑒定。筆者將78例多發(fā)性骨髓瘤患者血清進(jìn)行血清蛋白電泳、免疫固定電泳、免疫球蛋白測定，現(xiàn)分析如下：

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

2007年1月～2009年12月在我院住院的多發(fā)性骨髓瘤患者78例，按WHO制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)確診，其中，男54例，女24例；男女比例為2.25∶1；最小年齡33歲，最大年齡83歲，中位年齡57歲。其中12例以腎功能不全入院，后確診為多發(fā)性骨髓瘤。

1.2 方法

①血清蛋白電泳：采用法國Sebia Hydrasys全自動電泳分析系統(tǒng)進(jìn)行電泳和掃描。②免疫固定電泳：采用法國Sebia Hydrasys全自動電泳分析系統(tǒng)及原裝配套試劑盒，取按操作規(guī)程稀釋的患者血清10 μl加入點樣梳內(nèi)，經(jīng)瓊脂糖凝膠板電泳后，在每份樣本的6個泳道上分別加入抗IgG，抗IgA，抗IgM，抗 KAP，抗 LAM血清 10.5 μl。孵育，固定，沉淀蛋白，吸去多余的血清，干燥，酸紫染色，脫色，烘干，觀察結(jié)果。③免疫球蛋白含量測定：采用美國德靈公司生產(chǎn)的BN2特種蛋白分析儀及原裝配套試劑盒，利用免疫散射比濁法進(jìn)行測定。

2 結(jié)果

78例多發(fā)性骨髓瘤分型結(jié)果：IgG占52.6%，IgA占29.5%，IgM占1.3%，游離輕鏈型占15.1%，其中IgG，IgA型以κ型為主。首診以腎功能不全入院的12例患者中，IgG λ型6例，IgA λ 型 3例，IgG κ 型 2例，LAM 型 1例，λ 型占了 75%。

78例多發(fā)性骨髓瘤血清免疫固定電泳檢出率均為100.0%，血清蛋白電泳的檢出率為92.3%，其中IgA和輕鏈型血清蛋白檢出率分別為82.0%和63.0%。因此免疫固定電泳的檢出率明顯高于血清蛋白電泳。

各型多發(fā)性骨髓瘤的免疫球蛋白定量結(jié)果見表1。表1顯示同型的免疫球蛋白顯著升高。

表1 各型多發(fā)性骨髓瘤的免疫球蛋白定量結(jié)果(mg/dl)Tab.1 Quantitative results of various types of multiple myeloma immunoglobulin(mg/dl)

3 討論

多發(fā)性骨髓瘤是漿細(xì)胞病中最常見的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率近年有逐漸上升趨勢，其免疫學(xué)特征表現(xiàn)為血清及尿中出現(xiàn)M蛋白、血清免疫球蛋白明顯降低。增生的漿細(xì)胞浸潤及其所生成的產(chǎn)物可引起一系列器官功能障礙，臨床多有骨痛、溶骨損害、貧血、腎功能不全、高鈣血癥等表現(xiàn)[1]?；颊叨嘁怨峭?、腎病等繼發(fā)病就診，常被誤診為骨折、腎小球腎炎等疾病。據(jù)不同醫(yī)院統(tǒng)計資料分析，誤診率可達(dá)54.00%～69.11%[2]。在我院確認(rèn)的78例多發(fā)性骨髓瘤中，其中12例是以腎功能不全入院，3例是以骨折入院后經(jīng)血清免疫固定電泳、血清蛋白電泳、免疫球蛋白測定及骨髓細(xì)胞學(xué)檢查確診為多發(fā)性骨髓瘤。在這12例以腎功能不全入院的患者中，9例是λ型占75%。多發(fā)性骨髓瘤中，λ鏈腎損害發(fā)生率高于κ鏈，所有尿中排泌本-周蛋白的患者均發(fā)展至腎損害[3]，本組實驗與文獻(xiàn)報道一致。因此對腎功能不全者應(yīng)做免疫固定電泳檢測以避免誤診或漏診，同時對免疫固定電泳為λ型的患者應(yīng)密切關(guān)注其腎臟功能的損傷。

血清蛋白電泳雖然具有簡單、快速、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點，但在多發(fā)性骨髓瘤出現(xiàn)M蛋白早期或非惡性單克隆γ球蛋白增多時，多克隆性免疫球蛋白常不減低，單克隆性蛋白因含量低，在血清蛋白電泳中M蛋白峰弱或隱含于正常β或γ區(qū)帶而被忽略。另外輕鏈病和重鏈病的M成分在蛋白電泳圖上通常不明顯，在血清蛋白電泳中不一定出現(xiàn)M帶，易造成漏診，此時應(yīng)進(jìn)行免疫固定電泳，因免疫固定電泳靈敏度為0.5～1.5 g/L，其靈敏度高于血清蛋白電泳。在本組實驗中，血清蛋白電泳檢出率為92.3%，其中輕鏈型檢出率僅占63.0%，IgA型檢出率為82.0%，免疫固定電泳檢出率均為100.0%，檢出率明顯高于血清蛋白電泳，而且免疫固定電泳能對M蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確分型。M蛋白的分型對多發(fā)性骨髓瘤的診斷和鑒別診斷、預(yù)后及治療具有重要意義。由于不同的免疫球蛋白類型會出現(xiàn)不相同的臨床結(jié)果[4]。免疫固定電泳能有效地減少漏診，同時能快速地為臨床提供確診依據(jù)。

多發(fā)性骨髓瘤是單克隆漿細(xì)胞惡性增殖，產(chǎn)生的免疫球蛋白是均一的單克隆性，呈同一型、同一亞型、同一基因型。惡性漿細(xì)胞的增生，抑制正常免疫球蛋白的產(chǎn)生，因此M蛋白所屬免疫球蛋白顯著增高（大多在30 g/L以上）[5]。由表1可知，不同類型的多發(fā)性骨髓瘤中，同型的免疫球蛋白明顯升高，其他各種免疫球蛋白正?；蛳鄬档?。M蛋白的數(shù)量反映腫瘤容量的大小和單克隆增生的程度，而免疫球蛋白定量測定有助于確定M蛋白的類別及數(shù)量。因此，多發(fā)性骨髓瘤患者應(yīng)進(jìn)行免疫固定電泳對M帶準(zhǔn)確分型后，測定免疫球蛋白含量有助于臨床觀察療效。

免疫固定電泳技術(shù)是一種特異、靈敏及分辨率高的快速分離及鑒別單克隆蛋白的方法，它具有比骨髓細(xì)胞學(xué)檢查更簡單、快速的優(yōu)勢。因此免疫固定電泳是快速鑒別與診斷多發(fā)性骨髓瘤的最理想的方法，同時免疫球蛋白的測定能進(jìn)一步印證分型結(jié)果，并能給臨床觀察療效提供有利的依據(jù)。

[1]楊志才,高玉杰,張春明,等.多發(fā)性骨髓瘤血清蛋白電泳與免疫分型[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,26(1):34-35,38.

[2]Kyle RA,child JA,Anderson K.Criteria for the classification of monoclonal gammopathies,multiple myeloma and related disorders:a report of the International Mycloma Working Group[J].Br J Haematol,2003,121(5):749-757.

[3]Knudsen LM,Hippe E,Hjorth M,et al.Real function in newly diagnosed multiple myeloma——a demographic study of 1353 patients,The Norclic Myeloman study Group[J].Eur J Hoematol,1994,53(4):207-212.

[4]Klouche M,Bradwell AR,Wilhelm D,et al.Subclass typing of IgG paraproteins by immunofixation electrophoresis[J].Clin Chem,1995,41(10):1475-1479.

[5]王蘭蘭.臨床免疫學(xué)和免疫檢驗[M].3版.北京:人民出版社,2003:66.