鐵騎力士馮光德實(shí)驗(yàn)室 賴守勛 葉兆美 鄧小麗
豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)是引起多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)的主要病原體。研究表明,臨床上PMWS主要表現(xiàn)為斷奶仔豬皮膚蒼白、發(fā)熱、進(jìn)行性消瘦,伴隨呼吸與消化系統(tǒng)失調(diào)。感染豬群中發(fā)病率為5%~25%,死淘率達(dá)80%。此外,豬皮炎與腎炎綜合征(PDNS)、增生性壞死性肺炎、豬呼吸道綜合征、繁殖障礙、先天性顫抖、胎兒心肌炎及腸炎等疾病也與PCV2感染有關(guān)。PCV2感染可導(dǎo)致動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)功能嚴(yán)重受損,形成免疫抑制,增強(qiáng)對(duì)其他多種病原體的易感性,引起在正常情況下具有較低致病性的病原體感染發(fā)病,使豬群發(fā)生嚴(yán)重的復(fù)發(fā)性疾病和多重感染。王澤華和王錫禎(2009)對(duì)國(guó)內(nèi)一些地區(qū)的初步調(diào)查,該病在豬場(chǎng)的陽(yáng)性率為65.42%,豬群的血清學(xué)的陽(yáng)性率為53.71%,一般感染率為26.03%~77.46%。疫苗免疫是控制傳染病引起相關(guān)疾病的重要手段之一,但目前國(guó)內(nèi)PCV2疫苗研究還處于實(shí)驗(yàn)室階段。本研究對(duì)PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng)使用滅活疫苗的效果進(jìn)行驗(yàn)證,并為制定合理的免疫程序提供依據(jù),為控制本病尋求新的方法和途徑。
豬PCV2滅活疫苗由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)提供;豬PCV2 ELISA診斷液購(gòu)自武漢科前生物技術(shù)公司;M0D680酶標(biāo)儀、Kinco-mcd測(cè)定儀。
2.1 安全試驗(yàn) 選擇8頭仔豬注射1頭份,觀察1周有無(wú)異常反應(yīng),如無(wú)異常開(kāi)展下面的試驗(yàn)。
2.2 小群試驗(yàn) 試驗(yàn)分組:隨機(jī)挑選6窩21日齡、體重相近的健康約克仔豬36頭(每窩6頭),隨機(jī)分成3組,每組確保有同窩豬2頭,飼養(yǎng)在同一幢相鄰的豬圈內(nèi)。試驗(yàn)1組:在25日齡注射PCV2滅活苗1頭份,間隔28 d再注射生理鹽水2 mL;試驗(yàn)2組:在25日齡注射PCV2滅活苗1頭份,間隔28 d再注射1頭份;對(duì)照組(試驗(yàn)3組):在25日齡注射生理鹽水2 mL,間隔28 d再注射生理鹽水 2 mL。分別在 25、40、56、85日齡前腔靜脈采血,分離血清備用。
豬群生長(zhǎng)情況觀察:分別于21、56、90日齡和120日齡時(shí)進(jìn)行稱重,比較3組豬只的生長(zhǎng)速度;分別觀察記錄豬只在試驗(yàn)期間的發(fā)病情況,主要觀察指標(biāo)咳嗽喘氣、廢食、消瘦、死亡等。通過(guò)生長(zhǎng)速度、發(fā)病死亡情況比較分析疫苗的免疫保護(hù)效果。
2.3 大群試驗(yàn) 在上述免疫試驗(yàn)結(jié)束后,試驗(yàn)無(wú)異常情況,再選擇21日齡仔豬10批2342頭,轉(zhuǎn)入保育舍的斷奶仔豬隨機(jī)分成2組,一組在25日齡注射一頭份PCV2疫苗,另一組不注射,記錄21日齡體重,90日齡成活率、體重和發(fā)病情況。
抗體測(cè)定:檢測(cè)血清PCV2抗體。
3.1 安全試驗(yàn) 試驗(yàn)結(jié)果表明,PCV2疫苗免疫25日齡仔豬未見(jiàn)異常反應(yīng),說(shuō)明疫苗是安全的。
3.2 小群試驗(yàn)
3.2.1 免疫PCV2疫苗對(duì)發(fā)病情況和成活率的影響 結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn),1組和2組免疫了PCV2疫苗,到120日齡時(shí),成活率達(dá)91.7%,而對(duì)照組死亡率卻很高。豬群的發(fā)病情況:試驗(yàn)組發(fā)病較少,對(duì)照組的豬多因呼吸疾病、瘦弱而死,但死亡時(shí)間多集中在90~120日齡。另外,因豬場(chǎng)近期流行皮炎腎炎綜合征,但1組和2組的癥狀比3組輕。說(shuō)明疫苗對(duì)PDNS有一定的保護(hù)作用。豬的發(fā)病和死亡時(shí)間多集中在90~120日齡階段,可能是豬場(chǎng)因免疫抑制問(wèn)題,豬感染多種病原,造成發(fā)病死亡,而免疫組可降低PCV2造成的免疫抑制,豬的抵抗力相對(duì)較好,死亡率低。
表1 免疫PCV2疫苗對(duì)豬發(fā)病和成活率的影響
3.2.2 免疫PCV2疫苗對(duì)增重的影響 結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn),三組之間平均增重差異不顯著(P>0.05)。從豬群的生長(zhǎng)來(lái)看,免疫組生長(zhǎng)均勻度好于對(duì)照組。各組凈增重免疫組均明顯高于對(duì)照組。
3.2.3 免疫PCV2疫苗對(duì)PCV2抗體的影響 結(jié)果見(jiàn)表3。從表3結(jié)果來(lái)看,免疫組在40日齡和56日齡的抗體均極顯著低于對(duì)照組 (P<0.01),而在85日齡1組快速升高,而2組仍然在較低的水平,這可能是因?yàn)槊庖吆?,豬只對(duì)野毒有一定的抵抗力,所測(cè)得的抗體是免疫抗體,抗體水平較低,而未免疫組是野毒感染產(chǎn)生的抗體,因此抗體水平較高。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)經(jīng)免疫的豬的抗體比較均勻,而1組的后期和3組整個(gè)周期抗體水平不整齊,這有可能是病毒感染造成的。只免疫一次的保護(hù)時(shí)間較短,在后期感染野毒后迅速升高,而免疫2次的豬能保護(hù)較長(zhǎng)時(shí)間。而對(duì)照組的情況卻與之不同,抗體水平一直維持較高的水平,可能是豬場(chǎng)分娩、保育舍中均存在嚴(yán)重的病毒污染,不斷感染仔豬造成。
表2 免疫PCV2疫苗對(duì)豬增重的影響
表3 免疫PCV2疫苗對(duì)PCV2抗體的影響
3.3 大群試驗(yàn) 結(jié)果見(jiàn)表4。試驗(yàn)結(jié)果表明,免疫組的成活率達(dá)97.4%,較未免疫組提高2.7個(gè)百分點(diǎn),日增重提高37 g。而且從外觀觀察,免疫豬群的均勻度明顯好于未免疫組。
表4 大群免疫效果
對(duì)仔豬免疫PCV2疫苗,可有效的產(chǎn)生對(duì)PCV2野毒感染保護(hù),提高仔豬只的成活率,降低豬只因PCV2感染引起相關(guān)疾病的發(fā)病程度。因此PCV2陽(yáng)性豬場(chǎng),在母源抗體消失之前對(duì)仔豬進(jìn)行疫苗接種是非常必要的。
[1]王澤華,王錫禎.豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)調(diào)查及其防治[J].中國(guó)動(dòng)物保健,2009,2:62 ~ 65.