劉 政，侯玉芬，劉 明

深靜脈血栓形成(deep venous thrombosis，DVT)是一種臨床常見(jiàn)疾病，多發(fā)生于下肢，急性期血栓易脫落導(dǎo)致肺栓塞，危及生命，后期表現(xiàn)為下肢腫脹、頑固性小腿潰瘍等后遺癥，影響患者生活質(zhì)量。目前，DVT已成為當(dāng)今影響人類(lèi)健康的重要疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，確切機(jī)制尚不清楚。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，P-選擇素與深靜脈血栓形成密切相關(guān)[1]，但相關(guān)臨床研究較少。我院于2006年2月—2008年11月，通過(guò)觀察DVT患者血漿P-選擇素的變化，從分子生物學(xué)方面探討其在DVT中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 32例DVT病人，從發(fā)病到入院時(shí)間12 h～15 d，平均5.5 d。男14例，女18例。年齡31～72歲，平均(50.1±13.23)歲。均符合DVT診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除嚴(yán)重心肺疾患、惡性腫瘤、糖尿病、結(jié)締組織病及嗜煙患者。對(duì)照組為健康成年人20例，男8例，女12例。年齡33～74歲，平均(49.05±12.20)歲。

1.2 標(biāo)本采集 從肘前靜脈抽血1.8 mL，置于含有0.2 mL的2%EDTA·Na2抗凝液的塑料試管中，3 000 r離心10 min，收集上層液（血漿，黃色），置于-20℃保存待測(cè)。以ELISA方法測(cè)血漿P-選擇素水平，藥盒由上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司提供。同時(shí)采血，以全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)（BPC）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為有顯著性差異。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示，DVT組和健康對(duì)照組性別、年齡之間比較無(wú)顯著性差異（P>0.05）,詳見(jiàn)表1。DVT組血漿P-選擇素水平為(48.39±10.26)ng/mL，明顯高于健康對(duì)照組，兩者比較有顯著性差異（P<0.05）；血小板計(jì)數(shù)測(cè)定，DVT組略高于健康對(duì)照組，但兩者比較無(wú)顯著性差異（P>0.05），詳見(jiàn)表2。

表1 DVT組與健康對(duì)照組性別、年齡比較(±s)

表1 DVT組與健康對(duì)照組性別、年齡比較(±s)

注：組間性別構(gòu)成比，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，P>0.05；組間年齡比較，P>0.05

n組別DVT組對(duì)照組32 20男性14 8女性18 12平均年齡（歲）50.10±13.23 49.05±12.20

表2 DVT組與健康對(duì)照組血漿P-選擇素水平和血小板計(jì)數(shù)比較(±s)

表2 DVT組與健康對(duì)照組血漿P-選擇素水平和血小板計(jì)數(shù)比較(±s)

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05

n組別DVT組對(duì)照組32 20 P-選擇素（ng/mL）48.39±10.26*17.76±6.06血小板（×109/L）203.51±65.55 185.85±45.54

3 討論

下肢深靜脈血栓形成的發(fā)病機(jī)制甚為復(fù)雜。目前，大多數(shù)學(xué)者仍公認(rèn)1856年Virchow提出的的三大發(fā)病因素，即血液高凝狀態(tài)、血流滯緩、血管壁損傷是導(dǎo)致血栓形成的的原因。近年來(lái)，隨著科學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)炎癥與血栓形成之間存在著密切的聯(lián)系[2]。傳統(tǒng)上認(rèn)為，炎癥和血栓形成是兩個(gè)相互獨(dú)立的病理過(guò)程。現(xiàn)研究認(rèn)為，體內(nèi)炎癥-凝血之間存在網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，一方面炎癥促進(jìn)血液高凝狀態(tài),易導(dǎo)致血栓形成；另一方面血栓形成中的物質(zhì)也可引起炎癥[3]。有學(xué)者認(rèn)為，炎癥的促凝作用以及凝血-炎癥網(wǎng)絡(luò)的相互作用所致的惡性循環(huán)，已成為血栓形成的重要發(fā)病機(jī)制[4]。

當(dāng)前，關(guān)于細(xì)胞黏附分子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在深靜脈血栓形成發(fā)病機(jī)制中的研究較少，這制約了對(duì)DVT防治的深入開(kāi)展。P-選擇素屬細(xì)胞黏附分子家族[5]，存在于內(nèi)皮細(xì)胞的Weibel-Palade小體及血小板的α顆粒和致密顆粒中。內(nèi)皮細(xì)胞處于靜息狀態(tài)時(shí)，P-選擇素幾乎不表達(dá)，一旦受到炎性介質(zhì)如凝血酶、組胺、腫瘤壞死因子、氧自由基等刺激后，P-選擇素迅速表達(dá)于細(xì)胞表面[6]，介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞和炎性細(xì)胞的黏附以及激活的血小板與單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的黏附［6-7］，在炎癥和血栓形成中起著中心環(huán)節(jié)的作用[8]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究顯示[1]，在深靜脈血栓形成的早期，P-選擇素在血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)明顯增多。本臨床研究表明，DVT患者血漿P-選擇素明顯高于對(duì)照組，但兩組間血小板數(shù)量無(wú)顯著性差別，提示P-選擇素介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)與下肢深靜脈血栓形成密切相關(guān)，即P-選擇素水平的升高，直接反映了靜脈壁的炎癥反應(yīng)和血栓形成的惡性循環(huán)。因此，P-選擇素可以作為早期診斷DVT的標(biāo)志物，也為DVT患者療效評(píng)估以及抗栓藥物的研究提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)DVT發(fā)病機(jī)制的研究有重要意義。但從文獻(xiàn)上看，血漿P-選擇素水平在嚴(yán)重心肺疾患及惡性腫瘤、糖尿病、結(jié)締組織病中也可升高，分析DVT患者病情時(shí)應(yīng)予注意。

[1]劉政，侯玉芬，張勇，等.消栓通脈顆粒劑對(duì)深靜脈血栓形成血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)P-選擇素的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2006,12(6):572.

[2]Esmon CT.Inflammation and thrombosis[J].J Thromb Haemost，2003,1(7):1343.

[3]張卉，賀蓉，賀石林.炎癥與血栓形成[J].中華醫(yī)學(xué)雜志，2004，84（9）：784.

[4]劉澤霖.炎癥與血栓形成[J].血栓與止血學(xué)，2004，10（3）：142.

[5]Mc Ever RP.Properties of Gmp-140,an inducible granule mem?brane protein of platelets and endothelium[J].Blood Cells,1990,16(1):73.

[6]Iwamura T,Caffrey TC,Kitamura N,et al.P-selectin expression in a metastatic pancreatic tumor cell line(SUIT-2)[J].Cancer Research,1997,57:1206.

[7]Mayadas TN,Johnson RC,Raybum H,et al.Leukocyte rolling and ex?travasation are severely compromised in P selectin-deficient mice[J].Cell,1993,74:541.

[8]阮長(zhǎng)耿.炎癥與血栓形成[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2004，12（1）：1.