陳 睿， 姚素波， 汪 茜， 孫秋艷， 曾 陽(yáng)， 包 旭*

(1.青海師范大學(xué)生命與地理科學(xué)院，青海西寧810008;2.四川大學(xué)華西醫(yī)院金卡醫(yī)院;3.四川大學(xué)華西藥學(xué)院，四川成都610041)

感冒屬上呼吸道感染范疇臨床上以發(fā)熱及鼻咽部卡他癥狀為主要表現(xiàn)，是最常見的呼吸道傳染病、多發(fā)病。本實(shí)驗(yàn)以風(fēng)寒感冒片解表發(fā)汗，疏風(fēng)散寒功效為指標(biāo)觀察采用分散片工藝流浸膏的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎的作用。

1 材料

1.1 藥物 風(fēng)寒感冒分散片流浸膏:規(guī)格5 g(生藥)/mL，由河北萬(wàn)歲藥業(yè)有限公司提供，批號(hào):040808，用生理鹽水配制成 0.52 g、0.26 g、0.13 g(生藥)/mL 的濃度作為藥物高、中、低劑量供實(shí)驗(yàn)用。風(fēng)寒感冒顆粒:8 g/袋，1.3 g(生藥)/1 g顆粒，由德陽(yáng)三九藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào):0306001，用生理鹽水配制成0.52 g(生藥)/mL濃度供實(shí)驗(yàn)用。阿司匹林腸溶片，0.3 g/片，西北第二合成制藥廠生產(chǎn)，批號(hào):9812022，以生理鹽水配制成30 mg/mL濃度供實(shí)驗(yàn)用。冰醋酸:500 mL/瓶，分析純，由中國(guó)成都化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，批號(hào):20040523。伊文思藍(lán):上?；瘜W(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站經(jīng)銷，行知中學(xué)辦工廠分裝，批號(hào):820805。鹽酸嗎啡:規(guī)格1 g/瓶，由國(guó)營(yíng)東北第六制藥廠生產(chǎn)，批號(hào):590002。醋酸:分析純，成都石羊化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號(hào):870330。2.4-二硝基酚:上海試劑三廠生產(chǎn)，批號(hào):900915。酵母粉:由中外合營(yíng)梅山——馬利酵母有限公司生產(chǎn)，批號(hào):980630。

1.2 動(dòng)物 昆明種小鼠，體重17～22 g，♀♂兼用，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物級(jí)別:一級(jí)。SD大鼠，體重160～180g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物級(jí)別:一級(jí)。

1.3 儀器 SHH.W21.Cr600恒溫水浴，北京長(zhǎng)安科學(xué)儀器廠出品;BS210s電子天平，Sartorius公司;T1000電子天平，ELECTRONIC SCALE;MC-3B型電腦數(shù)字式體溫計(jì)，歐姆龍大連有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響 取昆明種小鼠按體重隨機(jī)分成風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組，風(fēng)寒感冒顆粒組，陽(yáng)性對(duì)照阿司匹林組，陰性對(duì)照組，每組12只，♀♂各半。各組按0.4 mL/20 g灌胃給予相應(yīng)藥物，陰性對(duì)照組灌服等體積生理鹽水，每日給藥1次，連續(xù)給藥5 d，于末次給藥后1 h，用二甲苯0.05 mL/鼠涂抹每鼠右耳致炎，左耳作對(duì)照，致炎后30 min脫頸椎處死小鼠，以7 mm直徑打孔器取下耳緣左、右耳片，分別用電子天平稱重，以右、左耳片重量差表示腫脹度(腫脹度=右耳片重-左耳片重)，結(jié)果見表1。

表1 風(fēng)寒感冒分散片流浸膏對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的影響

表1結(jié)果顯示風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量腫脹度與陰性組比較具有顯著性差異，表明其能明顯減輕二甲苯致小鼠耳廓炎癥反應(yīng)。

2.2 對(duì)醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響 取昆明種小鼠按體重隨機(jī)分為6組，每組10只，♀♂各半。給藥劑量及方法同2.1項(xiàng)，于末次給藥后1 h，各鼠均尾靜脈注射0.4%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1 mL/10 g，然后隨即腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/只，30 min后脫頸椎處死，仰位固定小鼠，剪開腹部皮膚，用6 mL生理鹽水注入腹膜內(nèi)，輕揉小鼠腹部，自腹膜中央剪一小孔，吸取腹腔液3 mL，以2000 r/min離心10 min，取上清液用UV-2201紫外分光光度計(jì)，在590 nm處測(cè)其光密度，結(jié)果見表2。

表2 風(fēng)寒感冒分散片對(duì)小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性影響

表2顯示，風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中劑量能明顯抑制H+所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)，與陰性組比較有顯著性差異。表明風(fēng)寒感冒分散片流浸膏具有的抗炎作用。

2.3 對(duì)醋酸致小鼠疼痛作用的影響 取健康昆明種小鼠依體重隨機(jī)分為6組，每組♀♂各半，除陽(yáng)性藥物鹽酸嗎啡組外其余各組操作同2.1項(xiàng)，鹽酸嗎啡組各鼠僅在實(shí)驗(yàn)當(dāng)日以0.67 mg/mL 的濃度腹腔注射 0.4 mL/20 g(13.4 mg/kg)1次。末次給藥后30 min，各組各鼠腹腔注射0.6%醋酸0.2 mL/鼠，觀察記錄各鼠在腹腔注射醋酸后的15 min內(nèi)扭體次數(shù)，進(jìn)行組間比較其顯著差異性，結(jié)果見表3。

表3 風(fēng)寒感冒分散片流浸膏對(duì)醋酸致小鼠疼痛反應(yīng)的影響

表3結(jié)果顯示風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組均能抑制小鼠腹腔注射醋酸所引起的扭體反應(yīng)次數(shù)，與陰性對(duì)照組比較具有顯著或顯著性差異，說明風(fēng)寒感冒分散片流浸膏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。

2.4 對(duì)熱刺激致痛的影響 取昆明種♀性小鼠放置入(55±0.5)℃水浴恒溫的鋁盤上，以小鼠舔后足為痛反應(yīng)指標(biāo)，記錄痛反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間(痛閾值)，測(cè)定兩次平均值小于30 s且不跳躍的小鼠選供實(shí)驗(yàn)用。將合格的小鼠60只按體重、痛閾值隨機(jī)分成6組，給風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組、風(fēng)寒感冒顆粒組動(dòng)物灌服相應(yīng)藥物0.4 mL/20 g，陰性對(duì)照組動(dòng)物灌服等體積溶媒，給陽(yáng)性對(duì)照組動(dòng)物腹腔注射鹽酸嗎啡0.4 mL/20 g，以上各組在給藥后的30 min、60 min、90 min、120 min測(cè)定各小鼠的痛閾值，痛閾值若超過60 s則以60 s計(jì)，計(jì)算各組小鼠痛閾提高率，痛閾提高率(%)=(給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值)÷給藥前平均痛閾值×100%，結(jié)果見表4。

表4結(jié)果顯示，風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高劑量組與陰性組比較，于給藥后的30、60、90 min對(duì)熱刺激所致足墊疼痛反應(yīng)具有顯著的抑制作用，其痛閾提高百分率有明顯的提高，并具有極顯著差異。表明風(fēng)寒感冒分散片具有一定的鎮(zhèn)痛作用。

2.5 對(duì)2.4-二硝基酚致熱作用的影響 實(shí)驗(yàn)前以體溫計(jì)測(cè)大鼠肛溫2次，取肛溫均值在36～38℃的大鼠依體重隨機(jī)分成6組，每組♀♂各半，給風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組、風(fēng)寒感冒顆粒組、陽(yáng)性藥物(6%阿司匹林)組動(dòng)物灌服1.0 mL/100 g相應(yīng)藥物，給陰性組動(dòng)物灌服等體積蒸餾水。每日給藥1次，連續(xù)5 d。末次給藥前，測(cè)各鼠肛溫。給藥30 min后各組各鼠背部皮下注射1.0%2.4-二硝基酚溶液0.2 mL/100 g體重致熱，分別于注射后 0.5、1.0、2.0、3.0 h測(cè)定各鼠肛溫，與致熱前肛溫的差值進(jìn)行組間比較，結(jié)果見表5。

表4 風(fēng)寒感冒分散片對(duì)熱刺激小鼠疼痛反應(yīng)的影響

表5結(jié)果顯示，風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高劑量組于2.4二硝基酚致熱后的0.5、1.0 h的肛溫差與陰性組比較有顯著和極顯著性差異，風(fēng)寒感冒分散片流浸膏中劑量組在致熱后的0.5 h肛溫差與陰性對(duì)照組比較有顯著性差異。由此表明風(fēng)寒感冒分散片對(duì)2.4二硝基酚的致熱具有解熱作用。

2.6 對(duì)酵母粉所致大鼠發(fā)熱作用的影響 取兩次平均肛溫為36～38℃大鼠于各鼠背部皮下注射7%酵母液2.0 mL/100 g選擇6 h肛溫升高超過0.8℃的大鼠供實(shí)驗(yàn)用。分別灌胃給予風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組、風(fēng)寒感冒顆粒組、陽(yáng)性藥物(6%阿司匹林)組動(dòng)物相應(yīng)藥物1.0 mL/100 g，給陰性組動(dòng)物灌服等體積蒸餾水。給藥后0.5、1.0、 2.0、3.0、4.0 h分別測(cè)各組各鼠肛溫1次，結(jié)果見表6。

表5 風(fēng)寒感冒分散片對(duì)2.4-二硝基酚致大鼠發(fā)熱的影響

表6 風(fēng)寒感冒分散片對(duì)大鼠酵母致熱作用的影響(℃，±s)

表6 風(fēng)寒感冒分散片對(duì)大鼠酵母致熱作用的影響(℃，±s)

注:① 與陰性組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01，***P ＜0.001。②因經(jīng)兩次肛溫測(cè)定不符合要求的大鼠被剔除，故各組動(dòng)物數(shù)不等，但均在10只以上。

給藥后/h肛溫0.5 1.0 2.0 3.0 4.0陰性對(duì)照 - 10 37.04 ±0.37組 別 劑量/(g生藥/kg)動(dòng)物數(shù)/只正常肛溫/℃致熱6 h肛溫/℃0.31阿司匹林 0.6 g/kg 11 37.01 ±0.2838.37 ±0.4238.52 ±0.4538.51 ±0.3938.41 ±0.3338.34 ±0.3438.14 ±38.19 ±0.22風(fēng)寒感冒分散37.23 ±0.26***風(fēng)寒感冒38.36 ±0.2937.96 ±0.33**37.79 ±0.26***37.56 ±0.23***37.37 ±0.27***顆粒 10.4 11 37.05 ±0.4038.49 ±0.3538.11 ±0.27*38.09 ±0.31*38.25 ±0.2738.29 ±0.2238.22 ±0.30風(fēng)寒感冒分散片流浸膏 10.4 11 37.13 ±0.4238.53 ±0.4338.06 ±0.35*37.97 ±0.30**38.10 ±0.24*38.29 ±0.3038.20 ±0.18風(fēng)寒感冒分散片流浸膏 5.2 11 37.08 ±0.3838.52 ±0.3538.13 ±0.33*38.09 ±0.23*38.35 ±0.2438.40 ±0.21片流浸膏 2.6 10 36.99 ±0.410.2538.39 ±0.3438.05 ±0.34*38.34 ±0.3038.31 ±0.2638.24 ±0.2938.21 ±

表6結(jié)果顯示，風(fēng)寒感冒分散片流浸膏高、中、低劑量組在給藥0.5 h時(shí)具顯著的解熱作用，其中高、中劑量組解熱持續(xù)時(shí)間分別為 2.0、1.0 h。

3 討論

風(fēng)寒感冒片是由麻黃、葛根、紫蘇葉、防風(fēng)、桂枝、白芷、陳皮、苦杏仁、桔梗、甘草、干姜11味藥組成的。方中麻黃、桂枝發(fā)汗解表散寒，為主藥;輔以葛根解肌退熱，蘇葉、防風(fēng)、白芷辛溫發(fā)散，發(fā)表疏風(fēng)，散寒鎮(zhèn)痛;輔以陳皮、杏仁、桔梗宣肺化痰止咳，干姜溫肺散寒，燥濕化痰;甘草調(diào)和諸藥，為使。諸藥合用，共奏發(fā)汗解表，疏風(fēng)散寒，化痰止咳之功。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果風(fēng)寒感冒分散片流浸膏能減輕二甲苯致小鼠耳廓炎癥反應(yīng)，明顯抑制H+所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)，抑制小鼠腹腔注射醋酸所引起的扭體反應(yīng)次數(shù)，提高熱刺激痛閾值，對(duì)于2，4-二硝基酚及酵母所致大鼠體溫升高亦有顯著抑制作用。表明風(fēng)寒感冒分散片流浸膏確有抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱功效。

［1］陳 奇主編.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993，271.

［2］姚 干，何宗玉，方泰惠.芩梔膠囊抗炎、鎮(zhèn)痛和解熱作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中成藥，2006，28(5):694-697.

［3］聞 杰，田 澤，劉秀萍，等.雅叫哈頓散藥效學(xué)研究Ⅰ［J］.中成藥，2007，29(9):2721-4721.