帥起義,趙俊龍,葉培根
(華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,湖北武漢430070)
1.1 免疫增強劑 試驗所用免疫增強劑由武漢日鑫獸藥經(jīng)營公司提供,山東金鑄基藥業(yè)有限公司生產(chǎn),商品名為維康,通用名為黃連解毒散,性狀為白色粉末,屬中藥類復(fù)合型免疫增強劑,所含主要有效成分為黃連、黃芩、黃柏、干擾素、TCGF、天然稀土綠色免疫增強劑,藥品批號為070625。
1.2 豬瘟兔化弱毒疫苗 首免采用中牧實業(yè)股份有限公司成都藥械廠生產(chǎn)的細(xì)胞源豬瘟活疫苗,批號為0702022,二免采用中牧實業(yè)股份有限公司成都藥械廠生產(chǎn)的兔源組織苗,批號為:0703013。
1.3 豬瘟正向間接血凝診斷液 包含豬瘟血凝抗原、豬瘟陰性對照血清、豬瘟陽性對照血清和稀釋液購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,批號為20070506。
1.4 其他材料 96孔110oV型醫(yī)用血凝板、玻板、50 μ L微量移液器、微型振蕩器、稱豬磅秤、5 mL 一次性無菌注射器等。
1.5 試驗豬與飼養(yǎng)場所 試驗于2007年9月12日至2007年11月5日在華中農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗豬場進行。試驗豬選用該場8月8日至9月2日生產(chǎn)的29窩200頭斷奶仔豬,仔豬品種為湖北白豬,斷奶日齡為出生25 d~35 d(平均30 d),豬只健康狀況和生長發(fā)育良好。
1.6 試驗豬分組與管理 由于豬只出生日齡相差較遠(yuǎn),將其分成前后兩批入試(同批豬出生日期相差10 d以內(nèi))。每批各挑選合格豬100頭(公母各半),按照性別、體重、窩別對等分配原則隨機分為試驗組和對照組,每組50頭。
試驗豬于哺乳期(23 d)進行公豬去勢,同批豬平均日齡30 d時同步斷奶,并于斷奶當(dāng)天稱重入試,轉(zhuǎn)欄(由產(chǎn)仔房轉(zhuǎn)入保育舍),分組,同批豬平均日齡70 d時同步稱重結(jié)束試驗。整個試驗期豬只在保育舍飼養(yǎng),保育舍采用高床全漏糞網(wǎng)床養(yǎng)殖模式,每欄養(yǎng)殖7~8頭。同批豬(試驗組與對照組)同一單元飼養(yǎng),同一飼養(yǎng)員管理,各種飼養(yǎng)管理條件和環(huán)境相同。各種操作按照常規(guī)進行:上午和下午各清圈1次,保持豬舍干燥衛(wèi)生、空氣清新、環(huán)境溫濕度適宜。
試驗豬自由采食,自由飲水,于每日上午8:00、下午14:00、晚上20:00各加料1次。試驗組與對照組飼料配方相同,40 d更換保育豬后期料(試驗豬日糧組成與營養(yǎng)水平見表1)。
表1 日糧組成與營養(yǎng)水平
1.7 試驗設(shè)計 試驗組于平均日齡31~37 d按400 mg/kg的比例在飼料中連續(xù)添加免疫增強劑維康1周(維康產(chǎn)品說明的推薦添加比例為400 mg/kg),對照組不添加藥物。于加藥結(jié)束后(平均日齡39 d)進行豬瘟疫苗(細(xì)胞源)首免(4頭份/頭),于平均日齡60 d進行豬瘟疫苗(兔源組織苗)二免(4頭份/頭);并分別于平均日齡31、51 d和 70 d對全部豬只前腔靜脈采血5 mL,析出血清,以檢測免疫前、首免后、二免后豬瘟抗體水平。
1.8 測定指標(biāo)及方法 用正向間接血凝試驗(IHA)法檢測血清抗體效價水平。其操作方法和判定標(biāo)準(zhǔn),均按《豬瘟正向間接血凝診斷試劑使用說明書》進行。
生長性能測定:試驗期為40 d。入試和結(jié)束時分別稱重,計算出試期增重和日增重;逐日逐欄稱量記錄飼料消耗量,計算飼料報酬(料肉比)。
此外,還對試驗豬群的精神狀態(tài)、食欲、糞便狀態(tài)及發(fā)病情況、死亡淘汰情況等進行臨床觀察。
1.9 統(tǒng)計方法 采用獨立性檢驗法對試驗組與對照組在免疫前及首免后、二免后豬瘟抗體效價進行差異顯著性檢驗。P<0.05時確定為差異顯著,P<0.01時確定為差異極顯著。
采用方差分析法對試驗組與對照組的增重、飼料報酬進行統(tǒng)計分析。P<0.05時確定為差異顯著,P<0.01時確定為差異極顯著。
根據(jù)發(fā)病記錄的頭次數(shù),分別統(tǒng)計計算腹瀉和呼吸道感染的發(fā)病率,并對發(fā)病率進行 t檢驗。P<0.05時確定為差異顯著,P<0.01時確定為差異極顯著。
2.1 試驗豬豬瘟免疫抗體水平檢測結(jié)果 豬瘟抗體水平檢測結(jié)果見表2。
由表2可以看出,豬瘟疫苗免疫前,兩組抗體水平(母源抗體)均較高,說明豬場免疫程序合理、豬群健康狀況較好;經(jīng)統(tǒng)計分析兩組之間抗體水平差異不顯著(P>0.05),表明兩組試驗豬的抗體水平一致,符合試驗要求。
首免后豬瘟抗體水平檢測,試驗組比對照組整體抗體效價高,免疫不合格比例較低(分別為3%和6.32%);經(jīng)統(tǒng)計分析兩組之間差異不顯著(P>0.05),表明添加維康對提高仔豬豬瘟免疫應(yīng)答的效果暫時還未顯現(xiàn)出來。
二免后豬瘟抗體水平檢測,試驗組比對照組整體抗體效價高;且試驗組免疫全部合格,對照組免疫不合格比例仍占3.16%;經(jīng)統(tǒng)計分析兩組之間差異顯著(P<0.05),表明添加維康具有提高斷奶仔豬豬瘟免疫應(yīng)答的作用。
表2 豬瘟抗體水平檢測結(jié)果
2.2 試驗豬生長性能測定結(jié)果 試驗豬生長性能測定結(jié)果見表3。從表3可以看出,試驗組與對照組在相同體重入試,經(jīng)過40 d飼養(yǎng),生長性能基本相同;兩組各項數(shù)據(jù)(入試體重、結(jié)束體重、試期增重、日增重、料肉比)間比較均無顯著差異(P>0.05)。說明添加維康不能提高斷奶仔豬的生長性能。
表3 生長性能測定結(jié)果
2.3 試驗豬其他項目觀測結(jié)果 通過對兩組豬群的精神狀態(tài)、食欲、糞便狀況及發(fā)病、死亡等情況的臨床觀察,輕度腹瀉試驗組4頭次(發(fā)病率為4%)、對照組3頭次(發(fā)病率為3%),無顯著差異(P>0.05);呼吸道感染試驗組2頭次(發(fā)病率為2%),對照組6頭次(發(fā)病率為6%),但差異不顯著(P>0.05)。其他情況兩組均未顯現(xiàn)異常,兩組均無死亡。
3.1 本次試驗驗證了中藥免疫增強劑(維康)具有提高斷奶仔豬豬瘟疫苗免疫抗體水平的顯著功效,同王自然(2006)、張玉換(2004)中藥免疫增強劑試驗結(jié)果的相關(guān)報道一致,表明中藥免疫增強劑在激活豬體免疫機能、增強免疫應(yīng)答、提高免疫抗體水平有可靠的效果,是預(yù)防控制免疫抑制性疾病的有效手段[1-2]。同時,試驗結(jié)果顯示飼料中添加中藥免疫增強劑(維康)具有降低呼吸道疾病發(fā)病率的趨勢。試驗表明,維康在增強斷奶仔豬免疫應(yīng)答方面對于抗病力較強、健康狀況較好的湖北白豬同樣產(chǎn)生顯
著功效。
3.2 試驗中中藥免疫增強劑(維康)提高斷奶仔豬豬瘟疫苗免疫抗體水平的功效產(chǎn)生于加藥20 d后的二免,而對加藥后即進行的首免雖然從檢測數(shù)據(jù)上看有所提高,但未達到統(tǒng)計學(xué)顯著性水準(zhǔn),這表明中藥免疫增強劑對斷奶仔豬免疫應(yīng)答的促進作用不是于加藥后立即產(chǎn)生的,也不是停藥后很快失去的。這同中藥相對于西藥起效慢、藥效長久的特性是相符合的。因此,在養(yǎng)豬生產(chǎn)中,中藥免疫增強劑的使用時間應(yīng)相對提前,其效果將更有保障。
3.3 試驗中中藥免疫增強劑(維康)未產(chǎn)生提高斷奶仔豬生長性能水平的效果,這同張玉換(2004)、曾慶國(2006)、方桂友(2006)等有關(guān)中藥免疫增強劑的類似試驗報道不一致[2-4]。筆者分析認(rèn)為,中藥免疫增強劑的主要作用是激活機體免疫力、控制免疫抑制性疾病,提高豬群健康水平;而產(chǎn)生的促生長作用可能是因豬群健康狀況改善后所致。本次試驗所用豬群為抗病力較強的湖北白豬,且豬群健康狀況較好,免疫抑制性疾病的感染程度較輕,因而用藥的作用效果相對不明顯。這提示我們,養(yǎng)豬生產(chǎn)中添加中藥免疫增強劑的作用效果及用藥的經(jīng)濟價值同豬群特點密切相關(guān),對豬群抗病力較低、健康狀況較差、疾病感染嚴(yán)重及管理水平較低的豬場,中藥免疫增強劑的使用效果可能更為突出。而所用中藥免疫增強劑的配方及成分含量也會產(chǎn)生不同效果。3.4 控制預(yù)防免疫抑制性疾病的措施主要包括加強豬群的飼養(yǎng)管理、降低各種應(yīng)激因素刺激、增強防疫意識、加強防疫管理、建立生物安全體系、開展豬群抗體水平監(jiān)測、掌握豬群健康狀態(tài),采用科學(xué)合理的免疫程序,正確地進行預(yù)防接種,建立完善的藥物預(yù)防和治療方案;同時,針對免疫抑制性疾病破壞豬免疫機能的特點,使用免疫增強劑,充分增強豬群自身的抗病力,是減少豬病發(fā)生,提高養(yǎng)豬效益的重要和有效的手段[5-6]。
自20世紀(jì)40年代發(fā)現(xiàn)抗生素(四環(huán)素)對畜禽的抗病促生長作用以來,抗生素已被廣泛應(yīng)用于畜禽飼料中,對提高養(yǎng)殖效益,促進畜禽業(yè)的發(fā)展起了較大的作用。但抗生素的長期使用必然導(dǎo)致病原微生物產(chǎn)生抗藥性,從而使用藥量不斷增加,這不僅加大用藥成本,也增加了動物體內(nèi)藥物的殘留??股卦谛螽a(chǎn)品中的殘留直接威脅人類健康和安全,因此許多國家相繼頒布法令,禁止或限制一些抗生素在飼料中應(yīng)用。在養(yǎng)殖業(yè)中使用無毒、無害、無殘留的中藥免疫增強劑具有十分廣闊的前景[5-7]。
3.5 由于各方面條件的限制,本次研究對于試驗用藥豬的后期影響觀察及中藥免疫增強劑(維康)的作用機理、藥效持續(xù)時間等方面沒有進行更為深入的探討。用藥試驗也沒有作不同品種豬的對照。這些都將有待于今后進一步研究。
[1]王自然.中藥免疫增強劑提高仔豬免疫功能試驗[J].中國獸醫(yī)雜志,2006,42(10):30-32.
[2]張玉換 ,韓一超 ,王彩先.復(fù)方中草藥高效免疫增強劑對豬群免疫力及生產(chǎn)性能影響的研究[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,32(2):79-80.
[3]曾慶國,湖錦文,涂楊梅.中藥免疫增強劑對斷奶仔豬生長性能和免疫功能的影響[J].江西畜牧獸醫(yī)雜志,2006(5):7-8.
[4]方桂友,馮玉蘭,董志巖.中草藥免疫增強劑對仔豬生長性能及小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響[J].福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報:自然科學(xué)版,2006,35(6):636-639.
[5]王斌斌,王貴平,黃其.中草藥免疫增強劑在豬生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2006,25(4):67-70.
[6]蘭羅勛.豬免疫抑制性疾病及防控對策[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2007,26(2):79-82.
[7]郎利敏,王克領(lǐng),游弋,等.豬免疫抑制性疾病的病因及防治措施[J].養(yǎng)豬,2008(1):53-54.