周 磊 曾秋鳳 張克英 呂 剛

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所,教育部動物抗病營養(yǎng)重點實驗室,雅安 625014）

國內(nèi)外研究表明,在生產(chǎn)鵝肥肝的填飼料中添加油脂能加快脂肪沉積,提高肥肝質(zhì)量,顯著增加肥肝形成速度,而大豆油和魚油富含多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）,不僅能提高動物生產(chǎn)性能還能使PUFA富集于畜禽產(chǎn)品。Herm ier等[1]在朗德鵝填飼飼糧中添加棕櫚油,發(fā)現(xiàn)在不到2周的時間內(nèi)肝臟發(fā)生強烈的脂肪變性,重量增加近10倍,占體重的10%。但也有研究者認為填飼飼糧中添加油脂將會降低肥肝重量,李翔[2]在糙米型填飼飼糧中添加大豆色拉油進行填飼試驗,結(jié)果表明,隨油脂添加水平的提高,朗德鵝肥肝增重有下降的趨勢,6%水平添加組鵝肥肝重顯著低于對照組和低油脂水平組。添加不同油脂對產(chǎn)肝性能的影響報道不一,可能與添加油脂后填飼能量不同有關(guān)。本試驗擬研究在填飼能量相同條件下,比較大豆油和魚油對肥肝重量和品質(zhì)的影響,為合理利用油脂提高肥肝產(chǎn)量和生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)肥肝提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

本試驗采用單因子試驗設(shè)計,設(shè)3個處理（表1）。試驗填飼期為21 d,分為2個階段。第1階段（1～7 d）:3個處理均以處理1的玉米飼糧來填飼;第2階段（8～21 d）:各個處理分別按相應(yīng)飼糧進行填飼,為期14 d。

表1 試驗設(shè)計Tab le 1 Design o f experiment

1.2 試驗動物

櫻桃谷肉鴨購自四川綿櫻鴨業(yè)有限公司育種基地,并于四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所水禽養(yǎng)殖試驗場養(yǎng)殖至8周齡,選取體重相近、健康的櫻桃谷肉公鴨72只,填飼前隨機選取12只進行稱重、屠宰采樣,剩下60只隨機分為3個處理,每個處理20個重復(fù),每個重復(fù)1只鴨。采用單籠飼養(yǎng),自由飲水。

1.3 填飼飼糧的配制

飼糧在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所試驗場配制。大豆油為金海糧油工業(yè)有限公司生產(chǎn)的金龍魚大豆油,魚油購于成都安可明動物科技公司,經(jīng)測定,大豆油和魚油的脂肪酸組成見表2。

表2 大豆油與魚油脂肪酸組成Table 2 Fatty acid com position of soybean oil and fish oil %

填飼飼糧的配制:將玉米顆粒倒入開水鍋內(nèi),使水面浸沒玉米5～10 cm,煮沸10m in,撈出瀝干,趁熱拌入油脂和預(yù)先混好的預(yù)混料,充分拌勻冷卻后填飼。飼糧組成及營養(yǎng)水平見表3。

1.4 試驗動物填飼管理

前5天每天填2次（08:00、20:00）,其余時間均填飼3次（08:00、14:00、20:00）。各處理填飼量根據(jù)飼糧能量水平進行換算后確定,保證能量攝入相同（表4）。填飼期間注意減少試鴨的運動,保持環(huán)境安靜,同時,盡量保持光線較暗。每天觀察鴨群的健康狀況。每天在試鴨籠中放置干凈的沙礫,任其采食。

1.5 樣品采集

樣品采集分3次進行。填飼的第1天、第8天從各處理隨機選取4只肉鴨,單只空腹稱重后屠宰,第22天將剩余的肉鴨單只進行空腹稱重后屠宰,用滅菌處理的手術(shù)剪和鑷子對肥肝進行取樣,稱重后, -20℃保存?zhèn)錅y。

1.6 測定指標(biāo)

1.6.1 產(chǎn)肝性能

平均肝重:屠宰取肝后,記錄每只鴨的肝重,計算平均肝重。

料肝比:某一階段的平均耗料量除以平均肥肝重。

肝體比:肥肝重占個體活重的百分比。

1.6.2 肥肝常規(guī)營養(yǎng)成分

粗蛋白質(zhì)和水分:參照GB 9839—1988進行測定。

總脂肪:采用索氏提取法測定。

1.6.3 肥肝中脂肪酸組成

油脂及肥肝脂肪酸組成均在浙江大學(xué)飼料研究所測定,采用氣質(zhì)聯(lián)用法,測定儀器型號:6890GC/ 5973MS。樣品前處理參照Folch等[3]的方法,色譜條件參照張國蓉等[4]的方法。

1.6.4 肝臟組織切片

將新鮮肝樣品修成1 cm×1 cm×1 cm小塊,投入10%甲醛溶液中固定36 h,按常規(guī)脫水,包埋,蘇木精-伊紅（HE）染色,石蠟包埋切片,在100倍光鏡下檢查。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析

采用SPSS 16.0對數(shù)據(jù)進行單因子方差分析, Duncan氏法進行多重比較,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié) 果

2.1 產(chǎn)肝性能

從表5可知,填飼前肉鴨的平均肝重為59.28 g,肝體比為1.46。用玉米飼糧填飼1周后,平均肝重為115.80 g,較填飼前增加56.52 g,肝體比為2.69,較填飼前提高84.25%,差異極顯著（P＜0.01）,表明經(jīng)玉米飼糧填飼7 d后,肥肝已經(jīng)初步形成。

各處理按相應(yīng)飼糧繼續(xù)填飼2周后,肉鴨的平均肝重（肥肝重）和肝體比均較填飼前和填飼1周提高,差異極顯著（P＜0.01）。與玉米組和大豆油組比較,在填飼飼糧中添加3%魚油可極顯著提高平均肝重、肝體比（P＜0.01）,極顯著降低料肝比（P＜0.01）。大豆油組肉鴨的產(chǎn)肝性能與玉米組差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 3 Composition and nutrient levels of diets（air-dry basis）%

表4 填飼期間日平均攝入能量Tab le 4 Average daily energy intake during force-feeding period

2.2 肥肝品質(zhì)

2.2.1 肥肝常規(guī)營養(yǎng)成分

從表6可知,魚油組肥肝的常規(guī)營養(yǎng)成分均與其他2個處理差異極顯著（P＜0.01）,其中水分較玉米組和大豆油組分別降低15.96%和12.50%,粗蛋白質(zhì)分別降低16.95%和17.78%,粗脂肪分別增加38.13%和28.94%。玉米組和大豆油組肥肝的水分、粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量均無顯著差異（P＞0.05）。

2.2.2 肥肝脂肪酸組成

由表7可看出,各處理肥肝的脂肪酸主要是不飽和脂肪酸,占55%～62%,而飽和脂肪酸（satu-rated fatty acid,SFA）占38%～45%;其中不飽和脂肪酸中單不飽和脂肪酸（monounsaturated fatty acid,MUFA）占了絕對優(yōu)勢,為90%～94%,而PUFA僅占6%～10%。

表5 櫻桃谷肉鴨產(chǎn)肝性能Table 5 Fatty liver producing perform ance of cherry valley duck

表6 肥肝常規(guī)營養(yǎng)成分Table 6 Routine nutrient component o f fatty liver%

3個處理肥肝中絕大多數(shù)脂肪酸組成差異極顯著（P＜0.01）。魚油組肥肝的SFA含量最低（P＜0.01）,MUFA和n-3脂肪酸含量最高（P＜0.01）, PUFA和n-6脂肪酸含量低于大豆油組（P＜0.01）,而高于玉米組（P＜0.01）,且屬于PUFA的二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA,C20∶5）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA, C22∶6）含量也極顯著高于大豆油組和玉米組（P＜0.01）。與玉米組比較,大豆油組也可極顯著降低肥肝的SFA含量（P＜0.01）,極顯著提高MUFA、PUFA、n-3和n-6脂肪酸含量（P＜0.01）,特別是亞油酸（C18∶2）和亞麻酸（C18∶3）含量極顯著高于玉米組和魚油組（P＜0.01）。

2.2.3 肥肝組織切片

從圖1可以看出,隨著填飼時間的推移,肝臟組織切片變化十分明顯。圖1a可見,填飼前肉鴨肝臟未見大量脂肪沉積,肝臟細胞排列緊致,細胞核清晰可見,且細胞表面光滑切面無油脂滲出,胞漿顏色均勻一致,且肝靜脈也可以清晰可見。從圖1b可見,用玉米飼糧填飼7 d后,肝臟出現(xiàn)明顯的脂肪滴,肝組織間質(zhì)比填飼前少,脂質(zhì)開始沉積,肝細胞因脂肪沉積而明顯開始腫脹、變圓,肝細胞間界限模糊,可能細胞間出現(xiàn)了融合。繼續(xù)用各處理飼糧填飼至21 d時可見（圖1c、圖1d、圖1e）,肝臟細胞內(nèi)脂滴較填飼7 d時更明顯地增多,細胞核均已偏離中心被擠向周邊,肝細胞體積增大,使肝竇受壓變窄,較難辨認;其中玉米組和大豆油組肝臟的脂肪滴數(shù)量較魚油組少,且體積均小于魚油組,而魚油組肝細胞中脂滴因體積過大而發(fā)生了脂滴的融合。

表7 肥肝脂肪酸組成Table 7 Fatty acid composition of fatty liver%

3 討 論

3.1 不同油脂對櫻桃谷肉鴨產(chǎn)肝性能的影響

Mateo等[5]研究表明,將小麥型飼糧能量水平由12.0 M J/kg升高到13.3 MJ/kg,蛋雞肝臟顯著增大,飼糧蛋白質(zhì)水平為13%時,產(chǎn)蛋雞脂肪肝綜合征（fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS）發(fā)生率較16%時高。肥肝的形成機理與FLHS相似,且填飼采用高能低蛋白質(zhì)飼糧這將導(dǎo)致更多的能量轉(zhuǎn)化為脂肪,而蛋白質(zhì)的缺乏將造成脂蛋白和親脂因子的生成不足,從而使大量脂肪在肝中沉積。因此,普遍認為填飼飼糧中添加油脂不僅提高了飼料轉(zhuǎn)化效率,而且提供了額外的能量,使肥肝明顯增重且植物油效果優(yōu)于動物油。然而,通過研究得出的結(jié)論卻存在差異。李翔[2]研究表明,添加大豆色拉油有降低肥肝增重的趨勢,而許春蘭[6]研究表明,較未添加油脂組,添加2%大豆油組肉鴨的肥肝重量有增加的趨勢,而添加6%大豆油組則有所降低。出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因在于油脂的類型、添加量、飼喂量的差異。張巍[7]研究表明,代謝能11.56 MJ/kg的飼糧和代謝能13.40 M J/kg的飼糧對騾鴨肥肝性能的影響差異并不顯著,但添加不同量的油脂或能量濃度相同而油脂的添加種類不同卻對肥肝產(chǎn)肝性能的影響差異顯著。Cherian等[8]研究發(fā)現(xiàn),蛋雞長期飼喂共軛亞油酸、長鏈n-3脂肪酸、C18∶3 n-3和葵花油（n-6脂肪酸）后肝臟甘油三酯含量不同,分別為32.2、29.4、18.9和18.7 m g/g。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),添加魚油有助于提高肉鴨的肥肝形成,而大豆油對產(chǎn)肝性能無顯著影響。其影響機理可能與2種油脂的脂肪酸組成不同,大豆油富含n-6脂肪酸,魚油富含n-3 PUFA,2種類型脂肪酸對機體脂肪代謝調(diào)控方式不同,有待進一步研究。

3.2 不同油脂對櫻桃谷肉鴨肥肝品質(zhì)的影響

填飼過程中由于甘油三酯在肝臟沉積,導(dǎo)致水分不同程度被脂肪所替代,蛋白質(zhì)在肝臟中的沉積也受到影響,蛋白質(zhì)和水分含量均下降,使得干物質(zhì)含量上升。本試驗發(fā)現(xiàn),在填飼能量相同條件下,魚油組的肥肝重最大,玉米組最小,與前人報道一致,表現(xiàn)為肥肝重量愈大,水分含量愈低,脂肪含量愈高,蛋白質(zhì)含量愈低。從肝臟切片亦見,魚油組肝臟的脂肪滴多,體積大,并發(fā)生融合。

脂肪是人類獲取必需脂肪酸的重要來源。不同油脂所含的必需脂肪酸不同,大豆油富含亞油酸和亞麻酸,而魚油富含EPA和DHA。目前生產(chǎn)上已通過在肉雞或蛋雞飼糧中添加不同油脂來生產(chǎn)富含不同脂肪酸的雞肉或雞蛋,以達到滿足人體對多不飽和脂肪酸需求的目的。汪鯤[9]和崔佳[10]的研究表明,飼糧中PUFA的提高會使蛋中MUFA和SFA比例降低。許多研究均表明,飼糧中PUFA能增加機體組織PUFA的含量。張輝等[11]研究發(fā)現(xiàn), 52周齡蛋雞飼糧中分別添加3%菜籽油、3%大豆油和3%花生油對肝臟中n-6和n-3多不飽和脂肪酸的比例比對照組略有提高。萬文菊[12]在肉鴨上研究表明,添加魚油使肝臟、皮脂和血液中n-3 PUFA含量顯著增加,而n-6 PUFA則顯著降低。許春蘭[6]的研究得出富含MUFA的植物油更能增加肥肝重量,且肥肝中MUFA也為最高,肥肝中脂肪酸主要以MUFA為主,且肥肝越重其MUFA含量越高。分析其原因可能是由于△-5和△-6去飽和酶受到抑制,導(dǎo)致長鏈的PUFA（C20∶4、C22∶4、C22∶5）含量減少,因此肥肝中脂肪酸含量的增加主要是以MUFA增加來實現(xiàn)的。本試驗發(fā)現(xiàn),魚油和大豆油均可極顯著降低肉鴨肥肝的SFA,提高肥肝不飽和脂肪酸含量;而且魚油可極顯著提高EPA和DHA含量;大豆油可提高亞油酸和亞麻酸含量。結(jié)果表明,填飼飼糧中油脂類型影響肥肝的脂肪酸組成。因此,可以利用填飼不同油脂來開發(fā)生產(chǎn)富含不同脂肪酸組成的肥肝產(chǎn)品,滿足人們的需求。

4 結(jié) 論

①在填飼能量水平相同的條件下,先用玉米飼糧填飼1周,再填飼添加3%魚油的飼糧可極顯著提高肉鴨肥肝重量、肝料比和肝體比,并降低肥肝飽和脂肪酸含量,提高不飽和脂肪酸特別是EPA和DHA含量。

②在填飼能量水平相同的條件下,先用玉米飼糧填飼1周,再填飼添加3%大豆油的飼糧對肉鴨產(chǎn)肝性能無顯著影響,但可極顯著降低肥肝SFA含量,提高不飽和脂肪酸特別是亞油酸和亞麻酸含量。

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[6] 許春蘭.不同植物油脂對櫻桃谷鴨肥肝脂肪代謝及膽固醇含量影響的研究[D].碩士學(xué)位論文.南寧:廣西大學(xué),2007.

[7] 張巍.不同能量、蛋白質(zhì)、鈣水平日糧對騾鴨產(chǎn)肝性能影響的研究[D].碩士學(xué)位論文.武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.

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[10] 崔佳.不同PUFA源對蛋黃脂肪酸組成以及脂質(zhì)代謝的影響[D].碩士學(xué)位論文.鄭州:河南工業(yè)大學(xué), 2007.

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[12] 萬文菊.添加不同油脂對北京鴨生產(chǎn)性能、血脂及組織脂肪酸組成的影響[D].碩士學(xué)位論文.泰安:山東農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.

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（編輯 何麗霞）