張小勇 徐衛(wèi)平 邱漢嬰
激活的部分凝血活酶時(shí)間(APTT)臨床實(shí)踐表明,體外沖擊波碎石術(shù)不僅可引起心律失常,還導(dǎo)致血尿、皮膚瘀血等出血癥狀[1],這是由于局部組織損傷,還是同時(shí)伴有凝血功能障礙,目前尚未明確。心臟內(nèi)含有大量血液,當(dāng)其受到體外沖擊波(ESW)沖擊時(shí),血液的某些成分或功能發(fā)生是否改變,筆者目前未見(jiàn)報(bào)道。本文以雜種犬的右心室作為ESW的沖擊靶點(diǎn),JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機(jī)發(fā)放ESW,研究ESW對(duì)雜種犬血細(xì)胞和凝血功能的影響。報(bào)告如下。
1.1 儀器與試劑 (1)設(shè)備:儀器血球計(jì)數(shù)儀和LD 25-2型離心機(jī)。(2)試劑:2%的枸椽酸鈉,凍干含鈣凝血活酶,部分凝血活酶試劑盒,3%的戊巴比妥鈉和JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機(jī)。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 動(dòng)物模型與體外沖擊波的發(fā)放方式雜種犬8條,雌雄不拘,體重(13.0±2.1)kg,使用3%戊巴比妥鈉經(jīng)腹腔行注射麻醉(30 mg/kg)后,行右側(cè)股靜脈Seldinger穿刺,分別將6F Cordis 4極電極導(dǎo)管(極間距0.5 cm)送入,電極導(dǎo)管頭端(Ⅰ極)右室心尖部。將同雜種犬固定于JT ESWL-Ⅲ型體外沖擊波碎石機(jī)的平板床上,以電極導(dǎo)管第4極作為ESW沖擊靶點(diǎn),整個(gè)過(guò)程在X線下完成。ESW的工作電壓為:10 kV,工作方式:自動(dòng)連續(xù)(非R波同步)發(fā)射沖擊波,頻率40次/min,沖擊總數(shù)為2 000次/犬。
1.2.2 血液標(biāo)本的采集:于ESW沖擊大心臟前、后即刻取其左側(cè)股靜脈血。測(cè)定凝血酶原時(shí)間(PT)和APTT的血液標(biāo)本使用2%的枸椽酸鈉0.2 ml抗凝,取血量為1.8 m l,經(jīng)離心機(jī)處理15 min(3 000 r/min)后取上層血漿待檢;用于血常規(guī)的標(biāo)本使用專用的非抗凝管盛裝,取血量為0.5 ml,混勻后立即送檢。
1.2.3 血常規(guī)使用全自動(dòng)血球計(jì)數(shù)儀對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)及血小板計(jì)數(shù)(PLT)進(jìn)行檢測(cè)。PT使用一期法測(cè)定,APTT使用常規(guī)測(cè)定。
1.3 觀察指數(shù) 記錄ESW沖擊犬心臟前、后血細(xì)胞數(shù)和PT、APTT的測(cè)值。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析計(jì)量資料以ˉx±s表示,采用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 ESW沖擊犬心臟后較沖擊前,PLT下降明顯[(115±76)×109/L與 (211±76)×109/L],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)。WBC數(shù)量稍升高[(21±17)×109/L與(16±6)×109/L],但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。RBC數(shù)量也稍升高[(6.6±1.6) ×1012/L與(6.3±1.4) ×1012/L],但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。
2.2 ESW沖擊犬心臟后,PT及 APTT均明顯延長(zhǎng)(14.7±1.4)s與(12.7 ±1.0)s,(41 ±9)s與(39 ±8)s(P 均 <0.01)。
血細(xì)胞由紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板組成,血漿中含有多種具有酶活性的蛋白質(zhì),使用ESW沖擊犬心腔內(nèi)的血液,可能會(huì)使血液的某些成分或功能發(fā)生改變[2]。有鑒于此,我們對(duì)血常規(guī)和凝血功能進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):ESW沖擊犬心臟后PLT明顯明顯減少(P<0.05)。因此,我們推測(cè),ESW導(dǎo)致PLT減少的可能原因是:(1)ESW對(duì)細(xì)胞的直接損傷;(2)心內(nèi)膜損傷導(dǎo)致血小板易粘附、聚集,形成微血栓,血小板大量消耗。
但RBC和WBC沒(méi)有明顯改變(P>0.05)。其主要原因是紅細(xì)胞呈雙凹面碟形結(jié)構(gòu),可塑性強(qiáng),不容易造成機(jī)械破壞。而且從實(shí)驗(yàn)過(guò)程來(lái)看,也幾無(wú)出血。白細(xì)胞主要分布于骨髓池、周圍池和血液池。血液池中的白細(xì)胞只是比較小的一部分,其數(shù)量變化除受白細(xì)胞總量影響外,三池白細(xì)胞的動(dòng)態(tài)分布對(duì)其影響也比較大[3]。ESW沖擊使得機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài),并由此可能釋放出多種物質(zhì),二者共同作用,使得骨髓和周圍池中的白細(xì)胞向血液池中轉(zhuǎn)移,致使血液中的白細(xì)胞不但不減少,反而稍有上升。而血小板參與血管內(nèi)皮層的完整性,其中的PF-3、PF-4等多種血小板因子也與凝血功能有關(guān),因此,PLT的減少會(huì)導(dǎo)致凝血功能障礙。從實(shí)驗(yàn)來(lái)看,對(duì)凝血系統(tǒng)功能性指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):PT和APTT均有明顯延長(zhǎng)(P<0.05)。但孟慶軍等[4]的研究認(rèn)為:ESW后1~3 d內(nèi),血液中纖維蛋白原濃度升高,抗凝血物質(zhì)如AT-Ⅲ活性下降,血液處于高凝狀態(tài)。這與本組實(shí)驗(yàn)不符。就其原因,可能是ESW沖擊導(dǎo)致了腎組織的損傷和出血,從而激活了凝血系統(tǒng)而呈高凝狀態(tài),故1~3 d后檢查凝血功能仍呈高凝狀態(tài)。APTT和PT的延長(zhǎng),其原因可能是:ESW引起凝血酶等多種蛋白酶的空間構(gòu)象甚至一級(jí)結(jié)構(gòu)改變,使其活性下降所導(dǎo)致,但目前還沒(méi)有一致的結(jié)論,還有待于做進(jìn)一步的研究。
1 蔡正行,田武漢,余瓊芳.ESWL的并發(fā)癥.中華泌尿外科雜志,1991,12:188-190.
2 葉應(yīng)嫵主編.臨床實(shí)驗(yàn)診斷學(xué).第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1989.1132-133.
3 李芳.老年高血壓患者凌晨血壓增高與血液流變學(xué)的相關(guān)性研究.河北醫(yī)藥,2007,29:940-941.
4 孟慶軍,周惜才,章詠裳.ESWL對(duì)機(jī)體凝血及纖溶系統(tǒng)的影響和鈣拮抗劑的防護(hù)性作用.中華泌尿外科雜志,1996,10:61-63.