摘　要：目的：觀察黑骨頭乙醇提取物的抗炎鎮(zhèn)痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加模型觀察黑骨頭的抗炎作用；采用熱板法、醋酸扭體法觀察黑骨頭的鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：黑骨頭可有效提高小鼠痛閾值(P＜0.01)和抑制小鼠醋酸扭體反應(yīng)率(P＜0.05)；對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有顯著抑制作用(P＜0.01)；對(duì)醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加也有抑制作用(P＜0.05)。結(jié)論：黑骨頭具有較好的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。
　　關(guān)鍵詞：黑骨頭；抗炎；鎮(zhèn)痛；實(shí)驗(yàn)研究
　　中圖分類號(hào)：R285．5　文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
　　文章編號(hào)：1007-2349(2008)01-0035-02
　　
　　黑骨頭(Periploca forrestii Schlechter)又名鐵骨頭、青蛇膽、達(dá)風(fēng)藤、黑風(fēng)藤等，常綠攀援藤本，根或全株入藥；有通經(jīng)絡(luò)。祛風(fēng)濕，消炎，活血等功效；用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，跌打損傷等。目前國內(nèi)外尚未見其抗炎、鎮(zhèn)痛作用的報(bào)道。本研究觀察了黑骨頭乙醇提取物對(duì)小鼠的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。
　　
　　
　　1　實(shí)驗(yàn)材料
　　
　　1．1　藥物　實(shí)驗(yàn)用黑骨頭，采集于楚雄永仁，由大理學(xué)院生藥學(xué)教研室馬曉匡教授鑒定。采后自然陰干，切碎。稱取6000g，用乙醇浸泡、濃縮得浸膏303g，即1g浸膏相當(dāng)于19.80g生藥，臨用前取浸膏分別用水配制成低(0.175％)、中(0.350％)、高(0.700％)3個(gè)劑量組的黑骨頭混懸液，依次含生藥700mg，1400mg，2800mg；阿司匹林腸溶片(昆明云健制藥有限公司，批號(hào)：20070140)；冰醋酸(西安化學(xué)試劑廠，批號(hào)：901209)；伊文思藍(lán)(上?；瘜W(xué)試劑采購供應(yīng)站經(jīng)銷行校辦廠分裝，批號(hào)：82-11-02)。
　　1．2　動(dòng)物　昆明種小鼠．體重18～22g，雌雄各半，由四川省動(dòng)物研究所提供，動(dòng)物合格號(hào)：SCXK(川)2004-50。
　　1．3　儀器　722光柵分光光度計(jì)(上海生化儀器廠生產(chǎn))；電熱恒溫水溫箱(上海醫(yī)療器械七廠；型號(hào)：HH-W21-Cu600)；電子天平[梅特勒一托利多儀器(上海)有限公司；型號(hào)：AL204-1C]；秒表(上海星鉆秒表有限公司)。
　　
　　2　實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
　　
　　2．1　鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)
　　2．1．1　小鼠熱板法　實(shí)驗(yàn)前篩選雌性小鼠。將其置于55±0.5℃的熱板上。以放置于熱板上至小鼠首次舔后足所需時(shí)間為該鼠的正常痛閾值。將痛閾值小于5s或．大于30s或跳躍的小鼠棄用。痛閾值合格(5～30s)的小鼠，再次測(cè)正常痛閾值，取2次測(cè)試結(jié)果平均值，作為該鼠給藥前痛閾值(2次測(cè)試問隔≥15min)。取合格小鼠50只，隨機(jī)分為5組：N.S組；阿司匹林組(150mg／kg)；黑骨頭低、中、高劑量組。各給藥組連續(xù)灌胃給藥7d，2次／d，阿司匹林為1次／d，給藥量均為0.2ml／10g，末次給藥15rain，30min，60min，90min后分別測(cè)定小鼠痛閾值1次，若60s仍無反應(yīng)，將小鼠取出，其痛閾值以60s計(jì)算。結(jié)果見表1。
　　
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，黑骨頭3個(gè)劑量組均有一定的提高小鼠痛閾值的作用，且峰值出現(xiàn)較快(15min)，持續(xù)15rain后開始下降。黑骨頭中劑量作用最為明顯(P＜0.01)且持續(xù)時(shí)間較長。
　　2．1．2　小鼠扭體法　取體重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分組與給藥同2．1．1。末次給藥30min后，腹腔注射0.7％醋酸溶液0.1ml／10g，觀察小鼠在注射20min內(nèi)因疼痛而產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)(以腹腔內(nèi)凹，伸展后肢，臀部抬高為標(biāo)準(zhǔn))，計(jì)算扭體反應(yīng)抑制率。扭體反應(yīng)抑制率(％)=[(對(duì)照組平均扭體次數(shù)-給藥組平均扭體次數(shù))÷對(duì)照組平均扭體次數(shù)]×100％。扭體反應(yīng)抑制率小于25％為無鎮(zhèn)痛作用，在25％～40％為弱鎮(zhèn)痛作用，在40％～55％為中度鎮(zhèn)痛作用，大于55％為強(qiáng)鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果見表2。
　　
　　結(jié)果顯示，黑骨頭高劑世具有抑制小鼠醋酸扭體反應(yīng)的作用(P＜0.05)，其鎮(zhèn)痛率低于阿司匹林。
　　2．2　抗炎實(shí)驗(yàn)
　　2．2．1小鼠二甲苯耳廓腫脹法　取體重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分組與給藥同2．1．1。末次給藥30min后。各組小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml／只斂炎，左耳對(duì)照。30min后處死動(dòng)物，用直徑為7mm打孔器分別于左、右耳廓的對(duì)稱部位取下兩圓耳片，精確稱重。以左右耳片重量之差為腫脹度，計(jì)算腫脹抑制率，腫脹抑制率(％)=[(塒照組平均腫脹度一給藥組平均腫脹度)÷對(duì)照組平均腫脹度]×100％。結(jié)果見表3。
　　結(jié)果顯示，黑骨頭低、中、高劑量組均對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用(P＜0.05，P＜0.01)，其抑制率均在50％以上，抑制率隨劑量的增大而增大。
　　2．2．2　對(duì)腹腔毛細(xì)血管通透性的影響　取體重18～22g小鼠50只，雌雄各半，分組與給藥同2．1．1。末次給藥30min后，鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)溶液0.1ml／10g，隨后立即腹腔注射0.7％冰醋酸溶液0.1ml／10g，30min后脫頸椎處死動(dòng)物，用6ml生理鹽水洗滌腹腔，收集全部腹腔液于試管中，3000r／min離心15min，取上清液于590nm波長下比色，測(cè)定光密度。計(jì)算抑制率(％)=[(對(duì)照組平均光密度一給藥組平均光密度)÷對(duì)照組平均光密度]×100％，結(jié)果見表4。
　　
　　結(jié)果顯示，黑骨頭中、高劑量組均對(duì)醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加有顯著的抑制作用(P＜0.05)，抑制率隨劑量的增大呈上升趨勢(shì)。
　　
　　3　討論
　　
　　黑骨頭民間主要用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，跌打損傷，胃痛，消化不良等。目前國內(nèi)外尚未見其抗炎、鎮(zhèn)痛作用的報(bào)道，僅見生藥方面的研究。黑骨頭的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)反映其各劑量組均有鎮(zhèn)痛作用(P＜0.05，P＜0.01)，且起效時(shí)間較快，但持續(xù)時(shí)間相對(duì)較短。熱板法顯示黑骨頭中濃度的鎮(zhèn)痛作用效果最好(P＜0.01)，起效快、持續(xù)時(shí)間也較長。實(shí)驗(yàn)中抗炎部分證明，黑骨頭各劑量組的抗炎作用均較明顯(P＜0.05，P＜0.01)，能有效抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹度和醋酸引起的小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的增加。以上實(shí)驗(yàn)提示，黑骨頭具有良好的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。但有關(guān)黑骨頭的抗炎、鎮(zhèn)痛機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步研究確