摘要：對遼寧地區(qū)某豬場發(fā)生的大規(guī)模豬病進(jìn)行診斷和治療。通過對臨床癥狀、剖檢病理變化的觀察和總結(jié)，結(jié)合實驗室熒光PCR技術(shù)、細(xì)菌分離培養(yǎng)、藥敏試驗等檢測結(jié)果，認(rèn)為該場豬群的疾病為豬氣喘病和豬鏈球菌病混合感染。使用土霉素、青霉素聯(lián)合用藥，可較快治愈。

關(guān)鍵詞：豬氣喘??；豬鏈球菌?。粺晒釶CR；藥敏試驗；混合感染

1 豬場發(fā)病情況

1.1 豬場概況

遼寧地區(qū)某豬場為家庭農(nóng)場式飼養(yǎng)模式，該場豬舍共計2棟，以混凝土、鋼結(jié)構(gòu)，覆蓋聚乙烯薄膜形式建筑。地理位置遠(yuǎn)離居民區(qū)和交通要道，海拔較高且具有天然屏障。主要飼養(yǎng)肥育豬只。

1.2 流行病學(xué)調(diào)查

該場原有80日齡肥育豬240余頭，當(dāng)年11月初由外地購入相近日齡豬只30余頭。原有豬只和新進(jìn)豬只均已注射口蹄疫、豬瘟、豬圓環(huán)病毒病疫苗。2023年12月初，該場豬只陸續(xù)發(fā)病，3 d內(nèi)蔓延至全場，70%以上存欄豬只出現(xiàn)不同程度的發(fā)病表現(xiàn)，體質(zhì)較弱、生長較慢豬只陸續(xù)出現(xiàn)死亡，死亡率約為5%。

1.3 臨床癥狀

發(fā)病豬只精神委頓、廢食、喜飲水，呼吸短頻、喘，嚴(yán)重者呈犬坐式；部分病豬出現(xiàn)跛行和不同程度的肘、膝關(guān)節(jié)腫大；癥狀較輕的豬只體溫幾乎正常，癥狀較重的病豬體溫為40～41.5 ℃左右。

1.4 剖檢病理變化

對病死豬只進(jìn)行剖檢，可見肺部腫大、實質(zhì)化；下頜淋巴結(jié)、縱膈淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)腫大，切面外翻；心肌有不同程度的水腫；脾、腎腫大，出血，心包和胸腔有纖維性炎性滲出物；腫大的關(guān)節(jié)腔內(nèi)有膠凍樣黏液。

根據(jù)病豬的臨床癥狀，結(jié)合剖檢的病理變化，懷疑此次豬群發(fā)生的疾病可能是豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬支原體肺炎、非洲豬瘟，并繼發(fā)細(xì)菌性感染。

2 實驗室檢測

2.1 主要材料

1）病料采集。利用手術(shù)器械，采集病死豬的肺組織、淋巴結(jié)和呼吸道內(nèi)容物；在無菌環(huán)境下，用棉拭子分別采集病死豬只的心包和胸腔的炎性滲出物、關(guān)節(jié)腔內(nèi)黏液，送往實驗室-20 ℃冷凍保存。

2）主要設(shè)備儀器：全自動核酸提取儀（上海志昂生物有限公司）、實時定量熒光PCR儀（Roche）、生化培養(yǎng)箱（寧波江南儀器廠）、高速冷凍離心機(jī)（北京路科順高新技術(shù)有限公司）。

3）主要檢測試劑：通用病毒核酸提取試劑盒購自濟(jì)凡生物科技（北京）有限公司，支原體熒光PCR檢測試劑盒購自北京森康生物技術(shù)開發(fā)有限公司，豬瘟病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司，豬藍(lán)耳病熒光RT-PCR檢測試劑盒購自賽諾利康生物技術(shù)（北京）有限公司，非洲豬瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒購自北京明日達(dá)科技發(fā)展有限責(zé)任公司，血平板（成品培養(yǎng)基）購自廣東環(huán)凱生物科技有限公司。

2.2檢測方法

1）分子生物學(xué)檢測。根據(jù)檢測試劑和儀器設(shè)備使用說明書，采用熒光PCR技術(shù)，對豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬支原體肺炎、非洲豬瘟進(jìn)行檢測。

2）病原菌分離鑒定。采用馬鮮血瓊脂培養(yǎng)皿和細(xì)菌劃線分離培養(yǎng)技術(shù)，篩選疑似致病菌。將采集的樣品，涂抹在鮮血瓊脂培養(yǎng)皿中，觀察是否存在溶血菌落；通過細(xì)菌劃線培養(yǎng)，將溶血菌落純化；通過革蘭氏染色和鏡下檢查初步判定細(xì)菌種屬。對疑似病原菌進(jìn)行藥敏試驗，選用敏感度高的藥物進(jìn)行治療。

2.3結(jié)果與分析

1）分子生物學(xué)檢測結(jié)果。檢測結(jié)果顯示，三類樣品中豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒和非洲豬瘟病毒均為陰性，支原體均為陽性（詳見圖1）。據(jù)此可判定，引起本次豬群發(fā)病的主要病原為支原體。

2）病原菌分離鑒定結(jié)果。馬鮮血瓊脂培養(yǎng)皿培養(yǎng)結(jié)果顯示，三類樣品中均各存在一種β溶血菌落，將各溶血菌落細(xì)菌純化后染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)均為革蘭氏陽性鏈狀球菌。藥敏試驗顯示，該細(xì)菌對青霉素極為敏感。

3）病原菌藥敏試驗結(jié)果。結(jié)果顯示，在三類樣品中分離出的鏈球菌對土霉素和青霉素表現(xiàn)極敏，對恩諾沙星表現(xiàn)為高敏，對阿莫西林和萬古霉素表現(xiàn)為中敏，對林可霉素不敏（詳見表1）。

通過實驗室檢測結(jié)果，可初步判定本病為支原體和鏈球菌引起的，豬支原體肺炎和豬鏈球菌病混合感染。

3 臨床治療試驗

3.1 豬場消毒

使用2%氫氧化鈉（NaOH）熱溶液對全場的走廊、過道、豬舍墻壁進(jìn)行噴灑消毒；用稀釋后的過硫酸氫鉀（KHSO5）噴灑圈舍欄桿、地面、食槽及豬體進(jìn)行帶豬消毒，每2 d進(jìn)行一次。

3.2 藥物治療

1）藥物選用。根據(jù)實驗室檢測結(jié)果和藥敏試驗結(jié)果，遵循聯(lián)合用藥的原則，以土霉素和青霉素對本病進(jìn)行治療。具體用法為：鹽酸土霉素注射液，35 mg/kg·bw，肌內(nèi)注射，1次/d[1]；肌內(nèi)注射青霉素3萬IU/kg·bw，2次/d[2]。同時，按照500 g/m3水的比例，在飲水中添加70%黃芪多糖可溶性粉，以增強(qiáng)病豬抵抗力。

2）治療結(jié)果。治療2 d后，病豬癥狀明顯減輕，采食量有所增長，日死亡量大幅下降；連續(xù)治療5 d后，已無病豬死亡，癥狀較輕豬只基本恢復(fù)正常；連續(xù)用于8 d后，所有豬只基本痊愈，僅余11只嚴(yán)重病例，仍有跛行、萎靡、食欲下降等較輕癥狀，需進(jìn)一步治療。

4 討論

4.1 豬氣喘病的防治措施

豬氣喘病，又稱豬支原體肺炎，是由豬肺炎支原體引起的一種傳染迅速、病程緩慢持久的豬傳染病，在任何季節(jié)均可發(fā)生，并且任何品種和年齡段的豬都可感染[3]。但本病的發(fā)生和傳播往往需要一定的誘導(dǎo)因素，如長途運(yùn)輸所產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)、飼養(yǎng)密度大、環(huán)境密閉及空氣不流通等，本次豬群在發(fā)生疾病前，由于飼養(yǎng)管理不當(dāng)，已滿足了發(fā)病的相應(yīng)條件。因此，豬場尤其是小型豬場，在生豬養(yǎng)殖過程中，要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，方能預(yù)防本病。需要特別注意的是，豬場一旦發(fā)生本病，很難徹底清除環(huán)境中隱藏的豬肺炎支原體，所以本病容易在同個養(yǎng)殖區(qū)域反復(fù)發(fā)生，因此，及時接種疫苗便成為預(yù)防本病的關(guān)鍵。曹蕊[4]在研究中認(rèn)為，針對養(yǎng)殖場的實際情況和地方流行病學(xué)選擇適合的疫苗，可有效預(yù)防本?。缓蠃i[5]認(rèn)為做好疫苗接種是防控豬氣喘病的關(guān)鍵措施，及時接種疫苗能幫助生豬獲得抗體，防止疫病發(fā)生。由于豬氣喘病發(fā)展緩慢、病程長，因此本病的根治較為困難。陳國才[6]認(rèn)為，中藥治療豬氣喘病可以在一定程度上增強(qiáng)生豬的免疫力，降低病原菌的耐藥性，這些優(yōu)勢是抗生素不可替代的。張明[7]研究發(fā)現(xiàn)，將中西醫(yī)手段有效結(jié)合治療豬氣喘病能夠達(dá)到協(xié)同兼治的效果，同時也能夠縮短治療周期，提高治愈率。

4.2 豬鏈球菌病的防治措施

豬鏈球菌被認(rèn)為是給養(yǎng)豬業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失的細(xì)菌性病原體之一，隨著世界范圍內(nèi)預(yù)防性抗菌劑的使用逐漸減少，豬鏈球菌病的發(fā)病率呈上升趨勢[8]。由此可見，在發(fā)生疾病后，快速有效地選擇治療方案，變得尤為重要。石元軍[8]等認(rèn)為，豬鏈球菌病可使用抗生素來治療，但由于鏈球菌容易產(chǎn)生耐藥性，因此要先進(jìn)行藥敏試驗，再選用藥物。本研究中，豬鏈球菌的發(fā)生，是由于豬場的飼養(yǎng)管理混亂——飼養(yǎng)密度大、新進(jìn)豬只直接混群、豬舍密閉，所引起的，因此，從飼養(yǎng)管理層面來預(yù)防豬鏈球菌病。除此之外，本次豬群疾病中，發(fā)病豬只的豬氣喘病癥狀較重，表現(xiàn)明顯，而豬鏈球菌病則僅在瀕死豬只中病變清晰，筆者懷疑本次發(fā)生的豬鏈球菌病是繼發(fā)于豬氣喘病。由此可見，當(dāng)豬群發(fā)生疾病時，緊急消毒處理，對預(yù)防繼發(fā)感染尤為重要。

4.3 基層分子生物學(xué)技術(shù)的推廣與應(yīng)用

近年來，隨著我國農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展，各農(nóng)業(yè)院校培養(yǎng)的高素質(zhì)獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)人才越來越多，尤其是我國發(fā)生非洲豬瘟疫情后，國家動物疫病監(jiān)督防控機(jī)構(gòu)，在畜禽養(yǎng)殖量較大縣區(qū)增設(shè)了分子生物學(xué)實驗室。這些實驗室在建設(shè)過程中，加大了資金投入，采購了較為先進(jìn)的檢測設(shè)備，招聘了大量專業(yè)人才，完全可以對常見動物疫病作出專業(yè)診斷。但是，所建成的分子生物學(xué)實驗室僅承擔(dān)非洲豬瘟、禽流感等重大動物疫病的監(jiān)測檢測工作，如果能夠進(jìn)一步推廣使用，承擔(dān)起常見動物疾病的分子生物學(xué)檢測工作，對合理使用藥物、降低養(yǎng)殖成本、減少耐藥菌株的產(chǎn)生等養(yǎng)殖問題具有重要意義。然而，如何協(xié)調(diào)好成本增加和解決問題之間的關(guān)系，則需要國家相關(guān)部門慎重考慮，出臺一系列的法律法規(guī)，使之逐步完善，進(jìn)而使分子生物學(xué)技術(shù)推廣、應(yīng)用到養(yǎng)殖一線。

5 結(jié)論

通過臨床癥狀分析、病死豬解剖檢查和實驗室技術(shù)檢測，認(rèn)為引起本次豬群發(fā)病的疾病為豬氣喘病和豬鏈球菌病的混合感染。通過藥敏試驗，結(jié)合病原菌特性，使用青霉素和土霉素治療可快速達(dá)到治療目的。

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