病理學(xué)檢查在診斷疾病、制定治療方案、判斷預(yù)后及總結(jié)治療經(jīng)驗(yàn)等方面起著舉足輕重的作用。病理切片是病理標(biāo)本的一種。制作時(shí)，將部分有病變的組織或臟器經(jīng)過各種化學(xué)試劑處理和石蠟包埋，使之固定硬化；在切片機(jī)上切成薄片后，粘附于玻片上，染以各種顏色；通過顯微鏡以觀察病理變化作出病理診斷，為臨床診斷和治療提供幫助。然而，常規(guī)石蠟切片遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足于手術(shù)科醫(yī)生工作的需要。如果想在手術(shù)中馬上了解腫瘤或病變的性質(zhì)，以便確定手術(shù)方案和范圍，就需要應(yīng)用快速冰凍切片技術(shù)作出快速病理診斷。

快速冰凍切片的定義

快速冰凍切片也稱為冰凍切片，是將術(shù)中切下的病變組織在冰凍切片機(jī)中迅速冷凍后，于30 min內(nèi)完成制片和做出病理診斷的一項(xiàng)技術(shù)，免去了常規(guī)的固定、脫水、石蠟包埋等過程。

快速冰凍切片的作用

術(shù)中冰凍是一項(xiàng)高效且實(shí)用的技術(shù)，既能幫助醫(yī)生有效切除病變組織，又能在最大程度上減少手術(shù)的傷害。

（1）確定病變是否為腫瘤，并判斷腫瘤良、惡性，以確定下一步手術(shù)方案。

（2）了解腫瘤有無播散到鄰近淋巴結(jié)或臟器，確定手術(shù)切緣有無腫瘤浸潤(rùn)，以了解手術(shù)范圍是否足夠大。

（3）幫助識(shí)別手術(shù)中某些意外和確定可疑的微小組織，比如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管等。

（4）顯示組織中的脂肪和脂類物質(zhì)，常見于脂肪瘤、肉瘤等。

快速冰凍切片的適用及不適用范圍

適用范圍

擇期手術(shù)時(shí)，需要確定病變性質(zhì)，比如是腫瘤還是非腫瘤、是良性病變還是惡性病變等，以決定手術(shù)方案的標(biāo)本；了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況，包括腫瘤是否浸潤(rùn)相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等；確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留；切除組織的確認(rèn)，如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。

不適用范圍

疑為惡性淋巴瘤；標(biāo)本的檢查長(zhǎng)度≤2 cm；術(shù)前易于進(jìn)行常規(guī)活檢者；脂肪組織、骨組織和鈣化組織；需要依據(jù)核分裂象計(jì)數(shù)判定良、惡性的軟組織腫瘤；主要根據(jù)腫瘤生物學(xué)行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤；已知具有傳染性疾?。ńY(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等）的標(biāo)本。

快速冰凍切片的具體操作步驟

快速冰凍切片需要臨床醫(yī)生、病理醫(yī)生、病理技術(shù)員以及標(biāo)本送檢員共同完成。

術(shù)前

術(shù)前，臨床醫(yī)生與患者簽署《術(shù)中快速冰凍知情同意書》，告知其意義和局限性，向病理科提交《術(shù)中冰凍申請(qǐng)單》，并填寫患者的病史、重要檢查結(jié)果等信息。

術(shù)中

術(shù)中，臨床醫(yī)生取出標(biāo)本后立即裝入標(biāo)本袋，連同《病理組織檢驗(yàn)送檢單》一同迅速送至病理科。

病理檢驗(yàn)

病理科接收標(biāo)本后，核對(duì)標(biāo)本信息并登記。取材醫(yī)生觀察標(biāo)本，選取疑似病變組織交給病理技術(shù)員進(jìn)行冰凍切片。冰凍切片包括冰凍包埋和制片兩部分，常規(guī)病理一般需要十幾個(gè)小時(shí)的脫水，再用石蠟制成“蠟塊”，而術(shù)中冰凍只需要使用0CT包埋劑做支撐，利用低溫1～3 min就可將標(biāo)本快速變成一個(gè)“冰疙瘩”。制片是將標(biāo)本置于包埋托上，用冰凍切片機(jī)切成6～8 μm厚的切片，貼于預(yù)處理載玻片上，迅速放入固定液中，染色4～5 min。之后，切片交給診斷醫(yī)生進(jìn)行顯微鏡觀察，完成術(shù)中病理診斷，并出具規(guī)范的病理報(bào)告送交臨床醫(yī)生。

快速冰凍切片與常規(guī)石蠟切片的區(qū)別

術(shù)中快速病理現(xiàn)在一般采用特殊的冰凍設(shè)備將標(biāo)本快速冰凍并切片，從接到標(biāo)本至出報(bào)告一般在30 min。術(shù)中快速病理的開展大大提高了臨床手術(shù)術(shù)式的選擇和準(zhǔn)確性，特別對(duì)婦科卵巢腫瘤、普外兩腺進(jìn)一步選擇手術(shù)術(shù)式有幫助。

常規(guī)病理一般采用石蠟切片，是把快速冰凍切剩下的可疑病灶用蠟油浸泡包埋，做成一個(gè)蠟塊，然后慢慢通過層層取材，用不同的試劑進(jìn)行染色。這個(gè)過程非常繁瑣和復(fù)雜，有時(shí)候一種試劑的染色無法區(qū)分還要換另一種試劑，進(jìn)行第二次、第三次，甚至第四次的染色區(qū)分。因此，石蠟切片至少要5～10 d才能得出結(jié)果。碰到無法明確、疑難的病理，還要召集科室的病理醫(yī)生一起討論，重新做免疫組化，之后再討論，才能下最后的診斷意見。

但是，做完術(shù)中快速冰凍病理后一定還要進(jìn)行常規(guī)石蠟切片診斷，并且要以后者為準(zhǔn)，因?yàn)槌Ｒ?guī)的石蠟切片成像質(zhì)量遠(yuǎn)比快速冰凍切片好。

快速冰凍切片的優(yōu)缺點(diǎn)

快速冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)

快速冰凍切片簡(jiǎn)便，不需要對(duì)組織固定、脫水、透明、包埋等手續(xù)即可進(jìn)行切片，減少了一些中間環(huán)節(jié)，切取的組織變化也不大，正常情況下30 min內(nèi)即可完成診斷工作；提高手術(shù)成功率，解決高難手術(shù)術(shù)中的診斷問題；避免患者二次手術(shù)，減少其手術(shù)痛苦。

快速冰凍切片的缺點(diǎn)

不容易做連續(xù)切片或較薄的切片；切取的組織不能過大，否則不易凍結(jié)或者組織凍結(jié)不均，影響切片及染色效果；組織塊在凍結(jié)過程中容易產(chǎn)生水的結(jié)晶，組織結(jié)構(gòu)不如石蠟切片清晰；未經(jīng)過組織脫水透明等步驟，鏡下圖像不如石蠟切片清楚，容易造成誤診；體積較大的腫瘤發(fā)生局灶癌變時(shí)，可能因冰凍取材受限不能全取而漏診；某些情況下，冰凍病理檢查僅能提供一個(gè)參考性意見或推遲至石蠟切片才能明確病變性質(zhì)；腫瘤鈣化部分無法冰凍制片。

快速冰凍切片的發(fā)展趨勢(shì)

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，快速冰凍切片技術(shù)也在不斷發(fā)展。

自動(dòng)化和智能化

隨著自動(dòng)化和人工智能技術(shù)的發(fā)展，快速冰凍切片的過程正在變得越來越自動(dòng)化。從樣本準(zhǔn)備到切片制作，再到染色和觀察，許多步驟都可以通過機(jī)器自動(dòng)完成，不僅提高了效率，還減少了人為錯(cuò)誤的可能性。

多色和多模態(tài)成像

為了滿足復(fù)雜疾病診斷的需要，多色和多模態(tài)成像技術(shù)正在被越來越多地應(yīng)用于快速冰凍切片中。這允許醫(yī)生在同一時(shí)間觀察多種不同的組織特征，提高了診斷的準(zhǔn)確性。

綠色環(huán)保

隨著環(huán)保意識(shí)的提高，快速冰凍切片技術(shù)的發(fā)展也開始考慮環(huán)保和安全問題。例如，使用更環(huán)保的冷凍劑、減少廢棄物產(chǎn)生等措施，確保處理過程中的安全性，避免對(duì)操作人員和患者造成傷害。