摘要：豬圓環(huán)病毒病是豬圓環(huán)病毒引起豬的一種多系統(tǒng)功能障礙性疾病。病豬主要特征為體質(zhì)下降、生長發(fā)育不良、消瘦、貧血、黃疸、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大、內(nèi)臟器官和皮膚廣泛病變等。2024年5月在安徽省合肥市某黑毛豬場部分黑毛豬開始咳嗽，后面出現(xiàn)氣喘癥狀，食欲下降，消瘦。筆者通過對病豬的臨床癥狀及剖檢組織病變分析觀察，經(jīng)過實驗室的細菌型檢查、藥敏實驗、PCR檢測最終確定為豬圓環(huán)病毒病并發(fā)細菌感染。文章對該病發(fā)生的原因、如何診斷和鑒別進行了分析，并提出一些防控措施，希望有助于該病的診斷和防治。

關(guān)鍵詞：豬圓環(huán)病毒；PCR檢測；診斷

豬圓環(huán)病毒隸屬于圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的一種動物病毒。豬圓環(huán)病毒為無囊膜環(huán)狀、共價閉合的雙鏈DNA病毒^[1]。該病毒對雞、牛、羊等多種動物及人的紅細胞均無凝集作用，病毒顆粒大小在17 nm左右。按其核酸序列和抗原性不同，將其分為4個亞型：PCV1，PCV2，PCV3，PCV4。

PCV1是1970年在豬腎臟上皮細胞中首次被發(fā)現(xiàn)的，其基因組長度不超過1 800 bp，與PCV2，PCV3，PCV4類似。起初，PCV1僅被視為無致病性污染物。然而，隨著研究的深入，我國科學(xué)家在2008年第一次利用PCV1抗體的免疫過氧化物酶單細胞實驗檢測發(fā)現(xiàn)，257例全國樣本中，PCV1抗體在臨床上的檢出率為19 %左右。近年來數(shù)據(jù)表示PCV1是一種廣泛存在的病毒，但感染率不高。PCV2病毒是在20世紀晚期由加拿大的科學(xué)家首次發(fā)現(xiàn)的。自該毒株被發(fā)現(xiàn)后，國內(nèi)外不斷有關(guān)于其感染情況的報告，其中最早在1997年在我國被發(fā)現(xiàn)。PCV2a，PCV2b，PCV2c，PCV2d，PCV2e，PCV2f分別為PCV2的六種基因型。PCV2是目前唯一能導(dǎo)致豬多器官功能衰竭綜合癥的病原體，同時也與豬皮炎、腎病綜合征、豬繁殖和呼吸道綜合征、仔豬震顫等疾病有著緊密的聯(lián)系。PCV3在美國首先被發(fā)現(xiàn)，其基因組長度在20 000 bp左右。中國是繼美國后，又一個報告了PCV3的國家^[2]。 PCV3感染在國內(nèi)的分布較廣，感染率呈逐年上升的趨勢。前期研究表明，PCV3與PCV2具有很強的相似性，可導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)綜合癥等豬圓環(huán)病毒病相關(guān)癥狀，并與其它豬病原體共感染。PCV4是最晚發(fā)現(xiàn)的 PCV，其全基因組約1 770 bp，在湖南省第一次發(fā)現(xiàn)的PCV4亞型，但目前國內(nèi)外關(guān)于PCV4基因分型的報道很少，且體外培養(yǎng)的病例更是罕見。迄今，PCV4主要在中國，日本，韓國等國家均有分布，但仍未出現(xiàn)大范圍檢測和大量陽性的病例。

豬圓環(huán)病毒病，其發(fā)病季節(jié)沒有明顯的季節(jié)性，以呼吸道、消化道和胎盤為主要傳播媒介，傳播途徑主要為呼吸道、消化道和胎盤，感染的豬和流產(chǎn)的胎兒都是傳播的媒介。該疾病在各年齡階段都容易發(fā)生，尤以仔豬最多，6-12周時最多見。

1 病例介紹

在2024年5月，安徽省合肥市某黑毛豬場部分黑毛豬開始咳嗽，后面出現(xiàn)氣喘癥狀，食欲下降，消瘦等臨床癥狀。筆者觀察到該養(yǎng)殖場對糞便沒有進行及時合理處理，導(dǎo)致糞便隨意排放，養(yǎng)殖環(huán)境臟亂差，豬場飼料單一，品質(zhì)極差，很難滿足豬的日常營養(yǎng)需求。筆者詢問場主黑毛豬免疫情況，得知該豬場豬沒有進行任何疫苗免疫。

2 臨床癥狀及剖檢組織病變

2.1臨床癥狀

該病豬發(fā)熱，消瘦、食欲下降并呼吸困難和水腫。體表檢查發(fā)現(xiàn)腹股溝淺淋巴結(jié)腫大（見圖1A），全身有大小不等的褐色實變區(qū)（見圖2B）。

2.2剖檢組織病變

剖檢病豬后肉眼可見，該病豬心臟脂肪漿液化（見圖2A）肺彌漫性病變（見圖2B）脾臟腫大（見圖2C）腎皮質(zhì)發(fā)白（見圖2D）胃出血（見圖2E）喉頭出血（見圖2F）。

3 實驗室檢查

3.1 細菌學(xué)檢查

在無菌操作的前提下，將肺臟、肝臟做切口，涂布于蓋玻片上，革蘭氏染色進行鏡檢。鏡檢結(jié)果有革蘭氏陽性菌和陰性菌。將肺臟、肝臟研磨，進行三區(qū)劃線接種于血平板，37 ℃恒溫培養(yǎng)12 h以上，挑取單菌落做革蘭氏染色鏡檢。

3.2 藥敏試驗

取100 ul制成的菌液于培養(yǎng)基表面，用涂布棒快速涂覆，以保證培養(yǎng)基的均勻分布。在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中放置3分鐘，將藥敏片整齊地平放在平皿上，藥敏片與平皿內(nèi)緣之間的間距不得低于13 nm，相鄰兩層之間的間距不得低于24 nm。粘貼完畢后，在標簽上寫上藥敏片名字，然后將平板翻轉(zhuǎn)，置于37 ℃的溫箱中進行24 h的培養(yǎng)。用游標卡尺測制抑菌圈的直徑，并做好統(tǒng)計。

3.3 PCR檢測

采集病豬血液，加入含抗凝劑的試管，提取DNA進行豬圓環(huán)病毒病和非洲豬瘟檢測，反轉(zhuǎn)錄進行豬藍耳病和豬瘟檢測。以核算為模版，進行PCR擴增，PCR擴增程序（見表1）。

4 結(jié)果與分析

（1）細菌學(xué)檢查結(jié)果。三區(qū)接種的血平板上挑取菌落做鏡檢結(jié)果該豬分別感染革蘭氏陰性桿菌和革蘭氏陽性球菌（見圖3），確定該豬細菌性感染。

（2）藥敏試驗結(jié)果（見表2）。

（3）PCR檢測結(jié)果。該病毒經(jīng)PCR擴增后，凝膠電泳驗證結(jié)果豬圓環(huán)病毒病檢測為陽性，藍耳、豬瘟、非瘟檢測均為陰性（見圖4）。

綜上所述，根據(jù)該病豬臨床癥狀、剖檢病變以及PCR結(jié)果最終診斷為豬圓環(huán)病毒并發(fā)細菌感染。

5 綜合防治措施

5.1 加強日常飼養(yǎng)管理

優(yōu)良的飼養(yǎng)管理狀況能使豬更好地成長。在這方面要強化飼養(yǎng)管理，主要是通過平時的飼喂和管理來增強豬的免疫力，預(yù)防疾病的侵入，降低疾病的發(fā)病率。另外，要注意日常的飼養(yǎng)管理，要做到科學(xué)喂養(yǎng)，合理搭配，保證豬的生長發(fā)育需要的各種營養(yǎng)素和微量元素得到保證，還可以添加一些能夠維持豬只腸道機能的益生菌。應(yīng)加強對新、斷乳豬群體的監(jiān)督，以降低該病的發(fā)病率。還要對養(yǎng)殖場內(nèi)的生豬養(yǎng)殖密度進行合理的規(guī)劃，確保養(yǎng)殖場內(nèi)的通風(fēng)和光照等情況，確保生豬的健康成長。

5.2 強化生物安全

養(yǎng)殖場應(yīng)保持干凈整潔衛(wèi)生狀況，及時清理糞便和殘余飼料，定期消毒圈舍衛(wèi)生環(huán)境。嚴格規(guī)范的引種。對病情嚴重、無治療價值的患豬及早撲殺并無害化處理^[3]。對有治療價值的患豬及時隔離治療，并由專人管理。對環(huán)境進行消毒時優(yōu)選3 %氫氧化鈉溶液、5 %石灰水等；對空舍進行消毒時優(yōu)選甲醛、戊二醛噴霧消毒或福爾馬林熏蒸消毒，確保達到最佳消毒效果^[4]。

5.3 免疫預(yù)防

預(yù)防和控制豬圓環(huán)病毒感染的重要環(huán)節(jié)是疫苗免疫。在日常免疫工作中，要把預(yù)防接種工作納入日常免疫計劃。病毒滅活疫苗、嵌合病毒滅活疫苗、亞單位疫苗等是豬圓環(huán)病毒病疫苗的主要種類。在接種的過程中，一定要嚴格遵守疫苗接種的步驟，同時要時刻保持生物安全防控的狀態(tài)，要嚴格遵循一頭豬一針，在接種疫苗的過程中，要對所要注射的部位進行消毒^[5]。養(yǎng)殖場要嚴格按照免疫規(guī)程做好免疫工作，防止出現(xiàn)該病，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。

5.4 藥物治療

目前還沒有針對豬圓環(huán)病毒病的特異性治療藥物。治療的原則是提高患病豬的自身免疫力，防止繼發(fā)感染?？梢赃x擇將某些中草藥制劑混合在飼料中，然后喂給患病的豬，這樣可以刺激患病的豬的免疫細胞分泌更多的干擾素，從而提高機體的抗體生成^[6]。對患豬每千克體重肌注頭孢喹肟0.1 mL和黃芪多糖0.1～0.2 mL，同時全群日糧中也做添加，飲水中添加多維和電解質(zhì)，增強豬群整體的抗病能力。若發(fā)生繼發(fā)性感染，可考慮混合使用抗生素。

6 討論

豬圓環(huán)病毒病的防治要以防為主，養(yǎng)多于防，防治結(jié)合，加強生物安全措施和飼養(yǎng)管理，阻斷外來病原的入侵，阻斷病毒的傳染路徑，優(yōu)化飼養(yǎng)環(huán)境，疫苗免疫，才能實現(xiàn)對豬圓環(huán)病毒的有效防治。

參考文獻：

[1] 楊世興.安徽省豬圓環(huán)病毒病分子流行病學(xué)調(diào)查[D].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

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[3] 周茂旦.一起斷乳仔豬圓環(huán)病毒病的診治報告[J].福建畜牧獸醫(yī)，2023，45（02）： 78-79.

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[5] 曾皓然，喻維維，賀閃閃.豬圓環(huán)病毒病的診斷與防治[J].農(nóng)業(yè)技術(shù)與裝備，2023，（12）：138-140.

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