摘要：目的" 基于超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）技術(shù)，通過(guò)血液代謝組學(xué)尋找成人草酸鈣尿石癥潛在的生物標(biāo)志物和代謝機(jī)制，以指導(dǎo)草酸鈣結(jié)石的臨床診治。方法" 前瞻性收集2017年10月—2018年7月北京友誼醫(yī)院收治的36例雙側(cè)上尿路草酸鈣結(jié)石患者的血液樣本并與36例健康體檢者的血液樣本對(duì)照。采用UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)進(jìn)行代謝指紋圖譜分析。采用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA）對(duì)多元數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。通過(guò)對(duì)比人類代謝組數(shù)據(jù)庫(kù)確定潛在的生物學(xué)標(biāo)記物。最后對(duì)所鑒定的化合物行代謝通路分析并構(gòu)建代謝網(wǎng)絡(luò)圖。結(jié)果" PCA和OPLS-DA結(jié)果顯示健康對(duì)照者與結(jié)石患者血液代謝物存在顯著差異。進(jìn)一步鑒定出包括亞油酸、枸櫞酸、尿酸等29種與草酸鈣結(jié)石患者血液相關(guān)的代謝物，以及膽汁酸合成通路、脂肪酸生物合成通路、甘油磷脂代謝通路、鞘脂代謝通路和嘌呤代謝通路等9條血液代謝通路。結(jié)論" 基于UPLC-Q-TOF/MS平臺(tái)進(jìn)行血液代謝組學(xué)分析，找到了29種成人草酸鈣尿石癥的潛在血液生物標(biāo)志物，而嘌呤代謝與脂質(zhì)代謝可能與草酸鈣結(jié)石的成因相關(guān)。

關(guān)鍵詞：生物學(xué)標(biāo)記物；代謝組學(xué)；超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜；草酸鈣；尿石癥；血液代謝

中圖分類號(hào)：R691.4""" 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1009-8291.2024.09.015

Blood metabolomics research for calcium oxalate urolithiasis in adults based on UPLC-Q-TOF/MS

WANG Xiangyu，JI Jiayuan，CUI Teng，XIAO Jing

（Department of Urology，Beijing Friendship Hospital，Capital Medical University，Beijing 100050，China）

ABSTRACT：Objective" Based on ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry （UPLC-Q-TOF/MS），the potential biomarkers and metabolic mechanisms of adult calcium oxalate urolithiasis were identified to guide the diagnosis and treatment of calcium oxalate lithiasis.Methods" Blood samples of 36 patients diagnosed with bilateral upper urinary tract calcium oxalate stones and 36 healthy controls admitted to our hospital during Oct.2017 and Jul.2018 were collected.Metabolic fingerprints were analyzed with UPLC-Q-TOF/MS.The multivariate data were analyzed with principal component analysis （PCA） and orthogonal partial least squares discriminant analysis （OPLS-DA）.Potential biological markers were identified by comparing human metabolome datasets.Finally，the metabolic pathways of the identified compounds were analyzed and the metabolic network map was constructed.Results" PCA and OPLS-DA showed significant differences in blood metabolites between patients and healthy controls，and identified 29 blood-related metabolites，including linoleic acid，citric acid，uric acid and so on.The most relevant blood metabolic pathways were bile acid synthesis pathway，fatty acid biosynthesis pathway，glycerophospholipid metabolism pathway，sphingolipid metabolism pathway and purine metabolism pathway.Conclusion" Blood metabolomics analysis based on the UPLC-Q-TOF/MS platform identified 29 potential blood biomarkers of adult calcium oxalate urolithiasis，and purine and lipid metabolism may be related to the genesis of calcium oxalate stones.

KEY WORDS：biomarker; metabolomicsHYPERLINK\"javascript：ViewClassDetails（131）\";" ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry （UPLC-Q-TOF/MS）; calcium oxalate; urolithiasis; blood metabolomics

收稿日期：2023-12-24""" 修回日期：2024-03-26

通信作者：

肖荊，主任醫(yī)師。E-mail：drxiao830@163.com

作者簡(jiǎn)介：

王翔宇，博士研究生，住院醫(yī)師。研究方向：泌尿系結(jié)石。E-mail：18769513071@163.com

泌尿系結(jié)石具有較高的患病率和復(fù)發(fā)率，男性患病率約10.6%，女性約7.1% ［1］；術(shù)后2、5、10、15年的復(fù)發(fā)率分別為11%、20%、31%、39% ［2］。而其中74%的腎結(jié)石含有草酸鈣（calcium oxalate，CaOx）成分［3］。然而，目前關(guān)于結(jié)石的病理生理機(jī)制尚不清楚，因此尋找結(jié)石相關(guān)生物學(xué)標(biāo)記物及相應(yīng)的代謝通路至關(guān)重要。

代謝組學(xué)是一種用來(lái)檢測(cè)生物樣本所有小分子化合物的方法［4］，為尋找特定疾病引起的內(nèi)源性代謝物的差異提供了有效途徑，而差異內(nèi)源代謝物可能作為疾病診斷、預(yù)后和治療反應(yīng)的潛在生物標(biāo)志物［5］。同時(shí)，代謝組學(xué)有助于揭示特定疾病的潛在機(jī)制。本課題組已進(jìn)行了有關(guān)人類CaOx結(jié)石尿液代謝組學(xué)的首項(xiàng)研究，并發(fā)表了相關(guān)成果，但尿液受飲食及泌尿系感染等影響較大，其代謝物波動(dòng)較大，無(wú)法精準(zhǔn)反映人體內(nèi)代謝狀態(tài)，因此本課題組嘗試收集患者血液進(jìn)行代謝組學(xué)分析。本研究基于超高效液相色譜聯(lián)合四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry，UPLC-Q-TOF/MS）的代謝組學(xué)方法對(duì)比分析成人雙側(cè)上尿路CaOx結(jié)石患者血液樣本，旨在鑒定成人CaOx上尿路結(jié)石的生物學(xué)標(biāo)記物，找到相應(yīng)的代謝通路，為泌尿系結(jié)石的診斷、預(yù)防提供理論依據(jù)。

1" 材料與方法

1.1" 患者篩選和樣本收集

前瞻性收集2017年10月—2018年7月北京友誼醫(yī)院泌尿外科住院治療的36例泌尿系結(jié)石患者臨床資料和生物學(xué)樣本。入組標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)腹部、盆部計(jì)算機(jī)斷層掃描（computed tomography，CT）確診的雙側(cè)上尿路結(jié)石患者；②年齡18～50歲；③患者行輸尿管鏡碎石或經(jīng)皮腎鏡碎石取到結(jié)石標(biāo)本，經(jīng)紅外光譜結(jié)石成分分析證實(shí)為一水CaOx、二水CaOx或兩者的混合物。排除標(biāo)準(zhǔn)：①含有明確的尿路解剖畸形引起梗阻；②含有尿路異物等結(jié)石高危因素。在北京友誼醫(yī)院體檢中心匹配與每例結(jié)石患者年齡、性別相同的體檢者作為對(duì)照組。本研究獲得北京友誼醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（2018-P2-231-01），所有參與者均已簽署知情同意書(shū)。

1.2" 樣本的采集及前處理

于入院第2天采集患者清晨空腹血液樣本，采用血漿抗凝劑乙二胺四乙酸二鉀抗凝，最終取得患者血液樣本36份。同法收集健康體檢者的空腹血液檢測(cè)樣本。所有結(jié)石組患者及健康對(duì)照均來(lái)自北京及其周邊地區(qū)，且樣本采集前1 d所有患者及健康對(duì)照者均清淡飲食，盡量減少環(huán)境、飲食習(xí)慣的影響。

采集的全血樣本，在4 ℃條件下以3000 r/min的速度離心10 min，隨后取上清液分裝至1.5 mL的試管內(nèi)，于－80 ℃的冰箱中保存。上樣前，將樣本取出放置在25 ℃的溫度下解凍。在200 μL的血漿樣本中加入600 μL的1∶4甲醇水沉淀蛋白，震蕩混勻后，以3000 r/min的速度離心10 min，取400 μL的上清液使用氮?dú)獯蹈蓛x吹干后，加入150 μL的甲醇，并經(jīng)過(guò)超聲震蕩和3000 r/min的速度離心處理10 min。最后，取上清液加入內(nèi)襯管中。質(zhì)控樣本（quality control，QC）從所有樣本中分別取出5 μL混合而成。每采集7針樣本后采集1次QC數(shù)據(jù)，以檢測(cè)儀器穩(wěn)定性。

1.3" 數(shù)據(jù)采集

數(shù)據(jù)采集應(yīng)用Waters ACQUITY UPLC系統(tǒng)（Waters公司，Milford，MA，USA）。采用MassLynx V4.1進(jìn)行參數(shù)設(shè)定和總離子流圖（total ion chromatogram，TIC）的簡(jiǎn)單判定。

色譜分離法采用ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm，Waters公司，美國(guó)）。流動(dòng)相A是指質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的甲酸，B為乙腈。UPLC的洗脫條件為：0～0.5 min，0～2% B；0.5～7.0 min，2%～20% B；7.0～9.0 min，20%～35% B；9.0～15.0 min，35%～80% B；15.0～17.0 min，80%～98%B；17.0～26.0 min，98% B；26.0～26.5 min，98%～2% B；26.5～30.0 min，2% B。流量設(shè)定為0.35 mL/min，進(jìn)樣量為4 μL。采集溫度設(shè)定為35 ℃。

質(zhì)譜分析采用Q-TOF/MS（Synspt G2-Si，Waters公司，美國(guó)），分析過(guò)程采取正離子模式（ESI＋模式）和負(fù)離子模式（ESI－模式）。參數(shù)設(shè)定為：毛細(xì)管電壓1 kV，脫溶氣體流量800 L/h，反溶劑溫度450 ℃，源溫度120 ℃，錐形氣流50 L/h，噴霧氣壓6 bar（1 bar=100 kPa），取樣錐電壓20 V。采集模式為全信息串聯(lián)質(zhì)譜的分辨率模式。在全掃描模式下，質(zhì)量范圍設(shè)置為50～1050 m/z（質(zhì)荷比）。ESI＋模式選取LE（亮氨酸腦啡肽）556.277 1作為調(diào)諧和校正的參比物質(zhì)，ESI－模式選取LE（亮氨酸腦啡肽）554.261 5作為調(diào)諧和校正的參比物質(zhì)進(jìn)行采集。

1.4" 數(shù)據(jù)處理" 上述原始數(shù)據(jù)采集后導(dǎo)入Progenesis QI v2.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)對(duì)齊、峰提取、歸一化和去卷積等。歸一化的方式為總峰面積歸一化。采用方差分析（analysis of variance，ANOVA）評(píng)估代謝物在平均值中的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將多元數(shù)據(jù)導(dǎo)入EZinfo 3.0軟件進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）和正交偏最小二乘判別分析（orthogonal partial least squares determinant analysis，OPLS-DA），OPLS-DA中R2Y表示所建模型對(duì)Y矩陣的解釋率，Q2表示模型的預(yù)測(cè)能力，理論上R2、Q2數(shù)值越接近1說(shuō)明模型越好，越低說(shuō)明模型的擬合準(zhǔn)確性越差。利用OPLS-DA生成投影中的重要度變量（variable importance in projection，VIP），展示變量對(duì)向量形成的影響?；颊呋€資料對(duì)比及受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線構(gòu)建通過(guò)SPSS 19.0軟件進(jìn)行。

1.5" 生物學(xué)標(biāo)志物鑒定

將根據(jù)VIP值區(qū)分的標(biāo)志物數(shù)據(jù)導(dǎo)回Progenesis QI，并對(duì)比人類代謝組數(shù)據(jù)庫(kù)（human metabolome databaseHYPERLINK\"https：//www.baidu.com/link？url=e7RZQ4Eiuy84KZRgcwMrkE0GSuXJziJu0BDAwl9jF_qamp;wd=amp;eqid=81ad6e650002ad73000000035e645896\"＼t\"_blank\"，HMDB）分子量、質(zhì)荷比等參數(shù)，根據(jù)方差分析結(jié)果和來(lái)自O(shè)PLS-DA的VIP值，篩選潛在的用于區(qū)分結(jié)石組患者和健康對(duì)照組的生物標(biāo)志物。篩選條件為：VIP＞1，ANOVA Plt;0.05，有二級(jí)碎片信息且數(shù)據(jù)庫(kù)中可以鑒定，Progenesis QI軟件鑒別分?jǐn)?shù)＞35。符合條件的化合物被采納鑒定為潛在的生物標(biāo)記物。

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行ROC曲線分析，通過(guò)靈敏度、特異度及曲線下面積（area under the curve，AUC）衡量這些生物學(xué)標(biāo)志物的診斷效能。將鑒定的標(biāo)志物通過(guò)https：//www.metaboanalyst.caHYPERLINK\"https：//www.metaboanalyst.ca\"網(wǎng)站導(dǎo)入京都基因與基因組百科全書(shū)（Kyoto Encyclopedia of Genes and GenomesHYPERLINK\"https：//www.baidu.com/link？url=q1nsv4Cx7DYb5yOFYaa4wJPPZpHsGbm_rDdbmlbdkvOamp;wd=amp;eqid=bf55301900654e82000000035e48a5f6\"＼t\"_blank\"，KEGG）及小分子通路數(shù)據(jù)庫(kù)（Small Molecular Pathway Database，SMPDB）行代謝通路分析，找出涉及的代謝通路并繪制代謝網(wǎng)絡(luò)圖。

2" 結(jié)" 果

2.1" 兩組樣本來(lái)源人群的基線資料比較

結(jié)石組患者的平均年齡為（44.0±8.8）歲，其中男性22例，女性14例。結(jié)石組尿白細(xì)胞陽(yáng)性患者數(shù)較對(duì)照組多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），其余資料兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表1）。

2.2" PCA結(jié)果

通過(guò)PCA得分圖可以看出，兩組樣本之間代謝物成分存在差異，而組內(nèi)樣本具有相對(duì)共同的信息特征。QC樣品在PCA得分圖中均有聚集的趨勢(shì)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)狀態(tài)良好（圖1）。通過(guò)EZ-info軟件可以看出，在ESI+模式下有5320個(gè)變量，而ESI－模式下有5109個(gè)變量。

2.3" OPLS-DA結(jié)果

ESI＋及ESI－模式血液多參數(shù)數(shù)據(jù)的OPLS-DA得分圖顯示兩組之間代謝物成分有顯著差別（圖2）。本研究中，ESI＋模式R2Y=97%、Q2=96%，ESI－模式R2Y=98%、Q2=97%，具有比較高的準(zhǔn)確性和預(yù)測(cè)能力。

2.4" CaOx 結(jié)石患者潛在血液生物學(xué)標(biāo)記物鑒定

鑒定出的血液潛在生物學(xué)標(biāo)記物信息，以及ROC曲線計(jì)算的AUC、代謝物化學(xué)式和涉及的代謝通路見(jiàn)表2。表中化合物均按質(zhì)荷比大小從低到高排序。共有29種代謝物被挑選鑒定，涉及9條代謝通路。

我們利用化合物歸一化豐度繪制了ROC曲線來(lái)研究這些生物學(xué)標(biāo)志物的診斷能力，用AUC來(lái)評(píng)估診斷效能。29個(gè)標(biāo)志物的AUC范圍為0.604～0.822（表2），其中11個(gè)標(biāo)志物具有較高的特異度和靈敏度（AUCgt;0.7）。圖3顯示了5種AUC較高的血液代謝物的ROC曲線。

2.5" 代謝通路分析

通過(guò)MetaboAnalyst網(wǎng)站的通路分析進(jìn)行血液代謝途徑的分析（圖4），代謝通路分析通過(guò)比對(duì)KEGG和SMPDB數(shù)據(jù)庫(kù)。相關(guān)性最大的代謝途徑是膽汁酸合成、脂肪酸生物合成、嘌呤代謝、鞘脂代謝和甘油磷脂代謝。

3" 討" 論

代謝組學(xué)在尿石癥中的應(yīng)用很少［6］，近期一篇綜述總結(jié)其在泌尿系結(jié)石中的應(yīng)用，指出代謝組學(xué)已經(jīng)提供了幾種可能防止或促進(jìn)結(jié)石形成的潛在代謝物［7］，同樣代謝組學(xué)可聯(lián)合微生物組學(xué)來(lái)探究結(jié)石成因［8］。既往有研究應(yīng)用代謝組學(xué)的方法尋找小鼠CaOx腎結(jié)石潛在的生物學(xué)標(biāo)記物并闡述了一些藥物治療小鼠腎結(jié)石的作用機(jī)理，如連錢(qián)草 （Glechomae Herba）［9］、復(fù)方金錢(qián)草顆粒（Fu-Fang-Jin-Qian-Chao herbal granules）［10］和血尿安（Xue Niao An）［11］等藥物。CHAO等［12］運(yùn)用同樣的方法行小鼠脂質(zhì)代謝組學(xué)發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)代謝與CaOx結(jié)石形成密切相關(guān)。這些有關(guān)動(dòng)物CaOx結(jié)石的代謝組學(xué)研究，已經(jīng)從尿液或血清樣本中發(fā)現(xiàn)了異常的代謝物譜。最近一項(xiàng)運(yùn)用代謝組學(xué)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的研究表明，琥珀酸鹽作為三羧酸循環(huán)的關(guān)鍵參與物，可以減少動(dòng)物模型腎臟中鈣的沉積和損傷［13］。然而，這些CaOx腎結(jié)石是通過(guò)給動(dòng)物注射或喂食相應(yīng)的化學(xué)藥物繼發(fā)引起的，這極有可能與人類CaOx尿石癥形成的機(jī)制不同。目前代謝組學(xué)應(yīng)用于人類的文獻(xiàn)報(bào)道非常少，且有一定的局限性。部分研究比較淺顯，并無(wú)定性及定量結(jié)果［14］；部分研究針對(duì)極為特殊和有明確病因的結(jié)石（如三聚氰胺暴露）［15］或針對(duì)特殊人群（如兒童［16］）。同樣有研究納入了不同種類的結(jié)石，包括CaOx結(jié)石、尿酸石、碳酸磷灰石等成分，而不同成分的腎結(jié)石代謝成因可能并不相同［17］。

既往多項(xiàng)研究表明尿石癥是一種與代謝綜合征、慢性腎臟疾病、高血壓、糖尿病和冠狀動(dòng)脈疾病相關(guān)的全身性疾?。?8］。雙側(cè)上尿路結(jié)石可以排除單側(cè)潛在的解剖畸形等偏倚因素影響，其結(jié)石病因更可能與全身性疾病或代謝紊亂相關(guān)。因此，本研究選擇分析雙側(cè)上尿路結(jié)石患者的生物學(xué)樣本，以鑒定CaOx結(jié)石潛在的生物標(biāo)志物，并通過(guò)代謝通路分析，盡可能探究CaOx成因及發(fā)病機(jī)制。本課題組首次應(yīng)用基于UPLC-Q-TOF/MS的代謝組學(xué)方法研究成人CaOx結(jié)石尿液成分［19］。雖然尿液中的化學(xué)成分對(duì)泌尿系結(jié)石形成可能有直接的關(guān)系，但是不能確定這些代謝物與CaOx結(jié)石的因果關(guān)系。所以本團(tuán)隊(duì)用類似的方法對(duì)相應(yīng)的患者進(jìn)行了血液代謝組學(xué)研究，本項(xiàng)研究也是首次將基于UPLC-Q-TOF/MS技術(shù)的血液代謝組學(xué)分析應(yīng)用于成人CaOx尿石癥的研究。PCA、OPLS-DA結(jié)果顯示了健康對(duì)照者與CaOx尿石癥患者血液相比存在代謝物表達(dá)差異。我們還鑒定了29種與CaOx尿石癥相關(guān)的血液代謝物，涉及9種代謝途徑。

本研究中尿石癥患者血液中的枸櫞酸降低，而枸櫞酸鹽已被證明是含鈣結(jié)石形成的抑制因子。它可以通過(guò)多方面的機(jī)制抑制CaOx晶體的生長(zhǎng)［20］。脂質(zhì)在泌尿系結(jié)石形成中起重要作用。研究表明，尿石癥患者尿液中膽固醇、膽固醇酯和甘油三酯的水平明顯高于健康人群［21］?，F(xiàn)有的動(dòng)物模型證據(jù)表明，高脂肪飲食可導(dǎo)致尿液pH值降低，易于形成尿酸晶體和含鈣晶體。此外，有證據(jù)表明，食用高脂肪食物的動(dòng)物，尿液中草酸鹽和鈣的含量增加，晶體滯留在尿路上皮從而造成腎損傷［22］。本研究血液樣本中結(jié)石組患者與健康成人之間存在多種脂質(zhì)代謝成分的區(qū)別，高度提示脂質(zhì)代謝異常與結(jié)石形成相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，相比健康對(duì)照組，結(jié)石組血液中的DHA、亞油酸和α-亞麻酸、油酸、棕櫚酸及硬脂酸含量均較低，結(jié)合既往文獻(xiàn)報(bào)道，我們認(rèn)為部分脂肪酸對(duì)CaOx結(jié)石的產(chǎn)生有保護(hù)作用，尤其是n-3多聚不飽和脂肪酸及其代謝產(chǎn)物，可能是與這些脂肪酸參與減少氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)相關(guān)，小鼠CaOx模型脂質(zhì)組學(xué)也顯示了類似的結(jié)果［6］。結(jié)石組患者血液中神經(jīng)鞘磷脂、一磷酸鞘氨醇含量減低，整體鞘脂代謝產(chǎn)物都是降低的狀態(tài)，我們推測(cè)鞘脂代謝可能對(duì)腎CaOx結(jié)石的形成有保護(hù)作用，其機(jī)制可能也與抑制炎癥反應(yīng)相關(guān)。

初級(jí)膽酸、膽酸和鵝去氧膽酸由膽固醇在肝臟內(nèi)合成，與甘氨酸和?；撬峤Y(jié)合后暫時(shí)儲(chǔ)存和集中在膽囊內(nèi)，協(xié)助消化吸收脂質(zhì)，并可以促進(jìn)膽固醇的排泄［23］。未被吸收的膽汁酸和脂肪酸通過(guò)誘導(dǎo)鈣皂化作用，破壞自由鈣和草酸在腸道內(nèi)的結(jié)合，增加腸道對(duì)草酸鹽的吸收，從而增加CaOx尿石癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)［24］。本研究結(jié)果顯示，相較于健康對(duì)照組，結(jié)石組患者血液中膽酸、牛黃脫氧膽酸、鵝去氧膽酸、甘氨膽酸及牛黃膽酸明顯升高，可能提示膽酸合成通路代謝物會(huì)提高結(jié)石發(fā)病率。

本研究涉及的血液中代謝物肌酐、次黃嘌呤、尿酸和XPPPPX均參與嘌呤代謝。本研究中，尿石癥患者血液中尿酸、肌酐和次黃嘌呤升高，而XPPPPX降低。根據(jù)嘌呤代謝途徑，不論是肌酐、次黃嘌呤的升高，還是XPPPPX的降低都可能導(dǎo)致尿酸的升高，而尿酸可以促進(jìn)CaOx晶體成核［25］。

本研究仍存在一些局限性：①患者飲食習(xí)慣及外源性物質(zhì)對(duì)代謝組學(xué)的結(jié)果有影響。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，亞油酸和α-亞麻酸及其代謝產(chǎn)物很可能由飲食攝取而來(lái)，但我們對(duì)患者具體的飲食情況并未做研究。②各種慢性疾病及代謝性疾病都會(huì)影響代謝物組學(xué)的結(jié)果，甚至帶來(lái)偏倚，需要對(duì)其機(jī)制進(jìn)行更深入的研究，以說(shuō)明結(jié)果的意義。③由于所有樣本是在碎石術(shù)前采集，繼發(fā)的泌尿系感染或結(jié)石可能會(huì)引起組織損傷，從而造成代謝物的差異，更多樣本的對(duì)比以及采集患者術(shù)后完全恢復(fù)的樣本可避免此偏倚。④結(jié)石成分分析為一水CaOx、二水CaOx或二者混合，后續(xù)還需開(kāi)展進(jìn)一步研究一水CaOx/二水CaOx比例闡述結(jié)石成因。與所涉及的具體代謝物和代謝通路對(duì)CaOx結(jié)石成因影響的機(jī)制還需要進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，本研究利用UPLC-Q-TOF/MS的代謝組學(xué)方法對(duì)比分析成人雙側(cè)上尿路CaOx結(jié)石患者血液樣本，發(fā)現(xiàn)CaOx結(jié)石患者血液代謝物成分與健康對(duì)照者存在顯著差異，鑒定了29種與CaOx尿石癥相關(guān)的血液標(biāo)志物，嘌呤代謝與脂質(zhì)代謝可能與CaOx結(jié)石成因相關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

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（編輯" 郭楚君）