董秀金 徐一力 吳冰 許建和

摘 要：為了解麻醉?；罴夹g(shù)在活魚運輸中的應(yīng)用和最新研究進展，對活魚運輸過程中麻醉劑的種類、麻醉保活效果的影響因素、麻醉對魚體生理生化及組織結(jié)構(gòu)的影響進行了總結(jié)。

關(guān)鍵詞：魚類；麻醉劑；?；钸\輸；影響因素

在活魚運輸過程中由于捕撈、運輸時間、運輸量等應(yīng)激脅迫，極易造成魚體受傷甚至死亡，導(dǎo)致經(jīng)濟損失。如何采取適當(dāng)措施，降低活魚運輸應(yīng)激反應(yīng)，改善動物福利，提高運輸成活率目前已受到越來越多的關(guān)注。本文介紹了麻醉?；罴夹g(shù)在活魚運輸中的應(yīng)用和最新研究進展，包括麻醉劑的種類，麻醉保活的影響因素以及麻醉?；顚︳~體的影響等，為活魚運輸從業(yè)者和科研人員提供參考和借鑒。

1 麻醉劑種類

麻醉?；钸\輸法的原理是通過麻醉藥物干預(yù)魚類的神經(jīng)系統(tǒng)，使其在運輸過程中處于相對鎮(zhèn)定的狀態(tài)，降低因環(huán)境變化引起的應(yīng)激反應(yīng)，從而能夠在運輸過程中減少對魚類的傷害。目前常見的漁用麻醉劑有MS-222、丁香油（酚）、CO2、2-苯氧乙醇等[1]。

1.1 MS-222

MS-222（間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽，Tricaine methanesulfonate），又名魚安定或魚靜安[2]，是一種問世于1920年的老牌麻醉藥物。MS-222具有使用濃度低、麻醉復(fù)蘇快、毒副作用小等優(yōu)點，因此在國內(nèi)外水產(chǎn)行業(yè)得到廣泛應(yīng)用，也是目前唯一被美國食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)用于食用魚的麻醉劑[3]。MS-222最初被用作人類局部麻醉的替代品，后來發(fā)現(xiàn)其對冷血動物的麻醉效果也很明顯，因此在水產(chǎn)行業(yè)中得到了廣泛應(yīng)用。自上世紀七十年代末，我國研究人員就嘗試將MS-222應(yīng)用于養(yǎng)殖魚類的苗種運輸，并進行了大量相關(guān)研究。肖貴榜等[4]研究了不同濃度MS-222對紅尾副鰍（Paracobitis variegatus）麻醉的影響，結(jié)果顯示MS-222的最適麻醉濃度為110～180 mg/L，其用于長途運輸最適濃度為45～85 mg/L。RAIRAT等[5]在MS-222對尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）的麻醉試驗中，發(fā)現(xiàn)最佳麻醉劑量為300 mg/L。

1.2 丁香油

丁香油是丁香樹的花朵干燥蒸餾而得，自帶丁香花芳香氣味，是一種淺黃色或無色的油質(zhì)液體，具有殺菌、抗病毒、鎮(zhèn)痛、麻醉等藥理活性，其主要有效成分丁香酚約占油質(zhì)85～95%[6]。作為一種純天然麻醉劑，丁香酚兼具安全、高效和價格低廉的優(yōu)勢，因而被大量研究者關(guān)注。陳欣怡等[7]發(fā)現(xiàn)，褐菖鲉（Sebastiscus marmoratus）浸浴在40～50 mg/L丁香酚麻醉溶液內(nèi)15 min全部進入深度麻醉狀態(tài)而無一例死亡，且可實現(xiàn)全部復(fù)蘇；張建明等[8]研究丁香酚對長薄鰍（Leptobotia elongata）幼魚的麻醉時發(fā)現(xiàn)，在20 mg/L丁香酚麻醉劑內(nèi)浸泡10 h，長薄鰍幼魚存活率100%；王彩霞等[9]研究加州鱸（Micropterus salmoides）無水?；钸\輸發(fā)現(xiàn)，在30 mg/L的丁香酚麻醉濃度下，15 ℃無水?；?0～13 h后，存活率達100%。無水運輸后魚肉品質(zhì)稍有變化，但48 h后即可恢復(fù)正常。Liu等[10]在丁香酚對黃顙魚（Pseudobagrus fulvidraco）生理生化和基因表達影響的試驗中，以25～30 mg/L的丁香酚濃度模擬運輸黃顙魚12 h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，丁香酚可顯著降低魚體新陳代謝，減少其應(yīng)激反應(yīng)，保護肝臟健康，提高機體免疫力。然而，對于丁香酚的安全性，世界各國各組織持有不同態(tài)度。歐盟食品安全局（EFSA）研究發(fā)現(xiàn)丁香酚會對皮膚和眼睛產(chǎn)生刺激，嚴重的會導(dǎo)致過敏[11]。美國國家毒理學(xué)組織（NTP）研究認為丁香酚對小白鼠肝癌有潛在風(fēng)險[12]，美聯(lián)邦政府暫不允許其用于水產(chǎn)品麻醉，但允許其作為食品添加劑在食品中直接添加。澳大利亞、芬蘭、新西蘭等國則認為丁香油/酚可以短時間內(nèi)代謝，明確其可以作為水產(chǎn)麻醉劑[13-14]，推薦用量10～100 mg/L。我國最新的GB 1886.129-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)》明確規(guī)定丁香酚可以作為食品添加劑[15]。

1.3 CO2

CO2在自然界中無處不在，也是動物體內(nèi)新陳代謝的副產(chǎn)品。因此，利用CO2作為漁用麻醉劑對人體無害。值得一提的是，CO2麻醉沒有藥物消退期，運輸完成后可直接進入市場銷售。它是唯一獲得FDA明確表示不反對使用的麻醉劑[16]。因此，CO2麻醉運輸在水產(chǎn)領(lǐng)域具有巨大的應(yīng)用潛力，經(jīng)濟價值和科研價值顯著。目前，國內(nèi)外科研人員已將CO2麻醉應(yīng)用于大口黑鱸（Micropterus salmoides）[17]、鰱（Hypophthalmichthys molitrix）[18]、卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）[19]、珍珠龍膽石斑魚（Epinephelus fuscoguttatus）[20]等。但CO2麻醉魚類時，入麻和復(fù)蘇時間都比較長，且對不同種類的魚麻醉效果差別較大，麻醉后水環(huán)境的pH需及時調(diào)節(jié)，CO2麻醉劑量范圍較小，在一定程度上限制了其應(yīng)用。

1.4 2-苯氧乙醇

2-苯氧乙醇為無色微黏液體，可溶于水。2-苯氧乙醇作為漁用麻醉劑的優(yōu)勢在于可顯著降低魚類運輸中的排氨率[21]，但其綜合應(yīng)用價值不如 MS-222 和丁香油，因而應(yīng)用較少。研究發(fā)現(xiàn)，不同體積分數(shù)的2-苯氧乙醇和丁香油在一定溫度下對魚的麻醉效果有所不同。韓軍軍等[22]研究發(fā)現(xiàn)，在水溫11～12.1 ℃，pH 7.07～7.53的條件下，2-苯氧乙醇對質(zhì)量為10 g左右的扁吻魚（Aspiorhynchus laticeps）的最適麻醉濃度為800～1 000 μL/L，麻醉濃度越高，麻醉時間越短；Yildiz等[23]探究了2-苯氧乙醇對虹鱒（Oncorhynchus mykiss）的麻醉效果，結(jié)果表明，隨2-苯氧乙醇濃度的增加，虹鱒的復(fù)蘇時間顯著增加。盡管2-苯氧乙醇具有低價格、使用方便、靈敏度高等特點，但考慮到2-苯氧乙醇在食用魚麻醉方面存在潛在風(fēng)險，研究者尚不建議將其用于食用魚麻醉[24]，2-苯氧乙醇在漁用麻醉領(lǐng)域的應(yīng)用仍需進一步評估。

1.5 其它麻醉劑

除上述幾種常用麻醉劑以外，其它活魚麻醉劑也偶有報道。Jiang等[25]報道了香草醛對鯽魚（Carassius auratus）麻醉效果的影響，高濃度香草醛可顯著縮短鯽魚深度麻醉時間，且對鯽魚生理指標(biāo)和組織結(jié)構(gòu)影響較小，但麻醉后蘇醒時間較長。Cosmo等[26]發(fā)現(xiàn)氯化鎂輔助異氟烷可以快速有效地麻醉章魚（Octopus vulgaris），將1%的異氟醚注入仍含有氯化鎂的生理鹽水中，5 min即可實現(xiàn)完全麻醉。10～15 min范圍內(nèi)可完全恢復(fù)。但該麻醉劑主要用于海水運輸，其在淡水運輸中的作用尚未嘗試。

2 麻醉?；钸\輸?shù)挠绊懸蛩?/p>

影響麻醉運輸效果的因素主要包括麻醉劑種類、魚體規(guī)格、運輸水溫、運輸密度等。

王文豪等[27]在研究丁香酚對大口黑鱸幼魚?；钸\輸?shù)脑囼炛邪l(fā)現(xiàn)，在水溫27.5～28.5 ℃時，體質(zhì)量為120～140 g的幼魚最佳?；钸\輸濃度為10 mg/L；李寧等[28]在研究丁香酚對大口黑鱸保活運輸?shù)脑囼炛邪l(fā)現(xiàn)，當(dāng)水溫（16.5±1.5） ℃時，體質(zhì)量為310.4～410.4 g的大口黑鱸最佳?；钸\輸濃度為18～20 mg/L。胡望嬌等[29]研究了MS-222和丁香酚對松江鱸的麻醉效果，結(jié)果表明，松江鱸幼魚的MS-222最適麻醉濃度為60 mg/L，丁香酚的有效麻醉濃度為20～80 mg/L。另有研究發(fā)現(xiàn)，亞東鮭（Salmon trutta）魚種的MS-222有效麻醉濃度為100～160 mg/L，丁香酚有效濃度為50～110 mg/L[30]。由此可見，不同麻醉劑種類對同一魚種不同規(guī)格的有效麻醉濃度不盡相同，同一麻醉劑對不同魚種的有效麻醉濃度差別較大。

另有研究表明，在低溫條件下，魚類的存活時間較長。范秀萍[31]研究發(fā)現(xiàn)，珍珠龍膽石斑魚（Epinephelus fuscoguttatus）低溫休眠溫度為12～13.5 ℃，在此溫度下，機體代謝低，應(yīng)激處于較低水平，免疫應(yīng)答處于較高水平。丁亞濤[32]研究發(fā)現(xiàn)，鳊魚（Parabramis pekinensis）低溫?；钆R界生存溫度為2 ℃，麻醉?；钭钸m溫度為7 ℃。張偉佳[33]在綜合評價溫度對生理及生化指標(biāo)的影響后認為，在20 h以內(nèi)的有水運輸時長，大黃魚（Larimichthys crocea）的最佳麻醉溫度為16 ℃；而當(dāng)運輸時長為24～48 h時，最佳麻醉溫度為13 ℃。魚類生活在水中，魚體溫通常隨外界水溫變化而變化，由此影響體內(nèi)新陳代謝效率。溫度同時會影響水中的溶氧含量高低，其很大程度上決定了魚類存活。當(dāng)水中溶氧低時，魚類會因長時間缺氧導(dǎo)致死亡，因此提高水中溶氧量是一種既簡單有效又經(jīng)濟的提高存活率的方法，主要原因在于運輸時魚類會受到溫度、水質(zhì)、振動、擁擠等變化產(chǎn)生應(yīng)激，魚體需要消耗更多氧氣參與應(yīng)對應(yīng)激反應(yīng)，以維持魚體的正常生命活動。

高密度運輸可有效提高運輸效率，然而在一定的溶氧條件和水體積限制下，魚類的運輸密度越高，水體中積累的代謝廢物和氨氮含量越高，溶氧量也隨之降低。此外，高密度運輸環(huán)境中，魚體會由于擠壓碰撞甚至互相攻擊而產(chǎn)生較強應(yīng)激，導(dǎo)致血液皮質(zhì)醇（Cortisol，COR）含量迅速升高[34]。研究發(fā)現(xiàn)，長時間擁擠脅迫對大菱鲆（Scophthalmus maximus）血液生化指標(biāo)和應(yīng)激相關(guān)基因表達均可產(chǎn)生不利影響[35]。因此，在追求高密度運輸?shù)耐瑫r，也應(yīng)綜合考慮運輸時長、溫度、魚種等影響因素，權(quán)衡運輸密度與魚體死亡損失的利弊關(guān)系，實現(xiàn)運輸效益最大化。

3 麻醉?；钸\輸對魚體生理生化的影響

血液是一種重要的結(jié)締組織，承擔(dān)了物質(zhì)運輸、物質(zhì)交換、生理調(diào)節(jié)及能量供應(yīng)等功能[36]，對于魚類的存活及各項生理功能的發(fā)揮至關(guān)重要。血液經(jīng)心室泵出，流動到魚鰓，血紅蛋白攜帶上氧氣，然后流經(jīng)各個器官，把攜帶的營養(yǎng)和氧氣交換出去，代謝廢物經(jīng)靜脈再匯集到心房，再進入心室完成新一輪的循環(huán)。在此過程中，血液生化指標(biāo)可以直接反應(yīng)魚類健康、營養(yǎng)供給和應(yīng)激等方面的變化[37]。常用的檢測指標(biāo)為天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（Aspartate transaminase，AST）、皮質(zhì)醇、尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、乳酸等[38]。

3.1 AST

AST是一種重要酶，其作用是將糖、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)代謝關(guān)聯(lián)起來。當(dāng)肝臟受損時，血液中AST迅速升高。白嬋等[39]在研究丁香酚麻醉斑點叉尾鮰（Ictalurus punctatus）無水?；钸\輸試驗中發(fā)現(xiàn)，6 ℃時，60 mg/L丁香酚麻醉10 min后無水?；? h，斑點叉尾鮰AST活性顯著升高，增加值為44.91 U/L。唐忠林等[40]研究丁香酚對“優(yōu)鱸3號”模擬運輸麻醉時發(fā)現(xiàn)，6 mg/L丁香酚麻醉模擬運輸10 h，在最初2～6 h，麻醉組AST活性顯著高于對照組，試驗結(jié)束時，麻醉組和模擬組的AST活性均明顯升高。然而就整個試驗過程而言，兩者升高過程并不一致。初始麻醉組的高AST活性被認為是麻醉劑本身可作為應(yīng)激源所致。

3.2 皮質(zhì)醇

皮質(zhì)醇被譽為“魚類應(yīng)激第一信使”，由于測試靈敏度高，是最常見的應(yīng)激強度測定指標(biāo)[41]。當(dāng)魚體受到刺激后，下丘腦—垂體—腎上腺皮質(zhì)軸心開始發(fā)揮作用。在這一過程中，下丘腦分泌的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素量會明顯增加。隨后，這種激素會進一步引發(fā)垂體分泌的促腎上腺皮質(zhì)激素量大幅上升。這一連串的應(yīng)激反應(yīng)最終促使了皮質(zhì)醇的分泌量增加，因此皮質(zhì)醇在魚體應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。大黃魚的麻醉?；钛芯拷Y(jié)果表明[42]，大黃魚經(jīng)過MS-222麻醉模擬運輸12 h后，麻醉組的皮質(zhì)醇濃度顯著低于對照組。曹杰等[43]研究大菱鲆麻醉?；钸\輸時發(fā)現(xiàn)，水溫8 ℃時，濃度為40 mg/L的MS-222麻醉12 h，麻醉組的皮質(zhì)醇變化濃度顯著低于對照組。由此可見，麻醉劑可顯著降低長時間?；钸\輸中魚體的應(yīng)激反應(yīng)。

3.3 尿素氮

尿素氮是魚類蛋白質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種含氮廢物，主要由肝臟合成，并通過腎臟排出體外，常被用作評估腎臟損傷的重要指標(biāo)[44]。王肇鼎等[17]通過研究CO2麻醉大口黑鱸的模擬運輸時發(fā)現(xiàn)，CO2處理組與對照組的尿素氮濃度均顯著變化，但處理組尿素氮濃度始終低于對照組；李泊巖等[45]在研究丁香油對俄羅斯鱘（Acipenser gueldenstaedti）的麻醉效果時發(fā)現(xiàn)，魚體麻醉后的尿素氮含量顯著低于對照組，與CO2麻醉大口黑鱸的試驗結(jié)果基本一致。分析原因可能是魚體經(jīng)過麻醉后，腎功能受到了一定損傷，同時麻醉也減輕了魚體的新陳代謝和應(yīng)激反應(yīng)。

4 麻醉?；钸\輸對組織結(jié)構(gòu)的影響

大量研究證實，麻醉可以有效降低魚體應(yīng)激，有助于延長?；顣r間和保活成活率。但麻醉劑對于魚體來說，本身也是一種應(yīng)激源，因而近年來，研究學(xué)者開始關(guān)注麻醉劑對魚體組織結(jié)構(gòu)的影響，從另外的角度觀察麻醉劑對魚體的影響。謝希堯等[46]研究MS-222和丁香酚對四指馬鲅（Eleutheronema tetradactylum）幼魚的靜水麻醉試驗時發(fā)現(xiàn)，隨著兩種麻醉劑濃度的升高，可以觀察到四指馬鲅幼魚的肝臟組織受到損害。分析原因可能在于，隨著兩種麻醉劑濃度的提高，它們作為應(yīng)激源對幼魚產(chǎn)生了額外的應(yīng)激，這種應(yīng)激超出了幼魚肝細胞的自穩(wěn)調(diào)節(jié)能力，導(dǎo)致部分肝細胞核出現(xiàn)萎縮甚至消失等異?，F(xiàn)象。此外研究者觀察到幼魚鰓組織也受到了顯著影響，麻醉劑導(dǎo)致了鰓組織微觀結(jié)構(gòu)的破壞，并引發(fā)了鰓形態(tài)的改變。章霞等[47]在研究MS-222對大黃魚的麻醉效果中發(fā)現(xiàn)，大黃魚經(jīng)40 mg/L濃度麻醉24 h，會造成肝細胞腫脹，次級鰓絲上皮細胞壞死。麻醉劑對魚體組織結(jié)構(gòu)造成損傷但不致死，結(jié)論與謝希堯等[46]的報道基本一致。由此可見，長時間過高濃度的麻醉會對魚體組織結(jié)構(gòu)造成一定的損傷，嚴重的可能導(dǎo)致機體功能喪失，麻醉復(fù)蘇后魚體損傷能否修復(fù)還需要進一步研究。

5 結(jié)論與展望

我國是水產(chǎn)養(yǎng)殖大國，也是水產(chǎn)養(yǎng)殖消費大國，對于活魚運輸有著巨大的需求。如何能夠低成本、高效率、高成活率的運輸，盡可能提高經(jīng)濟效益，是水產(chǎn)行業(yè)相關(guān)人員堅持不懈的追求目標(biāo)。麻醉劑在魚類保活運輸中發(fā)揮一定的作用，但仍存在成本較高、作用機理不清晰及使用殘留等問題。隨著科技的進步，研究的持續(xù)深入和法律法規(guī)的不斷完善，將有望開發(fā)出更高效、殘留更低的漁用麻醉劑，從而提高運輸過程中的成活率，減少運輸風(fēng)險和損失，為消費者提供健康安全的新鮮水產(chǎn)品。

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Reviews on fish anesthesia and live fish transportation

DONG Xiujin， XU Yili， WU Bing， XU Jianhe

（Jiangsu Ocean University， School of Marine Science and Fisheries，Lianyungang 222005，China）

Abstract：In order to understand the latest reserch progress in fish anesthesia and live fish transportation， types of anesthetics used in live fish transportation were listed and factors influencing anesthesia efficacy were also summarized. In addtion， effects of anesthesia on the physiological， biochemical， and tissue structure of the fish were analyzed.

Key words：fish; anesthesia; live transportation;impacting factors

（收稿日期：2024-03-19）