馬尚 李雨朦 王富河

摘要 為了提高翅柃種子的發(fā)芽率，以翅柃種子為材料，通過采用不同外源激素浸種，以探索促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)的方法。對翅柃種子的表型性狀進(jìn)行測定；用TTC染色法測定種子生活力；選用不同濃度（50、100、150、200 mg/L）的赤霉素（GA3）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）分別浸種1、2 h，對翅柃種子進(jìn)行激素浸種處理，以清水浸種1、2 h為對照，在25? ℃恒溫條件下觀測翅柃種子的萌發(fā)情況。結(jié)果表明：翅柃種子呈三角形或不規(guī)則菱形，長0.8～1.0 mm，寬0.5～1.0 mm；翅柃種子生活力很低，僅為8％；翅柃種子經(jīng)不同濃度激素處理后發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽時間有顯著差異，NAA 150 mg/L浸種2 h發(fā)芽率7％，GA3 100 mg/L浸種時間1 h發(fā)芽率2％，IAA 200 mg/L浸種1 h發(fā)芽率4%，其余處理組合發(fā)芽率較低或均無發(fā)芽種粒。

關(guān)鍵詞 翅柃；種子發(fā)芽；外源激素；發(fā)芽率

中圖分類號 S722.3? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A? 文章編號 0517-6611（2024）11-0101-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.11.022

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Effects of Different Exogenous Hormone Treatments on Seed Germination of Eurya alata

MA Shang1，LI Yu-meng2，WANG Fu-he2

（1. Forestry Bureau of Pingqiao District， Xinyang， Henan 464100;2.Xinyang Agriculture and Forestry College，Xinyang，Henan 464100）

Abstract In order to improve the germination rate of Eurya alata seeds， we used different exogenous hormones to immerse the seeds in order to explore ways to promote the germination of Eurya alata seeds. The seed viability of Eurya alata was determined by TTC staining， and different concentrations of gibberellin （GA3），indole-3-acetic acid （IAA） and naphthylacetic acid （NAA） were used， seeds were soaked in water for 1 h and 2 h， respectively， and the germination of Eurya alata seeds was observed at 25 ℃. The results showed that the seeds were triangular or irregular rhombus， 0.8-1.0 mm in length and 0.5-1.0 mm in width.The germination percentage， germination potential and germination time of Eurya alata seeds treated with different concentrations of hormones were significantly different. The germination percentage of seeds treated with NAA 150 mg/L for 2 h was 7%， and that of seeds treated with GA3 100 mg/L for 1 h was 2%， the germination rate of seeds soaked with IAA 200 mg/L for 1 h was 4%， and other treatments have lower germination rates or no seeds germinated.

Key words Eurya alata;Seed germination;Exogenous hormones;Germination rate

基金項目 中央財政林業(yè)科技推廣項目（GTH〔2020〕15號）。

作者簡介 馬尚（1988—），男，河南信陽人，工程師，從事園林、經(jīng)濟(jì)林栽培、林業(yè)生產(chǎn)技術(shù)推廣研究。

收稿日期 2023-08-17

翅柃（Eurya alata）為山茶科（Theaceae）柃屬（Eurya Thunb），常綠灌木或小喬木，雌雄異株，鮮葉可以制作成新型的信陽茶飲品，其功效神奇，但產(chǎn)量小，口感獨特，因而價格昂貴，市場少見［1］。

信陽大茶溝當(dāng)?shù)夭柁r(nóng)用翅柃古茶樹的鮮嫩葉制作綠茶，當(dāng)?shù)厝罕姺Q之為三棱枝茶、神仙茶，具有鮮濃、爽口、甜醇、芳香的口感特征，是不同于現(xiàn)有信陽茶的新品種“茶”，主要分布于信陽市浉河區(qū)境內(nèi)雞公山大茶溝［2］。信陽大茶溝翅柃古茶樹的發(fā)現(xiàn)，填補(bǔ)了河南省沒有古茶樹的空白［3］。國外僅報道過同屬中的尾尖葉柃（Eurya acuminata）、米碎花（Eurya chinecsis）、柃木（Eurya japonica）的栽培和繁殖方式，并應(yīng)用于庭院綠化［4］。目前國內(nèi)對柃屬植物的研究報道多集中在翅柃作為蜜源植物或作為園林綠化樹種2個方向［5］。

近年來，外源激素法對揭示種子休眠和萌發(fā)的調(diào)控機(jī)理具有重要作用，成為促進(jìn)種子發(fā)芽研究的重要手段［6］。為了提高種子發(fā)芽率，生產(chǎn)中常采用外源激素浸種。葉青雷等［7］研究不同外源激素對桑樹種子發(fā)芽的影響，研究表明，用GA3浸種處理可以有效解除秋雨桑種子休眠，促進(jìn)其萌發(fā)。在一定濃度范圍內(nèi)，隨著GA3濃度升高，秋雨桑種子發(fā)芽率顯著提高。趙瑩等［8］研究不同外源激素處理對長白松種子發(fā)芽的影響，選用不同濃度吲哚丁酸（IAA）、萘乙酸（NAA）及赤霉素（GA3）浸種 1、2 h對長白松種子進(jìn)行預(yù)處理，以清水浸種1、2 h為對照，結(jié)果表明，用外源激素處理可以有效地提高長白松種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢。因此，研究不同外源激素處理對翅柃種子發(fā)芽的影響是有必要的。經(jīng)調(diào)查，信陽大茶溝翅柃古茶樹結(jié)實量較大，但周邊沒有幼樹或幼苗分布，說明翅柃種子在野外自然狀態(tài)下很難正常萌發(fā)成苗；為了加快對這類野生資源開發(fā)［9］，提高種子發(fā)芽率，該試驗用GA3、IAA、NAA 3種外源激素對種子進(jìn)行處理，共設(shè)置50、100、150、200 mg/L 4個浸種濃度，采用1、2 h 2個浸種時間，對照清水浸種，以篩選出較佳的激素濃度和浸種時間，找出促進(jìn)翅柃種子發(fā)芽的最佳方法，探究不同外源激素及浸種時間對翅柃種子發(fā)芽率的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

以翅柃種子為試驗材料，于2022年9月在信陽大茶溝采摘，用于浸種的GA3、IAA、NAA、測定種子生活力的TTC以及用于消毒的高錳酸鉀由信陽農(nóng)林學(xué)院林學(xué)樓實驗室提供。由于前期信陽農(nóng)林學(xué)院林學(xué)院實驗室已開展了翅柃發(fā)芽試驗，結(jié)果表明種子只在25 ℃條件下才會發(fā)芽，因此設(shè)置試驗溫度為恒溫25 ℃。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設(shè)計。

選用不同濃度的GA3、IAA、NAA對翅柃種子進(jìn)行1、2 h浸種處理，觀察翅柃種子在25 ℃恒溫下的發(fā)芽情況。試驗共設(shè)26個處理，每個處理100粒種子。試驗設(shè)計見表1。

以清水浸種1、2 h為對照組（CK1、CK2）。浸種處理后取出種子均勻擺放在培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿中鋪設(shè)濾紙作為芽床［10］。放在25 ℃恒溫箱中培養(yǎng)，每天噴灑少量蒸餾水保持種子濕潤，記錄發(fā)芽天數(shù)及發(fā)芽情況［11］。

1.2.2 消毒處理。

選用成熟度較好的果實，取出種子作為試驗材料，選取種子100粒，共26組，將種子從果實中取出后，清水沖洗，用配制好的0.75％高錳酸鉀溶液對種子進(jìn)行3～4 h的浸種消毒。消毒后用清水沖洗5～6次，直至種子表面無高錳酸鉀殘留［12］。同時將需要用到的試驗儀器清洗干凈，放入無菌鍋內(nèi)滅菌。

1.2.3 激素處理。

將需要用到的GA3、IAA、NAA配制成相應(yīng)的濃度，對翅柃種子分別進(jìn)行1、2 h浸種，以清水浸種1、2 h為對照［13］。貼好標(biāo)簽，標(biāo)明浸種濃度和浸種時間［14］。

1.2.4 試驗方法。

將種子進(jìn)行消毒，把需要用到的培養(yǎng)皿、鑷子、燒杯、濾紙等放入滅菌鍋內(nèi)滅菌，將溶液配制成相應(yīng)的濃度對種子進(jìn)行浸種。培養(yǎng)皿中鋪2層浸透水的濾紙，作為芽床［15］。將處理過后的種子整齊地擺放在培養(yǎng)皿中，貼好標(biāo)簽，注明日期及溶液濃度和浸種時間。放入25 ℃恒溫箱中，每日噴水，保持芽床濕潤。記錄始發(fā)芽天數(shù)、發(fā)芽時長和每日發(fā)芽率。以種子發(fā)芽至胚根突破種皮為準(zhǔn)［16］。以連續(xù)5 d無新種子萌發(fā)為發(fā)芽結(jié)束日期［17］。若出現(xiàn)新發(fā)芽種子，則適當(dāng)延長發(fā)芽日期。

1.2.5 種子性狀測定。

測定翅柃種子的表型性狀，分別測定翅柃果實和種子的縱徑、橫徑、單粒重和千粒重。隨機(jī)選取翅柃種子，用精準(zhǔn)游標(biāo)卡尺測量種子的橫徑和縱徑，1/1 000精準(zhǔn)電子天平測種子重量，重復(fù)4次，以其平均值作為最終數(shù)據(jù)。采用百粒法測千粒重。

1.2.6 種子生活力測定。

種子生活力是指用化學(xué)或物理方法測定的種子的潛在發(fā)芽能力。根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)《林木種子檢驗規(guī)程》（ GB 2772—1999），采用TTC染色法檢驗種子生活力，隨機(jī)選取100粒種子，清水浸種2 h后切開種子，將胚從頂端沿中線切成兩半，取一半放入配制好的1.0％ TTC溶液中，使其染色。染色后將種子清洗干凈，對染色情況進(jìn)行觀察。有生活力的種子胚變成紅色，而沒有生活力的種子胚則不變色。

種子生活力按以下公式計算：

種子生活力=有生活力的種子數(shù)/供試種子總數(shù)×100％

1.2.7 種子發(fā)芽指標(biāo)測定。

對翅柃種子進(jìn)行發(fā)芽指標(biāo)測定，試驗結(jié)束后，計算翅柃種子在25 ℃恒溫下的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、平均發(fā)芽時間及發(fā)芽指數(shù)。研究不同激素及其不同濃度處理下對種子萌發(fā)的影響［18］。

發(fā)芽率=供試種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100％［19］

發(fā)芽勢=規(guī)定時間內(nèi)供試種子的發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100％［19］

發(fā)芽指數(shù)：GI=∑（Gt/Dt）

式中：Gt為在t日內(nèi)的發(fā)芽種子數(shù)；Dt為Gt所對應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 種子性狀

對翅柃果實和種子的橫徑、縱徑、單粒重、千粒重進(jìn)行性狀測定，結(jié)果見表2。由表2可知，翅柃的果實和種子較小，單個果實或種子之間差異不大，翅柃果實長3～5 mm，寬2～4 mm，成熟的果實呈灰褐色，為圓球形，表面有網(wǎng)紋。單個果實中有12～22粒種子，種子呈三角形或不規(guī)則菱形，長0.8～1.0 mm，寬0.5～1.0 mm，種子之間無顯著差異。

2.2 種子生活力

用TTC染色法測定翅柃種子生活力，結(jié)果如圖1所示。翅柃種子生活力表現(xiàn)較差，只有8％。

2.3 種子發(fā)芽率

2.3.1 GA3對翅柃種子發(fā)芽的影響。

在不同濃度和浸種時間下，用GA3對種子進(jìn)行處理，觀察分析種子在25 ℃恒溫下發(fā)芽率的變化。由表3可知，GA3處理和對照組的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)差異不大。處理A2的發(fā)芽率最高，為2％。處理A3、A6、A7發(fā)芽率為1％，與CK1、CK2相同，其余均無發(fā)芽種粒，相比較而言，種子發(fā)芽效果不顯著。這說明GA3對促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)沒有明顯的效果。發(fā)芽勢方面，除處理A2、A3，其余處理組合前期發(fā)芽勢明顯呈弱勢狀態(tài)，均無發(fā)芽種粒。處理A3，前期發(fā)芽勢穩(wěn)定，后期呈弱勢。

從圖2可以看出，GA3處理翅柃種子發(fā)芽率不高，發(fā)芽率最高的處理組合為浸種濃度100 mg/L，浸種時間1 h，發(fā)芽率為2％，隨著浸種時間的延長及浸種濃度的升高，發(fā)芽率下降，濃度為100 mg/L，浸種時間為2 h時，發(fā)芽率為1％，較同一濃度下浸種時間為1 h降低1百分點；濃度為150 mg/L，浸種1、2 h，發(fā)芽率均為1％，較對照沒有區(qū)別。浸種濃度為50和200 mg/L時，均無發(fā)芽種粒，表明GA3濃度過高或過低抑制種子萌發(fā)。試驗數(shù)據(jù)表明，GA3對促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)效果不明顯，不同處理濃度浸種1、2 h發(fā)芽率差異不大。

采用GA3不同濃度對種子進(jìn)行1、2 h浸種處理，觀察GA3處理下翅柃種子不同時間發(fā)芽率。從圖3可以看出，翅柃種子發(fā)芽時間不整齊，同一浸種濃度不同浸種時間的始發(fā)芽天數(shù)差異明顯，而發(fā)芽率相差不大，GA3處理翅柃種子最早發(fā)芽處理組合為A2和A3，發(fā)芽時間最早，22 d開始發(fā)芽。最晚發(fā)芽的處理組合為A7，48 d開始發(fā)芽。發(fā)芽高峰主要集中在30 d以后，34 d A2處理發(fā)芽率為2％。40 d時，A6處理的種子開始發(fā)芽。到了48 d，A7處理的種子開始發(fā)芽，此后沒有新的種子發(fā)芽。試驗表明，GA3處理翅柃種子同一濃度下浸種2 h的種子始發(fā)芽天數(shù)較長，而不同濃度浸種時間為1 h發(fā)芽天數(shù)較短。結(jié)果表明，同一濃度下的GA3溶液浸種時間縮短，最早發(fā)芽天數(shù)也縮短。

2.3.2 IAA對翅柃種子發(fā)芽的影響。

IAA不同濃度下對翅柃種子進(jìn)行1、2 h的浸種處理，分析其在25 ℃恒溫下發(fā)芽率的變化。發(fā)芽鑒定結(jié)果見表4。

由表4可知，IAA處理對促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)的效果不明顯，處理B1、B2、B3、B5、B6、B7、B8均無發(fā)芽種粒，發(fā)芽率為0，較對照組發(fā)芽率降低，難以有效促進(jìn)種子萌發(fā)，甚至抑制萌發(fā)。浸種濃度上升為200 mg/L時，處理B4的發(fā)芽率為4％，明顯高于對照組發(fā)芽率。同一浸種濃度條件下IAA浸種1 h種子萌發(fā)效果較好，浸種2 h無發(fā)芽種粒，表明浸種時間過長抑制種子萌發(fā)。這說明IAA對解除種子休眠沒有明顯的效果，處理濃度偏小，處理時間過長都會抑制種子萌發(fā)。結(jié)果表明，處理濃度為200 mg/L，浸種時間為1 h可有效促進(jìn)種子萌發(fā)，處理濃度過低，處理時間過長都會抑制種子萌發(fā)，說明IAA處理只有在一定濃度一定浸種時間下才能促進(jìn)種子萌發(fā)。用第30天的種子發(fā)芽個數(shù)計算種子發(fā)芽勢，可以看出，處理B4發(fā)芽勢一直處于穩(wěn)定狀態(tài)，其余處理組合發(fā)芽勢明顯呈弱勢狀態(tài)，均無發(fā)芽種粒。

從圖4可以看出，不同濃度IAA不同時間浸種發(fā)芽效果差異明顯，不同濃度IAA浸種2 h均無發(fā)芽種粒，發(fā)芽率為0，表明浸種時間過長抑制種子萌發(fā)。低濃度IAA浸種1 h也無發(fā)芽種粒，表明低濃度IAA浸種時間較短也會抑制種子萌發(fā)。當(dāng)IAA濃度增加到200 mg/L時，浸種時間為1 h，發(fā)芽率為4％，與同一濃度下浸種時間為2 h相比，差異明顯。結(jié)果表明，IAA既能促進(jìn)種子萌發(fā)又能抑制種子萌發(fā)，高濃度IAA浸種1 h有利于種子萌發(fā)。

用不同濃度IAA浸種1、2 h，觀察翅柃種子在不同時間的發(fā)芽率。從圖5可以看出，處理B4為唯一發(fā)芽組，20 d開始發(fā)芽，36 d發(fā)芽率為4％，36～54 d發(fā)芽率均為4%，其余處理組合均無發(fā)芽種粒。試驗表明，IAA處理翅柃種子發(fā)芽時間較短，IAA浸種處理可以有效地縮短種子的萌發(fā)時間。浸種濃度為200 mg/L，浸種時間為1 h，可以有效打破翅柃種子休眠，縮短發(fā)芽時間，提高種子發(fā)芽率。

2.3.3 NAA對翅柃種子發(fā)芽的影響。

NAA不同濃度下對種子進(jìn)行1、2 h的浸種處理，觀察分析種子在25 ℃恒溫下發(fā)芽率的變化，發(fā)芽鑒定結(jié)果見表5。由表5可知，NAA浸種處理對翅柃種子萌發(fā)效果明顯，發(fā)芽率較對照組有明顯提高，發(fā)芽率最高為處理C7（150 mg/L浸種2 h），發(fā)芽率為7％，與對照組相比，發(fā)芽率有了大幅提高。其次是處理C2（100 mg/L浸種1 h），發(fā)芽率為5％。處理C1、C4、C5、C8均無發(fā)芽種粒，表明NAA既能促進(jìn)種子萌發(fā)，又能抑制種子萌發(fā)，浸種濃度及浸種時間對種子萌發(fā)有著極大影響，NAA一定濃度會抑制種子萌發(fā)，促進(jìn)種子萌發(fā)效果最好的處理為C7，同種激素處理下發(fā)芽率表現(xiàn)為C7＞C2＞C6＞C3。當(dāng)浸種濃度為50和200 mg/L時，均無發(fā)芽種粒，發(fā)芽率為0，難以有效解除種子休眠，甚至抑制種子發(fā)芽。

用第30天的種子發(fā)芽個數(shù)計算種子發(fā)芽勢，可以看出，處理C2發(fā)芽勢呈穩(wěn)定狀態(tài)，處理C3（150 mg/L浸種1 h）、C6（100 mg/L浸種2 h）、C7（150 mg/L浸種2 h）試驗前期發(fā)芽勢呈弱勢，試驗后期迅速發(fā)芽，發(fā)芽勢呈強(qiáng)勢狀態(tài)。其余各濃度種子發(fā)芽勢均呈弱勢。

從圖6可以看出，不同濃度NAA對翅柃種子進(jìn)行1、2 h浸種處理發(fā)芽率差異明顯，試驗數(shù)據(jù)表明，浸種時間為2 h的發(fā)芽率明顯高于浸種時間為1 h的發(fā)芽率，發(fā)芽率最高為150 mg/L浸種2 h，發(fā)芽率為7％，較同一濃度下浸種時間為1 h的發(fā)芽率明顯提高。而濃度為100 mg/L時，不同浸種時間發(fā)芽率差異僅為1％。處理濃度為50和200 mg/L時，無發(fā)芽種粒。試驗結(jié)果表明，NAA處理不僅促進(jìn)了種子萌發(fā)，還能抑制種子萌發(fā)，且種子只在一定濃度一定浸種時間下才能發(fā)芽，濃度過高或過低則抑制種子萌發(fā)。

采用NAA不同濃度浸種1、2 h對翅柃種子進(jìn)行處理，觀察翅柃種子不同時間發(fā)芽率。從圖7可以看出，NAA浸種處理翅柃種子發(fā)芽率

大部分超過對照組，發(fā)芽率表現(xiàn)良好。NAA處理翅柃種子最早發(fā)芽處理組合為C2，28 d開始發(fā)芽，發(fā)芽率為2％，最晚發(fā)芽處理組合為C7，46 d開始發(fā)芽，63 d時發(fā)芽結(jié)束，發(fā)芽延續(xù)期為35 d。萌發(fā)初期種子發(fā)芽率差異不大，發(fā)芽高峰主要集中在36 d以后，發(fā)芽較緩慢。36 d后，陸續(xù)有新種子發(fā)芽，到了54 d，處理C5發(fā)芽率為5％，此后該處理沒有新種子發(fā)芽。處理C7的種子在46 d開始發(fā)芽，始發(fā)芽率為3％，58 d時，發(fā)芽率為7％，為發(fā)芽率最高組合。試驗表明，NAA不具備縮短種子發(fā)芽時間的效果。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

該試驗對翅柃種子性狀及萌發(fā)特征進(jìn)行調(diào)查分析，用GA3、IAA、NAA對翅柃種子進(jìn)行處理，開展翅柃種子在25 ℃恒溫下的發(fā)芽試驗，研究不同激素處理對翅柃種子萌發(fā)產(chǎn)生的影響。

（1）千粒重可以反映種子飽滿度，間接反映種子的大小和養(yǎng)分含量等，與種子發(fā)芽有直接或間接的關(guān)系，翅柃種子千粒重只有0.076 g，說明種子內(nèi)所含營養(yǎng)物質(zhì)很少。單個果實或種子之間性狀無明顯差異，種子很小，只有1 mm。

（2）翅柃種子生活力表現(xiàn)較差，僅為8％。

（3）發(fā)芽試驗結(jié)果表明，激素處理對種子萌發(fā)效果顯著，不同濃度激素處理下種子的發(fā)芽率存在差異。其中，GA3處理對促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)沒有明顯的效果，IAA、NAA都具有促進(jìn)和抑制種子萌發(fā)的特性。

（4）翅柃種子發(fā)芽延續(xù)時間較長，且不整齊，可能與外界環(huán)境有關(guān)，如溫度、光照、水分等以及在秋冬季不易萌發(fā)相關(guān)。

3.2 結(jié)論

該試驗數(shù)據(jù)可以看出，翅柃種子的生活力不高，因此發(fā)芽率也不高。發(fā)芽率是衡量種子萌發(fā)能力的重要指

標(biāo)，但由于翅柃種子發(fā)芽延續(xù)時間較長，且不規(guī)則，在不同激素處理，不同浸種濃度，不同浸種時間下種子發(fā)芽率并不完

全一致。激素處理可有效提高種子發(fā)芽率，但增加幅度不隨

激素濃度及浸種時間的增加而增大，只有在一定濃度和時間范圍內(nèi)，激素處理才能提高種子活力，促進(jìn)種子萌發(fā)。該試驗結(jié)果表明，150 mg/L NAA浸種2 h發(fā)芽效果最好，發(fā)芽率為7％。不同處理對發(fā)芽率的促進(jìn)效果依次為C7＞C2＞B4＞C6＞C3＞A2＞A3＞A6＞A7＞CK。

該試驗結(jié)果表明，外源激素處理對打破翅柃種子休眠起著重要作用，只有經(jīng)過一定濃度和浸種時間的處理，才能提高翅柃種子的發(fā)芽率。不同種類和濃度的外源激素對翅柃種子的影響也不相同，因此要選擇合適的浸種激素和浸種濃度。NAA是該研究促進(jìn)種子萌發(fā)的重要外源激素，激素濃度為150 mg/L，浸種時間為2 h時，可促進(jìn)翅柃種子萌發(fā)，提高翅柃種子發(fā)芽率。

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