成莉 姚莉 楊建科 王燕玲 孫菱 李碧蓮

收稿日期：2023-02-22

作者簡(jiǎn)介：成莉，主管技師，主要從事細(xì)菌耐藥性研究。

摘要：目的 分析四川省樂山市不同年齡段女性患者泌尿生殖道支原體檢出情況及其對(duì)抗菌藥物的耐藥性，為該地區(qū)女性泌尿生殖道支原體感染的診斷和治療提供依據(jù)。方法 回顧性分析2020年9月—2022年10月四川省樂山人民醫(yī)院婦科和皮膚科診治疑似為女性泌尿生殖道感染的1064例標(biāo)本的支原體培養(yǎng)和藥敏結(jié)果。結(jié)果 1064例標(biāo)本中支原體培養(yǎng)陽(yáng)性率為53.75%（572/1 064），主要集中在21～30歲及31～40歲兩個(gè)年齡段，分別占20.21%（215/1 064）和17.48%（186/1 064），各年齡階段的陽(yáng)性檢出率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在陽(yáng)性檢出例數(shù)中，單純解脲脲原體（Uu）陽(yáng)性檢出率44.36%（472/1 064），單純?nèi)诵椭гw（Mh）陽(yáng)性檢出率0.56%（6/1 064），Uu和Mh混合檢出率為8.83%（94/1 064）。單純Uu對(duì)交沙霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素和四環(huán)素敏感率達(dá)到94.07%以上，對(duì)氧氟沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和司帕沙星敏感率低于12.92%；單純Mh對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素、交沙霉素和四環(huán)素敏感率均達(dá)到100.0%，對(duì)其余藥物敏感率低于33.33%；Uu和Mh混合對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素的敏感率高于86.17%，對(duì)四環(huán)素敏感率為73.40%，對(duì)其余藥物敏感率均低于5.32%。結(jié)論 四川樂山地區(qū)女性泌尿生殖道支原體以單純Uu檢出率最高，Uu和Mh混合檢出率次之，單純Mh檢出率最低。21～30歲及31～40歲兩個(gè)年齡段是感染的高發(fā)人群。支原體對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素敏感，對(duì)氧氟沙星、左氧氟沙星和環(huán)丙沙星耐藥嚴(yán)重。臨床應(yīng)根據(jù)感染類型的不同及抗菌藥物的敏感性，合理選用抗菌藥物。

關(guān)鍵詞：女性泌尿生殖道感染；藥敏試驗(yàn)；支原體；解脲脲原體；抗菌藥物

中圖分類號(hào)：R978.1? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ? ? ?文章編號(hào)：1001-8751（2024）02-0132-04

Analysis of Mycoplasma Detection and Drug Resistance in the Urogenital Tract of Female in Different Age Groups in Leshan

Cheng Li，? ?Yao Li，? ?Yang Jian-ke，? ?Wang Yan-ling，? ?Sun Ling，? ?Li Bi-lian

（ Medical Laboratory Department of Peoples Hospital of Leshan city， Leshan? ? Sichuan? 614000）

Abstract：Objective In order to establish a foundation for the clinical diagnosis and management of Mycoplasma infection in the female genitourinary tract， it is necessary to examine the finding of Mycoplasma in the genitourinary tract and its resistance to antimicrobial medications in female patients of various ages in the Leshan region of Sichuan Province. Methods The findings of the Mycoplasma culture and medication sensitivity tests were examined retrospectively on 1064 female genitourinary tract specimens that were treated in the dermatology and gynecology departments of Leshan People's Hospital in Sichuan Province between September 2020 and October 2022. Results Among 1 064 specimens tested， the positive rate of Mycoplasma culture was 53.75% （572/1 064）， mainly concentrated in two age groups of 21～30 and 31～40， accounting for 20.21 % （215/1 064） and 17.48% （186/1 064）， respectively， and the difference in the positive detection rate was statistically significant （ P < 0.01） when comparing the age groups. Among the positive cases， 44.36% （472/1 064） were detected for Uu alone， 0.56% （6/1 064） for Mh alone， and 8.83% （94/1064） for Uu+Mh mixed. For Uu alone， the sensitivity rate of cloxacillin， doxycycline， memantine and tetracycline was more than 94.07%， while the sensitivity rate of of ofloxacin， ciprofloxacin， levofloxacin and sparfloxacin was less than 12.92%.The sensitivity rates of doxycycline， memantine and cross-fastenomycin， and tetracycline reached 100.0% for Mh positive alone， and the sensitivity rates of the rest of drugs were lower than 33.33%. For mixed Uu+Mh positivity， the sensitivity rate of doxycycline， minocycline and josamycin was higher than 86.17%， and the sensitivity rate of tetracycline was 73.40%， and the sensitivity rate of other drugs was lower than 5.32%. Conclusion For female genitourinary tract infections， the mixed Uu+Mh positivity had the lowest detection rate， whereas the Uu alone positivity had the greatest. 21～30 years old and 31～40 years old were the two age groups with high prevalence of infection. Mycoplasma is sensitive to doxycycline， memantine and cross-famil， and is severely resistant to ofloxacin， levofloxacin and ciprofloxacin. The clinical selection of antimicrobial drugs should be reasonable according to the type of infection and the sensitivity of antimicrobial drugs.

Key words：female urogenital tract infection;? ?drug sensitivity test;? ?Mycoplasma;? ?Ureaplasma urealyticum;? anti-bacterial drugs

解脲脲原體（Ureaplasma urealytium， Uu）和人型支原體（Mycoplasma hominis， Mh）主要引起泌尿生殖系統(tǒng)的感染，如非淋球菌性尿道炎（NGU）、陰道炎、宮頸炎、絨毛膜羊膜炎、自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、前列腺炎、附睪炎和不育癥等，是一種典型的性傳播疾病[1]。隨著抗菌藥物在臨床的廣泛使用，支原體的耐藥率日趨增加，使感染出現(xiàn)慢性遷延甚至反復(fù)感染的現(xiàn)象，在一定程度上增加了用藥難度及治愈難度[2]。本研究對(duì)四川省樂山市1 064例女性泌尿生殖道支原體培養(yǎng)情況及其藥敏結(jié)果進(jìn)行調(diào)查分析，初步了解支原體在該地區(qū)不同年齡段女性中的感染情況及對(duì)臨床上常用治療藥物的敏感性，為樂山市針對(duì)性治療女性泌尿生殖道支原體感染提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 資料來源

2020年9月—2022年10月樂山市人民醫(yī)院婦科和皮膚科診治疑似為泌尿生殖道感染的女性1 064例，按年齡劃分為五組，其中≤20歲組48例，21～30歲組379例，31～40歲組322例，41～50歲組174例，≥51歲組141例。

1.2 標(biāo)本的采集

宮頸分泌物的采集由?？漆t(yī)生完成，標(biāo)本采集時(shí)先擦去宮頸口多余黏液，再用另一個(gè)拭子在宮頸管內(nèi)1～2 cm處取宮頸分泌物。用拭子取材時(shí)要在宮頸（或尿道）內(nèi)旋轉(zhuǎn)并至少停留20 s，以便獲取較多細(xì)胞。

1.3 支原體培養(yǎng)、鑒定與藥敏試驗(yàn)

1.3.1 支原體培養(yǎng)

采用珠海迪爾生物工程有限公司生產(chǎn)的支原體（Uu/Mh）培養(yǎng)藥敏檢測(cè)試劑盒進(jìn)行，試驗(yàn)過程中注意無菌操作，避免污染。將液體支原體培養(yǎng)基恢復(fù)至室溫，用無菌吸頭吸取培養(yǎng)基100 μL加入檢測(cè)卡C空白孔，將采集的標(biāo)本拭子插入培養(yǎng)瓶，在靠近液面上方的瓶壁擠壓旋轉(zhuǎn)拭子數(shù)次，使拭子中樣本滲入；若為中段尿，經(jīng)2 000 r/min離心10 min，取沉渣100 μL加入培養(yǎng)基中。充分混勻接種標(biāo)本的培養(yǎng)基，取100 μL加入檢測(cè)卡的各孔中（除C孔）。各孔滴加2滴無菌礦物油，蓋上檢測(cè)卡蓋，置35～37 ℃孵箱培養(yǎng)，24 h判讀Uu培養(yǎng)結(jié)果，48 h判讀Mh培養(yǎng)結(jié)果。

1.3.2 支原體鑒定原理

根據(jù)Uu利用尿素產(chǎn)堿，Mh利用精氨酸產(chǎn)堿引起pH升高的特性，使得培養(yǎng)基中酚紅發(fā)生由黃變紅的顏色變化，從而可以判斷是否有支原體生長(zhǎng)。

1.3.3 支原體鑒定方法

以空白孔為對(duì)照，當(dāng)培養(yǎng)48 h時(shí)液體仍為黃色則為陰性，表明無支原體生長(zhǎng)；當(dāng)培養(yǎng)24 h時(shí)Uu孔液體由黃色變?yōu)榧t色或橙色且無渾濁則為Uu陽(yáng)性，表明有Uu生長(zhǎng)；當(dāng)培養(yǎng)48 h時(shí)Mh孔液體由黃色變?yōu)榧t色或橙色且無渾濁則為Mh陽(yáng)性，表明有Mh生長(zhǎng)。若液體出現(xiàn)渾濁，表明有細(xì)菌污染，試驗(yàn)失敗，則通知病人重取標(biāo)本復(fù)查。

1.3.4 藥敏試驗(yàn)

嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。每種抗菌藥物設(shè)置高低兩種水平，藥敏結(jié)果高低水平均為黃色則為敏感，均為紅色則為耐藥，高水平黃色而低水平紅色則為中介。

1.4 觀察指標(biāo)

比較不同年齡女性的支原體檢出情況，并分別觀察Uu感染、Mh感染、Uu和Mh混合感染的藥敏試驗(yàn)結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡女性泌尿生殖道感染患者支原體的檢出情況比較

1 064例女性支原體培養(yǎng)標(biāo)本中，共有572例檢出支原體，其中單純Uu陽(yáng)性檢出472例，單純Mh陽(yáng)性檢出6例，Uu和Mh混合陽(yáng)性檢出94例。572例支原體培養(yǎng)陽(yáng)性患者中，主要集中在21～30歲和31～40歲，分別占20.21%（215/1064）和17.48%（186/1064），各年齡階段的陽(yáng)性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），具體見表1。

2.2 Uu、Mh及Uu+Mh感染的耐藥情況比較

單純Uu陽(yáng)性對(duì)交沙霉素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素和四環(huán)素敏感率達(dá)到94.06%以上，對(duì)氧氟沙星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星和司帕沙星敏感率低于12.92%；單純Mh陽(yáng)性對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素、交沙霉素和四環(huán)素敏感率均達(dá)到100.0%，其余藥物敏感率均低于33.33%；Uu和Mh混合陽(yáng)性對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素的敏感率高于86.17%，對(duì)四環(huán)素敏感率為73.40%，其余藥物敏感率均低于5.32%。具體見表2和表3。

3 討論

支原體屬和脲原體屬屬于柔膜綱的支原體目，支原體科，是一類體積介于細(xì)菌和病毒之間的，缺乏細(xì)胞壁，呈高度多形性，可通過濾菌器，能在無生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小的原核細(xì)胞型微生物[3]。它們?cè)谧匀唤缰袕V泛分布，許多是動(dòng)物、植物和人類的病原體[4]。支原體屬包括約100個(gè)種，脲原體屬包括6個(gè)種，常見的引起女性泌尿生殖道感染的支原體有解脲脲原體和人型支原體[5]。

支原體主要存在于人體的呼吸道和泌尿生殖道黏膜，其致病性是與黏膜相關(guān)的。支原體致病機(jī)制是由于其特殊結(jié)構(gòu)能夠緊密地黏附在易感宿主細(xì)胞膜的受體上，侵入細(xì)胞內(nèi)，使宿主細(xì)胞雙層類脂分子紊亂，細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物外溢，并產(chǎn)生毒性物質(zhì)使宿主細(xì)胞受損[6]。支原體感染后可寄生于細(xì)胞內(nèi)從而逃避機(jī)體免疫排斥而長(zhǎng)期存在[7]，與此同時(shí)，支原體引起的泌尿生殖道感染不會(huì)像淋球菌感染那樣有排尿困難、尿頻、尿痛等明顯臨床表現(xiàn)[8]，因此常被忽略，導(dǎo)致診斷治療不及時(shí)，致使支原體引起的感染多為反復(fù)性、隱匿性特點(diǎn)，使之更易于傳播。

本研究收集的1064例女性泌尿生殖道標(biāo)本共檢出支原體572例，總陽(yáng)性檢出率為53.75%，其中21～ 30歲患者支原體陽(yáng)性檢出率最高，31～40歲陽(yáng)性檢出率次之，原因可能與不同年齡段的女性所處的婚姻狀態(tài)、性伙伴數(shù)、性生活的頻率、感染者激素水平及不同地域生活狀態(tài)等因素有關(guān)[9]。支原體檢出以單純Uu最高，Uu和Mh混合其次，單純Mh檢出率最低。藥敏結(jié)果顯示，單純Uu、Uu和Mh混合及單純Mh均對(duì)多西環(huán)素、米諾環(huán)素和交沙霉素三種抗菌藥物敏感性高，對(duì)氧氟沙星、左氧氟沙星、環(huán)丙沙星和司帕沙星的耐藥性高，但Uu和Mh混合陽(yáng)性的耐藥性更高，可能有多種耐藥機(jī)制同時(shí)發(fā)揮作用而導(dǎo)致交叉耐藥，使耐藥性更高[10]。由此可見，四川省樂山市治療女性泌尿生殖道支原體感染應(yīng)盡量選擇四環(huán)素類藥物，而喹諾酮類藥物應(yīng)少用或者不用，同時(shí)需要多宣傳，及時(shí)正規(guī)地就醫(yī)。

綜上所述，四川省樂山市女性泌尿生殖道支原體感染主要集中在20～40歲人群，且以單純Uu感染為主，臨床治療時(shí)，應(yīng)依據(jù)支原體培養(yǎng)及藥敏結(jié)果針對(duì)性治療，減少耐藥。

參 考 文 獻(xiàn)

姜春南. 3 000例女性泌尿生殖道感染患者標(biāo)本中衣原體支原體培養(yǎng)結(jié)果及其對(duì)抗菌藥物的耐藥性分析[J]. 抗感染藥學(xué)， 2020， 17（8）： 1133-1135.

Guo F， Tang Y， Zhang W， et al. DnaJ， a promising vaccine candidate against Ureaplasma urealyticum infection[J]. Appl Microbiol Biotechnol， 2022， 106（22）： 7643-7659.

羅丹. 生殖支原體MgPa經(jīng)CypA-CaN-NFAT途徑抑制T細(xì)胞活化[D]. 衡陽(yáng)： 南華大學(xué)， 2020.

Razin S， Hayflick L. Highlights of mycoplasma research--an historical perspective[J]. Biologicals， 2010， 38（2）： 183-90.

殷怡華， 張賢華. 泌尿生殖道標(biāo)本解脲脲原體和人型支原體檢測(cè)及抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果分析[J]. 中國(guó)感染與化療雜志， 2021， 21（2）： 201-204.

張艷， 張波. 解脲支原體致病機(jī)制與耐藥機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2013， 34（13）： 1715-1717.

于麗紅， 郭洪巖. 性傳播疾病中四種病原體檢測(cè)的分析[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南， 2012， 10（35）： 264-265.

劉倫. 泌尿生殖系統(tǒng)感染患者解脲脲原體、沙眼衣原體和淋球菌感染特點(diǎn)及相關(guān)性分析[J]. 臨床合理用藥雜志， 2021， 14（35）： 157-159.

董瀟陽(yáng)， 聶晶， 哈地麗亞·哈斯木， 等. 新疆1539例女性泌尿生殖道中兩種支原體在不同年齡段的分布及藥敏分析[J]. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志， 2019， 33（2）： 169-173.

Takahashi S， Takeyama K， Miyamoto S， et al. Detection of Mycoplasma genitalium， Mycoplasma hominis， Ureaplasma urealyticum， and Ureaplasma parvum DNAs in urine from asymptomatic healthy young Japanese men[J]. J Infect Chemother， 2006， 12（5）： 269-271.