王巖　于洪敏　李娟　劉艷　江國(guó)托

摘要 為探究酸處理（酸濃度、時(shí)間、溫度）、酶制劑（纖維素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶）對(duì)杏鮑菇菌渣的影響，以河北采集的杏鮑菇菌渣為原料，以總還原糖含量為研究指標(biāo)，通過主成分分析方法研究影響杏鮑菇菌渣酸處理的因素；以中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量為響應(yīng)值，開展正交試驗(yàn)，分析酶制劑對(duì)其的影響。結(jié)果表明：40 ℃條件下，2%和3%酸濃度處理隨時(shí)間的延長(zhǎng)會(huì)降解總還原糖；60 ℃條件下，酸濃度的增加可以減緩總還原糖的降解；80 ℃條件下，1%和2%酸濃度處理可以促進(jìn)多糖的降解，提高總還原糖含量。根據(jù)主成分分析結(jié)果可知，溫度與總還原糖含量呈正相關(guān)，是影響杏鮑菇菌渣多糖降解的最主要因素。正交試驗(yàn)結(jié)果表明，木聚糖酶添加量和纖維素酶添加量是影響中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維降解的最主要因素，最優(yōu)酶解配方為纖維素酶85 U/mL、木聚糖酶220 U/mL、葡聚糖酶40 U/mL，說明菌渣經(jīng)酸、酶處理后可作為反芻飼料。

關(guān)鍵詞 杏鮑菇菌渣；酸處理；酶制劑；還原糖；纖維素

中圖分類號(hào) S548 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2024）08-0086-06

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.08.020

Effects of Acid Treatment and Enzymatic Hydrolysis on Reducing Sugar and Cellulose Degradation of Pleurotus eryngii Residue

WANG Yan，YU Hong-min，LI Juan et al

（Dalian Sanyi Animal Medicine Co.，Ltd.，Dalian，Liaoning 116036）

Abstract In order to explore the effects of acid treatment （acid concentration，time and temperature），enzyme preparations （cellulase，xylanase，β-glucanase） on Pleurotus eryngii fungus residue.The experiment used the mushroom residue of Pleurotus eryngii collected in Hebei Province as the raw material，total reducing sugar content as the research index，the factors affecting the acid treatment of P.eryngii residue were analyzed by principal component analysis.At the same time，the effects of enzyme preparation on the reduction of neutral detergent cellulose and acid detergent cellulose were analyzed by orthogonal test.At 40 °C，2% and 3% acid concentrations would degrade the content of reducing sugar with time.At 60 °C，the increase of acid concentration could slow down the degradation of total? reducing sugar.At 80 ℃，1% and 2% acid concentrations could promote the degradation of polysaccharides and increase the content of total reducing sugar.According to the principal component analysis，temperature was the most important factor affecting the content of reducing sugar of P.eryngii slag.The orthogonal test results showed that the degradation of? xylanase and cellulase were the main factors affecting the reduced amount of neutral detergent cellulose and acid detergent cellulose respectively.The optimal enzymolysis formula was cellulase 85 U/mL，xylanase 220 U/mL and glucanase 40 U/mL.These results indicated that the bacterial residue after acid and enzyme treatment has nutritional value as a ruminant feed.

Key words Pleurotus eryngii residue;Acid treatment;Enzyme preparation;Reducing sugar;Cellulose

食用菌在收獲后的培養(yǎng)基質(zhì)稱為菌渣，由于食用菌的栽培大多以木屑、玉米芯、秸稈、棉籽殼、甘蔗渣等為培養(yǎng)基質(zhì)，因此含有大量的真菌菌絲體蛋白、半纖維素、纖維素、木質(zhì)素以及氮、磷、鉀、維生素等以及蘑菇分泌的用于降解底物的胞外水解酶、氧化酶，是潛在的反芻飼料來源［1］。菌渣的生產(chǎn)速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過現(xiàn)有的應(yīng)用需求，預(yù)計(jì)到2026年全世界產(chǎn)量將達(dá)到2 084萬t［2］。作為一種木質(zhì)纖維素材料，菌渣可作為生產(chǎn)生物燃料和其他生物材料的還原糖來源，但要通過預(yù)處理去除木質(zhì)素和半纖維素并破壞纖維素的晶體結(jié)構(gòu)，以克服菌渣中粗纖維、木質(zhì)素等成分很難被動(dòng)物直接利用的問題［3-4］，從而實(shí)現(xiàn)纖維素的有效轉(zhuǎn)化。

菌渣處理可分為傳統(tǒng)的溶劑提取方法和綠色高效的物理提取方法。其中，溶劑提取方法有堿水解和酸水解，物理提取方法有酶水解、熱水解和超聲提取。酸水解和熱水解一般結(jié)合使用，破壞纖維素的致密結(jié)構(gòu)，降低結(jié)晶性［5］和聚合度，將纖維素分解成葡萄糖，將半纖維素分解為木糖等可溶性糖類［6-7］。目前研究較多的是高溫水解［8-9］，低溫水解相關(guān)研究較少。低溫（小于100 ℃）對(duì)設(shè)備要求較低，操作安全，節(jié)約成本。Wu等［8］研究表明酸水解獲得的還原糖產(chǎn)量高于堿水解與酶制劑處理，酸處理可作為

將菌渣中的木質(zhì)纖維素轉(zhuǎn)化為糖的一種經(jīng)濟(jì)、高效方法。酶制劑處理?xiàng)l件溫和，可以降低纖維素的含量。目前低溫（小于100 ℃）酸處理對(duì)杏鮑菇菌渣的影響程度尚不清楚，纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶對(duì)菌渣纖維素的降解程度研究較少，因此通過酸濃度、時(shí)間和溫度3個(gè)方面，以總還原糖含量為研究指標(biāo)，通過主成分分析探究影響杏鮑菇菌渣酸處理的主要因素；以中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量為研究指標(biāo)，通過正交試驗(yàn)探究酶制劑對(duì)杏鮑菇菌渣纖維素的降解情況，以期為促進(jìn)食用菌菌渣的循環(huán)利用、增加反芻動(dòng)物飼料原料來源提供科學(xué)依據(jù)，為蘑菇工業(yè)副產(chǎn)品的綜合利用及利用水解產(chǎn)物殘?jiān)a(chǎn)生物肥料提供一條重要途徑。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 杏鮑菇菌渣。

杏鮑菇菌渣采集于河北省廊坊市，采收后3 d內(nèi)寄到大連三儀動(dòng)物藥品有限公司實(shí)驗(yàn)室。收到菌渣后，立即切成約1 cm×1 cm大小，置于電熱鼓風(fēng)干燥箱中30 ℃烘干，使用多功能粉碎機(jī)粉碎后，過60目篩備用。

1.1.2 主要試劑。

硫酸（丹東市龍海試劑廠）；3，5-二硝基水楊酸（天津市大茂化學(xué)試劑廠）；氫氧化鈉（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；酒石酸鉀鈉（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；無水亞硫酸鈉（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；無水葡萄糖（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）等；纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶均由江蘇三儀科研質(zhì)量控制中心提供。

1.2 主要儀器

高速多功能粉碎機(jī)（型號(hào)CS-700，永康市天祺盛世工貿(mào)有限公司）、電熱鼓風(fēng)干燥箱（型號(hào)DHG-9240A，上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、分析天平（型號(hào)FA2004，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）、全自動(dòng)凱氏定氮儀（型號(hào)K1100，山東海能科學(xué)儀器有限公司）、紫外可見分光光度計(jì)（型號(hào)TU-1810，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）、離心機(jī)（型號(hào)TDZ5-WS，長(zhǎng)沙湘智離心機(jī)儀器有限公司）等。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。

1.3.1.1 菌渣基本成分。試驗(yàn)前對(duì)菌渣基本成分進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.1.2 酸處理菌渣。

根據(jù)文獻(xiàn)［10］方法，結(jié)合生產(chǎn)工藝的可操作性，取粉碎后的干燥菌渣10 g置于250 mL燒杯中，分別加入1%、2%和3%硫酸10 mL，攪拌均勻后置于40 ℃電熱鼓風(fēng)干燥箱中反應(yīng)。1、2、3 h時(shí)每個(gè)酸濃度各取2份，5 000 r/min 離心10 min取上清，測(cè)定總還原糖含量。按照相同方法進(jìn)行60和80 ℃不同濃度酸處理。

1.3.1.3 酶制劑處理菌渣。

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的酶制劑添加量，選擇纖維素酶添加量（45、65、85 U/mL）、木聚糖酶添加量（180、200、220 U/mL）和β-葡聚糖酶添加量（40、60、80 U/mL）進(jìn)行3因素3水平正交試驗(yàn)。取9個(gè)100 mL三角瓶，分別加入5 g 經(jīng)處理的干燥菌棒粉，加入15 mL水，酶制劑按照正交表添加量依次加入，蓋上瓶塞后，于100 r/min、50 ℃的搖床中振蕩水解。試驗(yàn)24 h時(shí)，試樣按照張安榮［11］的方法處理，處理后測(cè)定中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。

1.3.2 測(cè)定指標(biāo)與方法。

菌渣的成分鑒定采用國(guó)標(biāo)方法，具體如下：水分含量GB/T 6435—2014，粗脂肪含量GB/T 6433—2006，粗蛋白含量GB/T 6432—2018，中性洗滌纖維含量GB/T 20806—2006，酸性洗滌纖維含量NY/T 1459—2007，木質(zhì)素含量GB/T 20805—2006，鈣含量GB/T 6436—2018，磷含量GB/T 6437—2018。

總還原糖含量檢測(cè)參照張美江［12］的二硝基水楊酸法，杏鮑菇菌渣中含有大量的酸性洗滌纖維、中性洗滌纖維以及木質(zhì)素。二硝基水楊酸法是在堿性條件下與總還原糖發(fā)生氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)物煮沸后在540 nm下有吸收，故通過比色法測(cè)定總還原糖含量。

分別取1 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 置于15 mL試管，用去離子水補(bǔ)足1.0 mL；分別加入DNS試劑2.0 mL，沸水浴加熱5 min，流水冷卻，用去離子水定容至15.0 mL，在540 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。以吸光度為橫坐標(biāo)，以葡萄糖濃度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為Y=0.064 6X+0.006 3（R2=0.999）。樣品檢測(cè)方法：將酸解液樣品適當(dāng)稀釋，使糖濃度為0.1～1.0 mg/mL；取稀釋后的樣品溶液1.0 mL 置于15 mL試管中，加入DNS 試劑2.0 mL，沸水煮沸5 min，冷卻后用去離子水補(bǔ)足15.0 mL，在540 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。根據(jù)葡萄糖濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品總還原糖含量。

1.3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。

應(yīng)用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)間的比較采用Duncan模型進(jìn)行差異顯著性分析，P＜0.05表示差異顯著，同時(shí)使用該軟件中皮爾遜相關(guān)系數(shù)確定各因素間相關(guān)性；應(yīng)用XLSTAT軟件對(duì)各影響因素進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）和聚類分析。使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及方差分析，使用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算。

2 結(jié)果與分析

2.1 營(yíng)養(yǎng)成分分析

對(duì)河北地區(qū)收集的杏鮑菇菌渣進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分分析，結(jié)果顯示：水分含量49.93%，粗蛋白含量8.57%，粗脂肪含量2.48%，鈣和磷含量共0.77%，中性洗滌纖維含量66.09%，酸性洗滌纖維含量45.01%，木質(zhì)素含量9.26%。含量較高的營(yíng)養(yǎng)成分為粗蛋白、纖維素和木質(zhì)素，其中鈣和磷含量基本滿足奶牛的需要量［12］。該試驗(yàn)測(cè)得的營(yíng)養(yǎng)成分含量在宮福臣［13］調(diào)研的食用菌菌渣營(yíng)養(yǎng)成分范圍內(nèi)，具有一定的指導(dǎo)意義。

2.2 酸處理對(duì)杏鮑菇菌渣總還原糖含量的影響

2.2.1 不同溫度下總還原糖含量在不同酸濃度下隨時(shí)間的變化。

40 ℃下總還原糖含量在不同酸濃度下隨時(shí)間的變化如表1所示。由表1可知，40 ℃下，1%酸濃度處理杏鮑菇菌渣在不同時(shí)間點(diǎn)總還原糖含量無顯著差異；2%和3%酸濃度時(shí)，同一酸濃度下杏鮑菇菌渣總還原糖含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，1 h時(shí)總還原糖含量最高，分別為6.24和6.44 mg/mL。這表明40 ℃條件下1%酸濃度處理杏鮑菇菌渣的總還原糖含量受時(shí)間的影響不顯著，2%和3%酸濃度處理后杏鮑菇菌渣中的總還原糖隨時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生降解［13］。同一時(shí)間點(diǎn)，1 h時(shí)總還原糖含量隨酸濃度的提高而升高，1 h時(shí)3%酸濃度處理總還原糖含量最高，為6.44 mg/mL；2和3 h 時(shí)，總還原糖含量隨酸濃度的提高而降低。

60 ℃下杏鮑菇菌渣總還原糖含量在不同酸濃度下隨時(shí)間的變化如表2所示。由表2可知，同一酸濃度下，總還原糖含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈先增加后下降的趨勢(shì)，2 h時(shí)總還原糖含量最高，1%、2%、3%酸濃度處理分別為7.81、11.14和9.52 mg/mL。60 ℃下，與2 h時(shí)相比，酸處理3 h時(shí)總還原糖發(fā)生了降解，其中1%酸濃度下總還原糖降解率最多，為5.89%；其次是2%和3%酸濃度，分別為5.39%和4.41%，表明60 ℃下酸濃度的增加可以減緩總還原糖的降解。同一時(shí)間點(diǎn)，1 h時(shí)總還原糖含量隨著酸濃度的升高而升高，最高值為8.74 mg/mL；2 h和3 h時(shí)，總還原糖含量隨著酸濃度的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)，2%酸濃度處理總還原糖含量較高，分別為11.14和10.54 mg/mL。

80 ℃下杏鮑菇菌渣總還原糖含量在不同酸濃度下隨時(shí)間的變化如表3所示。由表3可知，同一酸濃度下總還原糖含量的變化趨勢(shì)存在差異。1%酸濃度處理杏鮑菇菌渣的總還原糖含量隨時(shí)間的延長(zhǎng)而升高；2%酸濃度處理后的總還原糖含量隨著時(shí)間的變化而逐漸升高，3 h時(shí)總還原糖含量最高，為20.49 mg/mL；3%酸濃度處理后的總還原糖含量隨著時(shí)間的變化而先升高后下降，3%酸濃度處理3 h時(shí)總還原糖發(fā)生降解，2 h 時(shí)總還原糖含量最高，為17.51 mg/mL。這表明當(dāng)溫度升高到80 ℃時(shí)，1%酸濃度處理促使多糖降解速率減緩，2%酸濃度處理可以促進(jìn)多糖的降解，提高總還原糖的含量，而3%酸濃度處理3 h時(shí)總還原糖發(fā)生降解。同一時(shí)間點(diǎn)，總還原糖含量均隨著酸濃度的升高而先升高后降低，2 h時(shí)1%、2%、3%酸濃度處理的總還原糖含量最高，分別為17.19、18.59和17.51 mg/mL；3 h時(shí)，80 ℃時(shí)各個(gè)酸濃度處理后的總還原糖均發(fā)生降解，2 h可以實(shí)現(xiàn)有效的預(yù)處理。

2.2.2 酸濃度、時(shí)間、溫度和總還原糖含量的主成分分析。

通過分析以上結(jié)果發(fā)現(xiàn)，酸濃度、時(shí)間和溫度不同條件下均對(duì)總還原糖含量有影響。為了分析3個(gè)因素對(duì)總還原糖含量的影響程度，對(duì)酸濃度、時(shí)間、溫度和總還原糖含量進(jìn)行主成分分析。主成分分析是將原坐標(biāo)軸旋轉(zhuǎn)為相互正交的坐標(biāo)軸，根據(jù)貢獻(xiàn)率大小選擇主成分，貢獻(xiàn)率越大，解釋指標(biāo)能力越強(qiáng)；幾個(gè)主成分的貢獻(xiàn)率之和（累計(jì)貢獻(xiàn)率）越大，越能全面解釋原數(shù)據(jù)，主成分個(gè)數(shù)的選擇根據(jù)累計(jì)貢獻(xiàn)率而定［14］。變量的余弦平方值反映變量在不同主成分上的相關(guān)性程度，最大值所在的主成分與該變量的相關(guān)性最強(qiáng)。不同主成分之間無相關(guān)性，同一主成分的變量間存在正相關(guān)和負(fù)相關(guān)關(guān)系［15］。樹狀圖聚類分析是通過計(jì)算樣品間的聚類統(tǒng)計(jì)量（距離 、相關(guān)系數(shù)等）將相關(guān)性最大的樣品聚在一起［16］。

根據(jù)以上數(shù)據(jù)，對(duì)其進(jìn)行主成分分析，如圖1所示。變量的余弦平方值如表4所示。對(duì)不同酸濃度、時(shí)間和溫度處理的杏鮑菇菌渣總還原糖含量進(jìn)行樹狀圖聚類分析，如圖2所示。樹狀圖聚類結(jié)果有利于解釋主成分分析中樣品的變化趨勢(shì)。

由圖1可知，主成分1貢獻(xiàn)率為48.69%，主成分2貢獻(xiàn)率為25.00%，累計(jì)貢獻(xiàn)率為73.69%。結(jié)合表4可知，主成分1的變量有總還原糖含量和溫度，且都位于主成分1的正方向，表明總還原糖含量與溫度呈正相關(guān)關(guān)系；時(shí)間位于主成分2正方向，酸濃度屬于主成分3，表明溫度對(duì)總還原糖含量的影響最大。

由圖2可知，不同條件處理的杏鮑菇菌渣總還原糖含量可分為3類，且按照溫度聚類，分別為40、60和80 ℃。圖1分為3個(gè)部分（虛線劃分），3個(gè)部分沿著主成分1從左向右移動(dòng)，80 ℃區(qū)域位于主成分正方向，表明溫度對(duì)總還原糖含量的影響起主要作用，總還原糖含量隨著溫度的升高而增加。

為了分析酸濃度和時(shí)間對(duì)杏鮑菇菌渣總還原糖含量的影響程度，對(duì)80 ℃數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果如表5所示。由表5可知，總還原糖含量與時(shí)間顯著相關(guān)（P<0.05），總還原糖含量與酸濃度未達(dá)到顯著相關(guān)（P>0.05），表明除了溫度外時(shí)間是影響總還原糖含量的第二主要因素。

2.3 酶制劑對(duì)杏鮑菇菌渣纖維素降解的影響

以中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量為響應(yīng)值，進(jìn)行正交試驗(yàn)，結(jié)果如表6所示。由表6可知，中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量最大的是第7組，中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量分別為23.05%和18.63%，其對(duì)應(yīng)的工藝條件為A3B3C1。從極差R可以看出，3個(gè)因素對(duì)中性洗滌纖維減少量影響的主次順序?yàn)槟揪厶敲柑砑恿浚纠w維素酶添加量＞葡聚糖酶添加量，3個(gè)因素對(duì)酸性洗滌纖維減少量影響的主次順序?yàn)槔w維素酶添加量＞木聚糖酶添加量＞葡聚糖酶添加量。同時(shí)可以看出，最佳酶制劑添加方案為纖維素酶85 U/mL、木聚糖酶220 U/mL、葡聚糖酶40 U/mL。

由表7～8可知，纖維素酶添加量和木聚糖酶添加量對(duì)中性洗滌纖維減少量和酸性洗滌纖維減少量均具有顯著影響，而β-葡聚糖酶添加量對(duì)其沒有顯著影響。由此可見，纖維素酶和木聚糖酶是降解杏鮑菇菌渣纖維素的主要酶制劑。

3 討論

從蘑菇副產(chǎn)品中提取的多糖大致可分為酸性殘多糖、堿性殘多糖和酶殘多糖3類［17］。Qiao等［9］在120 ℃下用6%稀硫酸預(yù)處理菌渣120 min后還原糖含量最高為267.57 g/kg。Zhu等［18］為了提高成本效益和避免環(huán)境問題，用堿和酸預(yù)處理與酶水解相結(jié)合的方法處理菌渣，總還原糖含量為230 mg/g，堿處理試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)溫度和氫氧化鉀濃度的影響比預(yù)處理時(shí)間更顯著，經(jīng)石灰預(yù)處理的菌渣在低溫（50 ℃）下隨著時(shí)間的延長(zhǎng)有釋放更多糖的潛力。Zhang等［19］采用熱堿提取法將香菇菌渣在90 ℃下提取300 min并進(jìn)行2次脫鹽后的總糖含量為58.1%，顯著高于用熱水提取的總糖含量（4.76%）和超聲波+酶提取的總糖含量（14.39%），原因可能是堿容易破壞多糖與細(xì)胞壁或細(xì)胞間物質(zhì)之間的結(jié)合，從而促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)多糖的釋放。Wu等［8］研究發(fā)現(xiàn)用酸提取的還原糖含量高于用氫氧化鈉、氫氧化鈣和熱水提取的還原糖含量。Corrêa等［3］用纖維素酶和β-葡萄糖苷酶酶解菌渣，產(chǎn)生（77.5±4.0）μmol/L的總還原糖。

對(duì)于酸處理，不同處理?xiàng)l件下杏鮑菇菌渣總還原糖含量的主要影響因素不同。筆者通過主成分分析發(fā)現(xiàn)，影響杏鮑菇菌渣酸處理的主要因素是溫度和時(shí)間。張美江［12］研究表明總還原糖含量的影響因素依次為溫度、酸濃度、時(shí)間，酸濃度對(duì)預(yù)處理的影響不顯著，原因首先可能與試驗(yàn)的酸濃度和溫度有關(guān)。隨著溫度的升高，提高酸濃度可以促進(jìn)總還原糖的產(chǎn)生，故高酸濃度處理要對(duì)應(yīng)設(shè)置高溫度。其次，這還可能與料水比有關(guān)，較高的含水量可能會(huì)提高酸作用面積，提高其影響程度。黃民鳳［20］采用熱水浸提法提取金針菇多糖，發(fā)現(xiàn)影響提取的因素依次為時(shí)間、料液比、溫度。結(jié)合此試驗(yàn)結(jié)果可知，酸改變了溫度對(duì)還原糖提取的影響。關(guān)于酶制劑對(duì)菌渣纖維素降解的研究較少。王樂樂等［21］研究表明菌酶協(xié)同發(fā)酵可以改善菌渣發(fā)酵飼料品質(zhì)。在酶制劑選擇上，馬冰清等［22］處理香菇菌渣所用的酶制劑為纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶，酶總添加量為660 U/g，3種酶的添加比例為3∶2∶1。張安榮［11］利用纖維素酶、木聚糖酶和β-半乳糖苷酶協(xié)同發(fā)酵菌渣，中性洗滌纖維降解率為23.69%。此研究中性洗滌纖維的最大降解率達(dá)34.88%，其原因一是所用酶制劑不同，二是菌渣具有不同的酶系統(tǒng)，對(duì)木質(zhì)纖維素具有不同的水解效率，因此影響了木質(zhì)素結(jié)構(gòu)的破壞程度。

4 結(jié)論

不同溫度下酸濃度及處理時(shí)間對(duì)杏鮑菇菌渣總還原糖含量的影響不同，不同溫度有不同的適宜酸濃度和時(shí)間。40 ℃時(shí)，適合1%酸濃度，高濃度酸會(huì)降解產(chǎn)生的總還原糖；60 ℃時(shí)，酸濃度的增加可以減緩總還原糖的降解；80 ℃時(shí)，1%和2%酸濃度處理促進(jìn)多糖的降解，提高總還原糖的含量。根據(jù)主成分分析結(jié)果可知，該試驗(yàn)條件下溫度是影響杏鮑菇菌渣預(yù)處理的最主要因素，其次為時(shí)間，≤80 ℃條件下預(yù)處理菌渣時(shí)酸濃度不宜過高。纖維素酶添加量和木聚糖酶添加量對(duì)杏鮑菇菌渣纖維素降解的影響顯著。綜上所述，菌渣酸處理可后不溶性多糖水解成可發(fā)酵糖，酶處理可降解纖維素。

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基金項(xiàng)目 2019年大連市青年科技之星項(xiàng)目（2019RQ146）。

作者簡(jiǎn)介 王巖（1991—），女，遼寧朝陽人，工程師，碩士，從事微生物酶制劑飼料研究。*通信作者，教授，博士，博士生導(dǎo)師，從事分子免疫學(xué)與獸醫(yī)學(xué)研究。

收稿日期 2023-04-06；修回日期 2023-06-06