衣然，馬浩洋，金露達(dá)，張悅，王洪江*，李娟，張東杰,2

基于嗜酸乳桿菌的時(shí)間溫度指示器的制備及其性能表征

衣然1，馬浩洋1，金露達(dá)1，張悅1，王洪江1*，李娟1，張東杰1,2

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，黑龍江 大慶 163319；2.國(guó)家雜糧工程技術(shù)研究中心，黑龍江 大慶 163319）

為了監(jiān)測(cè)食品貯藏和運(yùn)輸期間的品質(zhì)，制備微生物時(shí)間-溫度指示器（TTI）。選擇嗜酸乳桿菌作為時(shí)間-溫度指示器的微生物，對(duì)配制成的9種混合pH指示劑溶液進(jìn)行篩選，用合適的混合pH指示劑溶液制備TTI，加入不同濃度的嗜酸乳桿菌，在不同等溫條件下（5、15、25 ℃）貯藏檢測(cè)其指標(biāo)，以合適的指標(biāo)參數(shù)為響應(yīng)值探究其動(dòng)力學(xué)與溫度依賴性。9種混合pH指示劑溶液中有5種顏色變化較明顯，用其中一種制備TTI，以色差值（?）為響應(yīng)參數(shù)得出其活化能（a）為84.9 kJ/mol。5種顏色變化較明顯的混合pH指示劑溶液可以作為TTI的指示劑，制備的微生物型TTI有潛力應(yīng)用于活化能59.9 kJ/mol≤a≤109.9 kJ/mol的食品品質(zhì)指標(biāo)的貨架期預(yù)測(cè)中。

微生物時(shí)間-溫度指示器（TTI）；嗜酸乳桿菌；pH指示劑；溫度依賴性

隨著全球供應(yīng)鏈的不斷擴(kuò)大和各行各業(yè)的發(fā)展，消費(fèi)者對(duì)食品質(zhì)量和安全的要求不斷提高。近年來，我國(guó)食品安全形勢(shì)嚴(yán)峻[1]，食品中含有豐富的微生物，溫度的變化會(huì)促進(jìn)其生長(zhǎng)代謝使食品發(fā)生腐敗變質(zhì)，適宜的溫度對(duì)于防止食品變質(zhì)和預(yù)防食源性疾病[2]，如何監(jiān)測(cè)食品經(jīng)歷的溫度顯得至關(guān)重要。因此，時(shí)間-溫度指示器（Time-Temperature Indicator，TTI）應(yīng)運(yùn)而生。TTI是附于包裝或產(chǎn)品外部的一種簡(jiǎn)單裝置或標(biāo)簽，其主要作用在于能夠監(jiān)測(cè)有關(guān)食品的溫度歷史信息。TTI提供了一種監(jiān)測(cè)儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中溫度偏差的可靠方法，有助于確保產(chǎn)品保持在安全的溫度范圍內(nèi)[3-5]，是一種保障食品安全的重要手段。

根據(jù)反應(yīng)機(jī)理的不同，主要可以將TTI分為化學(xué)型TTI、物理型TTI和生物型TTI三大類[6]。微生物型TTI屬于生物型TTI，其反應(yīng)機(jī)理是通過微生物的生長(zhǎng)代謝產(chǎn)酸，引起底物基質(zhì)的pH值降低，進(jìn)而引起pH指示劑的顏色發(fā)生改變[7]。因此，制備TTI時(shí)必須充分考慮酸性環(huán)境的影響，以酸性反應(yīng)為基礎(chǔ)的TTI能夠更好地反映食物的新鮮程度[8]。

研究表明，將TTI應(yīng)用到供應(yīng)鏈流程中可以節(jié)約成本、改善物流和減少食品浪費(fèi)。2017年Hsiao等[9]針對(duì)冷鏈?zhǔn)唪~保鮮問題，將清酒乳桿菌作為特異性腐敗菌進(jìn)行研究，采用0.1 mg/mL氯酚紅作為pH指示劑，研究出了一種適用的TTI，在4 ℃條件下對(duì)其特性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)其色差Δ從0升高至45，pH值從6.19下降至5.25，使用過程中其顏色經(jīng)歷了由紅色到橙色最終變?yōu)辄S色，而這一變化是菌株生長(zhǎng)產(chǎn)生的乳酸導(dǎo)致pH值的降低引起的。Avery Dennison的TTSensorTM標(biāo)簽[10-11]也已投入Sav-On水產(chǎn)品公司商用于新鮮魚類的包裝，通常粘貼于食品外包裝表面，使用時(shí)會(huì)隨著時(shí)間溫度積累從黃色最終變成粉紅色。Gao等[12]認(rèn)為微生物TTI是一種基于TTI微生物的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)對(duì)TTI營(yíng)養(yǎng)底物產(chǎn)生酸化作用的裝置，在此過程中，pH指示劑會(huì)隨著微生物的代謝活動(dòng)而逐漸發(fā)生定量且連續(xù)的不可逆顏色變化。

與國(guó)外相比，國(guó)內(nèi)TTI的研究還處于起步階段，與微生物型TTI相關(guān)的研究更是寥寥無幾。2018年孟晶晶等[13]利用Weissella cibaria CIFP 009菌種開發(fā)了微生物型TTI，改進(jìn)了SPG膜技術(shù)法制備微膠囊，使TTI具有更好的應(yīng)用性能；同時(shí)在實(shí)驗(yàn)室對(duì)酸奶貯藏運(yùn)輸過程進(jìn)行模擬，驗(yàn)證了TTI在酸奶質(zhì)量監(jiān)測(cè)管理中應(yīng)用的準(zhǔn)確性。2020年邱靈敏等[14]，用SPG膜乳化技術(shù)，以瑞士乳桿菌作為TTI的微生物制備微膠囊，根據(jù)微生物型TTI的工作機(jī)理制備TTI，使用過程中其顏色由深綠色逐漸變成黃色。

嗜酸乳桿菌是一種成本低、易獲取、安全性好、產(chǎn)酸的常用益生菌，在國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中未見到有關(guān)嗜酸乳桿菌用作TTI的報(bào)道。因此，本研究用嗜酸乳桿菌作為TTI菌種制備微生物TTI，對(duì)混合pH指示劑進(jìn)行了篩選，接種不同濃度的菌種，并于恒溫條件下貯藏，對(duì)其進(jìn)行性能表征和溫度依賴性分析，得到其動(dòng)力學(xué)參數(shù)和活化能（a），為其在食品貯藏過程中指示貨架期提供科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料與設(shè)備

主要試劑：嗜酸乳桿菌，天益生物科技有限公司；MRS（Man Rogasa Sharpe）肉湯，青島海博公司；脫脂奶粉，BioFroxx公司；丙三醇（甘油），泉瑞公司；95%乙醇，泉瑞公司；溴百里酚藍(lán)CB2971，Coolaber公司；甲基紅CM7261，Coolaber公司；甲基橙CM7251，Coolaber公司；溴甲酚綠CB2911，Coolaber公司；溴甲酚紫CB2931，Coolaber公司；酚酞P816041，MACKLIN公司。

主要設(shè)備：LHS-2413型壓力蒸汽滅菌鍋，寧波凌宏醫(yī)療器械科技有限公司；BCD-610W無霜冷藏冷凍箱，博西華家用電器有限公司；303-ZB型電熱恒溫培養(yǎng)箱，尚誠(chéng)儀器制造有限責(zé)任公司；HCL-4A數(shù)顯磁力攪拌水浴鍋，常州基銘實(shí)驗(yàn)儀器廠；NH310高品質(zhì)電腦色差儀，3nh公司；PHS-2F pH計(jì)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；JD100-3B電子天平，沈陽龍騰電子有限公司。

1.2 微生物TTI的組成及制備

微生物TTI由TTI微生物、生長(zhǎng)培養(yǎng)基和TTI載體三部分組成，為了方便實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)中TTI載體用12孔細(xì)胞培養(yǎng)板代替。

以MRS肉湯為培養(yǎng)基、加入體積分?jǐn)?shù)為1.5%的瓊脂、體積分?jǐn)?shù)為10%的pH指示劑溶液、體積分?jǐn)?shù)為10%的脫脂乳和體積分?jǐn)?shù)為1.5%的甘油配制成微生物TTI的底物基質(zhì)。pH指示劑溶液中甲基橙、甲基紅、溴甲酚綠、溴甲酚紫和溴百里酚藍(lán)按照0.1、0.1、0.04、0.05、0.1 g溶于100 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇配制。

本文以嗜酸乳桿菌作為TTI的微生物菌種，在實(shí)驗(yàn)前2天將菌種活化，傳至2～3代后備用。將配制好的微生物TTI生長(zhǎng)培養(yǎng)基用濃度為0.1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0左右，滅菌后為防止培養(yǎng)基凝固將其置于45 ℃水浴鍋中備用。在無菌操作臺(tái)中，將濃度分別為6.4、4.4、2.4 lg(CFU/mL)的嗜酸乳桿菌和TTI培養(yǎng)基按體積比1∶2制成微生物TTI，接入12孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。用封板膜密封，待其凝固后置于25、15、5 ℃培養(yǎng)箱中，以便后續(xù)測(cè)量。

1.3 pH指示劑的篩選

TTI通過微生物發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，進(jìn)而引起pH指示劑產(chǎn)生視覺上的顏色變化，為消費(fèi)者實(shí)時(shí)地反映食品質(zhì)量，因此pH指示劑是TTI中重要的組成部分。由于TTI的pH值變化范圍較大，最初調(diào)整的培養(yǎng)基pH值為7.0左右，最終可下降至4.5左右。根據(jù)周南[15-16]的研究可知，甲基橙（pH為3.0～4.4）、甲基紅（pH為4.4～6.2）、溴甲酚綠（pH為3.8～5.4）、溴甲酚紫（pH為5.2～6.8）和溴百里酚藍(lán)（pH為6.0～7.6）幾種pH指示劑中沒有單一的一種可以對(duì)TTI的pH值變化范圍進(jìn)行有效的指示。因此需配制成指示范圍更寬、顏色變化明顯的混合pH指示劑來對(duì)其進(jìn)行指示。選擇幾種合適的pH指示劑按照體積比1∶1∶1或1:1進(jìn)行混合，以pH值覆蓋范圍為指標(biāo)對(duì)其進(jìn)行篩選并編號(hào)（1～9），如表1所示。選出合適的混合pH指示劑進(jìn)行接下來的實(shí)驗(yàn)。

表1 9種混合pH指示劑

Tab.1 Nine mixed pH indicators

1.4 TTI響應(yīng)的測(cè)量

將制備好的微生物TTI在恒溫條件下（25、15、5 ℃）放置于生化培養(yǎng)箱中，間隔一定時(shí)間取出測(cè)量其響應(yīng)值（pH值和色度）。

pH值：用固體pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定，每次測(cè)定3次取平均值。

色度：采用CIE-LAB系統(tǒng)，用色度計(jì)固定視角和照明測(cè)得*（亮度）、*（紅綠色度）、*（黃藍(lán)色度）。

1.5 TTI動(dòng)力學(xué)參數(shù)及溫度依賴性的確定

根據(jù)以上指標(biāo)測(cè)量的結(jié)果，采用CIE-LAB系統(tǒng)，用***顏色進(jìn)行表示，得出色差（Δ）：

TTI響應(yīng)的顏色隨貯藏時(shí)間變化的線性關(guān)系由零階反應(yīng)式（2）來描述。

式中：（）為TTI的顏色響應(yīng)；為速率常量，h?1；為時(shí)間，h；（X0）為一個(gè)初始值。利用Arrhenius方程來計(jì)算反應(yīng)速度與溫度的相關(guān)性：

式中：A為指前因子，h?1；a為活化能，kJ/mol；為溫度，K；為氣體常數(shù)，具體值為0.008 314 kJ/（mol·K）。Arrhenius 方程兩邊取對(duì)數(shù)，可得：

通過上述公式確定動(dòng)力學(xué)參數(shù)并求得活化能a，即溫度依賴性。

2 結(jié)果與分析

2.1 混合pH指示劑的篩選

TTI通過pH指示劑顯示出肉眼可見的不可逆的顏色變化來指示食品的貨架期，選擇合適的pH指示劑對(duì)TTI的有效性起著至關(guān)重要的作用[17]。Ellouze等[18]列出了pH指示劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)，包括微生物的抑制作用、顏色變化反應(yīng)機(jī)理解釋的簡(jiǎn)單性和顏色變化程度；Kim等[19]提出了pH指示劑的選擇方法。但在TTI的研究中極少有提及對(duì)其pH指示劑進(jìn)行篩選的研究。本文對(duì)混合pH指示劑進(jìn)行篩選，選擇合適的組合進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。

9種混合pH指示劑所制成的TTI的pH值變化如圖1所示。左側(cè)縱坐標(biāo)為pH值，在恒定溫度下隨著時(shí)間增加嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)代謝產(chǎn)生乳酸對(duì)TTI系統(tǒng)產(chǎn)生影響，pH值均從最初的7.0左右下降至最終的4.5左右，可知9種pH指示劑對(duì)嗜酸乳桿菌的生長(zhǎng)都沒有明顯的抑制作用，均符合TTI指示劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)。

將表1中的9種混合pH指示劑作為TTI指示劑，分別制備成微生物TTI，37 ℃培養(yǎng)12 h，每2 h拍照記錄得到TTI的顏色變化如表2所示。通過肉眼觀察發(fā)現(xiàn)1、2、3、6、7號(hào)混合pH指示劑制備的TTI呈現(xiàn)出不可逆的明顯的顏色變化，而4、5、8、9號(hào)顏色變化不明顯，根據(jù) Ellouze等[18]列出的pH指示劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)，1、2、3、6、7號(hào)混合pH指示劑更適合作為微生物TTI的指示劑。

測(cè)定pH值和色差Δ如圖1所示，各拐點(diǎn)對(duì)應(yīng)的顏色如圖1中圓形標(biāo)注所示?？梢钥闯?、2、3、6、7號(hào)色差Δ均隨著時(shí)間的增加而變大，并且都在8 h左右出現(xiàn)色差的突變，這種情況更適合作為指示劑指示TTI的顏色變化。而4、5、8、9號(hào)色差Δ較小，顏色變化不明顯，肉眼無法清晰的辨認(rèn)，因此不適合作為pH指示劑。

2.2 微生物TTI的性能表征

通過上述pH混合指示劑的篩選，對(duì)TTI的pH值、色差Δ和肉眼觀察進(jìn)行分析，最終選擇了1號(hào)pH混合指示劑配方作為TTI指示劑進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，根據(jù)1.2節(jié)制備微生物TTI進(jìn)行各指標(biāo)的檢測(cè)，對(duì)其性能表征進(jìn)行分析。

圖1 不同TTI的pH值和ΔE隨時(shí)間的變化

表2 不同TTI的顏色隨時(shí)間變化

Tab.2 Color change of different TTIs as function of time

在不同溫度條件下不同菌液濃度的TTI pH值隨時(shí)間的變化如圖2所示，可知隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，25、15 ℃下TTI的pH值逐漸降低，且初始菌液濃度越大pH值下降越早，均在下降至4.5左右后保持穩(wěn)定。25 ℃條件下接種菌液濃度為6.4 lg(CFU/mL)和4.4 lg(CFU/mL)的TTI的pH值在第2天下降至4.5以下，接種菌液濃度為2.4 lg CFU/mL在第3天下降至4.5以下；15 ℃條件下接種菌液濃度為6.4 lg(CFU/mL) 的TTI的pH值在第4天開始持續(xù)降低，4.4 lg(CFU/mL)和2.4 lg(CFU/mL) 的TTI的pH值也有小幅度降低的趨勢(shì)；5 ℃下TTI的pH值在13 d內(nèi)沒有明顯變化。這與Kim等[17]的研究中4種不同乳酸菌在37 ℃下保存的TTIs的pH值變化相似，均呈現(xiàn)從7.0下降至4.0的趨勢(shì)。

在不同溫度條件下不同菌液濃度的Δ隨時(shí)間的變化如圖3所示，可知隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，Δ呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。初始菌液濃度為6.4、4.4、2.4 lg(CFU/mL)時(shí)，25 ℃下Δ均逐漸增大，到第4天后基本保持不變；15 ℃下初始菌液濃度為6.4 lg(CFU/mL)的TTI在6 d內(nèi)變化較大，并且還在持續(xù)增長(zhǎng)；5 ℃下Δ沒有明顯變化；空白組Δ在3個(gè)溫度下均無太大變化。由此可知溫度對(duì)TTI的Δ存在較大影響，Han等[20]的研究與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，隨時(shí)間延長(zhǎng)TTI的Δ逐漸變大，且溫度越高變化時(shí)間越短。

2.3 微生物TTI動(dòng)力學(xué)與溫度依賴性分析

Pereira等[21]提出Δ作為一種方便測(cè)量的響應(yīng)指標(biāo)，與TTI反應(yīng)密切相關(guān)，許多研究對(duì)其應(yīng)用的有效性進(jìn)行了驗(yàn)證。根據(jù)孟晶晶[13]的方法，在 CIE***顏色系統(tǒng)中，如式（1）所示，有基礎(chǔ)變量*、*、*和二次變量Δ這4個(gè)關(guān)鍵參數(shù)。為了更準(zhǔn)確地反映TTI的顏色響應(yīng)，需要找到最合適的變量來表征這一過程，因此在25 ℃下對(duì)顏色參數(shù)*、*、*和Δ進(jìn)行線性擬合得到相關(guān)參數(shù)，如表3所示。

可以看出，Δ隨時(shí)間呈現(xiàn)最明顯的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)2為0.938 7，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他3個(gè)變量。因此，本文將Δ值作為微生物TTI的顏色響應(yīng)（）。

圖2 在不同溫度條件下不同菌液濃度 TTI的pH值隨時(shí)間變化情況

表3 25 ℃下*、*、*和Δ隨時(shí)間變化的擬合結(jié)果和相關(guān)參數(shù)

Tab.3 Fitting results and related parameters of L*, a*, b* and ΔE with time at 25 ℃

根據(jù)式（2），對(duì)制備的微生物型TTI進(jìn)行動(dòng)力學(xué)與溫度依賴性研究，TTI的顏色響應(yīng)()為Δ值，將時(shí)間作為橫軸，在5、15和25 ℃下，分別對(duì)其顏色響應(yīng)變化進(jìn)行了線性擬合，如圖4所示。

圖4 不同溫度下微生物型TTI的顏色響應(yīng)隨時(shí)間的變化

由圖4所得式（2）中的動(dòng)力學(xué)相關(guān)參數(shù)見表4。

通過式（2），(0)取3個(gè)平均值保留2位小數(shù)(0)=0.23?？傻茫?/p>

為得到該反應(yīng)率與溫度的相關(guān)性，根據(jù)式（4）與表4中的數(shù)據(jù)進(jìn)行l(wèi)n-1/作圖，如圖5所示。

表4 不同溫度下微生物型TTI顏色響應(yīng)的動(dòng)力學(xué)參數(shù)

Tab.4 Kinetic parameters of the color response of microbial TTI at different temperature

圖5 對(duì)ln k與1/T進(jìn)行線性回歸

通過ln與1/線性回歸可以得到微生物型TTI的動(dòng)力學(xué)參數(shù)及其溫度依賴性，a為84.9 kJ/mol，A為1.13×1013，2為0.926 5。結(jié)合式（2）與式（3）可以得到微生物型TTI的Δ響應(yīng)模型：

該微生物型TTI的a為84.9 kJ/mol，根據(jù)Taoukis等[22]提出的觀點(diǎn)，當(dāng)TTI與食品的活化能之差小于25 kJ/mol時(shí)，可以比較準(zhǔn)確地指示該種食品的貨架期終點(diǎn)，因此該TTI有潛力應(yīng)用于活化能59.9 kJ/mol≤a≤109.9 kJ/mol的食品品質(zhì)指標(biāo)的貨架期預(yù)測(cè)中。TTI在牛肉、豬肉、雞肉、牛奶等食品中的應(yīng)用情況如表5所示，其中列出了食品品質(zhì)指標(biāo)所對(duì)應(yīng)的a和TTI的a，例如Vaikousi等[23]所制備的TTI的a為112.77 kJ/mol，監(jiān)測(cè)的牛肉品質(zhì)指標(biāo)a為106.90 kJ/mol，其差值在25 kJ/mol以內(nèi)，可以指示該食品品質(zhì)指標(biāo)的貨架期。與文獻(xiàn)[23]相比，本文所研究的嗜酸乳桿菌制備的TTI有很大的應(yīng)用前景，有潛力用于表5中列出的食品品質(zhì)指標(biāo)的貨架期指示。但由于貯藏運(yùn)輸過程中溫度的動(dòng)態(tài)變化，想要將TTI應(yīng)用于某一食品，還需在動(dòng)態(tài)和恒定溫度條件下進(jìn)行食品和TTI的匹配試驗(yàn)，以確保TTI可以用于該食品的品質(zhì)監(jiān)測(cè)。

表5 部分食品TTI的應(yīng)用

Tab.5 Application of TTI in some foods

注：1.LAB為乳酸菌；2.VBN為揮發(fā)性堿基；3.OFDT為異味檢測(cè)時(shí)間；4.AMB為好氧中溫菌；5.CB為大腸菌群；6.TA為可滴定酸度。

3 結(jié)論

本文以嗜酸乳桿菌作為TTI微生物，篩選出5種pH指示劑，并用1號(hào)指示劑成功制備了TTI，其顏色變化由綠變?yōu)辄S。探討不同微生物濃度、不同恒溫環(huán)境下TTI的性能表征，并進(jìn)行溫度依賴性和動(dòng)力學(xué)分析。結(jié)果顯示TTI的pH值隨時(shí)間延長(zhǎng)和溫度升高而降低，Δ則隨時(shí)間延長(zhǎng)和溫度升高而增大，且可以看到明顯的顏色變化。通過動(dòng)力學(xué)分析得出制備的微生物TTI活化能a為84.9 kJ/mol，該TTI有潛力應(yīng)用于活化能為59.9 kJ/mol≤a≤109.9 kJ/mol的食品品質(zhì)指標(biāo)的貨架期預(yù)測(cè)中，具體應(yīng)用于某一食品的品質(zhì)監(jiān)測(cè)還需后續(xù)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行匹配。

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Preparation and Characterization of Time and Temperature Indicator Based on Lactobacillus Acidophilus

YI Ran1, MA Haoyang1, JIN Luda1, ZHANG Yue1, WANG Hongjiang1*, LI Juan1, ZHANG Dongjie1,2

(1. Heilongjiang Bayi Agricultural University, Heilongjiang Daqing 163319, China; 2. National Coarse Cereals Engineering Research Center, Heilongjiang Daqing 163319, China)

The work aims to prepare microbial time-temperature indicators (TTIs) for monitoring the quality of food products during storage and transportation. Lactobacillus acidophilus was selected as the microorganism of the time-temperature indicator, and nine mixed pH indicator solutions were prepared for screening. The TTI was prepared with suitable mixed pH indicator solutions, and the indicators were evaluated by adding different concentrations of Lactobacillus acidophilus and stored under different isothermal conditions (5, 15 and 25 ℃), and the kinetics and temperature dependence were investigated with suitable indicator parameters as response values. Five of the nine mixed pH indicator solutions had significant color changes, one of which was used to prepare the TTI, and the activation energy (a) was 84.9 kJ/mol with the total color difference value (?) as the response parameter. Five mixed pH indicator solutions with significant color changes can be used as indicators for the TTI, and the prepared microbial-type TTI has potential to be applied in shelf life prediction of food with an activation energy of quality index from 59.9 kJ/mol to 109.9 kJ/mol.

microbial time-temperature indicators (TTIs); lactobacillus acidophilus; pH indicator; temperature dependence

TS206.6

A

1001-3563(2024)09-0017-08

10.19554/j.cnki.1001-3563.2024.09.003

2023-08-04

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃（2018YFE0206300）；黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)博士科研啟動(dòng)項(xiàng)目（XDB-2017-14）；大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目（S202210223041）