朱中勤 田娣 李偉

急性腦梗死是常見的腦血管疾病,具有高致殘率、復(fù)發(fā)率、死亡率的特點[1-2]。經(jīng)臨床治療后雖能控制病情進展,但穩(wěn)定恢復(fù)期仍遺留不同程度的血管內(nèi)皮功能和神經(jīng)功能障礙,因此如何有效保護、改善血管和促進神經(jīng)功能恢復(fù)成為臨床關(guān)注的重點[3]。微小RNA(miR)因在多種腦部疾病的發(fā)展過程中扮演重要角色而受臨床研究的關(guān)注[4]。既往研究報道,miR-25-3p可靶向調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞中血管內(nèi)皮生長因子受體-2、正閉鎖小帶蛋白1、閉合蛋白和連接蛋白的表達從而促進血管通透性和血管生成;miR-25還可通過下調(diào)AGE-RAGE和減少煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶作為糖尿病神經(jīng)病變的保護因子[5-6]。本研究探討血清miR-25表達與急性腦梗死恢復(fù)期血管內(nèi)皮功能及神經(jīng)功能的關(guān)系,為臨床防治提供參考。

對象與方法

1.對象:選取本院2020年3月～2022年3月收治的急性腦梗死患者272例作為疾病組,其中男146例、女126例,年齡45～73歲,平均年齡(61.87±8.44)歲;BMI 19.45～28.61 kg/m2,平均BMI(24.01±2.32)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)均符合急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];(2)首次發(fā)病。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并心、肝、肺功能不全;(2)伴有顱腦內(nèi)惡性腫瘤;(3)合并腦出血;(4)伴有自身免疫性、代謝類、全身感染類疾病;(5)既往神經(jīng)功能障礙;(6)對研究藥物過敏。根據(jù)疾病組入院時間和疾病恢復(fù)情況將其分為急性期組(入院時間≤24 h)136例和恢復(fù)期組(距離收入本院時間>4周,且疾病處于穩(wěn)定狀態(tài))136例。另選取本院同期健康體檢者129例作為對照組,其中男68例、女61例,年齡44～75歲,平均年齡(60.34±8.31)歲;BMI 19.67～29.12 kg/m2,平均BMI(24.23±2.42)kg/m2。兩組受試者性別、年齡、BMI比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)我院倫理委員會審核批準(zhǔn),所有受試者均簽署知情同意書。

2.方法:依據(jù)《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[8]對急性腦梗死患者進行治療,綜合評估病情后行溶栓、取栓及口服阿司匹林治療,術(shù)后根據(jù)患者自身情況進行抗凝、擴容、神經(jīng)保護等處理。收集所有受試者一般資料(性別、年齡、BMI)、實驗室檢查指標(biāo)[血清miR-25、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)]及疾病組患者腦梗部位和梗死病灶面積。采用美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)[9]評估恢復(fù)期患者神經(jīng)功能并將其分為輕度組(NIHSS評分≤5分,63例)、中度組(NIHSS評分6～15分,42例)和重度組(NIHSS評分>15分,31例)。

結(jié) 果

1.疾病組患者腦梗死情況:急性腦梗死患者腦梗部位:基底節(jié)區(qū)130例,腦干84例,小腦58例;梗死病灶面積3～25 cm2,平均病灶面積(13.26±3.62)cm2。

2.急性期組、恢復(fù)期組和對照組受試者VEGF、NO、ET-1及miR-25表達水平比較:急性期組、恢復(fù)期組和對照組受試者VEGF、ET-1水平依次降低,NO、miR-25表達水平依次升高(P<0.05)。見表1。

表1 急性期組、恢復(fù)期組和對照組受試者VEGF、NO、ET-1及miR-25表達水平比較

3.不同組別患者miR-25表達水平比較:急性期組患者NIHSS評分高于恢復(fù)期組[17.74±3.23)分比(14.23±2.65)分,t=9.797,P<0.05]。疾病恢復(fù)期輕度組(0.76±0.12)、中度組(0.71±0.09)和重度組(0.65±0.07)患者血清miR-25表達水平依次降低(P<0.05)。

4.血清miR-25表達水平與急性腦梗死恢復(fù)期患者血管內(nèi)皮功能、神經(jīng)功能的相關(guān)性:Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,血清miR-25表達水平與VEGF(r=-0.593)、ET-1(r=-0.528)、NIHSS評分(r=-0.644)均呈負相關(guān),與NO(r=0.473)呈正相關(guān)(P<0.05)。見表2。

討 論

急性腦梗死可引起血管內(nèi)皮通透性改變和腦組織缺氧缺血損傷,經(jīng)臨床治療后仍在血管內(nèi)皮功能和神經(jīng)功能尚未完全恢復(fù)的狀況[10]。本研究顯示腦梗死急性期患者NIHSS評分高于恢復(fù)期患者,有研究證實,急性腦梗死發(fā)生后,NIHSS評分越高,側(cè)支循環(huán)代償越差,加重患者神經(jīng)功能受損[11]。本研究還顯示,急性期組、恢復(fù)期組和對照組受試者VEGF、ET-1水平依次降低,NO、miR-25表達水平依次升高,提示血管內(nèi)皮功能損傷與急性腦梗死患者病情發(fā)展有關(guān)。在急性腦梗死發(fā)生到恢復(fù)階段低氧作為一種信號激活VEGF/VEGF受體系統(tǒng),誘導(dǎo)半暗帶VEGF高表達,促進新生血管生成,加快急性腦梗死患者的恢復(fù)。當(dāng)機體發(fā)生急性腦梗死后,會導(dǎo)致NO分泌下降、ET-1合成增多,破壞兩者平衡,引起腦梗死邊緣側(cè)支血管強烈收縮,進一步減少病灶周圍血管流量,加重腦損傷[12-13]。

近年來,miR-25在腦血管疾病中發(fā)揮重要作用,可靶向作用于腦血管生成基因,調(diào)控正常腦血管生成及發(fā)育。有研究證實,miR-25的靶基因參與細胞增殖、分化、應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等多種生物活動調(diào)節(jié),在急性腦梗死的發(fā)生中發(fā)揮著重要作用[14]。本研究發(fā)現(xiàn)疾病恢復(fù)期輕度組、中度組和重度組患者血清miR-25表達水平依次降低,提示miR-25可能參與急性腦梗死的發(fā)生發(fā)展過程。Pearson相關(guān)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),恢復(fù)期患者miR-25表達水平與NHISS評分呈負相關(guān),提示miR-25表達水平與神經(jīng)功能密切相關(guān)。Zhou等[15]在急性缺血性中風(fēng)研究中發(fā)現(xiàn),miR-25可通過抑制人組蛋白去乙?；?(HDAC3)和重組人失調(diào)蛋白3(ATXN3)從而減少神經(jīng)元損失,減少大鼠梗死面積和神經(jīng)元凋亡,提高神經(jīng)元和軸突的可塑性,保護神經(jīng)功能。miR-25還可在大動脈粥樣硬化性腦卒中患者中可通過調(diào)控人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECS)增殖、遷移和早期凋亡,從而保護神經(jīng)功能[16]。因此,猜測急性腦梗死恢復(fù)期患者中miR-25可能靶向作用于多種促營養(yǎng)、促生長的細胞因子,進而影響神經(jīng)功能的恢復(fù)情況。

本研究還發(fā)現(xiàn),血清miR-25表達水平與VEGF、ET-1均呈負相關(guān),與NO呈正相關(guān),表明miR-25表達水平與血管內(nèi)皮功能密切相關(guān)。miR-25可通過抑制線粒體凋亡過程,對抗氧化應(yīng)激損傷,從而影響ET-1和NO的表達[17]。Lian等[18]在研究中發(fā)現(xiàn),miR-25-3p可通過靶向調(diào)節(jié)抑制T-細胞泛素配體-2/脾酪氨酸激酶信號通路調(diào)節(jié)VEGFR-2的磷酸化,而VEGFR-2在VEGF的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和血管內(nèi)皮生成中起主導(dǎo)作用,因此miR-25可通過影響VEGFR-2調(diào)控VEGF的表達。miR-25還可通過抑制細胞增殖和Ki-67表達,調(diào)控血管平滑肌細胞的增殖,直接影響血管內(nèi)皮細胞,調(diào)控血管內(nèi)皮功能[19]。故推測miR-25與血管內(nèi)皮功能可能存在一定相關(guān)性,可通過調(diào)控miR-25水平促進血管再生,減輕患者病情。

綜上所述,miR-25在急性腦梗死恢復(fù)期患者中異常低表達,且與恢復(fù)期患者的血管內(nèi)皮功能和神經(jīng)功能密切相關(guān),可有望成為改善急性腦梗死患者恢復(fù)期神經(jīng)功能和血管內(nèi)皮功能的潛在治療靶點。