林桂梅 來有雪 鞠成國 侯斌

【摘?要】 目的：優(yōu)選黃芪、木香微型飲片切制的工藝條件。方法：以飲片的粒徑、片厚、潤制時(shí)間和干燥方式為考察因素，以休止角、醇溶性浸出物及黃芪中指標(biāo)成分黃芪甲苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷、木香中指標(biāo)成分木香烴內(nèi)酯和去氫木香內(nèi)酯含量為指標(biāo)，采用正交設(shè)計(jì)，優(yōu)選黃芪、木香微型飲片切制條件。結(jié)果：黃芪、木香微型飲片切制的最佳工藝均為潤制4 h，切制粒徑為7～8 mm，厚度為4 mm，采用陰干方法干燥。結(jié)論：黃芪、木香微型飲片切制工藝合理可行，為微型飲片的研究提供了參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】

黃芪；木香；微型飲片；正交設(shè)計(jì)

【中圖分類號(hào)】R283???【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A????【文章編號(hào)】1007-8517（2024）01-0022-06

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.01.zgmzmjyyzz202401006

Optimizing Cutting Process of Astragali Radix and Astragaloside IV for Micro Slices

LIN Guimei1，2?LAI Youxue3?JU Chengguo1，2?HOU Bin1，2

1.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600， China；

2. Traditional Chinese Medicine Processing Technology Inheritance Base （Liaoning） of the State Administration of Traditional Chinese Medicine， Dalian 116600， China；

3.Dalian Sixth Peoples Hospital， Dalian 116600， China

Abstract：Objective The process condition of selecting Astragali Radix and Aucklandiae Radix. Methods The results showed that the particle size， tablet thickness， the time of drying and the drying method were as follows： the angle of repellent， the alcohol soluble leachate and the astragalus and astragalus were the contents of astragaloside and maize isoflavone glucoside， ester and dehydroroma lactone content as an indicator， the use of orthogonal design， preferably astragalus， woody micro-Pieces cutting conditions. Results Astragali Radix， Aucklandiae Radix microplates cut the best process for the filing 4 h， cut the particle size of 7-8 mm， the thickness of 4 mm， dry by dry method. Conclusion Astragali Radix， Aucklandiae Radix cutting process is reasonable and feasible for micro-Pieces of the study provides a reference.

Keywords：Astragali Radix; Aucklandiae Radix; Micro Slices; Orthogonal Design

黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus （Fisch） Bge.var.mongholicus （Bge.） Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus （Fisch） Bge.的干燥根^［1］。木香為菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根^［1］。黃芪、木香雖均為根入藥，但性狀上有所區(qū)別，黃芪為長30～90 cm，直徑1～3.5 cm的根，木香則為長5～10 cm，但直徑為0.5～5cm的根。臨床上，黃芪、木香均需要切成厚片才能入藥，可以說中藥飲片是中藥最基本的入藥形式^［2］。藥典對(duì)厚片的切制厚度規(guī)定為2～4 mm，但飲片廠生產(chǎn)中對(duì)其切制規(guī)格不易掌控，并且各地飲片切制方法不一，導(dǎo)致臨床上黃芪、木香切制質(zhì)量差異較大，這些極大地制約了黃芪和木香飲片的臨床用藥。為了制出質(zhì)優(yōu)、型精的飲片，課題組提出微型飲片概念^［3-6］。微型飲片較常規(guī)飲片粒徑細(xì)，比細(xì)粉粗，依然可以保持中藥材固有的藥效學(xué)基礎(chǔ)。以此為基礎(chǔ)，選取黃芪、木香藥材，以飲片粒徑、片厚、潤制時(shí)間和干燥方式為因素，以飲片的流動(dòng)性、浸出物含量、指標(biāo)性成分含量等為指標(biāo)，對(duì)黃芪、木香微型飲片的切制工藝進(jìn)行優(yōu)化，為微型飲片的研究提供參考。

1?儀器與試藥

1.1?儀器?日本島津LC-20AT液相色譜儀（SPD-M20A 檢測器，CAD檢測器，LC-20AB 泵，CTO-20A柱溫箱，SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器，CBM-20A數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換模器）；島津 LC-Solution色譜數(shù)據(jù)工作站；METTLER AE240型十萬分之一分析天平（瑞士METTLER）；FA1004B電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；YP5102型電子天平（上海光正醫(yī)療有限公司）。DHF-200手提式高速萬能打粉機(jī)（溫嶺市林大機(jī)械有限公司）；HITECH純水儀（上海和泰儀器有限公司）。

1.2?試藥?黃芪藥材購自安徽亳州藥材市場，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室翟延君教授鑒定為蒙古黃芪Astragalus membranaceus （Fisch） Bge.var.mongholicus （Bge.） Hsiao的干燥根；木香藥材購自云南，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室翟延君教授鑒定為菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根。黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品（成都德思特生物技術(shù)有限公司，批號(hào)84687-43-4、20633-67-4）、木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品（上海永恒生物科技有限公司，批號(hào)553-21-9、20140421），甲醇、乙腈（均為色譜純），超純水，其它試劑均為分析純。

2?方法與結(jié)果

2.1?黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量測定

2.1.1?對(duì)照品溶液的制備?黃芪甲苷、毛蕊異黃酮：精密稱取黃芪甲苷、毛蕊異黃酮對(duì)照品適量，加甲醇分別制成每1 mL含黃芪甲苷0.505 mg、毛蕊異黃酮0.143 mg的溶液，即得。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯：精密稱取木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含木香烴內(nèi)酯0.208 mg、去氫木香內(nèi)酯0.372 mg的混合對(duì)照品溶液，即得。

2.1.2?供試品溶液的制備^［1］黃芪甲苷：取樣品中粉約4 g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇40 mL，冷浸過夜，再加甲醇適量，加熱回流4 h，提取液回收溶劑并濃縮至干，殘?jiān)铀?0 mL，微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次40 mL，合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次，每次40 mL，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀? mL使溶解，放冷，通過D101型大孔吸附樹脂（內(nèi)徑為1.5 cm，柱高為12 cm），以水50 mL洗滌，棄去水液，再用40%乙醇30 mL洗脫，棄去洗脫液，繼用70%乙醇80 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯：毛蕊異黃酮葡萄糖苷：取本品粉末（過四號(hào)篩）約1 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，加熱回流4 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25 mL，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙猓D(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

取樣品粉末（過四號(hào)篩）約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，放置過夜，超聲處理（功率250 W，頻率50 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.1.3?測定條件^［1］黃芪甲苷色譜柱： Diamonsil C18（5 μm，200 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相：乙腈-水（32∶8）；流速：1 mL/min；電霧式檢測器檢測；進(jìn)樣量：10 μL。HPLC圖如圖1所示。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷色譜柱： Diamonsil C18（5 μm，200 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相：乙腈（A）-0.2%甲酸水溶液（B）梯度洗脫；流速：1 mL/min；檢測波長：260 nm；進(jìn)樣量：10 μL。梯度洗脫條件見表1，HPLC圖如圖2所示。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯^［7］色譜柱： Diamonsil C18（5 μm，200 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相：甲醇-水（65∶35）；流速：1 mL/min；檢測波長：225 nm；進(jìn)樣量：10 μL。HPLC圖如圖3所示。

2.1.4?方法學(xué)考察

2.1.4.1?線性范圍考察?精密吸取濃度為0.5050 mg/mL的黃芪甲苷對(duì)照品溶液1 μL、2 μL、4 μL、8 μL、10 μL、15 μL；精密吸取濃度為0.0480 mg/mL的毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品溶液1 μL、2 μL、4 μL、8 μL、10 μL、15 μL；精密吸取濃度為0.208 mg/mL的木香烴內(nèi)酯對(duì)照品溶液1 μL、2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 ?μL；精密吸取濃度為0.372 mg/mL的去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品溶液1 μL、2 μL、5 μL、10 μL、15 μL、20 μL，注入高效液相色譜儀中，測定峰面積。對(duì)照品進(jìn)樣量（Y）為橫坐標(biāo)，峰面積（X）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性回歸方程見表2。

2.1.4.2?精密度試驗(yàn)?黃芪甲苷：精密吸取同一供試品溶液10 μL，按2.1.3項(xiàng)下操作，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，測定供試品中黃芪甲苷峰面積的RSD為2.0%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷：精密吸取同一供試品溶液10 μL，按2.1.3項(xiàng)下操作，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，測定供試品中毛蕊異黃酮葡萄糖苷峰面積的RSD為0.9%，結(jié)果表明儀器精密度良好。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯：精密吸取同一供試品溶液10 μL，按2.1.3項(xiàng)下操作，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，測定供試品中木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯峰面積的RSD分別為2.0%、1.9%、結(jié)果表明儀器精密度良好。

2.1.4.3?穩(wěn)定性試驗(yàn)?黃芪甲苷：精密吸取同一供試品溶液10 μL，分別于0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h進(jìn)樣分析，按2.1.3項(xiàng)下操作，測定色譜峰面積的RSD分別為2.0%，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷：精密吸取同一供試品溶液10 μL，分別于0 h，1 h，2 h，4 h，8 h，24 h進(jìn)樣分析，按2.1.3項(xiàng)下操作，測定色譜峰面積的RSD分別為2.0%，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯：精密吸取同一供試品溶液10 μL，分別于0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、24 h進(jìn)樣分析，按2.1.3項(xiàng)下操作，木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量，測定色譜峰面積的RSD分別為1.7%、1.6%，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.4.4?重復(fù)性試驗(yàn)?黃芪甲苷：取同一樣品6份，按2.1.2及2.1.3項(xiàng)下操作，分別進(jìn)樣10 μL，測定各樣品中黃芪甲苷的平均含量為0.041%，RSD為1.9%。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷取同一樣品6份，按2.1.2及2.1.3項(xiàng)下操作，分別進(jìn)樣10 μL，測定各樣品中毛蕊異黃酮葡萄糖苷的平均含量為0.031%，RSD為1.7%。

木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯：取同一樣品6份，按2.1.2及2.1.3項(xiàng)下操作，分別進(jìn)樣10 μL，測定各樣品中木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯的平均含量分別為2.32%、1.96%，RSD分別為1.8%、1.7%。

2.1.4.5?加樣回收率試驗(yàn)?黃芪甲苷：取已知含量黃芪樣品6份，每份0.5 g，精密稱定，分別加入0.157 g/L的黃芪甲苷標(biāo)準(zhǔn)液10 mL，按照2.1.2黃芪項(xiàng)下操作，配制成6份加樣的供試品溶液，在上述色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算回收率，結(jié)果黃芪甲苷的加樣回收率為99.19%，RSD為2.4%。

毛蕊異黃酮葡萄糖苷：取已知含量的黃芪樣品6份，每份0.1 g，精密稱定，分別加入1.41 g/L的毛蕊異黃酮葡萄糖苷標(biāo)準(zhǔn)液2 mL， 按照2.1.2黃芪項(xiàng)下操作，配制成6份加樣的供試品溶液，在上述色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算回收率，結(jié)果毛蕊異黃酮葡萄糖苷的加樣回收率為98.18%，RSD為1.7%。

木香烴內(nèi)酯：取已知含量的木香樣品6份，每份0.1 g，精密稱定，分別加入0.102 g/L的木香烴內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)液2 mL， 按照2.1.2木香項(xiàng)下操作，配制成6份加樣的供試品溶液，在上述色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算回收率，結(jié)果木香烴內(nèi)酯的加樣回收率為98.32%，RSD為1.4%。

去氫木香內(nèi)酯：取已知含量的木香樣品6份，每份0.1 g，精密稱定，分別加入1.261 g/L的去氫木香內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)液2 mL， 按照2.1.2木香項(xiàng)下操作，配制成6份加樣的供試品溶液，在上述色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算回收率，結(jié)果去氫木香內(nèi)酯的加樣回收率為99.12%，RSD為1.7%。

2.2?浸出物的含量測定^［1］黃芪：取供試品4g，精密稱定，置250 mL錐形瓶中，精密加水100 mL，密塞，冷浸，前6 h內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再靜置18 h，用干燥濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干后，105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，稱定重量。以干燥品計(jì)算水溶性浸出物含量。

木香：取供試品2 g，精密稱定，置250 mL錐形瓶中，精密加70%乙醇100 mL，密塞，稱定重量，靜置1 h后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取續(xù)濾液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿，在水浴上蒸干后，105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，以干燥品計(jì)算醇溶性浸出物含量。

2.3?休止角的測定^［8-10］傾斜法，于矩形盒內(nèi)裝滿樣品飲片，松實(shí)程度適中，將盒逐漸傾斜至粉體開始流出為止，盒子傾斜的角度即為休止角。設(shè)傾斜角的高為H，傾斜角的底邊為L。按照下面公式計(jì)算休止角：tanθ=H/L，算出θ值即為休止角。

3?黃芪、木香微型飲片切制工藝優(yōu)選^［11-13］

3.1?試驗(yàn)設(shè)計(jì)?根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，選取飲片粒徑（A）、片厚（B）、潤制時(shí)間（C）、干燥方式（D）四個(gè)因素，每個(gè)因素分別設(shè)3個(gè)水平，不考慮交互作用，選用L₉（3）⁴正交表安排實(shí)驗(yàn)，黃芪、木香微型飲片切制工藝因素水平安排分別見表2、表3，按2.1、2.2及2.3項(xiàng)下方法分別測定黃芪甲苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量，樣品浸出物含量及休止角。按照綜合加權(quán)評(píng)分法進(jìn)行綜合評(píng)分與分析，黃芪微型飲片切制工藝中選擇黃芪甲苷權(quán)重系數(shù)為30，毛蕊異黃酮葡萄糖苷權(quán)重系數(shù)為30，醇溶性浸出物權(quán)重系數(shù)為30，休止角權(quán)重系數(shù)為10，綜合評(píng)分=30×黃芪甲苷/黃芪甲苷最大值+30×毛蕊異黃酮葡萄糖苷/毛蕊異黃酮葡萄糖苷最大值+30×浸出物/浸出物最大值+10×休止角最小值/休止角；木香微型飲片切制工藝中選擇木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量總和權(quán)重系數(shù)為40，醇溶性浸出物權(quán)重系數(shù)為40，休止角權(quán)重系數(shù)為20，綜合評(píng)分=40×木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量總和/木香烴內(nèi)酯、去氫木香內(nèi)酯含量總和最大值+40×浸出物/浸出物最大值+20×休止角/休止角最大值。

3.2?正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果?試驗(yàn)方法按正交表安排進(jìn)行試驗(yàn)，正交試驗(yàn)測定數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)結(jié)果，黃芪分別見表4、表5，枳殼分別見表6、表7。

3.3?綜合分析?在黃芪微型飲片切制工藝中，因素B對(duì)結(jié)果有顯著影響，而因素A、C、D對(duì)結(jié)果無顯著影響。極差分析認(rèn)為各因素的主次順序是B＞C＞A＞D，由此確定最佳的工藝條件為A₃B₃C₁D₂。在木香微型飲片切制工藝中，極差分析認(rèn)為各因素的主次順序是A＞D＞B＞C，由此確定最佳的工藝條件為A₃B₃C₃D₂。

4?討論

飲片的軟化方式極大地影響飲片的質(zhì)量，一直有“三分刀功七分潤”的說法。大多數(shù)植物藥均需要軟化后切制，本實(shí)驗(yàn)在正式實(shí)驗(yàn)之前進(jìn)行了泡潤軟化、蒸制軟化、減壓軟化、烘箱烘制軟化等多種軟化方法的預(yù)實(shí)驗(yàn)，最終確定泡潤軟化的方法。實(shí)驗(yàn)中考察微型飲片的流動(dòng)性選取休止角作為一個(gè)檢測指標(biāo)，也是為下一步尋找適合微型飲片加工設(shè)備，初步建立微型飲片切制工業(yè)生產(chǎn)線做準(zhǔn)備。

微型飲片與傳統(tǒng)飲片相比，大大增加飲片與溶媒接觸面積，可提高有效成分煎出率。同時(shí)微型飲片還可避免藥材細(xì)粉在煎煮過程中出現(xiàn)粘鍋、煳化現(xiàn)象。結(jié)合木香自身的形狀和硬度，并且根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，選取木香飲片的切制粒徑水平進(jìn)行考察。通過前期的煎膏率實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，木香微型飲片煎出的有效成分的含量均高于傳統(tǒng)飲片，有的甚至高出傳統(tǒng)飲片的三倍甚至更多。參考相關(guān)文獻(xiàn)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果，有理由認(rèn)為由于飲片粒徑變小，相同質(zhì)量的飲片與提取溶劑的接觸面積增大，所以有效成分的溶出更多。

實(shí)驗(yàn)通過對(duì)木香微型飲片大小水平的考察發(fā)現(xiàn)，飲片在一定粒徑范圍內(nèi)，浸出物含量及有效成分會(huì)隨著粒徑的減小而增加。有研究^［14-18］發(fā)現(xiàn)如果飲片過小，煎煮過程中易出現(xiàn)糊鍋及不易過濾的情況。微型飲片在外形上較傳統(tǒng)飲片粒徑小，比細(xì)粉粗。這可以保證微型飲片仍然保有傳統(tǒng)飲片的藥效前提下，盡量提高飲片利用率。

黃芪作為臨床常用大宗中藥材之一，其藥用歷史已有2000年之久，但隨著日益增長的市場需求，黃芪野生資源幾近枯竭，栽培品種因?yàn)樯L環(huán)境等諸多限制，難以滿足市場需求^［19］。那么在有限的黃芪藥材資源前提下，如何最大限度提高飲片利用率，成為目前亟需解決的問題。微型飲片以飲片的形制變革為外在形式，有效成分的提取更完全，煎出率更高為內(nèi)在優(yōu)勢，為提高黃芪飲片的利用率開辟了一條新的道路。

5?結(jié)論

通過正交設(shè)計(jì)，優(yōu)選黃芪、木香微型飲片切制條件為潤制4 h，切制粒徑為7～8 mm，厚度為4 mm，采用陰干方法干燥。由黃芪、木香微型飲片切制工藝結(jié)果可見，微型飲片化大為小，增加了飲片的流動(dòng)性，并且在保留藥材原有的藥效與性狀同時(shí)，更能提高藥材中有效成分的煎出率，這些為下一步實(shí)現(xiàn)智能調(diào)劑和智能煎煮提供參考。

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（收稿日期：2023-04-05?編輯：劉?斌）

基金項(xiàng)目：國家中醫(yī)藥管理局中藥炮制技術(shù)傳承基地項(xiàng)目（國中醫(yī)藥科技［2015］132號(hào)）；遼寧省中醫(yī)藥管理局中藥炮制技術(shù)傳承基地建設(shè)項(xiàng)目。

作者簡介：林桂梅（1982—），女，漢族，博士，副教授，研究方向?yàn)橹兴幣谥茩C(jī)理研究。E-mail： linguimei1982@163.com