董以雷 姚啟蒙 李和朋 趙群峰 李寶華 朱應(yīng)波 劉雪蘭 伏春燕

關(guān)鍵詞：纖維飼糧：肉雞：生長(zhǎng)性能：生化指標(biāo)；腸道發(fā)育

纖維是日糧的重要組成部分。近年來，隨著對(duì)纖維素營(yíng)養(yǎng)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)畜禽日糧中適量添加纖維可以維持腸道正常結(jié)構(gòu)，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，改善腸道微生物區(qū)系，提高機(jī)體免疫力和抗病力。我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)蛋白原料進(jìn)口依賴度高，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局《飼料中玉米豆粕減量替代工作方案》要求推進(jìn)使用谷物和雜粕實(shí)現(xiàn)對(duì)飼料中玉米豆粕的減量替代，增加畜禽日糧纖維素含量、降低蛋白含量、提高飼料轉(zhuǎn)化率，保障養(yǎng)殖業(yè)安全、穩(wěn)定發(fā)展。麩皮、米糠、玉米酒糟及其可溶物（DDGS）均為谷物加工副產(chǎn)物，富含粗纖維、粗蛋白、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分，常作為纖維原料添加在豬、禽、反芻動(dòng)物的飼料中。研究顯示，日糧添加0.5%～1.5%麩皮提高了鵪鶉十二指腸、空腸、回腸的相對(duì)重量和絨隱比，增加體重，提高飼料利用率：用含18%全脂米糠的日糧飼喂28日齡四川鵝，對(duì)57～70日齡階段的生長(zhǎng)性能有積極影響：日糧中添加34.8%米糠可促進(jìn)蘇淮豬十二指腸和空腸絨毛生長(zhǎng)，增加空腸隱窩深度：飼喂含30%DDGS的日糧可降低斷奶仔豬十二指腸絨隱比。

雞可以耐受一定水平的日糧纖維。適宜的纖維水平，可以促進(jìn)肉雞的生長(zhǎng)發(fā)育，但是超過耐受量后，受纖維本身抗?fàn)I養(yǎng)屬性的影響，會(huì)導(dǎo)致肉雞生產(chǎn)性能下降。彭涵等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加5%纖維能夠提高恒大肉雞的生產(chǎn)性能，但當(dāng)纖維水平提高到9%時(shí)，肉雞的日增重顯著降低、料重比顯著增加。當(dāng)肉雞日糧中添加15%DDGS時(shí)，需配合一定量的復(fù)合酶制劑使用。不同來源的纖維因其結(jié)構(gòu)和特性的差異，使其在腸道中的流通速率不同，進(jìn)而對(duì)畜禽采食量、腸道蠕動(dòng)、腸道發(fā)育、微生物菌群等產(chǎn)生不同影響。目前，有關(guān)單一飼糧纖維的飼喂效果，或混合纖維飼料的適宜添加水平的研究較多，而不同來源纖維飼喂效果的比較，特別是對(duì)肉雞生長(zhǎng)發(fā)育影響方面的研究相對(duì)較少。本研究以羅斯308肉雞為動(dòng)物模型，探討麩皮、米糠、DDGS三種不同類型的飼糧纖維對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、機(jī)體免疫功能、小腸發(fā)育、盲腸微生態(tài)平衡的影響，以期為肉雞生產(chǎn)中纖維原料的選擇與使用提供指導(dǎo)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選取1日齡健康、發(fā)育良好的羅斯308肉仔雞480只，采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

飼養(yǎng)試驗(yàn)在山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所試驗(yàn)基地開展。采用玉米一豆粕型基礎(chǔ)飼糧，飼糧營(yíng)養(yǎng)水平參考《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T33-2004）進(jìn)行設(shè)計(jì)，并參考《中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表》（2018年第29版）核算飼糧營(yíng)養(yǎng)水平。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂含2%的麩皮、米糠、DDGS的纖維飼糧。飼糧配方和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)期42d，采用立體籠養(yǎng)。第1周每天光照24h，隨后每周遞減1～2h。試驗(yàn)期間，試驗(yàn)雞自由采食、飲水，按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫接種。

1.3測(cè)定指標(biāo)及方法

1.3.1生長(zhǎng)性能試驗(yàn)期間觀察雞只的健康、采食與排泄物狀況，記錄死淘情況。試驗(yàn)后20d和41d晚9：00對(duì)所有試驗(yàn)雞禁食，次日早9：00以重復(fù)為單位稱量各組試驗(yàn)雞活重、剩余料重，計(jì)算各組平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.3.2血清生化指標(biāo)試驗(yàn)后21d和42d，每個(gè)重復(fù)選取接近平均體重的試驗(yàn)雞2只，稱重后翅靜脈采血2mL，靜置分層后3000r/min離心15min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。紫外分光光度?jì)法測(cè)定血清中總蛋白（TP）含量，酶標(biāo)儀法測(cè)定白蛋白（ALB）、膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）的含量。試劑盒均購(gòu)自武漢基因美科技有限公司。

1.3.3免疫器官指數(shù)將1.3.2中選中的試驗(yàn)雞稱重后屠宰，取胸腺、脾臟、法氏囊等器官并稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

1.3.4消化酶活性取盲腸食糜置于凍存管中，迅速放人液氮中，后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中凍存待測(cè)。參照試劑盒（南京建成生物工程研究所）提供的方法用全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)定盲腸食糜中纖維素酶和木聚糖酶活性。

1.3.5腸道活菌計(jì)數(shù)

使用無菌凍存管收集盲腸內(nèi)容物，液氮速凍后-80℃保存待測(cè)。取相同重量的內(nèi)容物，用生理鹽水進(jìn)行10倍梯度稀釋。取適當(dāng)稀釋倍數(shù)的梯度稀釋液10uL接種到相應(yīng)的培養(yǎng)基上，分別進(jìn)行大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸菌、雙歧桿菌的培養(yǎng)。培養(yǎng)條件見表2。培養(yǎng)結(jié)束后，采用平板計(jì)數(shù)法計(jì)算細(xì)菌數(shù)量，計(jì)算1g腸內(nèi)容物中各種細(xì)菌的數(shù)量，結(jié)果用lg（cfu/g）表示。

1.3.6腸道組織形態(tài)取十二指腸、空腸、回腸中段約1cm腸管，用4%多聚甲醛固定24h后，經(jīng)沖水、脫水、包埋處理后切片（厚度為5um），隨后進(jìn)行蘇木精一伊紅（HE）染色。用普通光學(xué)顯微鏡統(tǒng)計(jì)各腸段的絨毛高度（VH）和隱窩深度（CD），并計(jì)算絨隱比（絨毛高度／隱窩深度，V/C）。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用SAS9.1.3統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Dun-can's法做多重比較分析，P<0.05表示差異顯著。

2結(jié)果與分析

2.1不同纖維飼糧對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

由表3可知，麩皮、米糠、DDGS飼糧對(duì)肉雞各生產(chǎn)性能指標(biāo)均無顯著影響，但可一定程度上增加肉雞的采食量，提高日增重，增加出欄體重，降低料重比。

2.2不同纖維飼糧對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，與基礎(chǔ)日糧組相比，麩皮飼糧顯著降低42日齡肉雞血清TC水平（P<0.05）；米糠飼糧顯著降低42日齡血清TC、TG水平（P<0.05）；DDGS飼糧顯著降低21日齡血清TG水平和42日齡血清TC、TG水平，顯著提高42日齡血清TP水平（P<0.05）。不同類型纖維飼糧對(duì)21日齡肉雞血清TC、TP、ALB水平和42日齡ALB含量均無顯著影響。

2.3不同纖維飼糧對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表5可知，不同類型纖維飼糧對(duì)21日齡肉雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)．法氏囊指數(shù)，以及42日齡的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均無顯著影響。與基礎(chǔ)日糧組相比，米糠、DDGS飼糧顯著提高42日齡肉雞法氏囊指數(shù)（P<0.05）。

2.4不同纖維飼糧對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響

由表6可知，不同類型纖維飼糧對(duì)21日齡肉雞的十二指腸發(fā)育無顯著影響。42日齡時(shí)，米糠飼糧顯著提高十二指腸VH （P<0.05）；米糠、DDGS飼糧均顯著提高十二指腸CD和V/C值（P<0.05）；3種不同纖維飼糧相比，米糠組和DDGS組的VH、V/C均顯著高于麩皮組（P<0.05）。

由表7可知，米糠、DDGS飼糧對(duì)肉雞的空腸發(fā)育均無顯著影響。麩皮飼糧顯著降低21日齡肉雞空腸CD（P<0.05）。

由表8可知，不同類型纖維飼糧對(duì)21日齡肉雞回腸發(fā)育無顯著影響。42日齡時(shí)，麩皮飼糧顯著升高回腸VH、CD（P<0.05），DDGS顯著提高回腸CD（P<0.05），麩皮組回腸VH、CD均顯著高于米糠組（P<0.05）。

2.5不同纖維飼糧對(duì)肉雞盲腸消化酶活性的影響

如表9所示，不同類型纖維飼糧均顯著提高42日齡肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性（P<0.05），且DDGS組兩酶活性最高（P<0.05），米糠組木聚糖酶活性顯著低于其他兩組（P<0.05）。

2.6不同纖維飼糧對(duì)肉雞盲腸微生物含量的影響

不同纖維飼糧對(duì)肉雞盲腸微生物含量的影響見表10。麩皮飼糧顯著降低21日齡肉雞盲腸大腸桿菌以及42日齡大腸桿菌、沙門氏菌和乳酸桿菌的數(shù)量（P<0.05）；米糠飼糧顯著提高21日齡時(shí)沙門氏菌的定植，減少42日齡大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌的定植（P<0.05）；DDGS顯著提高21日齡乳酸桿菌以及42日齡時(shí)各類微生物的定植（P<0.05）。

3種不同的飼糧纖維相比，麩皮組顯著降低21日齡肉雞盲腸中大腸桿菌的數(shù)量（P<0.05），米糠組增加21日齡沙門氏菌的數(shù)量（P<0.05），DDGS顯著增加21日齡乳酸桿菌，以及42日齡時(shí)大腸桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量（P<0.05）。

3討論

3.1不同纖維飼糧對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

日糧纖維通過影響腸道內(nèi)食糜的流通速率、消化黏性、離子交換性能以及食糜的發(fā)酵效率，對(duì)雞的采食量、料重比產(chǎn)生影響。日糧纖維類型、添加水平和肉雞品種、日齡共同影響雞的生產(chǎn)性能。研究顯示，日糧中添加4%～8%的麩皮，對(duì)35日齡肉雞生產(chǎn)性能無負(fù)面影響。飼喂含5%麩皮或米糠的日糧，28日齡星布羅肉仔雞的體增重、采食量和料重比也沒有顯著變化。多項(xiàng)研究報(bào)道，肉仔雞日糧中DDGS的添加水平控制在10%以內(nèi)（前期料中不超過6%），對(duì)生產(chǎn)性能不會(huì)造成顯著影響。本研究中，日糧中添加2%的麩皮、米糠、DDGS對(duì)羅斯308肉雞生長(zhǎng)全期的各生產(chǎn)性能指標(biāo)均沒有顯著影響，與上述研究結(jié)果一致。表明日糧中適量添加麩皮、米糠、DDGS不會(huì)對(duì)肉雞的消化系統(tǒng)、養(yǎng)分吸收能力、飼料利用率等造成負(fù)面影響，也不會(huì)影響肉雞的生產(chǎn)性能，說明羅斯308肉雞對(duì)日糧纖維具有一定的耐受力。但當(dāng)纖維劑量過高時(shí)，則會(huì)降低飼料的有效能，稀釋養(yǎng)分含量，對(duì)肉雞生產(chǎn)性能造成不利影響。這可能與纖維源的溶解性和內(nèi)在理化性質(zhì)有關(guān)。

3.2不同纖維飼糧對(duì)肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)反映了機(jī)體代謝、營(yíng)養(yǎng)水平及健康狀況。研究顯示，日糧中添加纖維可調(diào)節(jié)肉雞血脂，提高機(jī)體氮利用率，促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成。日糧中添加4%的苜蓿草顆粒顯著提高了蘇禽3號(hào)肉種雞血清TP含量，添加5%的粗纖維顯著降低20周齡固始雞血清TC、TG水平。而且，隨著日糧中纖維（苜蓿草粉與DDGS等比例混合）添加水平的增加（2%～6%），42日齡肉雞血清TG水平顯著線性降低，TP含量線性升高。本研究也發(fā)現(xiàn)，日糧添加2%米糠、DDGS均降低42日齡肉雞血清TG水平，而麩皮、米糠、DDGS則顯著降低42日齡肉雞血清TC水平。這可能與日糧添加纖維導(dǎo)致膽汁酸的分泌增加，促進(jìn)脂質(zhì)的乳化和釋放有關(guān)。另有學(xué)者揭示，日糧高纖維通過其果膠成分與膽固醇結(jié)合、木質(zhì)素與膽汁酸結(jié)合而使其隨糞排出，促進(jìn)肝臟中TC合成膽汁酸，減少了TC的積累。血清中TP、ALB水平與機(jī)體蛋白質(zhì)代謝密切相關(guān)，其一定程度上的升高，可促進(jìn)機(jī)體正向作用的加強(qiáng)。本研究中，麩皮、DDGS顯著提高42日齡肉雞血清TP水平，表明機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成能力提高了。這可能是由于日糧纖維的添加改善了消化道的消化能力，影響腸道微生物的繁殖，從而提高日糧中蛋白的消化率。

3.3不同纖維飼糧對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)的影響

在家禽體內(nèi)，胸腺、脾臟、法氏囊是重要的免疫器官，參與機(jī)體免疫過程，其發(fā)育與機(jī)體的免疫能力相關(guān)。研究顯示，日糧添加7%～9%苜蓿草粉可提高大恒優(yōu)質(zhì)肉雞的胸腺指數(shù)和法氏囊指數(shù)：玉米豆粕型日糧中添加15%DDGS可在一定程度上提高肉雞的免疫機(jī)能：前期料中15%DDGS、后期料中25% DDGS均在一定程度上提高了肉雞的法氏囊指數(shù)。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加2%米糠、DDGS顯著升高42日齡肉雞法氏囊指數(shù)，這可能與米糠和DDGS中含有大量不可溶纖維有關(guān)。不可溶纖維主要在雞盲腸中被微生物發(fā)酵，該過程可促進(jìn)微生物菌群的生長(zhǎng)。研究顯示，益生菌在腸道內(nèi)的繁殖，可合成益生元，促進(jìn)免疫器官的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.4不同纖維飼糧對(duì)肉雞小腸發(fā)育的影響

小腸是消化道內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位，養(yǎng)分吸收是小腸絨毛的主要功能，隱窩深度反映了小腸上皮更新的速度。小腸黏膜結(jié)構(gòu)的良好狀態(tài)是養(yǎng)分消化吸收和動(dòng)物正常生長(zhǎng)的生理基礎(chǔ)。日糧纖維的類型和尺寸均影響著腸道的發(fā)育。研究顯示，日糧添加34.8%米糠（日糧粗纖維含量7.5%）顯著增加蘇淮豬十二指腸VH：添加5%苜蓿草粉提高仔豬小腸各段的VH：與玉米秸稈纖維相比，日糧添加23%黑麥草顯著提高吉林白鵝十二指腸、空腸的VH和CD，降低回腸VH、CD。本研究發(fā)現(xiàn)，不同纖維源對(duì)肉雞小腸形態(tài)發(fā)育有不同的影響。日糧添加米糠、DDGS影響出欄肉雞十二指腸的形態(tài)發(fā)育，而麩皮主要影響空腸和回腸的形態(tài)發(fā)育，表明不同纖維源對(duì)小腸不同腸段的影響不同。這可能與不同纖維源在不同腸段的理化性質(zhì)（溶解性、黏性、發(fā)酵性等）以及原料本身的酸性洗滌纖維、中性洗滌纖維含量有關(guān)。

3.5不同纖維飼糧對(duì)肉雞盲腸消化酶活性的影響

畜禽對(duì)纖維素的消化能力有賴于腸道內(nèi)微生物的發(fā)酵作用。日糧纖維通過影響腸道中微生物菌群的生長(zhǎng)，提高腸內(nèi)纖維素酶和木聚糖酶等非淀粉多糖分解酶的活性，從而增強(qiáng)腸道對(duì)纖維素的消化能力。研究顯示，日糧添加高水平纖維使得固始雞盲腸內(nèi)容物的纖維素酶活性顯著升高。本研究結(jié)果也證實(shí)，飼糧添加2%的麩皮、米糠、DDGS均顯著提高42日齡肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性。而3種不同的飼糧纖維相比，DDGS組肉雞盲腸中纖維素酶和木聚糖酶的活性最高，米糠組肉雞盲腸中木聚糖酶的活性顯著低于其他兩組，這可能與不同纖維中非淀粉多糖組成不同有關(guān)。麥麩和DDGS中的非淀粉多糖主要是纖維素和阿拉伯木聚糖，米糠中主要為阿拉伯木聚糖和少量纖維素。且DDGS是玉米生產(chǎn)酒精的副產(chǎn)物，蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪、維生素含量較高，這可能在一定程度上促進(jìn)了腸道中產(chǎn)纖維素酶、木聚糖酶微生物的定植和發(fā)酵活力。

3.6不同纖維飼糧對(duì)肉雞盲腸微生物含量的影響

日糧纖維在一定程度上對(duì)各種致病性棱狀芽孢桿菌能起到防疫屏障作用。日糧纖維能增強(qiáng)雞、豬胃腸功能，調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群繁殖數(shù)量。Ger-ritsen等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中不可溶性非淀粉多糖會(huì)降低斷奶仔豬回腸和盲腸中大腸埃希菌的數(shù)量。這可能與消化飼糧中纖維的菌群競(jìng)爭(zhēng)性抑制大腸桿菌在腸道組織中的黏附有關(guān)，不可溶性非淀粉多糖縮短了食糜在腸道中的通過時(shí)間，并增加后端大腸微生物發(fā)酵底物。本研究也發(fā)現(xiàn)，日糧中添加麩皮、米糠有抑制42日齡肉雞盲腸中大腸桿菌、沙門氏菌定植的效果。但DDGS則有促進(jìn)腸道中各類細(xì)菌定植的效果，這可能與DDGS做為酒精發(fā)酵副產(chǎn)物，本身含有一定量的微生物有關(guān)。此外，麩皮組、DDGS組盲腸中乳酸菌數(shù)量高于米糠組，這可能與麩皮、DDGS提高木聚糖酶活性有關(guān)。研究顯示，木聚糖酶具有促進(jìn)雞盲腸中乳酸菌定植的潛力，通過產(chǎn)生一種新型的乳酸菌，與乳酸菌互補(bǔ)，從而降低致病菌株的定植，提高肉雞生產(chǎn)性能。

4結(jié)論

麩皮、米糠、DDGS雖然對(duì)肉雞各生產(chǎn)性能指標(biāo)沒有顯著影響，但可一定程度上增加肉雞的采食量、出欄體重，提高日增重，降低料重比。3種纖維相比，DDGS能有效降低肉雞血脂水平，提高出欄肉雞血清TP水平、盲腸消化酶活性和益生菌定植，也可促進(jìn)免疫器官發(fā)育，但DDGS也促進(jìn)了盲腸中有害菌的增殖，而麩皮可有效抑制肉雞盲腸中有害菌的增殖，米糠可有效促進(jìn)十二指腸發(fā)育。綜合以上結(jié)果，在肉雞日糧中推薦多種功能纖維配合使用，充分發(fā)揮其各自的優(yōu)勢(shì)，以保障機(jī)體免疫力和腸道健康，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用效率。