段情,李秀芳,黃相艷,房愛(ài)芳

(安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院 婦二科,河南 安陽(yáng) 455000)

宮頸癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤,發(fā)病率隨著年齡的增加而增高[1]。盡管近年來(lái)治療技術(shù)取得了進(jìn)展,但由于耐藥和復(fù)發(fā),宮頸癌的長(zhǎng)期預(yù)后仍然較差[2]。因此,探索宮頸癌的分子機(jī)制,以促進(jìn)患者預(yù)后改善具有重要臨床意義。研究表明,糖酵解和氧化應(yīng)激參與腫瘤發(fā)生發(fā)展[3]。丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,能催化細(xì)胞糖酵解促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)[4]。核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor E2 correlated factor 2,NRF2)是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子,能驅(qū)動(dòng)抗氧化基因發(fā)揮抗氧化作用[5]。已有研究報(bào)道,PKM2、NRF2在宮頸癌組織中呈高表達(dá),與宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[6-7]。探討血清PKM2、NRF2與宮頸癌患者臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系,報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年1月安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院收治的宮頸癌患者92例為宮頸癌組。(1)納入標(biāo)準(zhǔn):年齡≥18歲;符合《宮頸癌及癌前病變規(guī)范化診療指南(試行)》[8]的診斷標(biāo)準(zhǔn),且經(jīng)病理確診;初診且入院前未接受化療、放療及生物免疫治療。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重肝、腎等重要器官功能不全者;合并全身感染及自身血液系統(tǒng)疾病者;合并其他惡性腫瘤;處于哺乳、妊娠期;伴有認(rèn)知障礙和精神異?；颊?資料不完整或隨訪失訪者?；颊吣挲g34～76歲,平均(51.66±9.54)歲。另選取同期55例體檢健康女性為對(duì)照組,年齡26～73歲,平均(50.68±5.18)歲。兩組年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書,本研究經(jīng)安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法

收集宮頸癌組入院次日清晨和對(duì)照組體檢時(shí)3 mL空腹靜脈血,離心15 min分離上層血清,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)PKM2、NRF2水平。

1.3 隨訪和分組

患者出院后通過(guò)門診或電話隨訪,截至2023年1月31日,隨訪時(shí)間3～60個(gè)月,中位隨訪時(shí)間為27.3個(gè)月。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 血清PKM2、NRF2水平

宮頸癌組血清PKM2、NRF2水平高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清PKM2、NRF2水平比較

2.2 血清PKM2、NRF2水平與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系

血清PKM2、NRF2水平與宮頸癌患者分化程度、FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05);與年齡、病理類型、HPV感染、腫瘤直徑無(wú)關(guān)(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 血清PKM2、NRF2水平與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系

2.3 血清PKM2、NRF2水平與宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)系

根據(jù)宮頸癌患者血清PKM2、NRF2水平平均值分為PKM2高水平組(n=46,≥31.69 μg·L-1)、PKM2低水平組(n=46,<31.69 μg·L-1)、NRF2高水平組(n=51,≥10.83 μg·L-1)、NRF2低水平組(n=41,<10.83 μg·L-1)。 92例宮頸癌患者隨訪死亡35例,5 a總生存率為61.96%(57/92)。K-M生存曲線分析顯示,PKM2高水平組總生存率[50.00%(23/46)]低于PKM2低水平組[73.91%(34/46)](χ2=5.870,P=0.015);NRF2高水平組總生存率52.94%(27/51)低于NRF2低水平組73.17%(30/41)(χ2=5.726,P=0.017)。見(jiàn)圖1。

PKM2為丙酮酸激酶M2型;NRF2為核因子E2相關(guān)因子。

2.4 血清PKM2、NRF2水平對(duì)宮頸癌患者預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC曲線分析顯示,血清PKM2、NRF2水平聯(lián)合預(yù)測(cè)宮頸癌患者預(yù)后不良的曲線下面積為0.878,大于血清PKM2、NRF2水平單獨(dú)預(yù)測(cè)的0.791、0.780,見(jiàn)表3和圖2。

表3 血清PKM2、NRF2水平對(duì)宮頸癌患者預(yù)后不良的預(yù)測(cè)價(jià)值

PKM2為丙酮酸激酶M2型;NRF2為核因子E2相關(guān)因子。

3 討論

人乳頭瘤病毒是宮頸癌變的主要病因,早期的宮頸癌一般以手術(shù)切除治療為主,也是最有效的治療有段,但大多患者常因早期無(wú)明顯癥狀而延誤治療,不能進(jìn)行手術(shù)切除而增加死亡風(fēng)險(xiǎn)[9]。及時(shí)評(píng)估患者預(yù)后十分重要,常用如鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原、糖類抗原125等宮頸癌篩查指標(biāo)對(duì)宮頸癌診斷的靈敏度和特異度較低,不能作為宮頸癌患者預(yù)后評(píng)估指標(biāo),有必要尋找其他可靠標(biāo)志物[10]。

惡性腫瘤細(xì)胞具備無(wú)限增殖能力,其生長(zhǎng)過(guò)程中需要消耗大量的能量和原料,糖作為生物體內(nèi)最重要的能源物質(zhì),其分解代謝是能量釋放和轉(zhuǎn)移的重要途徑,由于該過(guò)程類似酵母菌使糖生醇發(fā)酵的過(guò)程,因此被稱為糖酵解[11]。研究表明,腫瘤細(xì)胞無(wú)論是否處于缺氧環(huán)境,均能通過(guò)糖酵解提取能量,糖酵解強(qiáng)度與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)關(guān)系,抑制腫瘤糖酵解可阻斷腫瘤細(xì)胞能量供應(yīng),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞死亡,因此糖酵解成為腫瘤的研究熱點(diǎn)[12]。丙酮酸激酶是糖酵解限速酶之一,能催化磷酸烯醇式丙酮酸生成丙酮酸,再生成乳酸促進(jìn)有氧糖酵解,協(xié)助糖代謝中間產(chǎn)物形成核酸、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等物質(zhì),進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖[13]。丙酮酸激酶存在L型、R型、M1型、M2型共4種類型,其中M2型會(huì)隨著胚胎分化逐漸被L型、R型、M1型取代,但腫瘤細(xì)胞中M2型會(huì)重新升高并取代其他丙酮酸激酶類型[14]。本研究結(jié)果顯示,宮頸癌患者血清PKM2水平升高,分析可能與宮頸癌細(xì)胞形成后PKM2基因異常激活有關(guān)[15]。進(jìn)一步分析顯示,血清PKM2水平與宮頸癌患者分化程度、國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)合會(huì)(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),說(shuō)明血清PKM2水平升高參與宮頸癌發(fā)生發(fā)展,分析其機(jī)制與PKM2升高能通過(guò)糖酵解為宮頸癌細(xì)胞提供生長(zhǎng)所需能量,促進(jìn)其發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

氧化應(yīng)激是體內(nèi)氧化與抗氧化失衡的一種狀態(tài),腫瘤細(xì)胞代謝編程可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基導(dǎo)致的氧化應(yīng)激,損傷細(xì)胞內(nèi)生物大分子,同時(shí)氧化應(yīng)激還能發(fā)揮第二信使功能調(diào)控細(xì)胞內(nèi)重要信號(hào)通路,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞增殖、分化、遷移、侵襲和抗凋亡[16]。NRF2是一種含堿性亮氨酸拉鏈的高度保守的CNC轉(zhuǎn)錄因子,當(dāng)細(xì)胞存在氧化應(yīng)激時(shí)能誘導(dǎo)NRF2入核,結(jié)合抗氧化反應(yīng)元件上調(diào)抗氧化相關(guān)基因,以減少腫瘤細(xì)胞內(nèi)活性氧水平,維持細(xì)胞氧化還原平衡,抑制腫瘤發(fā)生[17]。同時(shí)NRF2作為一種轉(zhuǎn)錄因子,還能與多條信號(hào)通路發(fā)生串?dāng)_,調(diào)控多條腫瘤相關(guān)信號(hào)通路,影響腫瘤細(xì)胞增殖、分化、遷移、侵襲和凋亡[18]。本研究結(jié)果顯示,宮頸癌患者血清NRF2水平升高,分析原因可能是宮頸癌細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激發(fā)生激活了NRF2基因,誘導(dǎo)其大量表達(dá)以抑制該反應(yīng)。進(jìn)一步分析顯示,血清NRF2水平與宮頸癌患者分化程度、FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),說(shuō)明血清NRF2水平升高參與宮頸癌發(fā)生發(fā)展。本研究進(jìn)一步分析宮頸癌患者血清PKM2、NRF2水平與預(yù)后的關(guān)系發(fā)現(xiàn),血清PKM2、NRF2高水平的宮頸癌患者5 a總生存率降低,說(shuō)明血清PKM2、NRF2水平與宮頸癌患者預(yù)后密切相關(guān),有望成為宮頸癌患者預(yù)后潛在指標(biāo)。ROC曲線分析顯示,血清PKM2、NRF2水平聯(lián)合預(yù)測(cè)宮頸癌患者預(yù)后不良的曲線下面積為0.878,大于血清PKM2、NRF2水平單獨(dú)預(yù)測(cè)的0.791、0.780,說(shuō)明血清PKM2、NRF2水平可能成為宮頸癌患者預(yù)后預(yù)測(cè)指標(biāo),且聯(lián)合檢測(cè)血清PKM2、NRF2水平能提升宮頸癌患者預(yù)后不良價(jià)值,更好地指導(dǎo)患者治療。

4 結(jié)論

宮頸癌患者血清PKM2、NRF2水平呈異常高表達(dá),其與惡性臨床病理特征有關(guān),可能成為宮頸癌患者預(yù)后不良的輔助預(yù)測(cè)指標(biāo)。臨床上可通過(guò)監(jiān)測(cè)血清PKM2、NRF2的表達(dá)情況,從而更好地輔助臨床診治宮頸癌及患者預(yù)后生存期的研判。但本研究屬于單中心研究,可能存在選擇偏倚,期待未來(lái)加大樣本量開展多中心研究,同時(shí)PKM2、NRF2參與宮頸癌的具體作用機(jī)制還需更多的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)加以探究。