李瑞麗, 徐志紅, 周 靜, 杜曉英*,,2, 朱 祥*,,2

(1.長江大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，湖北 荊州 434025；2.長江大學(xué) 農(nóng)藥研究所，湖北 荊州 434025)

?；酋啺奉惢衔锞哂辛己玫目拐婢鶾1]、除草[2-3]、抗腫瘤[4]、抗病毒[5]、抗糖尿病[6]等多種生物活性，是近年農(nóng)藥和醫(yī)藥研究的熱點。1995年，Cloudsdale 等[7]研究發(fā)現(xiàn)，N-?；酋啺奉惢衔飯D式1，1)對乙酰羥酸合成酶(AHAS)具有較強的抑制活性，其除草活性 (IC50= 0.3 mg/L) 高于對照藥劑氯嘧磺隆 (IC50= 0.386 mg/L)，具有開發(fā)為防除闊葉雜草除草劑的潛力；由巴斯夫公司開發(fā)的含苯甲酰基磺酰亞胺結(jié)構(gòu)的脲嘧啶類除草劑苯嘧磺草胺[saflufenacil (圖式1，2)][8]，為原卟啉原氧化酶(PPO)類抑制劑，可快速鏟除70 余種闊葉雜草，具有除草效果好、作用快的特點，是第一個作用于玉米田的PPO 類芽前除草劑；劉卓等[9]報道了14 種包含酰基磺酰亞胺結(jié)構(gòu)的新型嘧啶磺酰脲化合物(圖式1，3)，其中有3 種新化合物對黃瓜灰霉病菌、油菜菌核病菌和水稻紋枯病菌表現(xiàn)出一定的抑菌效果；Avupati 等[10]合成了一系列新型二芳基酰基磺酰亞胺結(jié)構(gòu)化合物(圖式1，4)，其中有 2 種化合物具有廣譜抗真菌活性，對枯草芽孢桿菌(NCIM 2063)、短小芽孢桿菌(NCIM 2327)、金黃色葡萄球菌(NCIM 2079)和藤黃微球菌(NCIM 2155) 等 12 種病菌顯示出一定的抗菌活性。由此可見，?；酋啺奉惢衔镌谵r(nóng)用除草劑和殺菌劑開發(fā)方面表現(xiàn)出巨大潛力。

圖式 1 N-?；酋啺烦輨┖鸵志鷦㏒cheme 1 N-Acylsulfonimide herbicides and fungicides

磺草靈(asulox，圖式1，5)，1965 年由英國May&Baker 公司(現(xiàn)拜耳公司)[11-12]研發(fā)，是典型的含?；酋啺方Y(jié)構(gòu)的氨基甲酸酯類廣譜性除草劑，也是目前唯一的二氫葉酸合酶抑制劑類除草劑?；遣蒽`因具有內(nèi)吸傳導(dǎo)性，很容易被植物莖葉吸收傳導(dǎo)至地下根莖的生長點，從而抑制根莖呼吸，阻礙細胞分裂，影響葉酸合成，使植物枯死，是一種較好的除草劑品種。但由于磺草靈長期大量被使用，導(dǎo)致雜草對其抗性增加，田間除草效果下降。Rueb 等[13]發(fā)現(xiàn)，在苯環(huán)上引入N-取代四氫鄰苯二甲酰胺可以提高該類化合物(圖式1，6)的除草活性。為了進一步提高其除草活性，本研究通過在磺草靈苯環(huán)上引入鄰苯二甲酸酐結(jié)構(gòu)，設(shè)計合成了20 個未見文獻報道的化合物 (合成路線見圖式2 )，初步測定了其除草活性和抑菌活性，并對化合物的構(gòu)效關(guān)系進行了初步探討，以期望能夠發(fā)現(xiàn)高活性的化合物，為磺草靈類似物的農(nóng)用活性的開發(fā)和應(yīng)用提供依據(jù)。

圖式 2 目標化合物的合成路線Scheme 2 Synthetic route of target compounds

1 材料與方法

1.1 藥劑與儀器

97.4% 磺草靈原藥，南通泰禾化工股份有限公司；98%多菌靈原藥，江蘇龍燈化學(xué)有限公司；99.5% 對氨基苯磺酰胺和間氨基苯磺酰胺、99.7%鄰苯二甲酸酐、98% 氯甲酸丁酯和98% 氯甲酸異丁酯，均為上海麥克林生化科技股份有限公司產(chǎn)品。

Bruker Avance DPX400 型核磁共振儀 (以TMS 作內(nèi)標物，CDCl3作溶劑)，德國-瑞士布魯克光譜公司；WRR 熔點測定儀 (熔點未校正)，上海精密科學(xué)儀器有限公司；Themo Scientific Q Exactive 型高分辨質(zhì)譜儀 (ESI-MS)，賽默飛世爾科技 (中國) 有限公司；Digital Water Bath SB1000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，日本 EYELA 公司。

1.2 供試植物病原真菌及雜草

油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum、茶葉炭疽病菌Colletotrichum camalliae、水稻惡苗病菌Fusarium moniliforme、白芨白絹病菌Sclerotium rolfii和辣椒疫霉Phytophthora capsici，均由長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理實驗室提供。

稗草Echinochloa crus-galli，由長江大學(xué)農(nóng)藥研究所提供。

1.3 化合物的合成

1.3.1 中間體2a～2t 的合成 參考文獻方法[14]合成。將對氨基苯磺酰胺或間氨基苯磺酰胺(1.17 mmol)、鄰苯二甲酸酐(1 mmol) 和20 mL 的醋酸溶液，在氮氣下于130 ℃回流攪拌過夜，薄層色譜(TLC,V(石油醚) :V(乙酸乙酯) = 14 : 1)檢測至反應(yīng)完全，反應(yīng)液趁熱過濾，濾餅用乙醇進行洗滌，粗產(chǎn)品用V(石油醚) :V(乙酸乙酯) = 1 : 8 重結(jié)晶，進行重結(jié)晶，分別得中間體4-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)苯磺酰胺和3-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)苯磺酰胺 (2a～2t)。

1.3.2 目標化合物3a～3t 的合成 參考文獻方法[15]合成。在室溫下，向100 mL 圓底燒瓶中加入中間體2 (3.96 mmol)和 4-二甲氨基吡啶 (7.90 mmol)溶于二氯甲烷 (12 mL)的溶液，緩慢滴加氯甲酸丁酯(4.76 mmol)，室溫反應(yīng)約1 h，薄層色譜(TLC，V(石油醚) :V(乙酸乙酯) = 2 : 1) 監(jiān)測至反應(yīng)完全。用1 mmol/L 的稀鹽酸(10 mL)酸洗，再用二氯甲烷(20 mL × 3)萃取，合并有機相，減壓濃縮得到粗品，經(jīng)V(二氯甲烷) :V(石油醚) = 1 : 6重結(jié)晶，得到目標化合物3a～3t。

(4-(4-氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3a): 白色固體, 收率89%, m.p.169.2-171.4 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.21 (d,J= 8.4 Hz, 2H), 7.95(t,J= 4.0 Hz, 1H), 7.85 - 7.73 (m, 4H), 4.14 (t,J= 6.8 Hz,2H), 1.67 - 1.56 (m, 2H), 1.42 - 1.26 (m, 2H), 0.93 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 165.18, 164.19,150.45, 137.59, 136.69, 136.43, 135.82, 133.47, 132.42,129.36, 127.06, 126.31, 122.67, 67.20, 30.42, 18.87, 13.63;HRMS-ESI(m/z) C19H17ClN2O6S (M-H)-435.0420 計算值435.0420, 測試值 435.0428.

(4-(5-溴-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯 (3b): 白色固體, 收率87% , m.p.161.2-163.2 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.20 (d,J=8.8 Hz, 2H), 8.14 (s,1H), 8.01 (dd,J= 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d,J= 8 Hz, 1H),7.75 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 4.14 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.54(m, 2H), 1.41 - 1.26 (m, 2H), 0.92 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 165.80, 165.28, 150.48, 138.05,137.55, 136.48, 132.96, 130.03, 129.87, 129.39, 127.48,126.18, 125.52, 67.20, 30.42, 18.87, 13.63; HRMS-ESI(m/z)C19H17BrN2O6S (M-H)-478.9920 計算值478.9920, 測試值478.9922.

(4-(5-硝基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3c): 白色固體, 收率85% , m.p.176.8-179.1 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.83 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 8.75(dd,J= 8.0, 2.0 Hz, 1H), 8.24 (d,J= 8.4 Hz, 3H), 7.82 - 7.74(m, 2H), 4.15 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.56 (m, 2H), 1.42 -1.34 (m, 2H), 0.93 (t,J= 7.4 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 164.52, 164.29, 152.25, 150.36, 138.02, 136.04,135.68, 132.79, 130.11, 129.55, 126.19, 125.52, 119.58, 67.26,30.42, 18.87, 13.62; HRMS-ESI(m/z) C19H17N3O8S(M-H)-446.0660 計算值446.0660, 測試值 446.0667.

(4-(5-氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺酰基) 氨基甲酸丁酯(3d): 白色固體, 收率86% , m.p.167.8-169.6 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.21 (t,J= 2 Hz, 1H), 8.18 - 8.08(m, 2H), 8.00 (dd,J= 8, 1.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.68 (m, 3H), 4.15(t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.66 - 1.55 (m, 2H), 1.40 - 1.26 (m, 2H),0.91 (t,J= 7.6 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ:165.85, 165.33, 150.39, 139.63, 137.96, 132.99, 132.24,131.36, 129.92, 129.84, 127.81, 127.42, 125.92, 125.46, 67.25,30.42, 18.85, 13.63; HRMS-ESI(m/z) C19H17ClN2O6S (M-H)-435.0420 計算值435.0420, 測試值 435.0427.

(3-(4,5,6,7-四溴-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3e): 白色固體, 收率88% , m.p.169.7-172.5 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.22 - 8.13(m, 1H), 7.84 - 7.69 (m, 1H), 7.30 (d,J= 1.6 Hz, 3H), 4.16 (t,J= 6.8 Hz, 2H), 1.61 (d,J= 7.2, 2H), 1.32 (d,J= 7.6 Hz, 2H),0.92 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ:162.00, 150.27, 141.10, 139.75, 131.48, 130.54, 129.96,128.39, 126.93, 126.09, 67.32, 30.42, 18.85, 13.63; HRMSESI(m/z) C19H14Cl4N2O6S (M-H)-536.9250 計算值536.9250, 測試值 536.9260.

(4-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3f): 白色固體, 收率91% , m.p.162.7-164.6 ℃;1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ: 8.21 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 8.03 (dd,J=5.6, 3.2 Hz, 2H), 7.88 (dd,J= 5.2, 2.8 Hz, 2H), 7.78 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 4.14 (t,J= 6.8 Hz, 2H), 1.67 - 1.56 (m, 2H), 1.42 -1.26 (m, 2H), 0.93 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 166.59, 150.46, 137.31, 136.83, 134.99, 131.39,129.34, 126.22, 124.19, 67.16, 30.43, 18.88, 13.63; HRMSESI(m/z) C19H18N2O6S(M-H)-401.0810 計算值401.0810, 測試值 401.0816.

(4-(5-氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸異丁酯(3g): 白色固體, 收率90% , m.p.＞ 220 ℃;1H NMR(400MHz, DMSO-d6)δ: 8.09 (d,J= 2 Hz, 1H), 8.05 - 7.95(m, 2H), 7.86 (d,J= 8.4 Hz, 2H), 7.47 (d,J= 8.4 Hz, 2H),3.49 (d,J= 6.8 Hz, 2H), 1.80 - 1.65 (m, 1H), 0.83 (d,J= 6.4 Hz, 6H);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 166.53, 166.17,159.29, 146.34, 139.96, 135.00, 134.13, 133.09, 130.67,127.78, 126.85, 125.73, 124.05, 70.12, 28.10, 19.74; HRMSESI(m/z) C19H17ClN2O6S (M-H)-435.0420 計算值435.0420,測試值 435.0427.

(4-(4-硝基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3h): 白色固體,76% , m.p.178.2-179.6 ℃;1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 12.19 (s, 1H), 8.39 (d,J= 8.0 Hz, 1H), 8.32 (d,J= 7.2 Hz, 1H), 8.16 (t,J= 7.6 Hz, 1H), 8.13 -8.04 (m, 2H), 7.77 (d,J= 8.4 Hz, 2H), 4.03 (t,J= 6.4 Hz, 2H),1.56 - 1.44 (m, 2H), 1.32 - 1.18 (m, 2H), 0.85 (t,J= 7.2 Hz,3H);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 165.20, 162.65,151.76, 145.05, 139.09, 137.10, 136.34, 133.93, 129.08,128.76, 128.21, 127.72, 123.33, 66.22, 18.82, 13.93; HRMSESI(m/z) C19H17N3O8S(M-H)-446.0660 計算值446.0660,測試值 446.0672.

(4-(4,5,6,7-四溴-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3i): 白色固體, 收率83% , m.p.＞ 220 ℃;1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 12.22 (s, 1H), 8.09 (d,J=8.8 Hz, 2H), 7.74 (d,J= 8.4 Hz, 2H), 4.03 (d,J= 6.4 Hz, 2H),1.55 - 1.44 (m, 2H), 1.34 - 1.18 (m, 2H), 0.85 (t,J= 7.6 Hz,3H);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 162.99, 151.77,139.23, 137.33, 136.33, 131.44, 128.77, 128.29, 121.46, 66.21,30.51, 18.82, 13.95.

(4-(1,3-二氧代-1,3,4,5,6,7-六氫-2H-異吲哚-2-基) 苯基) 磺酰基) 氨基甲酸丁酯(3j): 白色固體, 收率90% , m.p.189.5-190.9 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.13 (d,J= 9.2 Hz, 1H), 7.69 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 4.12 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 2.48(s, 4H), 1.87 (m,J= 3.2 Hz, 4H), 1.65 - 1.54 (m, 2H), 1.40 -1.26 (m, 2H), 0.92 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 169.13, 150.41, 142.41, 137.19, 136.27, 129.29,125.04, 77.39, 77.27, 77.07, 76.76, 67.12, 30.41, 21.27, 20.25,18.86, 13.62; HRMS-ESI(m/z) C19H22N2O6S (M-H)-405.1130 計算值405.1130, 測試值 405.1131.

(4-(5-甲基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3k): 白色固體, 收率91% , m.p.156.7-158.8 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.20 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 7.90(d,J= 7.6 Hz, 1H), 7.84 - 7.71 (m, 3H), 7.66 (d,J= 7.6 Hz,1H), 4.14 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 2.60 (s, 3H), 1.64 - 1.54 (m, 2H), 1.42 -1.26 (m, 2H), 0.93 (t,J= 7.6 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 166.74, 166.59, 150.33, 146.50, 137.13, 137.05,135.56, 131.79, 129.29, 128.81, 126.13, 124.61, 124.07, 77.36,77.25, 77.04, 76.73, 67.16, 30.44, 22.15, 18.86, 13.59; HRMSESI(m/z) C20H20N2O6S (M-H)-415.0970 計算值415.0970,測試值, 415.0978.

(3- (4-氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺酰基) 氨基甲酸丁酯(3l): 白色固體, 收率87% , m.p.126.7-129.2 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.22 (t,J= 2.0 Hz, 1H), 8.17 -8.09 (m, 1H), 7.94 (t,J= 4.0Hz, 1H), 7.86 - 7.66 (m, 4H),4.15 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.55 (m, 2H), 1.40 - 1.27 (m,2H), 0.91 (t,J= 7.6 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ:165.23, 164.26, 150.42, 139.63, 136.60, 135.75, 133.50,132.33, 132.18, 131.46, 129.81, 127.89, 127.09, 125.99,122.62, 67.24, 30.42, 18.85, 13.63; HRMS-ESI(m/z)C19H17ClN2O6S (M-H)-435.0420 計算值435.0420, 測試值435.0424.

(3-(4,5,6,7-四溴-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3m): 白色固體, 收率80% , m.p.＞ 220 ℃;1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ: 12.22 (s, 1H), 8.08 (d,J=8.8 Hz, 2H), 7.72 (d,J= 8.4 Hz, 2H), 4.03 (d,J= 6.4 Hz, 2H),1.55 - 1.43 (m, 2H), 1.34 - 1.18 (m, 2H), 0.85 (t,J= 7.6 Hz,3H);13C NMR (100 MHz, DMSO-d6)δ: 162.99, 151.77,139.23, 137.33, 136.33, 131.44, 128.77, 128.29, 121.46, 66.21,30.51, 18.82, 13.95.

(3- (1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3n): 白色固體, 收率91% , m.p.78.7-80.4 ℃;1H NMR(400 MHz, CDCl3)δ: 8.24 (d,J= 2.0 Hz, 1H), 8.12 (d,J= 7.6 Hz, 1H), 8.02 (dd,J= 5.2, 3.2 Hz, 2H), 7.92 - 7.81 (m, 3H),7.73 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 4.16 (t,J= 6.8 Hz, 2H), 1.67 - 1.56(m, 2H), 1.35 (m,J= 7.2Hz, 2H), 0.91 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 166.60, 150.33, 139.60, 134.87,132.60, 131.44, 129.73, 127.59, 125.96, 124.10, 67.22, 30.43,18.83, 13.58; HRMS-ESI(m/z) C19H18N2O6S (M-H)-401.0810 計算值401.0810, 測試值, 401.0817.

(3- (4-硝基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺酰基) 氨基甲酸丁酯(3o): 白色固體, 收率94% , m.p.148.3-150.7 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.29 (d,J= 7.2 Hz, 1H), 8.27 -8.20 (m, 2H), 8.16 (dd,J= 8, 1.6 Hz, 1H), 8.11 - 8.02 (m, 1H),7.86 - 7.70 (m, 2H), 4.16 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.67 - 1.56 (m,2H), 1.41 - 1.27 (m, 2H), 0.92 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ: 164.21, 161.37, 150.33, 139.85, 136.20,133.45, 131.77, 131.49, 129.92, 129.30, 128.28, 127.74,126.12, 123.12, 77.36, 77.04, 76.72, 67.28, 30.42, 18.83,13.58; HRMS-ESI(m/z) C19H17N3O8S (M-H)-446.0660 計算值446.0660, 測試值, 446.0671.

(3-(4,5,6,7-四氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3p): 白色固體, 收率89% , m.p.176.4-177.9 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.22 - 8.12 (m, 2H),7.83 - 7.68 (m, 2H), 4.15 (t,J= 6.8 Hz, 2H), 1.67 - 1.55 (m,2H), 1.41 - 1.26 (m, 2H), 0.92 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ: 162.01, 150.37, 141.06, 139.76, 131.60,131.47, 130.51, 129.95, 128.37, 126.95, 126.08, 77.39, 77.27,77.07, 76.75, 67.30, 30.41, 18.84, 13.63; HRMS-ESI(m/z)C19H14Cl4N2O6S (M-H)-536.9250 計算值536.9250, 測試值536.9261.

(3-(5-甲基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3q): 白色固體, 收率93% , m.p.101.9-104.1 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.22 (t,J= 2 Hz, 1H), 8.11 (dt,J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 7.92 - 7.78 (m, 4H), 7.76 - 7.61 (m, 2H),4.15 (t,J= 6.4Hz, 2H),2.60 (s, 3H), 1.70 - 1.52 (m, 2H), 1.40 -1.25 (m, 2H), 0.91 (t,J= 7.2 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz,CDCl3)δ: 166.80, 166.66, 150.35, 146.37, 139.54, 135.46,132.74, 131.81, 131.38, 129.66, 128.83, 127.45, 125.88,124.55, 124.00, 67.20, 30.42, 22.14, 18.83, 13.58; HRMSESI(m/z) C20H20N2O6S (M-H)-415.0970 計算值415.0970,測試值, 415.0977.

2) 功率反映柴油機對外做功的能力，是柴油機的重要性能指標。但其功率輸出大小主要由外界需要所決定，通過調(diào)整噴油量來滿足功率需求。功率本身對柴油機故障診斷并沒有實際參考價值，但據(jù)其計算所得單位功率油耗可為故障診斷提供有效地指導(dǎo)。

(3-(5-氯-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3r): 白色固體, 收率86% , m.p.114.9-116.3 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.22 (t,J= 2 Hz, 1H), 8.13 (d,J=8.0 Hz, 1H), 8.01 - 7.92 (m, 2H), 7.83 (dd,J= 8.0, 1.6 Hz,2H), 7.73 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 4.16 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.67 -1.55 (m, 2H), 1.35 (m, 2H), 0.91 (t,J= 7.6 Hz, 3H);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ: 165.65, 150.32, 141.69, 139.68, 134.98,133.08, 132.31, 131.32, 129.81, 129.46, 127.78, 125.91,125.34, 124.48, 77.36, 77.25, 77.04, 76.73, 67.25, 30.43,18.83, 13.59; HRMS-ESI(m/z) C19H17ClN2O6S (M-H)-435.0420 計算值435.0420, 測試值, 435.0433.

(3-(5-硝基-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3s): 白色固體, 收率88% , m.p.118.6-120.1 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.81 (s, 1H), 8.77 - 8.70 (m,1H), 8.22 (d,J= 8.4 Hz, 1H), 8.17 - 8.11 (m, 1H), 7.86 - 7.80(m, 1H), 7.76 (t,J= 8 Hz, 1H), 4.15 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.66 -1.55 (m, 2H), 1.40 - 1.26 (m, 2H), 0.91 (t,J= 7.6Hz, 3H);13C NMR(100 MHz, CDCl3)δ:164.64, 164.41, 152.18, 150.44,139.79, 135.75, 132.81, 131.85, 131.32, 130.05, 130.01,128.15, 125.99, 125.45, 119.49, 77.28, 67.30, 30.40, 18.83,13.63; HRMS-ESI(m/z) C19H17N3O8S (M-H)-446.0660 計算值446.0660,測試值, 446.0676.

(3-(5-溴-1,3-二氧代異吲哚啉-2-基) 苯基) 磺?；? 氨基甲酸丁酯(3t): 白色固體, 收率90% , m.p.116.2-118.3 ℃;1H NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.20 (s, 1H), 8.11 (dd,J= 9.2,2 Hz, 2H), 7.99 (dd,J= 8.0, 2 Hz, 1H), 7.87 (d,J= 8.0 Hz,1H), 7.81 (d,J= 9.2 Hz, 1H), 7.72 (t,J= 8.0 Hz, 1H), 4.14 (t,J= 6.4 Hz, 2H), 1.65 - 1.53 (m, 2H), 1.39 - 1.25 (m, 2H), 0.90(t,J= 7.6 Hz, 3H);13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ: 165.89,165.36, 150.53, 139.64, 137.95, 132.98, 132.22, 131.33,129.89, 129.83, 127.78, 127.39, 125.89, 125.47, 67.24, 30.40,18.83, 13.63; HRMS-ESI(m/z) C19H17BrN2O6S (M-H)-478.9920 計算值478.9920, 測試值, 478.9934.

1.4 生物活性測定

1.4.1 抑菌活性的測定 采用菌絲生長速率法[16]測定目標化合物3a～3t 對5 種植物病原真菌的抑菌活性。將50 mg 待測化合物用1 mL 二甲基亞砜(DMSO)溶解，用含體積分數(shù)為0.1%吐溫80 的滅菌去離子水定容至100 mL，得到500 mg/L 的藥液。取5 mL 藥液加到45 mL PDA 培養(yǎng)基中均勻混合，待其冷卻凝固。在供試菌種菌落邊緣打取直徑7 mm 的菌餅，接種至上述含藥培養(yǎng)基平板中央。將培養(yǎng)基置于28 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每處理重復(fù)3 次。以含1 mL DMSO 的0.1%吐溫80 滅菌去離子水為空白對照，以磺草靈、多菌靈原藥為陽性對照。待空白對照處理組的菌絲長至培養(yǎng)皿的三分之二處時，用十字交叉法測量各處理組菌落直徑，按 (1) 式計算菌絲生長抑制率。

式中：I為抑制率；Dc為對照菌落直徑，mm；Dt為處理菌落直徑，mm；D0為菌餅直徑，mm。

1.4.2 除草活性的測定 采用盆栽法[17]測定目標化合物對稗草的除草活性。在直徑11 cm、高9 cm的花缽裝上育苗基質(zhì)，將催芽至露白的草種均勻地撒在上面，覆淺土，盆底滲透吸水。播種后移入溫室培養(yǎng)，溫度25～30 ℃，濕度60%～80%，光照/黑暗 = 14 h/10 h，待稗草生長至二葉一心備用。

供試藥劑初篩質(zhì)量濃度為150 mg/L，采用HCL-500 智能生測噴霧塔進行莖葉噴霧處理(壓力2.5 kPa)，以磺草靈為對照藥劑，清水為空白對照，自然晾干后移至溫室進行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件同上。處理15d 后觀察中毒癥狀并按 (2) 式計算鮮重抑制率。

式中：IFw為鮮重抑制率，%；mc為對照雜草地上部分鮮重；mt為處理雜草地上部分鮮重。

2 結(jié)果與討論

2.1 化合物的合成

以不同取代基的苯甲酸酐與間位或者對位苯磺酰胺進行縮合，以較高收率 (75%～95%) 獲得了4-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)苯磺酰胺和3-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)苯磺酰胺中間體2a～2t ，化合物2 再與氯甲酸丁酯或氯甲酸異丁酯發(fā)生縮合反應(yīng)，得到目標化合物3a～3t，部分化合物可用二氯甲烷和石油醚重結(jié)晶獲得，其余化合物需要通過柱層析純化。

2.2 目標化合物的生物活性

2.2.1 離體抑菌活性 測試結(jié)果 (表1) 表明：在50 mg/L 時，部分化合物對油菜菌核病菌、茶葉炭疽病菌、白芨白絹病菌和辣椒疫霉均具有良好的抑制作用，在 50 mg/L 下，化合物 3n 對白芨白絹病菌抑菌率為63.70%，化合物3f、3n 和3q 對油菜菌核病菌的抑制率分別為63.98%、79.56%和77.83%，其中化合3n、3q 的抑菌活性優(yōu)于磺草靈，化合物3q 對茶葉炭疽病菌的抑菌率為68.75%，部分化合物對辣椒疫霉的抑菌率高于50% 以上，抑菌活性優(yōu)于或相當于多菌靈。

表1 目標化合物對 5 種植物病原菌菌絲生長的抑制作用Table 1 Inhibitory of target compounds against five pathogenic fungi in vitro

根據(jù)初篩結(jié)果，測定了部分化合物對油菜菌核、茶葉炭疽病菌和白芨白絹病菌的EC50值。結(jié)果 (表2) 表明，化合物 3q 對油菜菌核病菌和茶葉炭疽病菌的EC50值分別為10.49 mg/L 和21.57 mg/L，抑菌活性均高于對照藥劑磺草靈?；衔?3n 對白芨白絹病菌的EC50值為28.26 mg/L，抑菌活性優(yōu)于磺草靈。

表2 部分目標化合物對供試植物病原菌的EC50 值Table 2 The EC50 values of some target compounds against pathogenic fungi

初步構(gòu)效關(guān)系分析結(jié)果表明，在目標化合物的苯環(huán)上引入不同取代基 (R)，會對化合物的抑菌活性產(chǎn)生影響。從3f和3n對油菜菌核病菌的抑制活性可以看出：當 R 為無取代時，間位的?；酋啺方Y(jié)構(gòu)活性優(yōu)于對位的。從3n、3q和3r對油菜菌核病菌的抑制活性可以看出：間位結(jié)構(gòu)供電子基的抑菌活性優(yōu)于吸電子基的。總之，當磺草靈類似物苯環(huán)上是無取代或者有甲基這樣的供電子基時抑菌活性增強。

2.2.2 除草活性 除草活性測定結(jié)果 (表3) 顯示：經(jīng)150 mg/L 的化合物處理后，大部分處理組的稗草葉片經(jīng)過先變細、發(fā)白的中毒癥狀后返青，表明目標化合物的除草活性較差，只有化合物3a除草效果較好，平均鮮重防效為52.48%，但低于對照藥劑磺草靈(71.68%)。

表3 目標化合物對稗草的除草活性Table 3 Herbicidal activity of target compounds on Echinochloa crus-galli

初步的構(gòu)效關(guān)系分析表明，與磺草靈相比，目標化合物的除草譜減少，除草活性降低，說明引入大體積的酸酐對化合物的除草活性無益，進一步研究表明，當酸酐的3 號位是鹵素氯時具有一定的除草活性，其活性優(yōu)于3 位供電子基取代的化合物。

3 結(jié)論

本研究通過活性亞結(jié)構(gòu)拼接的方式，設(shè)計合成了20 個未見文獻報道的新型?；酋啺奉惢衔?，其結(jié)構(gòu)均通過1H NMR、13C NMR 和高分辨質(zhì)譜表征確認。抑菌活性結(jié)果表明：在50 mg/L時，大部分目標化合物對油菜菌核病菌、茶葉炭疽病菌、白芨白絹病菌和辣椒疫霉具有一定的抑制作用。化合物3f、3n和3q對油菜菌核病菌的抑菌活性較好，其中化合物3q對油菜菌核病菌的抑菌活性最好，優(yōu)于磺草靈；化合物3n對白芨白絹病菌也有具有較好的抑菌活性，其余大部分化合物的殺菌活性并未達到預(yù)期。除草活性結(jié)果表明，在150 mg/L 時，化合物3a對稗草表現(xiàn)出一定的除草活性，但低于對照藥劑磺草靈，除草活性并不理想。說明酸酐基團的引入沒有提高酰基磺酰亞胺類化合物的除草活性，但能顯著提高其抑菌活性。本研究經(jīng)過試驗證明引入酸酐，部分化合物在母體磺草靈的基礎(chǔ)上提高了抑菌活性?？梢酝ㄟ^進一步結(jié)構(gòu)修飾作為抗真菌劑的候選物質(zhì)，這為進一步尋求新的具有生物活性的物質(zhì)提供了有價值的先導(dǎo)化合物。