易少威，王 浙，阮建華，胡凱燕，奧 琪，任紫鈺，趙 躍，丁奉興，劉 晨，劉晏利，李朝霞，馬 彬，3

1.蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院循證醫(yī)學(xué)中心（蘭州 730000）

2.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院（蘭州 730000）

3.甘肅省循證醫(yī)學(xué)與臨床轉(zhuǎn)化重點實驗室（蘭州 730000）

4.甘肅省第二人民醫(yī)院科研與研究生科（蘭州 730000）

5.西北民族大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院（蘭州 730000）

動物實驗是實現(xiàn)科學(xué)研究從分子細胞水平到臨床試驗研究的重要橋梁與紐帶，對理解疾病和尋找新的具有潛在價值的疾病治療方法貢獻巨大[1]。然而，近年來動物實驗的質(zhì)量和可信度受到了越來越多的質(zhì)疑。由于動物實驗結(jié)果的可重復(fù)性較差，與臨床試驗結(jié)果不一致性較高，其結(jié)果臨床轉(zhuǎn)化時的生物學(xué)風險明顯增加，導(dǎo)致后期臨床轉(zhuǎn)化成功率不足。如中風和多發(fā)性硬化在臨床前動物實驗領(lǐng)域積累了大量的陽性結(jié)果數(shù)據(jù)，但僅有極少數(shù)的干預(yù)措施被臨床驗證有效[2]，超90%的腫瘤學(xué)Ⅲ期臨床試驗未能達到其動物實驗預(yù)期研究結(jié)局[3]。在美國2003—2011年進入I期臨床試驗的489種抗腫瘤藥物中，僅13.2%的抗腫瘤藥物最終獲得臨床批準[3-4]，導(dǎo)致以上問題最主要的原因可能與臨床前動物實驗的發(fā)表偏倚和選擇性報告現(xiàn)象有關(guān)[5]。

在臨床研究領(lǐng)域，自2004年起WHO要求對所有臨床試驗進行強制預(yù)注冊，使試驗在起始階段公開，提高試驗的透明度，以盡可能減少由于利益沖突、選擇性報告等因素導(dǎo)致的發(fā)表偏倚[6]。預(yù)先注冊制度有助于促進醫(yī)學(xué)研究的規(guī)范化和標準化，增加研究結(jié)果的透明度和可追溯性，并且目前多個研究已經(jīng)顯示預(yù)注冊是一種有效降低發(fā)表偏倚的手段[6-7]。在動物實驗領(lǐng)域進行預(yù)注冊也有助于減少選擇性報告，最終提高動物實驗的倫理性和結(jié)果可靠性[8]。因此，為提高動物實驗的質(zhì)量和可信度，應(yīng)對動物研究中的“發(fā)表偏倚”和“可重復(fù)性危機”[9]，提高原始動物實驗的透明度、可靠性和重復(fù)性，進一步提升臨床前動物實驗的轉(zhuǎn)化效益，一些學(xué)者提出預(yù)先注冊原始動物實驗的建議[8,10-11]，即在開展動物實驗之前，有必要將動物實驗的目的、設(shè)計、方法、預(yù)期結(jié)果等信息公開登記在一個專門的平臺上，便于其他研究者和利益相關(guān)者進行監(jiān)督和評估，以期對動物實驗發(fā)表之后選擇性報告陽性結(jié)果的行為起到一定的約束作用[12]。

本文將對當前全球已有的動物實驗注冊平臺及其注冊流程進行詳細介紹，以提高科研人員對動物實驗進行預(yù)注冊的意識，并為國內(nèi)學(xué)者進行注冊提供參考。

1 動物實驗預(yù)注冊平臺簡介

全球目前有兩個專門針對原始動物實驗的預(yù)注冊平臺，分別為2017年由PCT（preclinicaltrials）工作組籌建的PCT平臺和2019年由德國實驗動物保護中心籌建的ASR（animalstudyregistry）平臺。

1.1 動物實驗預(yù)注冊平臺基本信息

2014年，PCT工作組在全球首次提出臨床前動物實驗需要進行注冊的理念[12]，2017年籌建了PCT注冊平臺，該平臺成為全球第一個專門用于動物實驗方案預(yù)注冊的平臺，隸屬于荷蘭心臟病研究所[12]。PCT平臺成立兩年之后，2019年德國實驗動物保護中心推出了ASR預(yù)注冊平臺，接受全球的動物實驗預(yù)注冊[12]。

申請者在ASR注冊后會自動獲得一個數(shù)字對象標識符（DOI），該標識符具有全球唯一性，不會隨著時間的推移而發(fā)生變化，以確保注冊實驗的唯一性[13-14]。PCT平臺聯(lián)合大學(xué)醫(yī)療中心、動物福利機構(gòu)等多方機構(gòu)進行注冊信息表的設(shè)計和驗證，確保了表格設(shè)計的嚴謹性[12]，ASR平臺則通過提供詳細的注冊信息介紹來幫助科學(xué)家規(guī)劃他們的研究，涉及研究設(shè)計、方法和統(tǒng)計等方面[13]。兩個注冊平臺對預(yù)注冊動物實驗的研究領(lǐng)域均不限制，且均為免費[12-13]。

兩個平臺自成立以來，已接受了來自全球多個國家的注冊申請（PCT：23個國家；ASR：17個國家），目前已注冊計劃書的總數(shù)為282項（PCT：163項；ASR：153項），詳細國家分布及注冊數(shù)量見圖1。

圖1 PCT平臺和ASR平臺已注冊計劃書數(shù)量及國家分布情況Figure 1.Number of registered plans and country distribution on the PCT platform and ASR platform

1.2 動物實驗預(yù)注冊平臺差異

相比較于臨床試驗注冊數(shù)量而言，PCT注冊平臺與ASR注冊平臺上注冊的動物實驗計劃書數(shù)量均不高，同時兩個平臺不會直接提供計劃書作者姓名信息。就注冊計劃書的審核標準而言，兩個注冊平臺之間存在一定差異，PCT平臺會對提交計劃書的詳細內(nèi)容進行審核，而ASR平臺僅對提交的計劃書進行系統(tǒng)審查，如基礎(chǔ)語法等，并不會對計劃書中具體內(nèi)容進行審核，但ASR平臺會為注冊的動物實驗分配DOI號，PCT平臺只分配注冊號（DOI為數(shù)字資源唯一的編號，而注冊號只是注冊平臺分配的編號，不一定具有唯一性）。此外，為了保障數(shù)據(jù)安全，兩個平臺均會為研究進行禁運保護，PCT平臺禁運保護期默認為1年，ASR禁運保護期默認最高為5年，但可以進行調(diào)整，具體內(nèi)容見表1。

表1 PCT注冊平臺和ASR注冊平臺差異Table 1.Differences between PCT registration platform and ASR registration platform

2 動物實驗預(yù)注冊內(nèi)容及流程

2.1 PCT注冊內(nèi)容

PCT平臺注冊內(nèi)容共包括實驗的基本信息、實驗的設(shè)計信息、聯(lián)系方式細節(jié)和提交情況4個部分共28個條目信息（表2）。

表2 PCT注冊平臺注冊所需條目內(nèi)容Table 2.Contents of entries required for registration on the PCT registration platform

2.2 ASR注冊平臺注冊內(nèi)容

ASR注冊所需條目內(nèi)容涵蓋了ARRIVE指南中部分核心和推薦條目，即第1至4條和第6至13條[15]，注冊內(nèi)容包括了基本信息、實驗設(shè)計、方法、統(tǒng)計學(xué)和動物5個部分共37個條目（表3）。

表3 ASR注冊平臺所需條目內(nèi)容Table 3.The required entries for the ASR registration platform

2.3 PCT及ASR注冊流程

PCT平臺和ASR平臺注冊流程類似，流程均比較簡單方便，具體注冊流程見圖2。

圖2 PCT及ASR平臺注冊流程Figure 2.PCT and ASR platform register process

3 討論

不同于臨床試驗，基礎(chǔ)實驗研究在預(yù)注冊時，研究者普遍關(guān)心的主要問題是，如果一項實驗的思路和全部內(nèi)容在最終研究論文發(fā)表之前就可見，那么想法可能會被其他研究者模仿甚至有可能被盜用[16]，這可能會成為一項實驗性研究預(yù)注冊的巨大阻力。因此，為了解決這個問題，PCT平臺和ASR平臺均提供了注冊條目的可見性限制（禁運）時間1年或者長達 5 年的措施。在此期間，PCT會隱去實驗關(guān)鍵信息，而ASR僅對實驗標題、簡短摘要以及機構(gòu)名稱和研究人員的姓名（可選）設(shè)置為公開可見。

但在整個禁運期內(nèi)，研究人員自己可以下載注冊研究的PDF，其中包含所有研究詳細信息和源數(shù)據(jù)，這些詳細信息和源數(shù)據(jù)可以附加到提交出版的手稿中。因此，投稿至期刊時同行評審專家能夠?qū)⒃佳芯糠桨概c提交的手稿進行比較。既保證了數(shù)據(jù)安全也可以有效解決發(fā)表偏倚和選擇性報告的問題[13]。

此外，值得注意的是，在 ASR 平臺中注冊的每項研究都會自動收到 DOI，該數(shù)字對象標識符將研究標記為研究人員的知識產(chǎn)權(quán)。該平臺嵌入在德國聯(lián)邦政府的基礎(chǔ)設(shè)施中。因此，保障了平臺的持續(xù)運行和數(shù)據(jù)安全性。

動物實驗的可重復(fù)性差不僅損害了此類研究的可信度，還引起了公眾對不合理使用實驗動物的擔憂[17]。隨著研究的預(yù)注冊，研究有關(guān)計劃書和進行動物實驗的完整數(shù)據(jù)將被保留以供科學(xué)界使用，這可以在一定程度上提升動物實驗的可重復(fù)性。

PCT和ASR平臺都是為動物實驗研究提供注冊服務(wù)的國際性平臺，目前已有多個國家的研究者使用這兩個平臺對其開展的動物實驗進行預(yù)注冊，這說明動物實驗研究的注冊意識在全球范圍內(nèi)逐漸提高。

檢索PubMed數(shù)據(jù)庫顯示，僅2022年有255 881篇動物實驗研究被發(fā)表[18]，但就目前已有的注冊數(shù)量而言，PCT和ASR平臺上注冊的動物實驗計劃書數(shù)量均較少，遠低于每年進行的動物實驗數(shù)量。WHO現(xiàn)要求所有的臨床試驗進行強制注冊，以盡可能減少發(fā)表偏倚帶來的影響。目前已建立了39個臨床試驗的注冊平臺[6]，截止2023年6月，僅美國（www.clinicaltrials.gov）和中國（www.chictr.org.cn）臨床試驗注冊平臺上注冊的臨床試驗注冊量分別高達457 560[19]項和68 171[20]項；遠高于目前動物實驗注冊平臺上注冊計劃書的數(shù)量，表明動物實驗研究的注冊還處于起步階段，需要進一步推廣和普及。

動物實驗研究的注冊不足可能不僅與研究者意識相關(guān)，也一定程度上與PCT和ASR平臺有關(guān)，PCT和ASR平臺在注冊流程和要求上存在差異，主要體現(xiàn)在注冊號獲取時間、注冊信息更新、DOI號分配、注冊研究審核和研究保護情況等方面。這些差異可能會影響研究者選擇注冊平臺的偏好和動機，也可能會對注冊研究的質(zhì)量和影響力產(chǎn)生一定的影響。PCT平臺相對于ASR平臺，具有更嚴格的審核機制和更短的保護期限，這可能會增加研究者注冊的難度和風險，但也可能會促進研究者更加規(guī)范地設(shè)計和執(zhí)行動物實驗，以及更快地公開和分享研究結(jié)果。ASR平臺相對于PCT平臺，具有更簡便的注冊過程和更長的保護期限，這可能會降低研究者注冊的門檻和壓力，但也可能會導(dǎo)致一些低質(zhì)量或重復(fù)性的動物實驗被注冊。因此在選擇平臺時，研究者需要對不同注冊平臺的優(yōu)缺點進行評估和比較，以便研究者找到更合適和有效的注冊服務(wù)。

總之，動物實驗注冊是提高動物實驗透明度和可信度的重要措施，也是促進動物實驗規(guī)范化的有效途徑。通過本文的介紹，能夠增加國內(nèi)研究者對動物實驗注冊的認識和關(guān)注，鼓勵更多的研究者使用PCT或ASR平臺對自己的動物實驗進行預(yù)注冊，同時也期待這兩個平臺能夠根據(jù)研究者的需求和反饋，不斷完善自己的注冊流程和要求，研究者和平臺一起努力為動物實驗研究提供更好的支持和服務(wù)。