陳利平

兩當(dāng)縣云屏畜牧獸醫(yī)站,甘肅 兩當(dāng) 742400

0 引言

法氏囊是雞的一個(gè)免疫器官。傳染性法氏囊炎最主要的特征是引起免疫抑制,嚴(yán)重削弱雞的身體免疫,所以感染該病的雞抵抗力會(huì)非常低,容易感染大腸桿菌、球蟲(chóng)等,增加雞的死亡率。因此對(duì)傳染性法氏囊炎的流行特點(diǎn)以及診治手段進(jìn)行分析是十分必要的,能夠更好地預(yù)防該病,提升治愈率,減少該病帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失,推動(dòng)雞養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定發(fā)展。

1 雞傳染性法氏囊炎病原學(xué)

雞傳染性法氏囊炎的致病原是雞傳染性法氏囊炎病毒,這種病毒為雙鏈RNA病毒,病毒粒子大小為55～75 nm,周?chē)淮嬖谀夷?主要由核芯與外殼組成。雞傳染性法氏囊病毒形態(tài)不一,有的形狀是卵圓形,有的形狀是六邊形。雞傳染性法氏囊炎病毒對(duì)外界的抵抗力較強(qiáng),尤其是對(duì)乙醚、氯仿等有著較強(qiáng)的抵抗力,可以在酸性(pH=3)、中性(pH=7)、弱堿性(pH=7.5)條件下存活,在堿性條件下(pH=12)會(huì)失活。雞傳染性法氏囊炎病毒不耐高溫,但對(duì)低溫條件有著較強(qiáng)的耐受性。在-58 ℃條件下,雞傳染性法氏囊炎可以存活長(zhǎng)達(dá)18個(gè)月。雞傳染性法氏囊炎病毒還可以抵抗紫外線照射,但在石炭酸溶液中,30 min可以滅活。

2 流行特點(diǎn)

雞傳染性法氏囊炎具有明顯的季節(jié)性發(fā)病,尤其6、7月份是雞傳染性法氏囊炎的發(fā)病高峰期,此時(shí)的天氣高溫多雨,濕氣較大,容易發(fā)病。雞傳染性法氏囊炎通常是突然發(fā)病,且短時(shí)間內(nèi)大范圍傳播,一旦雞群內(nèi)出現(xiàn)了感染個(gè)例,1～2 d整個(gè)雞群即可全部感染,第3天開(kāi)始出現(xiàn)死亡病例,如果后續(xù)不及時(shí)進(jìn)行治療,死亡數(shù)量將會(huì)不斷增加,5～7 d可達(dá)到死亡高峰。雞傳染性法氏囊炎除了會(huì)接觸性傳播,還會(huì)通過(guò)被污染的水、飼料、飼養(yǎng)工具等進(jìn)行間接傳播,或通過(guò)種蛋進(jìn)行垂直傳播,且小粉甲蟲(chóng)也是雞傳染性法氏囊炎的傳播媒介。該病的發(fā)病日齡在不斷增長(zhǎng),以往3～10日齡雞具有較強(qiáng)的易感性,當(dāng)前180日齡的雞也會(huì)感染雞傳染性法氏囊炎[1]。以往各品種的雞是雞傳染性法氏囊炎病毒的天然宿主,但近年來(lái)臨床上也出現(xiàn)了鵝、鴨等禽類(lèi)感染雞傳染性法氏囊炎或者攜帶致病病毒。雞傳染性法氏囊炎的非典型病例的數(shù)量在不斷增加,并且這種疾病容易反復(fù)出現(xiàn),即使對(duì)發(fā)病雞注射抗體,依然會(huì)有復(fù)發(fā)的可能性。在同一個(gè)雞場(chǎng)內(nèi),不同批次的雞存在相繼發(fā)病情況。

雞傳染性法氏囊炎帶來(lái)的危害不僅體現(xiàn)在疾病本身,還會(huì)嚴(yán)重削弱雞的身體免疫力,致使各種疫苗免疫應(yīng)答遭受負(fù)面影響,嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致其他疾病疫苗免疫失敗。因?yàn)樵摷膊【哂休^強(qiáng)的免疫抑制功能,所以導(dǎo)致雞很容易繼發(fā)感染其他疾病,增加病雞的死亡率。

3 癥狀表現(xiàn)

雞傳染性法氏囊炎潛伏期為2～3 d,發(fā)病初期,病雞精神沉郁,有自啄肛門(mén)的表現(xiàn),食欲減退,身體消瘦,羽毛雜亂、失去光澤,病雞喜臥、嗜睡。發(fā)病后期病雞開(kāi)始出現(xiàn)腹瀉癥狀,排便呈水樣,糞便顏色為黃色或者白色,一般間隔20～30 min排1次便。病雞的頸部、身體出現(xiàn)不受控制的震顫,走路搖搖晃晃,頭部下垂,眼瞼閉合,隨著排稀便次數(shù)的增加,病雞會(huì)出現(xiàn)脫水癥狀,眼窩深陷,最終病雞會(huì)因?yàn)樯眢w衰弱或者繼發(fā)感染其他疾病而死亡。急性感染雞傳染性法氏囊炎的病雞,通常會(huì)突然發(fā)病,病雞精神萎靡不振,食欲廢絕,經(jīng)常性縮頸,飲水量明顯增加。急性發(fā)病的雞在1～2 d后,就會(huì)死亡。

4 病理剖檢

對(duì)病死雞進(jìn)行剖檢可以發(fā)現(xiàn),病死雞脫水情況嚴(yán)重,身體消瘦明顯,腿部、胸部的肌肉存在出血情況,腺胃、肌胃交界處可以發(fā)現(xiàn)有條狀的出血點(diǎn),腎臟顏色蒼白,明顯腫大,腎小管與輸尿管明顯擴(kuò)張,輸尿管內(nèi)有尿酸鹽潴留,脾臟呈輕度腫脹,在脾臟表面可以發(fā)現(xiàn)有呈彌散性分布的壞死性病灶,病灶的顏色為灰色。病死雞法氏囊病變最為明顯,可以發(fā)現(xiàn)法氏囊內(nèi)部的黏液增多,整體出現(xiàn)明顯的水腫現(xiàn)象,并伴有出血情況,且表面覆蓋有膠樣滲出物,顏色為黃色。法氏囊體積與重量異常增大,與正常法氏囊相比,增大了約2倍[2]。

5 診斷

5.1 病毒分離鑒定

先獲取病死雞樣本,樣本來(lái)源可以是病死雞的法氏囊、脾臟組織,在無(wú)菌條件下將樣本進(jìn)行磨碎處理,然后加入肉湯與滅菌生理鹽水,二者比例為1：5,制作成懸液,隨后對(duì)懸液進(jìn)行離心沉淀,取上層清液后,加入1 000 IU/mL青霉素與1 000 IU/mL鏈霉素,間隔6 h后,取上層清液,然后通過(guò)絨毛尿囊膜,接種到10日齡雞胚之中。一般情況下,接種標(biāo)準(zhǔn)毒株的雞胚,會(huì)在3～5 d死亡,而雞傳染性法氏囊病毒的變異株,一般對(duì)雞胚不具備致死性。對(duì)接種標(biāo)準(zhǔn)毒株的陽(yáng)性對(duì)照雞胚進(jìn)行解剖后,可以發(fā)現(xiàn)雞胚的個(gè)頭較矮小,整體充血明顯,在趾關(guān)節(jié)與大腦部位,可以發(fā)現(xiàn)有明顯的出血斑點(diǎn),雞胚的肝臟壞死明顯,肝臟的顏色較淡,類(lèi)似熟肉樣;對(duì)接種變異毒株陽(yáng)性對(duì)照雞胚進(jìn)行剖檢后,可以發(fā)現(xiàn)雞胚大腦與腹部皮下存在明顯的水腫情況,雞胚的整體發(fā)育比較遲緩,雞胚的顏色呈奶油色,肝臟常有膽汁著色,有的肝臟壞死比較明顯,雞胚的脾臟異常腫大,顏色沒(méi)有明顯的變化。在陰陽(yáng)性對(duì)照成立的情況下,如果樣品病變與陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果相同,則判定為樣本雞傳染性法氏囊炎病毒疑似陽(yáng)性,需要收集病料,采用其他方法進(jìn)一步確診。

5.2 血清學(xué)試驗(yàn)

采用血清學(xué)試驗(yàn)診斷方法對(duì)雞傳染性法氏囊炎進(jìn)行診斷,優(yōu)勢(shì)在于特異性較強(qiáng),陽(yáng)性檢出率較高。常用的血清型試驗(yàn)方法如下。

5.2.1 瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)

該試驗(yàn)在無(wú)菌條件下對(duì)樣本進(jìn)行靜脈采血,采血量為1 mL,然后分離血清進(jìn)行檢測(cè)。在檢測(cè)時(shí),采用單梅花孔方法進(jìn)行打孔,在中央孔內(nèi),滴加標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性抗原,在外側(cè)兩孔內(nèi),滴加標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清,然后溫育24 h,最后根據(jù)沉淀線的位置與形狀,完成陽(yáng)性、陰性以及可疑結(jié)果的判定。如果判定可疑結(jié)果,后續(xù)還需要復(fù)檢。

5.2.2 直接免疫熒光試驗(yàn)

該試驗(yàn)采用法氏囊組織作為樣本,對(duì)樣本進(jìn)行壓片處理。先采用丙酮進(jìn)行固定,再進(jìn)行沖洗風(fēng)干,并滴加熒光抗體,注意抗體需要經(jīng)過(guò)稀釋,在經(jīng)過(guò)溫浴、水洗風(fēng)干處理后,采用顯微鏡進(jìn)行觀察。如果看到淋巴細(xì)胞呈現(xiàn)出“光輪”樣結(jié)構(gòu),胞漿出現(xiàn)了特異性熒光,說(shuō)明結(jié)果是陽(yáng)性[3]。如果無(wú)熒光,說(shuō)明結(jié)果是陰性。

5.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

該試驗(yàn)方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,可以實(shí)現(xiàn)批量檢測(cè)。在實(shí)際檢測(cè)時(shí),可以從市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)商品化試劑盒,根據(jù)試劑盒說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè)操作,并做好最終的結(jié)果判定。

5.3 分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)檢測(cè)診斷方法,包括RT-PCR、實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法,可以采用病死雞法氏囊組織作為檢測(cè)樣本。

5.3.1 RT-PCR擴(kuò)增

在檢測(cè)時(shí),需要對(duì)雞傳染性法氏囊炎病毒的VP2和VP1基因A、B這2個(gè)片段進(jìn)行擴(kuò)增,同時(shí)在引物序列中,還需要引入合適的酶切位點(diǎn),為測(cè)序帶來(lái)方便。在檢測(cè)診斷結(jié)果判定方面,如果A、B這2個(gè)片段同時(shí)被擴(kuò)增,說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,如只出現(xiàn)一個(gè)片段陽(yáng)性,另一個(gè)片段陰性,說(shuō)明診斷結(jié)果可疑,需要對(duì)樣品進(jìn)行復(fù)測(cè),后續(xù)復(fù)測(cè)如果A和B這2個(gè)片段任何一條陽(yáng)性,則判陽(yáng)性,否則為陰性。如果A、B這2個(gè)片段沒(méi)有被擴(kuò)增,說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果也是陰性。

5.3.2 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR擴(kuò)增

在完成檢測(cè)樣本核酸提取工作后,可以直接從市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)商品化試劑盒進(jìn)行檢測(cè),還可以選擇自行合成引物與探針,在確定目的基因后,開(kāi)展實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè)。這種檢測(cè)診斷方法比RT-PCR方法敏感性與特異性更強(qiáng)。

6 治療方法

發(fā)病雞采用高免蛋黃液進(jìn)行肌內(nèi)注射治療,用藥劑量為1.5～2 mL/只,病重的雞可次日重復(fù)注射1次。為防止出現(xiàn)細(xì)菌感染,可以在高免蛋黃液中加入青霉素4萬(wàn)IU、鏈霉素3萬(wàn)IU一起注射,可以提升雞的抵抗力,治療效果顯著?；虿捎脧?fù)方炔酮藥物進(jìn)行治療,按體質(zhì)量進(jìn)行用藥,用藥量為按0.5 kg喂服1片藥,灌服1次/d,連續(xù)用藥3～5 d,可以起到良好治療效果。或采用丙酸睪酮肌內(nèi)注射治療,3～7周齡的雞用藥5 mg/只,且僅注射1次。或采用速效管囊散藥物進(jìn)行治療,按體質(zhì)量用藥0.25 g/kg,或?qū)⑺幬锘烊腼暳现谢蛑苯涌诜?服藥后8 h即可見(jiàn)效,連續(xù)用藥3～5 d,能夠起到良好的治療效果?；虿捎名}酸嗎啉胍藥物進(jìn)行治療,可以選擇8片(每片0.1 g)藥物拌入1 kg雞飼料,在此基礎(chǔ)上,還可以在雞的飲水中加入板藍(lán)根沖劑15～20 g,供雞半日飲用,連用3～5 d,可以起到良好的治療效果。除了采用上述藥物進(jìn)行治療外,還應(yīng)注意在治療期間為雞提供充足的飲水,還可以在飲水中添加5%葡萄糖、0.1%維生素或水中加口服補(bǔ)液鹽,目的是預(yù)防雞脫水,提高雞的抗病能力。為了減輕雞的腎臟負(fù)擔(dān),還可以采用0.2%腎腫解毒藥飲水,同時(shí)將飼料中蛋白質(zhì)含量降低至15%左右,維持10～15 d,能夠起到更好的治療效果。

7 雞傳染性法氏囊炎預(yù)防

7.1 堅(jiān)持自繁自養(yǎng)

由于雞傳染性法氏囊炎既可以水平傳播,也可以垂直傳播,且該疾病的病毒對(duì)外界有著較強(qiáng)的適應(yīng)性,可以長(zhǎng)時(shí)間在外界環(huán)境中存活,所以為了提升預(yù)防效果,在尚未發(fā)生雞傳染性法氏囊炎的雞舍,應(yīng)堅(jiān)持自繁自養(yǎng),杜絕外部雞傳染性法氏囊炎病毒的引入,降低養(yǎng)雞損失。

7.2 做好衛(wèi)生消毒工作

應(yīng)加強(qiáng)衛(wèi)生消毒工作,滅殺雞舍內(nèi)的細(xì)菌病毒。一方面,定期做好雞舍衛(wèi)生清潔工作,將雞糞清除,運(yùn)往外部高溫發(fā)酵處理,可以實(shí)現(xiàn)肥料轉(zhuǎn)化利用;另一方面,加強(qiáng)對(duì)雞舍消毒工作,對(duì)尚未發(fā)生雞傳染性法氏囊炎的雞舍,采用廣譜消毒藥噴灑即可。針對(duì)已經(jīng)出現(xiàn)雞傳染性法氏囊炎的雞舍,需要將雞只全部出欄,然后對(duì)雞舍進(jìn)行全面消毒,并將飼養(yǎng)用具清洗干凈,然后用2%～4%火堿噴灑1次。同時(shí),整個(gè)雞舍采用高錳酸鉀15 g、甲醛30 mL進(jìn)行熏蒸,密封48～72 h后,再打開(kāi)門(mén)窗通風(fēng)換氣。在重新引入雞前3 d,再采用廣譜消毒藥全面噴灑消毒1次,能夠有效預(yù)防雞只再次感染發(fā)病。

7.3 加強(qiáng)免疫預(yù)防

結(jié)合當(dāng)?shù)貍魅拘苑ㄊ夏已琢餍刑攸c(diǎn)、飼養(yǎng)條件、雞群狀況等,制定合理的免疫程序。需要確定首免日齡,可以在瓊脂雙向擴(kuò)散試驗(yàn)的幫助下,按照0.5%的比例進(jìn)行采樣,收集雞群血清,然后采用標(biāo)準(zhǔn)法氏囊病毒抗原測(cè)母源抗體,確定首免日齡。如果1日齡抗體陽(yáng)性率小于80%,應(yīng)在10～15日齡進(jìn)行首免。如果抗體陽(yáng)性率在80%以上,可以在7～10日齡再采血復(fù)檢1次。如果陽(yáng)性率在50%以內(nèi),選擇15～20日齡首免,若抗體陽(yáng)性率高于50%,可于20～24日齡首免。在生產(chǎn)實(shí)踐中,有的雞首免后2～5 d,沒(méi)有進(jìn)行二次免疫接種,從而出現(xiàn)了感染發(fā)病情況。所以在第1次免疫接種后,注意間隔一段時(shí)間再進(jìn)行第2次免疫。如果雞的母源抗體偏低,再加上雛雞接種免疫傳染性法氏囊炎采用的是飲水法,很容易造成雞群內(nèi)抗體水平不一,不利于提升雞群抗感染能力,因此在進(jìn)行接種免疫預(yù)防時(shí),可以適當(dāng)提前免疫的時(shí)期,最好配用滅活疫苗,一對(duì)一進(jìn)行免疫,選擇的免疫疫苗為弱毒苗或中等毒力苗,針對(duì)有母源抗體的雛雞,可以選擇中等毒力的疫苗,反之,則需要選擇弱毒疫苗,再進(jìn)行二次免疫時(shí),統(tǒng)一采用中等毒力的疫苗,能起到更好的免疫預(yù)防效果。

8 結(jié)束語(yǔ)

在雞養(yǎng)殖過(guò)程中,雞傳染性法氏囊炎是一種常見(jiàn)的疫病,如果防治不及時(shí),極易提高雞的死亡率,從而帶來(lái)嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此,應(yīng)加強(qiáng)對(duì)雞傳染性法氏囊炎的診斷、治療與預(yù)防,早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早治療,從而減少雞傳染性法氏囊炎造成的影響,提升養(yǎng)殖效益。