李可月 陳嶺

基金項目：2022年度浙江省高校國內(nèi)訪問工程師校企合作項目“二十四節(jié)氣養(yǎng)生茶飲配方優(yōu)化與功效成分研究”（FG2022125）；2022年度浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學院橫向課題“四季養(yǎng)生花茶復合配方開發(fā)與優(yōu)化”（22HX26）；2023年浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學院大學生創(chuàng)新項目“基于順時養(yǎng)生理念的二十四節(jié)氣養(yǎng)生茶飲開發(fā)及體外抗氧化功效評價”（0080221157）。

作者簡介：李可月（2001—），女，貴州遵義人，大專。研究方向：食品檢驗檢測技術(shù)。

通信作者：陳嶺（1977—），女，畬族，浙江慈溪人，碩士，副教授。研究方向：食品營養(yǎng)與功能性成分。E-mail：loyola

@163.com。

摘 要：采用沸水浸提法提取茶飲中的活性物質(zhì)，分別采用三氯化鋁比色法、苯酚-硫酸法及福林酚法測定浸出液中黃酮、多糖及總酚的含量，并研究其抗氧化活性。結(jié)果表明，荷葉山楂紅棗茶浸出液中總黃酮含量是烏梅山楂茶浸出液的2倍多，兩款浸出液中多糖含量接近，而烏梅山楂茶浸出液中總酚含量則是荷葉山楂紅棗茶浸出液的3倍多，對DPPH自由基的清除能力則是荷葉山楂紅棗茶優(yōu)于烏梅山楂茶。

關(guān)鍵詞：黃酮；多糖；總酚；抗氧化活性

Comparison of the Active Ingredients and Antioxidant Activity of Two Summer Healthy Tea

LI Keyue， CHEN Ling*

（Zhejiang Institute of Economics and Trade， Hangzhou 310018， China）

Abstract： The active substances in the tea beverage were extracted by boiling water extraction method， and the contents of flavonoids， polysaccharides and total phenols in the extract were determined by aluminum trichloride colorimetric method， phenol-sulphuric acid method and Folin-phenol method， respectively， and their antioxidant activities were studied. The results showed that the total flavonoid content in the lotus leaf hawthorn red date tea extract was more than twice as much as that in the dark plum hawthorn tea extract， and the polysaccharides content in the two extracts was close to each other， while the total phenols content in the dark plum hawthorn tea extract was more than three times as much as that of the lotus leaf hawthorn red date tea extract， and in terms of the scavenging capacity of the DPPH radicals， it was better for the lotus leaf hawthorn red date tea than that of the dark plum hawthorn tea.

Keywords： flavones; polysaccharide; total polyphenols; antioxidant activity

山楂荷葉紅棗茶中的山楂性溫，味酸、甘，歸脾、胃、肝經(jīng)，具有消食化積、行氣散瘀、化濁降脂的功效，對于食積、瀉痢腹痛、瘀阻胸腹痛等癥狀有一定的緩解作用；荷葉具有疏散風熱、清利頭目等功效，對于暑熱煩渴、暑濕泄瀉、血熱吐衄等癥狀有一定的緩解作用。烏梅山楂茶口感獨特，酸甜適宜，可增加唾液以及胃液的分泌，促進消化，增強食欲，改善食欲不振的情況，且山楂、烏梅均含有一定的膳食纖維，可促進胃腸蠕動，具有潤腸通便的功效。山楂荷葉紅棗茶、烏梅山楂茶均適合在夏季飲用，本文以兩款茶飲為研究對象，通過沸水浸提法模擬人體直接飲用兩款茶飲的方式，提取茶飲中的黃酮類化合物、多糖類化合物及總酚，并測定其對DPPH的清除率，為消費者判定養(yǎng)生茶飲的功效及選購茶飲提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

T6新世紀紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限責任公司；分析天平，奧豪斯儀器（常州）有限公司。

1.2 材料與試劑

苯酚，上海凌峰化學試劑有限公司；硫酸、無水乙醇，湖州雙林化學科技有限公司；無水碳酸鈉，上海虹光化工廠有限公司；醋酸鉀，國藥集團化學試劑有限公司；結(jié)晶氯化鋁，上海美興化工有限公司；DPPH、蘆丁、FoLin & Ciocalteu試劑，浙江常青化工有限公司；葡萄糖，廣東光華科技股份有限公司；荷葉、山楂、烏梅和紅棗，購自浙江杭州。

1.3 實驗方法

1.3.1 花茶浸提液的制備

分別稱取荷葉山楂紅棗茶原料6.5 g和烏梅山楂茶原料5 g，料液比為1∶30（g∶mL），用沸水進行沖泡，浸泡30 min，過濾后的茶湯冷卻備用。

1.3.2 黃酮含量測定

根據(jù)龍躍等[1]的方法測定花茶浸出液中的總黃酮含量，并進行適當修改。以蘆丁的濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制黃酮含量標準曲線。準確吸取樣品浸出液0.1 mL，用60%乙醇稀釋至5.0 mL，加入

3.0 mL 2.5% AlCl3溶液以及5.0 mL 10% KAc溶液，并搖勻室溫放置40 min，在波長510 nm處測定吸光度值，同時做空白對照。茶飲中黃酮含量的計算公式為

（1）

1.3.3 多糖含量測定

根據(jù)朱艷等[2]的方法測定花茶浸出液中的多糖含量，并進行一些修改。以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制多糖含量標準曲線。將浸出液樣品稀釋成濃度為0.1 mg·mL-1的樣品溶液，移取0.1 mL于10 mL具塞比色管，補充水至1.0 mL，加入1.0 mL 5%苯酚，搖勻后加入5.0 mL硫酸，搖勻后將其放置于沸水浴中加熱20 min，冷卻至室溫后，于490 nm波長下測定吸光值，同時做空白對照。茶飲中多糖含量的計算公式為

（2）

1.3.4 總酚含量測定

根據(jù)李楠等[3]的方法測定花茶浸出液中的總酚含量，并進行適當修改。以沒食子酸濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制總酚含量標準曲線。準確吸取

1.0 mL浸出液樣品加入試管中，加5.0 mL 10%福林酚溶液并搖勻，反應(yīng)5 min后加入4.0 mL 7.5%碳酸鈉溶液，常溫下避光反應(yīng)60 min，在765 nm處測定其吸光度，同時做空白對照。茶飲中總酚含量的計算公式為

（3）

1.3.5 對DPPH清除能力的測定

根據(jù)李楠等[3]的方法測定花茶浸出液的DPPH清除能力，并進行適當修改。準確吸取0.1 mL浸出液樣品加入試管中，再加入0.1 mmol·L-1的DPPH-乙醇的溶液3.0 mL，振蕩搖勻后，25 ℃避光反應(yīng)

30 min，用無水乙醇調(diào)零，于517 nm處測定其吸光度值。DPPH自由基清除率計算公式為

（4）

式中：A0為DPPH溶液和無水乙醇的吸光度值；As為DPPH-乙醇溶液和樣品溶液的吸光度值；A1為樣品溶液和無水乙醇的吸光度值。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃酮含量比較

黃酮含量的標準曲線如圖1所示，其回歸方程為y=11.585x+0.008 3，相關(guān)系數(shù)R2=0.999。經(jīng)測定，荷葉山楂紅棗茶浸出液中黃酮平均含量為10.66 mg·g-1，烏梅山楂茶浸出液中黃酮平均含量為5.25 mg·g-1，荷葉山楂紅棗茶中的黃酮含量明顯高于烏梅山楂茶。

黃酮類化合物又稱生物黃酮或植物黃酮，是由3個碳原子連接2個苯環(huán)（A環(huán)和B環(huán)）形成的具有C6-C3-C6結(jié)構(gòu)的一類化合物。按苯環(huán)的不同組成，黃酮類化合物可以分為多個不同種類，包括黃酮類、黃酮醇類、異黃酮類、查耳酮類、花色素類和黃烷醇類等。黃酮類化合物是許多中藥的主要有效成分之一，廣泛存在于某些中藥的根、莖、葉、花、果實和種子等部位。中藥的黃酮類化合物種類繁多，不同中藥中含量也各不相同，其藥理作用豐富?，F(xiàn)代藥理學研究證實，中藥中黃酮類化合物具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用，對心血管、肝臟等相關(guān)疾病均具有良好的療效[4]。從兩款養(yǎng)生茶的原料來看，荷葉中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，如槲皮素、槲黃素、柚皮素和檸檬素等，對于促進人體健康發(fā)揮著重要的作用。

2.2 多糖含量比較

多糖含量的標準曲線如圖2所示，其回歸方程為y=10.772x-0.002 9，相關(guān)系數(shù)R2=0.999。經(jīng)測定，荷葉山楂紅棗茶浸出液中多糖平均含量為

0.29 mg·g-1，烏梅山楂茶浸出液中多糖平均含量為

0.28 mg·g-1，兩者相近。

圖1 黃酮含量標準曲線

《中華人民共和國藥典（2020年版）》記載，紅棗歸脾、胃、心經(jīng)，味甘，性溫，具有補中益氣、養(yǎng)血安神的功效。現(xiàn)代研究表明，紅棗功效的發(fā)揮與其富含的糖類、氨基酸、黃酮類、多酚類等多種活性成分具有密切聯(lián)系。紅棗多糖作為紅棗的主要活性成分之一，經(jīng)研究表明具有抗氧化、保肝護肝、降糖、降脂、菌群調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)、抗癌和抗凝等多種生物活性[5]。但是，本實驗中兩款茶飲的多糖檢測含量不高，推測可能與紅棗的預處理方式、浸提液的浸泡溫度和時間有關(guān)。

圖2 多糖含量標準曲線

2.3 總酚含量比較

總酚含量的標準曲線如圖3所示，其回歸方程為y=0.014 6x-0.009 1，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 4。經(jīng)測定，荷葉山楂紅棗茶浸出液中總酚平均含量為0.74 mg·g-1，烏梅山楂茶浸出液中總酚平均含量2.96 mg·g-1，烏梅山楂茶中的總酚含量明顯高于荷葉山楂紅棗茶。

總酚具有較強的抗氧化作用，可以減少自由基的產(chǎn)生，防止氧化反應(yīng)的發(fā)生。有研究表明，加熱可使中草藥糖漿中的總酚含量增高，當加熱溫度較低或加熱時間較短時，總酚含量變化不明顯，而隨著加熱溫度升高或加熱時間延長，總酚含量明顯增高[6]。對于養(yǎng)生茶而言，可以考慮將沸水沖泡改為用養(yǎng)生壺煮茶，以期獲得更高的總酚含量。

圖3 總酚含量標準曲線

2.4 對DPPH自由基清除能力的比較

荷葉山楂紅棗茶的DPPH自由基清除率為82.85%，烏梅山楂茶的DPPH自由基清除率為24.94%，相比之下，荷葉山楂紅棗茶對DPPH自由基的清除效果更為理想。

3 結(jié)論

通過實驗測定了荷葉山楂紅棗茶和烏梅山楂茶的功效成分含量，并比較了抗氧化活性。結(jié)果表明，荷葉山楂紅棗茶浸出液中總黃酮平均含量為

10.66 mg·g-1，多糖平均含量為0.29 mg·g-1，總酚平均含量為0.74 mg·g-1；烏梅山楂茶浸出液中總黃酮平均含量為5.25 mg·g-1，多糖平均含量為0.28 mg·g-1，總酚平均含量為2.96 mg·g-1。結(jié)合DPPH清除能力的測定結(jié)果，推測黃酮對抗氧化能力的貢獻度更高。兩款夏季養(yǎng)生茶中，荷葉山楂紅棗茶相對于烏梅山楂茶有更強的抗氧化活性。本研究可為消費者認知養(yǎng)生茶功效成分及選購養(yǎng)生茶提供一定的依據(jù)。

參考文獻

[1]龍躍，寇嫻，程素霞，等.三氯化鋁比色法測定中草藥雀兒舌頭中總黃酮研究[J].鄭州大學學報（工學版），2010，31（4）：113-115.

[2]朱艷，李先芝，嚴玲，等.苯酚-硫酸法測定保健酒中多糖含量的分析研究[J].釀酒科技，2023（2）：118-121.

[3]李楠，楊欣，孫元琳，等.20種花茶黃酮、總酚及抗氧化活性分析[J].福建中醫(yī)藥，2021，42（18）：34-39.

[4]蘇圓圓，王雪艷，李成林，等.中藥中黃酮類化合物的藥理藥效研究進展[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2023，42（6）：42-46.

[5]魏炳琦，高小雨，劉延鑫，等.紅棗多糖的結(jié)構(gòu)、生物學活性及產(chǎn)品開發(fā)進展[J/OL].食品工業(yè)科技：1-14[2023-12-08].https：//doi.org/10.13386/j.issn1002-0306.2023080051.

[6]殷倩倩，何志勇，陳潔，等.不同加熱條件對中草藥糖果中總酚和主要功效成分含量及抗氧化性的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2018，46（16）：167-171.