摘" 要：為了解副豬嗜血桿菌病的流行情況，從全國48家豬場采集疑似副豬嗜血桿菌感染的組織樣本285份，采取熒光定量檢測infB基因的檢測方法，并按照樣本陽性率、豬場陽性率、豬年齡、采樣季節(jié)、免疫與否等進(jìn)行分類分析。結(jié)果出現(xiàn)：81.3％豬場存在副豬嗜血桿菌感染；副豬嗜血桿菌感染在豬的不同生長階段均十分嚴(yán)重；冬春季節(jié)的副豬嗜血桿菌陽性率（77.6％）顯著高于夏秋季節(jié)的（55.8％）；疫苗免疫場的副豬嗜血桿菌陽性率比非免疫場的低59.3％。以上結(jié)果表明，當(dāng)前國內(nèi)副豬嗜血桿菌病流行情況較嚴(yán)重，且存在明顯季節(jié)性，通過接種疫苗進(jìn)行預(yù)防，可有效降低副豬嗜血桿菌檢出率。

關(guān)鍵詞：副豬嗜血桿菌；分離；流行病學(xué)

自2018年以來，養(yǎng)豬業(yè)集團(tuán)化、規(guī)?；潭韧伙w猛進(jìn)，從最初不足5％，到目前的30％以上；6年來，行業(yè)經(jīng)歷了超級(jí)紅利和持續(xù)低谷，洗牌不斷，為了生存，很多企業(yè)開始簡單粗暴地降本增效，造成規(guī)?；i場發(fā)病呈復(fù)雜化、多樣化特點(diǎn)，給豬場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。同時(shí)，隨著國家限抗禁抗政策的落實(shí)，一些細(xì)菌性疾病正在卷土重來，例如副豬嗜血桿菌病。副豬嗜血桿菌病危害的群體廣泛、致死性強(qiáng)，甚至成為很多豬場頭號(hào)敵人，從業(yè)人員需多加關(guān)注。

副豬嗜血桿菌病又叫格拉瑟病，由副豬嗜血桿菌引起，在國內(nèi)廣泛流行[1]，臨床多表現(xiàn)為消瘦、炸毛和漸進(jìn)性死亡，剖檢可見多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎等。急性病例導(dǎo)致感染豬突然死亡，慢性病例會(huì)造成豬組織和器官持續(xù)性損傷、生長速度降低、料肉比提高[2]。該病多發(fā)生在保育階段，但在哺乳期、育肥期也有出現(xiàn)，發(fā)病率和死亡率居高不下，治療效果一般，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大威脅。

副豬嗜血桿菌是呼吸道正常菌群的一員，仔豬出生后通過與母豬接觸該菌后會(huì)很快定植在仔豬的上呼吸道，在豬免疫力下降等情況下會(huì)大量增殖，導(dǎo)致豬發(fā)病。后備豬比例持續(xù)偏高、豬繁殖與呼吸綜合征持續(xù)流行、長距離運(yùn)輸以及藥物濫用帶來的耐藥性等問題，導(dǎo)致副豬嗜血桿菌感染的問題越來越嚴(yán)重，發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)越來越大。了解副豬嗜血桿菌的感染情況及豬場疫苗防控方案的有效性，對該病的防控至關(guān)重要。本試驗(yàn)對2022－2023年全國48個(gè)規(guī)模化豬場進(jìn)行采樣檢測和統(tǒng)計(jì)分析，以了解副豬嗜血桿菌病的流行情況，為規(guī)模化豬場的防疫工作提供參考。

1" 材料與方法

1.1 材料

2022－2023年，對四川、江蘇、山東等地48個(gè)規(guī)模化豬場進(jìn)行調(diào)查，其中2022年調(diào)查了16個(gè)豬場，2023年調(diào)查了32個(gè)豬場。將病豬剖檢后，用棉簽采集胸腔、腹腔積液或關(guān)節(jié)液樣本，共計(jì)285份（2022年采集樣本114份，2023年采集樣本171份）。

1.2 主要試劑

基因提取試劑盒和FTA卡（flinders technology associates，F(xiàn)TA）均購自QiaGen公司。

1.3 主要設(shè)備

熒光定量PCR儀器QS-5購自ABI公司。

1.4 試驗(yàn)方法

用一次性棉簽采集豬胸腔、腹腔積液或關(guān)節(jié)液后按壓在FTA卡中央，自然干燥2 h，送至海博萊實(shí)驗(yàn)室檢測。

在無菌條件下沿FTA卡圓圈剪下，提取細(xì)菌DNA并進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增。

利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測樣本中是否含有副豬嗜血桿菌特異性基因infB，同時(shí)為了進(jìn)一步比較，將檢測結(jié)果分為強(qiáng)陽性、中陽性、弱陽性以及陰性，詳情見表1。

1.5" 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)按照樣本陽性率、豬場陽性率、豬年齡、采樣季節(jié)、免疫與否等進(jìn)行分類分析。

2" 結(jié)果

2.1 不同時(shí)期豬場和不同樣本發(fā)病情況

從檢測結(jié)果來看，81.3％（39/48）豬場存在不同程度副豬嗜血桿菌感染的情況，其中2022年為87.5％（14/16），2023年為78.1％（25/32）；樣本陽性率為62.8％（179/285）。2022年為69.3％（79/114），2023年為61.4％（105/171）。其中2022年強(qiáng)陽性率為13.2％（15/114），中陽性率為36.8％（42/114）。2023年強(qiáng)陽性率為13.5％（23/171），中陽性率為24.6％（42/171）。結(jié)果表明，副豬嗜血桿菌在規(guī)?；i場的感染非常嚴(yán)重。

2.2 不同生長階段豬發(fā)病情況

按照不同生長階段劃分，3～7周齡仔豬樣本副豬嗜血桿菌陽性率為78.9％，8～10周齡仔豬樣本陽性率為70.5％，11～15周齡仔豬樣本陽性率為71.8％，15～20周齡仔豬樣本陽性率為72.2％。結(jié)果表明，在保育育肥階段，副豬嗜血桿菌感染十分嚴(yán)重。

此外，3～10周齡仔豬樣本強(qiáng)陽性率為10.1％（17/168），10周齡以上仔豬的僅為7.6％（6/79），3～10周齡仔豬樣本中陽性率為39.3％（66/168），10周齡以上仔豬的僅為12.7％（10/79），3～10周齡仔豬樣本強(qiáng)陽性率和中陽性率均高于10周齡以上仔豬的，具體見表2。

2.3 不同季節(jié)豬發(fā)病情況

檢測結(jié)果顯示，冬春季節(jié)樣本副豬嗜血桿菌陽性率為77.6％，夏秋季節(jié)樣本陽性率為55.8％，冬春季節(jié)的陽性率顯著高于夏秋的，說明副豬嗜血桿菌病具有明顯的季節(jié)性。

冬春季節(jié)樣本強(qiáng)陽性率為11.3％（13/115），而夏秋季節(jié)的為11.8％（20/170），冬春季節(jié)樣本中陽性率為38.3％（44/115），而夏秋季節(jié)的為23.5％（40/170），不同季節(jié)差異不明顯，表明在不同季節(jié)，豬感染副豬嗜血桿菌的嚴(yán)重性無明顯差異，具體見表2。

2.4 是否免疫豬發(fā)病情況

未免疫副豬嗜血桿菌疫苗的豬場副豬嗜血桿菌病陽性率為96.7％，免疫豬場的陽性率僅為36.4％。免疫豬場樣本強(qiáng)陽性率為22.2％（6/27），未免疫豬場的為16.3％（42/258），免疫豬場樣本中陽性率為18.5％（5/27），未免疫豬場的為39.5％（102/258），具體見表2。

3" 討論

副豬嗜血桿菌病在國內(nèi)往往被看作豬繁殖與呼吸綜合征的繼發(fā)病，但實(shí)際上，副豬嗜血桿菌既是原發(fā)性病原體又是繼發(fā)性病原體。副豬嗜血桿菌病不僅與混合感染有關(guān)，也可能與轉(zhuǎn)群、混群等應(yīng)激有關(guān)，在美國被認(rèn)為是保育豬主要的傳染病之一，也是保育豬非正常死亡的主要原因。副豬嗜血桿菌病的傳統(tǒng)控制方案是抗生素治療，由于通過飼料和飲水給藥很難給感染豬提供足夠劑量抗生素，注射治療效果更好，但是一線操作難度大，且耐藥性問題越發(fā)嚴(yán)重，可以考慮通過接種疫苗預(yù)防豬感染和死亡。

本研究結(jié)果顯示，81.3％的豬場副豬嗜血桿菌檢測為陽性，結(jié)合樣本均來自表現(xiàn)消瘦、炸毛和喘息等癥狀的豬，說明副豬嗜血桿菌感染可能是導(dǎo)致豬場不穩(wěn)定的重要原因。

本研究發(fā)現(xiàn)在不同生長階段副豬嗜血桿菌陽性率差異不大，說明副豬嗜血桿菌感染在保育階段和育肥階段感染均十分嚴(yán)重，而非大家一直關(guān)注的保育階段。3～10周齡仔豬樣本強(qiáng)陽性率和中陽性率均顯著高于10周齡以上仔豬的，表明副豬嗜血桿菌的感染和危害主要出現(xiàn)在保育階段。

冬春季節(jié)的副豬嗜血桿菌陽性率顯著高于夏秋季節(jié)的，這與趙占勤[3]研究結(jié)果相似，說明副豬嗜血桿菌病具有明顯季節(jié)性。這可能與環(huán)境條件和豬群抵抗力不同有關(guān)。因此在冬春季節(jié)要做好環(huán)境控制和應(yīng)激管理。但總體而言，副豬嗜血桿菌一年四季陽性率均較高，都需要做好綜合防控工作。

免疫豬場的陽性率以及樣本強(qiáng)陽性率和中陽性率均顯著低于未免疫豬場的，說明接種副豬嗜血桿菌病疫苗可以顯著降低感染程度，可以作為控制副豬嗜血桿菌感染的首選方案。

副豬嗜血桿菌病一直是我國豬群的重要威脅，傳統(tǒng)的抗生素控制細(xì)菌病策略需要進(jìn)行調(diào)整，而且藥物濫用導(dǎo)致細(xì)菌的耐藥性越來越強(qiáng)。接種疫苗是預(yù)防副豬嗜血桿菌病的有效途徑，可以根據(jù)每個(gè)豬場不同的流行病學(xué)特點(diǎn)設(shè)計(jì)合適的免疫程序，并配合豬場全進(jìn)全出、加強(qiáng)環(huán)境控制、減少豬群應(yīng)激等措施，最大限度發(fā)揮豬的生長潛力，提高豬場生產(chǎn)效益。

參考文獻(xiàn)

[1] 郭龍，宋文博，賈雙，等．2017年我國規(guī)模化豬場副豬嗜血桿菌流行病學(xué)調(diào)查[J]．中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2019，39（11）：2152-2156.

[2] 史開志，杜春林，王婧，等．副豬嗜血桿菌持續(xù)慢性感染對仔豬生產(chǎn)性能的影響及肺組織損傷[J]．中國動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào)，2022，30（3）：22-28.

[3] 丁文文，王樂，李飛躍，等．副豬嗜血桿菌的分離鑒定及其流行病學(xué)研究[J]．中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2019，41（8）：789-795.