黃巧莉 蘇曉晶 邱小蘭 范玉琳

目前在各類疾病的治療上，尤其是針對(duì)出血性疾病的治療，需要開展輸血治療[1]。而輸血前對(duì)于患者血型的明確是臨床治療的必要條件[2]。在臨床中，部分血液樣本中會(huì)相對(duì)含有一部分的意外抗體，這些抗體可能會(huì)對(duì)血型鑒定的準(zhǔn)確性產(chǎn)生一定的影響[3]。意外抗體是指在ABO 血型系統(tǒng)之外的其他血型系統(tǒng)中的抗體，這些抗體可能會(huì)干擾血型鑒定的結(jié)果。因此，在進(jìn)行血型鑒定時(shí)，需要特別注意樣本的采集和處理，以避免意外抗體的干擾，確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。在臨床的相關(guān)分析上主要是以MNS 血型系統(tǒng)（MNS antigen system，它也被稱為MNS 抗原系統(tǒng)或MNSs 血型系統(tǒng)），是人類血型系統(tǒng)的重要一員。是相對(duì)較為常見的一種類型，目前該抗體與ABO 抗體不同，有不規(guī)則性、不穩(wěn)定性結(jié)果[4-5]?；诖耍狙芯窟x取龍巖市第一醫(yī)院2020年1 月—2022 年10 月經(jīng)血清學(xué)檢測(cè)存在MNS 抗體的70 例患者，對(duì)ABO 血型進(jìn)行正反定型及交叉配血檢測(cè)。在血型鑒定及交叉配血過程中，分析MNS抗體的性質(zhì)具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）血清明確檢測(cè)，確認(rèn)MNS 抗體。（2）精神狀態(tài)正常。（3）臨床資料保存完整，知情同意[6]。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）其他血液系統(tǒng)疾病。（2）妊娠期或哺乳期婦女。（3）合并其他類型的惡性腫瘤[7]。本研究選取龍巖市第一醫(yī)院2020 年1 月—2022 年10 月經(jīng)血清學(xué)檢測(cè)存在MNS 抗體的70 例患者，男性38 例，女性32 例，身體質(zhì)量指數(shù)21.0～27.0 kg/m2，平均（23.48±2.56）kg/m2，年齡2～69歲，平均（40.73±2.85）歲。本研究經(jīng)龍巖市第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器

本研究所使用的相關(guān)試劑均購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限公司，且經(jīng)相關(guān)檢查均在保質(zhì)期內(nèi)。血液離心機(jī)（型號(hào)XE2011）由伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司提供；全自動(dòng)血型分析儀（型號(hào)DR-2018）由達(dá)亞美有限責(zé)任公司提供；恒溫水浴箱（型號(hào)ZE 0038）由上海躍進(jìn)醫(yī)療器械電子有限公司提供；本研究所上述儀器設(shè)備完好，可確保在整個(gè)研究中正常使用。

1.2.2 抗體篩查及特異性鑒定

抽取空腹靜脈血4 mL，離心5 min 后分離，反復(fù)洗滌3 次獲得分離紅細(xì)胞，加入生理鹽水，洗滌3～4 次后，配成30 mL/L 紅細(xì)胞懸液待檢。

1.2.3 交叉配血試驗(yàn)

鹽水試管法和微柱凝膠法交叉配血及全自動(dòng)血型分析儀正反定型結(jié)合，與正反定型均不相符時(shí)，應(yīng)采用鹽水試管法進(jìn)行ABO 血型復(fù)檢。

1.2.4 免疫球蛋白類型檢測(cè)

在待檢血清中加入抗體后，采用抗人球法檢測(cè)免疫球蛋白M（immunoglobulin G，IgM）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、IgM+IgG 類抗體。

2 結(jié)果

2.1 MNS 意外抗體特異性與抗體性質(zhì)

70 例患者中，MNS 抗體特異性主要以抗-M 最多，占比為88.57%，其次為抗-N、抗-S、抗-Mur，分別占比為5.71%、4.29%、1.43%；意外抗體性質(zhì)則以IgM 為主，占比為84.29%，其次為IgG、IgM+IgG，分別占比為12.86%、2.86%。見表1。

表1 MNS 意外抗體特異性與抗體性質(zhì)[例（%）]

2.2 血型鑒定與正反定型格局

70 例患者中，A 型血24 例，占比為34.29%；B 型血20 例，占比為28.57%；O 型血13 例，占比為18.57%；AB 型血13 例，占比為18.57%；正、反定型檢測(cè)，血清抗-M 陽(yáng)性時(shí)，再以NN 反定型細(xì)胞使正反定型相符，反之同理。見表2。

表2 血型鑒定與正反定型格局

3 討論

迄今為止，人類中存在29 個(gè)血型系統(tǒng)，各個(gè)系統(tǒng)均有其固有的屬性[8]。而臨床中對(duì)于血型，判定的作用從輸血角度上來(lái)講，將逐步擴(kuò)展到臨床生物醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)等諸多方面。近年來(lái)，隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，對(duì)于血型的研究逐漸地深入，而在人類血型基因不斷被克隆的背景下，對(duì)血型的分析已經(jīng)進(jìn)入一個(gè)以分子生物學(xué)為基礎(chǔ)的新時(shí)期、新時(shí)代的發(fā)展階段。在臨床研究中，目前已經(jīng)轉(zhuǎn)向了對(duì)血型基因遺傳多態(tài)性的檢測(cè)。從常規(guī)的血型檢測(cè)，已經(jīng)逐步深入到了血型抗原的組織特異性表達(dá)研究。目前正在研究各種不同血型之間的生物學(xué)特性、結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，以便為臨床血型分析提供重要的基礎(chǔ)。目前，與臨床輸血關(guān)系最為密切的是ABO 和Rh 這兩個(gè)血型系統(tǒng)。血型分型主要是根據(jù)紅細(xì)胞膜上不同的抗原將ABO 血型分為A、B、O、AB 4 種血型。根據(jù)臨床、血站的綜合數(shù)據(jù)分析得知，AB型則相對(duì)較少，約占10%，其余各血型均分。目前對(duì)于Rh血型系統(tǒng)數(shù)據(jù)認(rèn)為，其內(nèi)有45 種不同的抗原，其中主要是D 抗原為最重要的類型。根據(jù)人體中紅細(xì)胞上是否存在D 抗原，可將分類為Rh 陽(yáng)性或陰性，目前的數(shù)據(jù)研究認(rèn)為，約85%白種人為Rh 陽(yáng)性。而中國(guó)人群數(shù)據(jù)顯示，約99.6%為Rh 陽(yáng)性，由此在我國(guó)Rh 陰性是較為稀少的血型類型，也被臨床稱為“熊貓血”。

在臨床輸血患者的相關(guān)分析上認(rèn)為，輸血的安全性是目前臨床治療安全最重要的指標(biāo)之一。主要是因一旦出現(xiàn)ABO、Rh 血型不合的妊娠，或在血型不匹配的情況下，給予輸血治療可誘發(fā)輸血反應(yīng)和新生兒溶血病，對(duì)于患者的預(yù)后產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。尤其是在出血性疾病或手術(shù)治療時(shí)，需要接受輸血治療；而輸血的安全性，一直在臨床中屬于重要的診療問題，患者血型的準(zhǔn)確診斷，并在患者輸血前完成交叉配血的過程，對(duì)于保障患者的輸血安全性有著直接的影響及其重要的價(jià)值意義[9]。目前相關(guān)研究認(rèn)為，部分急診手術(shù)除外，應(yīng)當(dāng)對(duì)受血者進(jìn)行血型鑒定，根據(jù)其結(jié)果進(jìn)行輸血治療以保障輸血的安全性[10]。而ABO 正反定型時(shí)，由于在多種因素的作用下，導(dǎo)致在臨床中常常出現(xiàn)不相符的情況，或交叉配血不合現(xiàn)象[11]。實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)認(rèn)為，此與機(jī)體存在意外抗體因素有著直接關(guān)聯(lián)[12]。目前認(rèn)為這種意外抗體的出現(xiàn)以MNS 抗體為主，考慮與機(jī)體中的紅細(xì)胞膜涎糖蛋白A，并且與第5 位氨基酸的異常結(jié)合有直接關(guān)聯(lián)，繼之形成一種不同性質(zhì)的抗體類型，在目前發(fā)現(xiàn)的抗體種類中，主要包括了抗-M、抗-N、抗-S 等一類，目前數(shù)據(jù)顯示是抗-M 為主，而意外抗體中，其則以IgM 為主。IgM 型抗體是目前絕大部分出現(xiàn)的抗體類型，少部分的發(fā)生則是與輸血、妊娠免疫反應(yīng)誘發(fā)有關(guān)。目前的研究結(jié)果指出，針對(duì)該類抗體正常體溫下，蛋白介質(zhì)活性下降，因此在此情況下，將不會(huì)誘發(fā)出現(xiàn)相對(duì)較為嚴(yán)重的輸血反應(yīng)[13]。本研究中，經(jīng)檢測(cè)MNS 抗體特異性結(jié)果以抗-M 最多，占比為88.57%，而抗-N、抗-S、抗-Mur 分別次之，占比為5.71%、4.29%、1.43%；意外抗體以IgM 為主，占比為84.29%，其次為IgG、IgM+IgG，分別占比為12.86%、2.86%。70 例中，A 型血24 例（34.29%）；B 型血20 例（28.57%）；O 型血13 例（18.57%）；AB 型血13 例（18.57%）。此文的研究結(jié)果為交叉配血檢測(cè)后期標(biāo)準(zhǔn)制定提供了借鑒內(nèi)容。

綜上所述，在血清學(xué)MNS 抗體檢測(cè)的分析中，認(rèn)為目前主要是以抗-M 為主，在臨床上，可根據(jù)所納入患者ABO 血型，明確交叉配血檢測(cè)結(jié)果。但并不代表全部患者均為此情況。除了針對(duì)患者的血液檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行判斷，而在此之前，應(yīng)當(dāng)明確患者基本情況，如年齡、性別、輸血史、疾病類別等，根據(jù)患者的實(shí)際情況，分析其是否存在其他因素所產(chǎn)生的影響，對(duì)于檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生一定的作用；其次，在反定型檢測(cè)結(jié)果異常樣本中，加做意外抗體篩查，根據(jù)其獲得的結(jié)果進(jìn)行判定，明確是否因?yàn)橐馔饪贵w導(dǎo)致，根據(jù)獲得的抗篩陽(yáng)性標(biāo)本，再實(shí)施下一步的實(shí)驗(yàn)、分析，最終獲得定論；通過吸收放散、唾液試驗(yàn)、基因檢測(cè)等多種方式，對(duì)于所獲得結(jié)果進(jìn)行佐證，以明確診斷結(jié)果。但考慮到由于本研究?jī)H在龍巖市第一醫(yī)院開展，并未進(jìn)行大樣本數(shù)量研究。僅可對(duì)輸血治療的安全提供相關(guān)參考資料。但通過本研究所獲得的結(jié)論分析可知，在保障患者用血安全的要求上，不可采用盲配的手段，以減少由于血液輸注問題所產(chǎn)生對(duì)于機(jī)體的影響。而在選擇抗原陰性血液，因?yàn)镽h（D 除外）、Kidd、Duffy、MNS 血型系統(tǒng)具有劑量效應(yīng)，即血型抗原的濃度會(huì)對(duì)配血的結(jié)果產(chǎn)生影響。在實(shí)驗(yàn)室中，當(dāng)使用雜合子抗原進(jìn)行交叉配血時(shí)，如果血型抗原的劑量不足，可能會(huì)導(dǎo)致配血結(jié)果為陰性。這是因?yàn)檠涂乖菦Q定血型匹配的關(guān)鍵因素，如果劑量不足，就可能無(wú)法與對(duì)應(yīng)的抗體產(chǎn)生足夠的反應(yīng)，從而無(wú)法檢測(cè)出配血結(jié)果的陽(yáng)性或陰性，由此將產(chǎn)生誤判的風(fēng)險(xiǎn)。在此情況下，臨床中發(fā)現(xiàn)，仍然有輸入患者體內(nèi)后仍能產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)的可能性，而就算是微小的可能性，也將對(duì)患者的生命安全產(chǎn)生嚴(yán)重的影響；由此臨床用血的安全性應(yīng)引起重視。血型系統(tǒng)的劑量效應(yīng)還可能受到其他因素的影響，例如血液樣本的質(zhì)量、實(shí)驗(yàn)室的條件和操作人員的技能等。因此，在進(jìn)行交叉配血時(shí)，需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，確保血液樣本的質(zhì)量和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的穩(wěn)定性，同時(shí)還需要操作人員具備專業(yè)的技能和經(jīng)驗(yàn)。結(jié)合患者的實(shí)際病情，完善綜合性評(píng)估明確其獲得的結(jié)果，可有效提升血液配型的準(zhǔn)確度，提升臨床輸血的安全性。