崔明哲

（承德市雙灤區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 067000）

豬萎縮性鼻炎屬于一種呼吸道傳染病，雖然不會(huì)危及生命，但會(huì)對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成極為嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，導(dǎo)致飼料的利用率降低，影響生豬體重增長(zhǎng)，延遲出欄時(shí)間。為此，需加強(qiáng)AR 的診斷，并根據(jù)診斷結(jié)果，采取針對(duì)性的防治措施，降低該疾病的不良影響。故研究此項(xiàng)課題，具有十分重要的意義。

1 病原

AR 病原菌主要分為支氣管敗血波氏桿菌和產(chǎn)毒性巴氏桿菌，前者只對(duì)幼仔豬具有致病作用，而成年豬基本不產(chǎn)生病變，只是起到傳染源的作用。但如果豬舍內(nèi)的氨氣濃度超標(biāo)，或是攜帶其他真菌，都有可能加重病變。而后者能夠感染各年齡豬，引發(fā)鼻甲骨萎縮病變。

2 流行病學(xué)與臨床癥狀

AR 本身屬于一種慢性傳染病，由于病原體存在一定的差異性感染，發(fā)病的實(shí)際情況也不一致。比如：支氣管敗血波氏桿菌會(huì)造成3 周齡的豬發(fā)生鼻甲骨萎縮，而1 周齡內(nèi)的豬在感染時(shí)則會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重病變，至于6 周齡以上的豬，則基本不會(huì)出現(xiàn)病變。同時(shí)感染豬還會(huì)伴隨一定的肺炎，若感染數(shù)量較多，則豬群會(huì)集體呈現(xiàn)生長(zhǎng)遲滯的問題。產(chǎn)毒性巴氏桿菌則會(huì)感染各年齡的豬，引發(fā)鼻甲骨萎縮。在發(fā)病豬群中，許多成年豬均未出現(xiàn)臨床癥狀，但鼻腔內(nèi)的帶菌率極高，其主要傳播方式以飛沫傳播為主，被污染的工具、鞋子都可能成為傳播源，一旦豬群感染，往往難以有效清除。

至于AR 的臨床癥狀則表現(xiàn)為：病豬流鼻涕、吸氣困難，鼻中流出黏性膿液，病豬會(huì)因鼻部發(fā)癢，而出現(xiàn)搖頭、拱地等行為。同時(shí)由于病豬會(huì)產(chǎn)生結(jié)膜炎，會(huì)反映出一定的流淚癥狀，并在眼角處形成淚斑。若因支氣管敗血桿菌引發(fā)，則低齡豬的鼻甲骨萎縮現(xiàn)象會(huì)更加嚴(yán)重，至于大齡豬的病變則相對(duì)較輕。而感染產(chǎn)毒性巴氏桿菌的病毒，則會(huì)在臨床表現(xiàn)上出現(xiàn)一定的顏面變形，究其原因在于病豬感染后鼻腔骨骼會(huì)發(fā)生萎縮，進(jìn)而使覆蓋其上的皮膚以及皮下組織產(chǎn)生歪斜，最終造成豬的上下門齒無法正常咬合。同時(shí)萎縮性鼻炎的病豬大多患有肺炎，雖然單純的豬萎縮性鼻炎不會(huì)引發(fā)生豬的死亡，但因?yàn)榛疾∝i都存在一定的鈣代謝障礙，因此會(huì)造成生長(zhǎng)遲滯，進(jìn)一步降低機(jī)體的抵抗能力，容易造成呼吸道病，最終造成養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)的嚴(yán)重?fù)p失。若在觀察過程中發(fā)現(xiàn)有一定數(shù)量的豬出現(xiàn)生長(zhǎng)遲滯，則要第一時(shí)間借助病原鑒定完成病原學(xué)診斷。

3 診斷

本文以某地方城市的生豬養(yǎng)殖場(chǎng)作為研究對(duì)象，該養(yǎng)殖場(chǎng)為了進(jìn)一步擴(kuò)大養(yǎng)殖規(guī)模，在2017 年引進(jìn)了3 月齡的斷奶仔豬，共計(jì)20 頭。在仔豬到場(chǎng)后養(yǎng)殖人員并未做好嚴(yán)格的隔離工作，便將其混群養(yǎng)殖，直至在飼養(yǎng)的一周后，豬群中陸續(xù)出現(xiàn)食欲降低、流鼻涕等現(xiàn)象。在發(fā)病初期，養(yǎng)殖人員認(rèn)為只是豬的一種應(yīng)激反應(yīng)，而隨著病情的不斷加重，養(yǎng)殖人員發(fā)現(xiàn)共有29 頭豬發(fā)病，且死亡3 頭之后，養(yǎng)殖人員第一時(shí)間將患病豬進(jìn)行隔離處理，并上報(bào)獸醫(yī)站，采用抗生素治療，但均未起到明顯的改善效果。直至獸醫(yī)到場(chǎng)后發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖場(chǎng)的疫苗免疫工作不到位，且豬群飼養(yǎng)密度偏高，之后，獸醫(yī)將病灶第一時(shí)間帶回試驗(yàn)室診斷[1]。

3.1 病理學(xué)診斷

經(jīng)過對(duì)死亡豬的病理剖檢后發(fā)現(xiàn)，死亡豬大多瘦弱，豬的面部存在一定變形，鼻端向一側(cè)彎曲，抬起豬尸體的下顎部可以發(fā)現(xiàn)，鼻中隔正直，且鼻夾骨卷曲引發(fā)不同程度的萎縮，鼻中隔的彎曲不對(duì)稱，少數(shù)病仔豬會(huì)發(fā)生肺炎病變。

3.2 病原學(xué)診斷

第一，病料的采取與處理，需要實(shí)施活體采樣，利用酒精棉球預(yù)先消毒病豬鼻孔，并避免鼻孔殘留酒精，影響病原分離。之后使用棉頭拭子取樣，若無法立刻接種培養(yǎng)基，則要將其放在試管內(nèi)，并放在冰瓶送檢。至于尸體采樣，可在剖檢后觀察鼻夾骨的病變，使用滅菌棉拭子完成采樣。

第二，細(xì)菌的分離培養(yǎng)，需要在含有新霉素的馬丁瓊脂平板上使用拭子完成。在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)采用的馬丁瓊脂平板，需要在37℃的環(huán)境下培養(yǎng)24 h 左右，并根據(jù)熒光結(jié)構(gòu)挑選可疑菌落，完成移植鑒定。通常來說，巴氏桿菌的菌落直徑大約在2 mm，表現(xiàn)為光滑、透明、菌落呈黏液狀。在燈光較暗的室內(nèi)使用顯微鏡擴(kuò)大觀察后發(fā)現(xiàn)，菌落具有特征性的灰紅色光澤，即F0 類似菌落。

第三，特性鑒定，首先要鑒定支氣管波氏桿菌，需要將分離的單個(gè)菌落劃線接種在瓊脂平板上，并在37℃的環(huán)境下培養(yǎng)45 h，之后才可完成下一步鑒定。支氣管波氏桿菌本身屬于球桿菌，在氧化后會(huì)表現(xiàn)為陰性。并且采用的接種糖管要在37℃的潮濕環(huán)境下培養(yǎng)5 d 左右，記錄相關(guān)變化，才可開展MP 試驗(yàn)、定級(jí)試驗(yàn)，此類試驗(yàn)結(jié)果均為陰性。至于尿素酶試驗(yàn)則表現(xiàn)為陽性。而支氣管波氏桿菌本身具備一定的運(yùn)動(dòng)性，在平板表面出現(xiàn)一定的膜狀擴(kuò)散生長(zhǎng)，但在0.1%左右的瓊脂半固體板上則只會(huì)在表層生長(zhǎng)，不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)散生長(zhǎng)。根據(jù)菌相鑒定結(jié)果顯示，支氣管波氏桿菌的菌落相對(duì)較小，呈乳白色，不透明，使用鉑金圈進(jìn)行勾取時(shí)，會(huì)發(fā)現(xiàn)質(zhì)地相對(duì)柔軟，容易制成菌懸液，且菌落附近存在一定的溶血環(huán)。其次要進(jìn)行巴氏桿菌的鑒定，該桿菌主要表現(xiàn)為陰性，桿菌兩極染色，無運(yùn)動(dòng)性，對(duì)于可疑菌落可預(yù)先依照三糖鐵半固體培養(yǎng)的生長(zhǎng)特性，完成篩檢之后再開展其他鑒定。將單個(gè)菌落以接種針的形式插入管底，由原位抽出，并在37℃的環(huán)境下培養(yǎng)18 h 左右。此類桿菌的特性主要表現(xiàn)為沿穿刺線生長(zhǎng)，紅色無菌膜，不變黑，對(duì)蔗糖、木糖不產(chǎn)酸。VP 試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)以及明膠液化試驗(yàn)均表現(xiàn)為陰性，至于硝酸鹽還原試驗(yàn)則表現(xiàn)為陽性。之后對(duì)其進(jìn)行皮膚壞死能力檢查，采用350 g 的健康豚鼠，在背部注射，但要注意不可損傷皮膚，利用1 mL 的注射器在皮內(nèi)注射0.1 mL 的培養(yǎng)物，注射點(diǎn)需要與背中線保持1.5 cm 左右的間隔。設(shè)陽性參考株作對(duì)照，并在大腿肌肉注射1 mL 硫酸慶大霉素。在注射完成后，需進(jìn)行72 h 的觀察測(cè)量，經(jīng)觀察后發(fā)現(xiàn)，壞死區(qū)的直徑為1 cm，僅紅腫表現(xiàn)為陰性[2]。還要再次對(duì)多殺性桿菌的莢膜型完成鑒定，對(duì)于A 型菌株以及D 型菌株需分別采用透明質(zhì)酸形成試驗(yàn)以及吖啶黃試驗(yàn)。前者的試驗(yàn)需要在馬丁瓊脂平板上進(jìn)行，以直徑2 mm 劃出金黃色葡萄球菌，之后，在線的兩側(cè)取垂直方向，接種過夜培養(yǎng)物。設(shè)莢膜A 型、D 型巴氏桿菌作為參照物，在37℃的環(huán)境下培養(yǎng)20 h。其中A 型株的生長(zhǎng)線主要在葡萄球菌線區(qū)附近，存在一定的生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象。至于D 型菌株則無明顯的生長(zhǎng)抑制現(xiàn)象。最后還要將多殺性巴氏桿菌在馬丁瓊脂板上完成24 h培養(yǎng)，刮取菌苔，使其懸浮在生理鹽水中，取0.5 mL 細(xì)菌懸液與0.1%的吖啶黃蒸餾水混勻靜置，發(fā)現(xiàn)D 型桿菌會(huì)在5 min 后產(chǎn)生自凝現(xiàn)象，伴隨大量絮狀物，使上液呈現(xiàn)透明，至于其他細(xì)菌則不會(huì)出現(xiàn)顆粒沉淀，表現(xiàn)為上液渾濁[3]。

3.3 血清學(xué)診斷

豬萎縮性鼻炎的血清學(xué)診斷現(xiàn)階段只適用于多殺性桿菌感染診斷，至于支氣管敗血桿菌的診斷，則因?yàn)楦腥灸肛i可以將抗體傳給仔豬，因此具體的血清診斷方法只適用未注射疫苗的仔豬。

先要做好試管凝集試驗(yàn)，從生物制品廠購買抗原以及陽性對(duì)照血清。至于被檢血清則可從豬的耳靜脈采取、制備，保證無蛋白凝固、無腐敗氣味。至于稀釋液則要采取酸堿值為7 的磷酸鹽溶液，具體配制方法為：稱取1.2 g 磷酸鈉，6.8 g 氯化鈉，加蒸餾水至1000 mL，完成加熱溶解。之后用濾紙過濾，實(shí)現(xiàn)高壓滅菌。具體的試管凝集試驗(yàn)操作順序?yàn)椋和瓿杀粰z血清以及陰性對(duì)照血清與陽性對(duì)照血清的比對(duì)，在56℃的水浴箱中進(jìn)行30 min 左右的滅能，要求血清均采用口徑為10 mm的小試管進(jìn)行存儲(chǔ)。加入緩沖鹽溶液，在第一管中添加0.8 mL，其余各管均加入0.5 mL，并在滴管中實(shí)現(xiàn)血清的稀釋均勻，將其移入第二管。重復(fù)相應(yīng)操作，直至最后一管，棄去0.5 mL，保留稀釋血清0.5 mL。通常來說，被檢血清需要稀釋到1︰80；加抗原，需要在各管中加入0.5 mL 的抗原，振蕩混勻，將其放置在37℃的溫箱中。之后將其放置在室溫下，靜置2 h 觀察結(jié)果。在進(jìn)行結(jié)果判定時(shí)，若液體透明，管內(nèi)覆蓋沉淀物，則證明菌體被完全凝集。若菌體略顯渾濁，存在一定的凝集物沉淀，則證明有80%的菌體被凝集。若液體適度渾濁，管內(nèi)有少量凝集沉淀物質(zhì)，證明50%的菌體被凝集。若液體透明度不明顯，則證明只有25%的菌體被凝結(jié)。若液體無任何沉淀物，則證明無菌體凝集。當(dāng)抗原緩沖液對(duì)照管發(fā)生陰性反應(yīng)，且陽性血清對(duì)照管存在一定滴度時(shí)，證明被檢血清稀釋度超過10，有50%的菌體被凝集。此時(shí)可判定為支氣管波氏桿菌陰性反應(yīng)血清[4]。

此外，要進(jìn)行平板凝集試驗(yàn)，具體操作方式為：不對(duì)被檢血清以及對(duì)照血清進(jìn)行稀釋，也無需完成加熱滅能。需要在潔凈的玻璃板上劃分多個(gè)小格，之后，用1 mL 移液管加0.03 mL 的血清，并混合抗原血原液，搖動(dòng)玻璃板，使兩者充分混合，并在室溫條件下放置2 min 左右。若室溫環(huán)境不足20℃，則要適當(dāng)延長(zhǎng)靜置時(shí)間。在此過程中要注意，每次平板凝集試驗(yàn)需要設(shè)定對(duì)照組，在結(jié)果判定時(shí)若規(guī)定時(shí)間內(nèi)液滴出現(xiàn)顆粒狀凝結(jié)物，則證明100%菌體被凝聚。若液體接近透明，則證明近80%的菌體被凝集。若液滴中的顆粒狀基塊顯示較為遲緩，則證明只有50%的群體被凝集。如果液滴中液體渾濁，則證明有25%的菌體被凝結(jié)。若液滴無凝集顆粒，證明菌體無任何凝集[5]。

4 防治

4.1 免疫接種

根據(jù)實(shí)際調(diào)查顯示，免疫接種是現(xiàn)階段實(shí)現(xiàn)AR 控制的最佳手段，利用免疫母豬，可以使仔豬獲得更好的被動(dòng)保護(hù)，避免出現(xiàn)早期感染問題。通常來說，免疫的最佳時(shí)間取決于地方的流行程度，對(duì)于普通成年母豬來說，需要在耳后肌肉注射滅活苗2 mL。至于未接種疫苗的種豬則要在隔離180 d 后，完成兩次免疫接種。現(xiàn)階段，我國主要采取的AR 疫苗以Bb+Pm-D 型毒素疫苗、D 型類毒素疫苗為主。根據(jù)不同國家的大量試驗(yàn)顯示，只有最純化的類毒素才能有效刺激機(jī)體形成抗毒素，因此Bb+Pm-D 型毒素疫苗的效果最佳。

4.2 做好豬群管理

各豬場(chǎng)都需做好豬場(chǎng)的衛(wèi)生防疫工作，適當(dāng)調(diào)整豬群的飼養(yǎng)密度以及飼養(yǎng)方式，最大程度減少空氣內(nèi)的有害氣體，改善豬舍的通風(fēng)條件，保持豬舍干凈整潔，控制好應(yīng)激因素，并定期進(jìn)行噴灑消毒液，降低發(fā)病概率。同時(shí)還要做好人員的學(xué)習(xí)教育，要求養(yǎng)殖人員掌握先進(jìn)的防治知識(shí)，保證各項(xiàng)治理措施的有效落實(shí)。

4.3 堅(jiān)持自繁自養(yǎng)

之所以頻繁出現(xiàn)疫病，其本質(zhì)原因在于豬只的頻繁移運(yùn)，因此豬場(chǎng)應(yīng)堅(jiān)持少進(jìn)出的原則，堅(jiān)決禁止從疫區(qū)引進(jìn)生豬，并確保引入的種豬無疫病，直至隔離30 d后才可合群飼養(yǎng)。

4.4 實(shí)施藥物預(yù)防

為了更好地預(yù)防AR，需要做好母仔鏈的傳染控制，要求母豬在妊娠的最后一個(gè)月內(nèi)在飼料中適當(dāng)添加預(yù)防性藥物，比如金霉素、泰樂菌素、弗蘭尼考等。一般情況下，每噸飼料中的預(yù)防性藥物量可設(shè)定為：強(qiáng)力霉素150 g，磺胺二甲嘧啶100 g，阿莫西林100 g，直至母豬產(chǎn)后的兩周都應(yīng)做到持續(xù)使用。3 周內(nèi)的仔豬，則要堅(jiān)持每周注射一次強(qiáng)力霉素。至于育成豬，同樣可利用抗生素進(jìn)行預(yù)防，持續(xù)時(shí)間大致在4 周左右，并依照國家的相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)，按時(shí)停藥。

4.5 AR 凈化

現(xiàn)階段，世界各國均啟動(dòng)了AR 根除計(jì)劃，用以實(shí)現(xiàn)AR 的控制與凈化。借助無特定病原豬生產(chǎn)技術(shù)，提高豬群的生產(chǎn)性能。但此類技術(shù)相對(duì)復(fù)雜，成本較高，容易使健康豬群二次感染，因此需要建立適合的生產(chǎn)體系，并進(jìn)一步改進(jìn)原有技術(shù)。而隔離早期斷奶技術(shù)能夠徹底切斷母源性疾病，但由于操作相對(duì)簡(jiǎn)易，因此需要結(jié)合一定的防疫措施。雖然該方法存在極高的可行性，但仍值得進(jìn)一步探究。在具體的實(shí)施過程中需要做好養(yǎng)豬場(chǎng)的病原學(xué)調(diào)查以及血清學(xué)調(diào)查，以此制定根除計(jì)劃，并對(duì)陽性豬群實(shí)施病原菌的分離鑒定，確定適合的敏感藥物。至于在治療階段則要嚴(yán)格限制豬只流動(dòng)，加強(qiáng)豬場(chǎng)凈化，注意敏感藥物的更換，降低豬群的耐藥性。

5 結(jié)論

綜上所述，通過將生豬養(yǎng)殖場(chǎng)作為研究對(duì)象，闡述豬萎縮性鼻炎的臨床癥狀以及病理學(xué)、病原學(xué)、血清學(xué)等診斷措施，并提出免疫接種、做好豬群管理、堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、實(shí)施藥物預(yù)防等一系列豬萎縮性鼻炎的防治措施，以此幫助生豬養(yǎng)殖場(chǎng)更好地實(shí)現(xiàn)豬群管理，降低豬萎縮性鼻炎的形成概率。