劉 容,林 穎,崔小平,黎上琳

(重慶大學附屬黔江醫(yī)院,重慶 409000)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一種慢性自身免疫性疾病,可累及皮膚、關(guān)節(jié)、腎臟和神經(jīng)系統(tǒng)等全身多個器官和系統(tǒng),其中神經(jīng)精神性系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Neuropsychiatric systemic lupus erythematosus,NPSLE)是SLE累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)導致的一組非特異性和異質(zhì)性的神經(jīng)精神癥狀,大約一半SLE患者在發(fā)病后3～5年內(nèi)發(fā)展為NPLSE[1-2]。NPLSE包括局灶性和非局灶性NPSLE,局灶性NPSLE主要由抗磷脂抗體介導的血栓栓塞引起,非局灶性NPSLE往往引起情感障礙和認知異常,顯著影響患者生活質(zhì)量[3]。由于目前缺乏特異性的生物學標志物和客觀影像學指標,NPLSE的診斷和治療面臨較大挑戰(zhàn)。血清生物學標志物檢測便捷,可重復性強,靈敏度高,探討NPLSE相關(guān)的血清生物學標志物對NPSLE的診斷和治療有重要意義。S100A8/A9是一種Ca2+結(jié)合蛋白復合物,在炎癥反應(yīng)中由吞噬細胞釋放并促使炎癥細胞因子釋放,啟動炎癥反應(yīng)。有研究[4]發(fā)現(xiàn),S100A8/A9與SLE疾病活動度和腎損傷有關(guān)。高水平S100A8/A9與缺血性腦卒中所致神經(jīng)損傷及預后不良關(guān)系密切[5]。目前,關(guān)于S100A8/A9是否與NPSLE有關(guān)尚不清楚,缺乏相關(guān)報道。神經(jīng)絲輕鏈(Neurofilament light chain,NfL)是在中樞和外周神經(jīng)元中特異性表達的結(jié)構(gòu)支架蛋白,在神經(jīng)退行性病變、炎癥或創(chuàng)傷過程中被釋放并經(jīng)腦脊液進入外周血液循環(huán),血清NfL水平被認為是神經(jīng)損傷的標志物[6]。因此,NfL可能有望用于評估SLE患者異常神經(jīng)精神表現(xiàn)。故本研究檢測SLE患者血清S100A8/A9和NfL水平,探討它們是否能作為NPSLE的潛在標志物,以期為臨床識別NPSLE提供參考。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2019年9月1日至2022年9月1日本院收治的SLE患者165例為研究對象。病例納入標準:符合《系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷及治療指南》診斷標準[7];年齡18周歲以上;書面知情同意本研究。排除標準:多發(fā)性硬化癥、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、類風濕性關(guān)節(jié)炎等;阿爾茨海默病、帕金森綜合征、腦卒中、精神分裂癥等神經(jīng)精神疾病;膿毒癥、惡性腫瘤以及血液系統(tǒng)疾病;嚴重心、肺、肝、腎功能障礙。根據(jù)是否發(fā)生NPSLE將患者分為NPSLE組(77例)和非NPSLE組(88例)。NPSLE由風濕科醫(yī)師和神經(jīng)科醫(yī)師參考2019年歐洲抗風濕病聯(lián)盟/美國風濕病學會系統(tǒng)性紅斑狼瘡分類標準[8]共同診斷。根據(jù)SLE疾病活動性指數(shù)2000(SLEDAI-2000)評分[9]將NPSLE組患者分為輕度組(5～9分,23例)、中度組(10～14分,32例)和重度組(≥15分,22例)。本研究已獲得醫(yī)院倫理委員會審批。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床資料收集:收集患者入組年齡、發(fā)病時年齡、性別、SLE病程、臨床特征(發(fā)熱、血管炎性皮損、高血壓、蝶形紅斑、雷諾現(xiàn)象、關(guān)節(jié)炎、蛋白尿)以及治療方案(糖皮質(zhì)激素、糖皮質(zhì)激素聯(lián)合羥氯喹、糖皮質(zhì)激素聯(lián)合免疫抑制劑)。

1.2.2 血清S100A8/A9、NfL檢測:診斷NPSLE的同一天采集外周肘靜脈血,室溫靜置待血液自然凝固后取上層液離心(3000 r/min,半徑10 cm,5 min)獲得血清樣本。采用Cytation 5多功能酶標儀,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清S100A8/A9(試劑盒批號:EM1620,武漢菲恩生物科技有限公司)和NfL(試劑盒批號:ml0033,上海紀寧科技有限生物公司)水平。

1.2.3 其他相關(guān)生化指標檢測:采用間接免疫熒光法測定抗核抗體(ANA)、抗磷脂抗體(APA)、抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)抗體。采用歐蒙斑點法測定抗干燥綜合征A(SSA)抗體、抗干燥綜合征抗原B(SSB)抗體、抗史密斯(SM)抗體。采用丹麥雷度全自動血沉儀測定血沉(ESR)。采用Vi-CELL BLU全自動血細胞分析儀檢測白細胞計數(shù)(WBC)、血小板計數(shù)(PLT)。采用Cobas e411全自動生化分析儀檢測谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)。

2 結(jié) 果

2.1 NPSLE組與非NPSLE組患者臨床資料比較 見表1。NPSLE組發(fā)病年齡小于非NPSLE組,SLE病程大于非NPSLE組(均P<0.05)。NPSLE組發(fā)熱比例、血管炎性皮損比例、APA陽性比例、ESR、ALT、AST高于非NPSLE組,WBC、PLT低于非NPSLE組(均P<0.05)。

表1 NPSLE組與非NPSLE組患者臨床資料比較

2.2 兩組患者血清S100A8/A9、NfL水平比較 見表2。NPSLE組血清S100A8/A9、NfL水平高于非NPSLE組(均P<0.05)。

表2 兩組患者血清S100A8/A9、NfL水平比較

2.3 不同嚴重程度NPSLE患者血清S100A8/A9、NfL水平比較 見表3。重度組血清S100A8/A9、NfL水平高于中度組和輕度組,且中度組高于輕度組(均P<0.05)。

表3 不同嚴重程度NPSLE患者血清S100A8/A9、NfL水平比較

2.4 SLE患者發(fā)生NPSLE的影響因素Logistic回歸分析 見表4。以發(fā)病年齡、SLE病程、是否發(fā)熱(否=0,是=1)、是否出現(xiàn)血管炎性皮損(否=0,是=1)、APA(陰性=0,陽性=1)、ESR、ALT、AST、WBC、PLT、S100A8/A9、NfL為自變量(連續(xù)性變量直接代入),以SLE 患者是否發(fā)生NPSLE為因變量(否=0,是=1)建立Logistic回歸方程,采用向后逐步法排除無關(guān)變量,結(jié)果顯示血清S100A8/A9、NfL水平是SLE 患者發(fā)生NPSLE的獨立影響因素(均P<0.05)。

表4 SLE患者發(fā)生NPSLE的Logistic回歸分析

2.5 S100A8/A9、NfL對SLE患者發(fā)生NPSLE的診斷價值 見表5。血清S100A8/A9、NfL以及兩者聯(lián)合檢測診斷NPSLE的曲線下面積(AUC)分別為0.724、0.730、0.902,且兩者聯(lián)合診斷效能大于血清S100A8/A9和NfL單獨診斷效能(Z=4.241、4.356,均P<0.05)。

表5 S100A8/A9、NfL對SLE患者發(fā)生NPSLE的診斷價值

3 討 論

NPSLE可引起認知障礙、情感性障礙、頭痛、中風、癲癇、脊髓病以及精神病等嚴重神經(jīng)和精神性疾病,降低患者的生活質(zhì)量和工作能力且預后較差,是導致SLE患者病死的主要原因。NPSLE發(fā)病機制復雜,目前尚未完全清楚,可能與血腦屏障功能障礙、細胞因子和自身抗體介導的神經(jīng)炎癥、血管和腦組織損傷等有關(guān)[10-11]。

S100A8/A9是鈣顆粒蛋白,屬于S100家族成員,通常以一種活性異二聚復合物的形式存在。S100A8/A9在中性粒細胞、單核細胞和吞噬細胞中大量表達,作為內(nèi)源性損傷的相關(guān)分子模式,在炎癥反應(yīng)中被動或主動釋放,通過與Toll樣受體4和晚期糖基化終產(chǎn)物受體等多種膜受體相互作用,激活核因子-κB信號通路募集白細胞并分泌細胞因子,在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[12]。研究[13]發(fā)現(xiàn),高水平S100A8/A9與類風濕性關(guān)節(jié)炎疾病活動度增加、甲氨蝶呤治療反應(yīng)差有關(guān)。SLE患者血清S100A8/A9水平升高是患者腎損傷的標志物[14]。本研究發(fā)現(xiàn),NPSLE組血清S100A8/A9水平增高,且與疾病嚴重程度呈正相關(guān),是SLE患者發(fā)生NPSLE的獨立影響因素,表明S100A8/A9可能參與SLE神經(jīng)損傷過程。研究[15]表明,S100A8/A9作為一種促炎蛋白,可促使淀粉樣β斑塊形成,激活星形膠質(zhì)細胞,誘導神經(jīng)炎癥,與阿爾茨海默病發(fā)病密切相關(guān)。多發(fā)性硬化癥患者血清S100A8/A9水平顯著增高,S100A8/A9異二聚體復合物形成有助于促使髓源性抑制細胞形成,增加多發(fā)性硬化癥的發(fā)病風險[16]。以上研究表明,S100A8/A9可能參與多種神經(jīng)疾病的神經(jīng)損傷過程。但S100A8/A9參與NPSLE發(fā)生的機制尚不清楚,推測為SLE全身炎癥狀態(tài)下S100A8/A9大量激活和釋放,經(jīng)血腦屏障進入腦組織,誘導小膠質(zhì)細胞激活、增殖和遷移,導致巨噬細胞從抗炎的M2表型轉(zhuǎn)變?yōu)榇傺椎腗1表型,激活核因子-κB信號通路導致促炎細胞因子和趨化因子產(chǎn)生,從而引起神經(jīng)細胞損傷和NPSLE。

神經(jīng)絲屬于中間細絲家族,是神經(jīng)元的細胞骨架組成部分,在軸突中表達豐富,為軸突提供結(jié)構(gòu)支持,維持軸突的大小、形狀和口徑。神經(jīng)絲包括三個亞單位,分別為NfL、神經(jīng)絲中鏈和神經(jīng)絲重鏈,其中NfL研究最為廣泛。NfL在中樞神經(jīng)軸突損傷后釋放到腦脊液和血液中,被認為是軸突損傷和神經(jīng)元凋亡的標志物[17]。研究[18-19]發(fā)現(xiàn),多發(fā)性硬化癥(一種與脫髓鞘和神經(jīng)退行性變相關(guān)的自身免疫性疾病)、額顳葉癡呆患者血清NfL水平均顯著增高,且與多發(fā)性硬化癥疾病活動加重和額顳葉癡呆患者認知功能損傷程度增加有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn),NfL與SLE患者神經(jīng)系統(tǒng)損傷有關(guān),NPSLE組血清NfL水平高于非NPSLE組,且NfL水平與NPSLE疾病嚴重程度有關(guān),是SLE患者發(fā)生NPSLE的獨立影響因素。提示軸突損傷后NfL被釋放到細胞外液、腦脊液和血液中,引起血清NfL水平升高,NfL可作為SLE神經(jīng)損傷的標志物。NfL參與NPSLE的發(fā)病機制尚不清楚,分析可能機制為SLE累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)后,軸突損傷引起神經(jīng)元和軸突中NfL異常聚集、運輸失敗和軸突變性,導致軸突和神經(jīng)纖維萎縮,繼而引起信號轉(zhuǎn)導受損和神經(jīng)功能損傷[20]。本研究中ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清S100A8/A9、NfL以及兩者聯(lián)合檢測診斷NPSLE的AUC分別為0.724、0.730、0.902,且兩者聯(lián)合診斷效能較單獨診斷效能更高,表明血清S100A8/A9、NfL水平均升高對識別SLE患者神經(jīng)損傷風險價值更高。

綜上所述,NPSLE患者血清S100A8/A9、NfL水平均升高,與疾病嚴重程度相關(guān),是SLE 患者發(fā)生NPSLE的獨立影響因素,兩者聯(lián)合檢測對診斷NPSLE效能更高。但因本研究為橫斷面研究,尚不能證明S100A8/A9、NfL與NPSLE的直接關(guān)系,需進一步開展大樣本、多中心、縱向臨床研究加以證實。