曾靜，趙子瑄，花雷，陽勇，5，張小梅，5，魏江平，，李利生（1.遵義醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)藥理教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨特色民族藥教育部國際合作聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室，貴州 遵義 56000；2.遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省基礎(chǔ)藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/藥學(xué)院藥理學(xué)教研室，貴州 遵義 56000；.重慶市中藥研究院/國家中醫(yī)藥管理局中藥化學(xué)三級實(shí)驗(yàn)室，重慶 00065；.重慶醫(yī)科大學(xué)，重慶 00016；5.川渝共建慢病中藥新藥瀘州市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 瀘州 66000）

我國已步入人口老齡化時(shí)代，阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）已成為威脅老年群體健康的重大挑戰(zhàn)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為脾胃為人體氣血生化之源，為后天之本，脾胃虛弱是導(dǎo)致癡呆發(fā)病的重要原因。脾為生痰之源，痰濁內(nèi)盛，阻塞清竅則發(fā)癡呆，著名醫(yī)家陳士鐸將從脾論治AD概括為“治呆無奇法，治痰即治呆”。異功散是北宋醫(yī)家錢乙所創(chuàng)的名方，首載于《小兒藥證直訣》，后被《脾胃論》收載，由人參、茯苓、白術(shù)、陳皮和甘草組成。黨參異功散將異功散方中人參替換為黨參而得，具有補(bǔ)氣健脾、行氣化滯的功效，擅長調(diào)理脾運(yùn)。其中黨參補(bǔ)中益氣、生津；茯苓益脾和胃、寧心安神；白術(shù)為補(bǔ)脾胃之要藥，善健脾益氣、燥濕利水；陳皮理氣健脾、燥濕化痰；甘草益氣補(bǔ)中、調(diào)和諸藥。上述5 味中藥均是治療AD 的常用藥[1]，由四君子湯加陳皮而成方，四君子湯具有明確的抗AD 作用[2-3]，而陳皮中的川陳皮素（Nobiletin）[4]、橙皮苷（Hesperidin）[5]和橘皮素（Tangeretin）[6]等活性成分均有明顯的抗AD效應(yīng)。

近年來大量研究[7-10]發(fā)現(xiàn)，脾臟與腦通過免疫炎癥機(jī)制與諸多神經(jīng)系統(tǒng)性疾病相關(guān)聯(lián)，脾-腦鏈接機(jī)制有助于闡釋中醫(yī)從脾論治AD的科學(xué)內(nèi)涵。腫瘤壞死因子α（TNF-α）是一種由多種細(xì)胞產(chǎn)生的跨膜蛋白，是包括大腦在內(nèi)的諸多器官系統(tǒng)免疫應(yīng)答的主要調(diào)節(jié)因子[11]。腦卒中發(fā)生時(shí)脾細(xì)胞如單核細(xì)胞及T細(xì)胞等受趨化因子信號募集遷移至腦，分泌TNF-α等炎性因子促進(jìn)炎癥和組織損傷[9，12]。TNF-α 與其受體（TNFRs）結(jié)合，啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號級聯(lián)，促進(jìn)谷氨酸的大量釋放，進(jìn)一步加重神經(jīng)細(xì)胞損傷或死亡[13]。本研究在預(yù)實(shí)驗(yàn)中通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，黨參異功散治療AD的潛在作用機(jī)制涉及TNF靶點(diǎn)及其相關(guān)信號通路。D-半乳糖誘導(dǎo)的亞急性衰老動(dòng)物表現(xiàn)出神經(jīng)、免疫（脾臟、胸腺）等功能退化，涉及免疫炎癥等機(jī)制[14]，是常用的AD動(dòng)物模型[15-16]。故本研究擬以D-半乳糖誘導(dǎo)AD 小鼠模型，基于TNF-α/TNFRs信號探討黨參異功散抗AD的分子機(jī)制，以期為“治痰即治呆”理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物雄性昆明（KM）小鼠40 只，SPF 級，體質(zhì)量（20±2）g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號：SCXK（湘）2019-0004，動(dòng)物質(zhì)量合格證號：430727220100313743。動(dòng)物飼養(yǎng)于重慶市中藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所動(dòng)物觀察室，自由攝食、飲水。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)重慶市中藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查委員會(huì)審批，批文號：YHS2022-04。

1.2 藥物及制備黨參（批號：200701）、茯苓（批號：211201）、白術(shù)（批號：200401）、陳皮（批號：211101）和甘草（批號：201201），均購自重慶華奧藥業(yè)有限公司，上述藥材均由重慶市中藥研究院中藥生藥研究所瞿顯友研究員鑒定為正品。取上述5味中藥飲片各50 g，依次加8、6、4 倍量水，加熱提取3 次，每次0.5 h；濾過，合并濾液，濃縮至300 mL（0.8 g·mL-1），冷藏備用。

1.3 試劑D-半乳糖（批號：21161745），合肥蘭杰柯科技公司；鹽酸多奈派齊片（安理申，批號：2105147），衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司；離子鈣結(jié)合適配器分子1（IBA1）抗體（批號：ab178846）、膠質(zhì)纖維狀酸性蛋白（GFAP）抗體（批號：ab7260）、突觸素（Synaptophysin）抗體（批號：ab32127），均購自美國Abcam公司；DAPI（批號：G1012）和抗熒光淬滅封片劑（批號：G1401），均購自武漢賽維爾公司。腫瘤壞死因子受體1（TNFR1）抗體（批號：T55380M）、腫瘤壞死因子受體2（TNFR2）抗體（批號：TA0282M）、轉(zhuǎn)化生長因子α（TGF-α）ELISA 試劑盒（批號：ABJ0400A）、TGF-β ELISA試劑盒（批號：AB-J0401A），均購自艾比瑪特生物醫(yī)藥（上海）公司；TNF-α ELISA試劑盒（批號：EK282/4-96）、白細(xì)胞介素10（IL-10）ELISA試劑盒（批號：EK210/4-96），均購自杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司；谷氨酸測試盒（批號：20220715），南京建成生物工程研究所。

1.4 儀器MP30KC 型電子天平，上海舜字恒平科學(xué)儀器有限公司；BSA224S型電子天平（萬分之一），賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；Morris水迷宮分析系統(tǒng)，荷蘭Noldus公司；JB-P5型包埋機(jī)，武漢俊杰電子有限公司；RM2016型病理切片機(jī)，上海徠卡儀器有限公司；E100 型顯微鏡、DS-U3 成像系統(tǒng)，日本尼康公司；熒光正置顯微鏡，日本Olympus 公司；Read Max 1200型光吸收全波長酶標(biāo)儀，上海閃譜生物科技公司；WD-9423BC 型化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)，北京六一生物科技公司；Power Pac 基礎(chǔ)電泳儀，美國Bio-Rad公司。

2 方法

2.1 黨參異功散治療AD 的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫（https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）分別檢索黨參異功散中所包含的5 味中藥的化學(xué)成分，并以口服生物利用度（Oral bioavailability，OB）≥30%、類藥性（Druglikeness，DL）≥0.18為條件，篩選活性成分及其作用靶點(diǎn)，剔除無對應(yīng)靶點(diǎn)的成分。在BATMAN-TCM 數(shù)據(jù)庫（http：//bionet.ncpsb.org.cn/batman-tcm/）中繼續(xù)分別檢索黨參異功散中所包含的5 味中藥的作用靶點(diǎn)，將有關(guān)參數(shù)設(shè)定為Score cutoff＞100、AdjustedP-value≥0.05，并將所得靶點(diǎn)與TCMSP 數(shù)據(jù)庫得到的靶點(diǎn)進(jìn)行比較，去除重復(fù)靶點(diǎn)。在DisGeNET平臺（https：//www.disgenet.org）中檢索AD疾病相關(guān)靶點(diǎn)（EI=1），然后獲取黨參異功散成分作用靶點(diǎn)和AD 疾病相關(guān)靶點(diǎn)的交集（共同靶點(diǎn)），即為黨參異功散治療AD 的潛在作用靶點(diǎn)。運(yùn)用STRING 數(shù)據(jù)庫（https：//cn.string-db.org）對潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白互作（PPI）網(wǎng)絡(luò)分析，然后通過Cytoscape軟件的CentiScaPe插件分析出關(guān)鍵靶點(diǎn)，并對其進(jìn)行KEGG通路富集分析。

2.2 分組、模型復(fù)制及給藥[17]將小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力評價(jià)（Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)），然后根據(jù)各小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力結(jié)合體質(zhì)量隨機(jī)分為空白組、模型組、安理申組（1.5 mg·kg-1）及黨參異功散高（7.5 g·kg-1）、低（3.75 g·kg-1）劑量組，每組8 只。除空白組外，其余各組小鼠頸背部皮下注射200 mg·kg-1D-半乳糖復(fù)制AD 小鼠模型，每天1 次，連續(xù)30 d，空白組小鼠在相同部位注射等體積生理鹽水。同時(shí)給藥組每天以相應(yīng)劑量藥物灌胃（10 mL·kg-1），空白組及模型組灌胃等體積純水，每天1 次，連續(xù)30 d。根據(jù)《中華人民共和國藥典》中的規(guī)定劑量結(jié)合異功散處方中各藥物等分配比，確定臨床用量為每日45 g，以人用劑量的10 倍為小鼠等效劑量，折算黨參異功散高、低劑量為7.5、3.75 g·kg-1。

2.3 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)給藥第26 天至第30 天進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，檢測小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。定向航行試驗(yàn)中將所有小鼠分別從面朝池壁的同一定點(diǎn)依次放入池中，記錄2 min內(nèi)小鼠找到隱藏平臺的時(shí)間即為逃避潛伏期；若未找到平臺則引導(dǎo)小鼠至平臺上并停留10 s。第5天進(jìn)行空間探索試驗(yàn)，記錄各組小鼠在平臺象限的停留時(shí)間、穿越平臺象限次數(shù)。

2.4 小鼠海馬組織病理形態(tài)學(xué)觀察完成末次Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)后，麻醉后處死小鼠，冰上取腦組織。將小鼠海馬及皮層組織于4%多聚甲醛溶液中固定后，經(jīng)乙醇梯度脫水、二甲苯透明后進(jìn)行石蠟切片（5 μm）；選取海馬及皮層組織各區(qū)域完整的切片，經(jīng)二甲苯脫蠟、梯度乙醇脫水后，進(jìn)行常規(guī)蘇木素-伊紅（HE）染色；透明、封片后，在顯微鏡下觀察海馬細(xì)胞的病理形態(tài)變化，并進(jìn)行海馬受損神經(jīng)細(xì)胞病理評分[18]。

2.5 免疫熒光法檢測小鼠海馬組織GFAP、IBA1 及Synaptophysin 的表達(dá)將用4%多聚甲醛溶液固定后的海馬組織脫水、包埋后，切成5 μm 薄片，以5% Triton-X-100 通透后滴加10%山羊血清封閉液進(jìn)行封閉；然后滴加IBA1、GFAP、Synaptophysin 抗體，4 ℃下過夜；PBS 清洗后，滴加熒光二抗后在37 ℃下孵育1 h；避光條件下滴加含DAPI 的抗熒光衰減封片劑封片；在熒光顯微鏡下觀察并拍照，采用ImageJ 圖像分析系統(tǒng)測定陽性表達(dá)面積比，作為蛋白表達(dá)水平。

2.6 ELISA 法測定小鼠海馬及皮層組織中谷氨酸、TNF-α、IL-10、TGF-α、TGF-β 水平根據(jù)各試劑盒樣本制備要求制備腦組織樣本勻漿液，然后嚴(yán)格按照各試劑盒說明書步驟操作，分別檢測各組小鼠海馬及皮層組織中的谷氨酸、TNF-α、IL-10、TGF-α、TGF-β含量。

2.7 Western Blot 法檢測小鼠海馬及皮層組織中TNFR1、TNFR2 蛋白表達(dá)水平取小鼠海馬及皮層組織，稱定質(zhì)量后，加入含有PMSF 的RIPA 裂解液（含有1%磷酸酶抑制劑∶1% PMSF），勻漿后以4 ℃、12 000 r·min-1（離心半徑=5 cm）離心10 min，采用BCA 法測定上清液蛋白濃度。加上樣緩沖液和RIPA 制備樣品，蛋白經(jīng)SDS-PAGE 電泳后，轉(zhuǎn)移至PVDF 膜上；用5%脫脂奶粉封閉1.5 h 后，加入一抗［TNFR1（1∶1 000）、TNFR2（1∶1 000）、GAPDH（1∶5 000）］孵育過夜；洗滌后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記山羊抗小鼠IgG 二抗（1∶4 000），室溫下孵育1.5 h；使用超敏增強(qiáng)型化學(xué)發(fā)光試劑（ECL）顯影并掃描，采用Quantity One 軟件分析計(jì)算蛋白條帶灰度值，并進(jìn)行半定量分析。

2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用GraphPad Prism 9 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；多組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩兩比較采用Tukey’s 檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布則采用非參數(shù)檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 黨參異功散治療AD 的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析結(jié)果通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析獲得黨參異功散的活性成分112 個(gè)，作用靶點(diǎn)375個(gè)，AD疾病相關(guān)靶點(diǎn)3 053個(gè)，黨參異功散治療AD 的潛在作用靶點(diǎn)187 個(gè)。潛在作用靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)分析后通過Cytoscape 軟件的CentiScaPe 插件分析出關(guān)鍵靶點(diǎn)38 個(gè)。對關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG 通路富集分析，得到107 條與AD 疾病相關(guān)的信號通路，包括神經(jīng)TNF信號通路、PI3K-Akt信號通路、MAPK信號通路、IL-17信號通路等，結(jié)果見圖1、表1。

表1 黨參異功散治療阿爾茲海默病關(guān)鍵靶點(diǎn)的KEGG 通路富集分析Table 1 KEGG pathway enrichment analysis of key targets of Dangshen Yigong San in the treatment of Alzheimer’s disease

圖1 黨參異功散治療阿爾茲海默病關(guān)鍵靶點(diǎn)的KEGG 通路富集分析Figure 1 KEGG pathway enrichment analysis of key targets of Dangshen Yigong San in the treatment of Alzheimer’s disease

3.2 黨參異功散對AD 小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響結(jié)果見圖2。與空白組比較，模型組小鼠的第5 天逃避潛伏期顯著延長（P＜0.01），穿越平臺象限次數(shù)及停留時(shí)間明顯減少（P＜0.05）。與模型組比較，黨參異功散高劑量組小鼠第5天的逃避潛伏期顯著縮短（P＜0.01），高、低劑量組小鼠穿越平臺象限次數(shù)及停留時(shí)間明顯增加（P＜0.05，P＜0.01）。

圖2 黨參異功散對阿爾茲海默病小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響（±s，n=8）Figure 2 Effect of Dangshen Yigong San on learning and memory ability of Alzheimer’s disease mice（±s，n=8）

3.3 黨參異功散對AD 小鼠海馬組織病理變化的影響結(jié)果見圖3。與空白組比較，模型組小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞排列紊亂（紅色箭頭），部分細(xì)胞缺失，細(xì)胞間隙變大（藍(lán)色箭頭），并可見細(xì)胞核固縮、變性或死亡（黃色箭頭），病理評分顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，黨參異功散高、低劑量組小鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞排列相對整齊、緊密，結(jié)構(gòu)清晰，偶見個(gè)別神經(jīng)細(xì)胞變性或死亡，病理評分明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）。

圖3 黨參異功散對阿爾茲海默病小鼠海馬組織病理變化的影響（HE 染色；±s，n=8）Figure 3 Effect of Dangshen Yigong San on pathological changes of hippocampal tissue in Alzheimer’s disease mice（HE staining；±s，n=8）

3.4 黨參異功散配伍對AD 小鼠海馬組織GFAP、IBA1、Synaptophysin 表達(dá)的影響結(jié)果見圖4。與空白組比較，模型組小鼠海馬組織的GFAP、IBA1陽性表達(dá)面積比顯著升高（P＜0.01），Synaptophysin 陽性表達(dá)面積比顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，黨參異功散高、低劑量組小鼠海馬組織的GFAP、IBA1 陽性表達(dá)面積比顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），Synaptophysin 陽性表達(dá)面積比顯著升高（P＜0.01）。

3.5 黨參異功散對AD 小鼠腦組織中谷氨酸、TNF-α、IL-10、TGF-α、TGF-β 水平的影響結(jié)果見圖5。與空白組比較，模型組小鼠腦組織中谷氨酸、TNF-α、TGF-α、TGF-β 含量均顯著升高（P＜0.01），IL-10 含量顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，黨參異功散高、低劑量組小鼠腦組織中谷氨酸、TNF-α、TGF-α 含量均顯著降低（P＜0.01），IL-10含量顯著升高（P＜0.01）；黨參異功散低劑量組小鼠腦組織中TGF-β含量顯著降低（P＜0.01）。

3.6 黨參異功散對AD 小鼠腦組織TNFR1、TNFR2蛋白表達(dá)的影響結(jié)果見圖6。與空白組比較，模型組小鼠腦組織TNFR1 蛋白表達(dá)明顯上調(diào)（P＜0.05），TNFR2 蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.01）。與模型組比較，黨參異功散高劑量組小鼠腦組織TNFR1 蛋白表達(dá)明顯下調(diào)（P＜0.05），TNFR2 蛋白表達(dá)明顯上調(diào)（P＜0.05）。

圖6 黨參異功散對阿爾茲海默病小鼠腦組織TNFR1、TNFR2 蛋白表達(dá)的影響（±s，n=8）Figure 6 Effect of Dangshen Yigong San on TNFR1 and TNFR2 protein expressions in brain tissue of Alzheimer’s disease mice（±s，n=8）

4 討論

阿爾茨海默?。ˋD）屬中醫(yī)學(xué)“癡呆”“呆病”范疇，病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)，本虛為腎精虧損和氣血不足，標(biāo)實(shí)為痰濁阻竅、氣滯血瘀，虛、痰、瘀互結(jié)并貫穿疾病始終[18-19]。脾為氣血生化之源、后天之本，脾虛則運(yùn)化水谷精微不力，導(dǎo)致氣血乏源、精氣生化不足無以充腦填髓；再者脾運(yùn)化失常，聚濕生痰，痰瘀互結(jié)，久釀成毒，蒙蔽清竅，故脾在AD疾病過程中具有重要意義。臨床上常用茯苓健脾除濕，甘草溫運(yùn)脾胃，人參或黨參補(bǔ)脾生津，白術(shù)健脾燥濕，陳皮理氣化痰，均是治療AD 的常用中藥[20-22]。黨參、人參均為補(bǔ)氣要藥，常用于補(bǔ)氣健脾以治脾胃虛弱，人參大補(bǔ)元?dú)鉃榫抑畡?，黨參與人參功效相似為平補(bǔ)和緩之劑，臨床上兩者常作替換[23]。本研究結(jié)果表明，黨參異功散能夠明顯提高D-半乳糖誘導(dǎo)AD小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，改善其海馬神經(jīng)細(xì)胞的病理損傷。

研究發(fā)現(xiàn)，D-半乳糖可能引起小膠質(zhì)細(xì)胞過度激活，并通過釋放促炎細(xì)胞因子如IL-1β、TNF-α[24]來誘導(dǎo)神經(jīng)炎癥反應(yīng)，而機(jī)體產(chǎn)生TGF-α 、TGF-β[25]及IL-10 等抗炎細(xì)胞因子可能通過調(diào)節(jié)IL-1β、IL-6的產(chǎn)生來減輕神經(jīng)炎癥[26]。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組小鼠海馬區(qū)GFAP、IBA1 陽性表達(dá)明顯上調(diào)，腦組織中TNF-α、TGF-α及TGF-β含量明顯升高，IL-10水平明顯降低，說明AD模型小鼠腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞活化并出現(xiàn)神經(jīng)炎癥反應(yīng)，與相關(guān)研究報(bào)道一致。而黨參異功散干預(yù)后，AD 小鼠海馬組織的GFAP、IBA1陽性表達(dá)顯著下調(diào)，TNF-α、TGF-α及TGF-β含量明顯降低，IL-10含量顯著升高。

TNFR1、TNFR2 均是TNF-α 受體，TNFR1 幾乎表達(dá)于所有有核細(xì)胞表面，而TNFR2 則誘導(dǎo)性表達(dá)于一些免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。TNF-α 與TNFR1、TNFR2結(jié)合可產(chǎn)生相反的生理效應(yīng)[27]，如可溶性TNF-α 與TNFR1 結(jié)合介導(dǎo)有害促炎效應(yīng)及細(xì)胞死亡，而跨膜型TNF-α 與TNFR2 結(jié)合通過少突膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞和可能的其他細(xì)胞類型介導(dǎo)有益效應(yīng)及細(xì)胞存活[28]。研究[29]發(fā)現(xiàn)，小膠質(zhì)細(xì)胞可通過位于其表面的趨化因子受體4（CXCR4）過度激活而產(chǎn)生TNF-α，TNF-α 則可進(jìn)一步與位于星形膠質(zhì)細(xì)胞上的TNFR1 結(jié)合而促進(jìn)谷氨酸的釋放；星形膠質(zhì)細(xì)胞也可以通過表面的CXCR4 激活而引起細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度上升，并促進(jìn)胞內(nèi)可溶性TNF-α 及谷氨酸釋放，最終導(dǎo)致谷氨酸過度釋放而引起神經(jīng)細(xì)胞毒性[29]。本研究雖沒有區(qū)分可溶性TNF-α 和跨膜型TNF-α 的水平，但從空白組和模型組小鼠腦組織中TNF-α、谷氨酸含量以及TNFRs 表達(dá)水平變化可以看出TNF-α/TNFRs信號參與了AD模型小鼠腦內(nèi)的神經(jīng)炎癥反應(yīng)。而黨參異功散干預(yù)后，能夠明顯降低AD 小鼠腦內(nèi)的促炎癥因子及谷氨酸水平，并能夠下調(diào)TNFR1蛋白表達(dá)，促進(jìn)TNFR2蛋白表達(dá)。

綜上所述，黨參異功散能夠提高D-半乳糖誘導(dǎo)AD 小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，并改善海馬組織病理損傷，其作用機(jī)制可能與調(diào)控腦內(nèi)TNF-α/TNFRs 信號減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)有關(guān)。