趙志斌　董睿　李偉紅　張玥琦　鞠申丹

【摘要】目的：本次研究通過Meta分析法分析針灸治療對(duì)不同疼痛動(dòng)物模型中TRPV表達(dá)量的影響。方法：文獻(xiàn)檢索PubMed、Embase、Web of Science、CNKI、Wanfang數(shù)據(jù)庫(kù)，查找針灸療法影響TRPV表達(dá)量的相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。對(duì)納入的文獻(xiàn)進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，進(jìn)行Meta分析，旨在拓展針推療法治療各類疾病機(jī)制的證據(jù)，為后期研究提供參考。結(jié)果：共納入文獻(xiàn)的18篇，包括4篇英文文獻(xiàn)，14篇中文文獻(xiàn)，都采取了隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，未提及盲法的使用，18篇文獻(xiàn)分別測(cè)量了TRPV家族不同蛋白的表達(dá)。將18篇文獻(xiàn)數(shù)據(jù)提取出來(lái)，通過Meta分析發(fā)現(xiàn)，針灸療法對(duì)于TRPV家族的表達(dá)下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但是18篇文獻(xiàn)的異質(zhì)性較高（SMD=-2.28，95%CI=-2.95～-1.61，P<0.01；異質(zhì)性χ²=404.04，I²=90%，隨機(jī)效應(yīng)模型）。根據(jù)不同的動(dòng)物模型分組，無(wú)論是炎性疼痛還是神經(jīng)病理性疼痛，TRPV的表達(dá)下降都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而癌性疼痛亞組中，針灸對(duì)于TRPV表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且3個(gè)亞組間的異質(zhì)性較??；根據(jù)不同TRPV蛋白分組，分為4組，針灸對(duì)于TRPV1、TRPV4的表達(dá)下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而對(duì)于TRPV2、TRPV3的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。只有1篇文獻(xiàn)檢測(cè)了TRPV3的表達(dá)。結(jié)論：針灸鎮(zhèn)痛臨床療效確切，針灸鎮(zhèn)痛的機(jī)制與調(diào)節(jié)TRPV1和TPRV4的活性有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】針灸；疼痛；動(dòng)物模型；TRPV蛋白；Meta分析

【中圖分類號(hào)】R684.3【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2023）21-0105-10

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.21.zgmzmjyyzz202318022

Effects of Acupuncture and Massage Therapy on TRPV Subfamily Protein

Expression in Different Pain Animal Models：A Meta AnalysisZHAO Zhibin1DONG Rui2LI Weihong1ZHANG Yueqi3JU Shendan1*

1.Department of Acupuncture and Tuina Science，School of Traditional Chinese Medicine，

Naval Medical University，Shanghai 200433，China

2.Department of Nephrology， The First Affiliated Hospital of Naval Medical University，Shanghai 200433，China;

3.Shanghai Huangpu District Bund Street Community Health Service Center，Shanghai 200001，ChinaAbstract：Objective This study analyzed the influence of acupuncture therapy on the expression of TRPV in different pain animal models by meta analysis.Methods We searched for relevant animal experiments on the influence of acupuncture therapy about TRPV expression though PubMed，Embase，CNKI and Wanfang databases.We evaluted the the included literatures and performed the on the extracted data by meta-analysis，aiming to expand the evidence of acupuncture therapy in treating various pain diseases and provide reference for later research.Results A total of 18 articles were included with 4 English articles and 14 Chinese articles.The included aticles were all randomized controlled experiments，but no mentioning the use of blind method，and the expression of different proteins in the TRPV family was measured in 18 articles.We extracted the data from 18 literatures and The meta-analysis result showed that acupuncture therapy decreased the expression of TRPV family，which was statistically significant，but the heterogeneity of 18 literatures was high（SMD=-2.28，95%CI=-2.95～-1.61，P<0.01;Heterogeneity χ²=404.04，I²=90%，random effect model）.According to different animal model subgroups，the decreased expression of TRPV was statistically significant in both inflammatory pain and neuropathic pain，while acupuncture had no statistically significant effect on TRPV expression in cancer pain subgroup.There was little heterogeneity among the three subgroups.According to different TRPV protein groups，acupuncture was divided into 4 groups.The decreased expression of TRPV1 and TRPV4 had statistical significance，while the expression of TRPV2 and TRPV3 had no statistical significance.TRPV3 expression was detected in only one study.Conclusion Acupuncture therapy can be used as supplementary treatment in various pain diseases.The analgesic mechanism of acupuncture therapy is related to the regulation of TRPV1 and TPRV4.

Keywords：Acupuncture and Moxibustion;Pain;Animal Model;TRPV Subfamily Protein;Meta Analysis

針灸治療各類疾病的作用機(jī)制一直是學(xué)術(shù)界討論的熱點(diǎn)。近年來(lái)，有越來(lái)越多的動(dòng)物試驗(yàn)都將瞬時(shí)受體電位（transient receptor potential，TRP）作為研究針灸治療作用機(jī)制的新靶點(diǎn)。TRP通道是存在于人體組織細(xì)胞膜上的一組非選擇性陽(yáng)離子通道，對(duì)鈣離子和其他陽(yáng)離子都具有通透性，但絕大部分還是鈣離子［1］。根據(jù)同源性分類它包括TRPC、TRPV、TRPML、TRPP、TRPA、TRPM及TRPN等7個(gè)亞家族。其中又由于瞬時(shí)受體電位香草酸亞家族（transient receptor potential vanilloid，TRPV）通道中的TRPV1、TRPV2、TRPV4等在炎性疼痛、內(nèi)臟痛以及痛覺敏化中發(fā)揮著重要作用而被研究者采納并進(jìn)行廣泛研究。目前認(rèn)為，TRPV亞家族中的成員可以被辣椒素、4α-PDD和花生四烯酸代謝產(chǎn)物、熱以及機(jī)械刺激所激活，并參與到機(jī)體的抗炎反應(yīng)中去［2］。這也被認(rèn)為是闡釋針灸作用機(jī)制的一種途徑。廣義的針灸療法包括針刺（電針、皮膚針、頭針、腕踝針、火針等）、拔罐刮痧（刺絡(luò)放血）、艾灸（溫和灸、雀啄灸、熱敏灸）、敷貼療法（臍療）等多種治療方法，所以有不少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了各種針灸療法對(duì)于TRPV亞家族的調(diào)節(jié)來(lái)研究針灸的作用機(jī)制，其中尤以疼痛模型的研究較多。本文對(duì)該種療法治療不同疼痛模型動(dòng)物試驗(yàn)中TRPV亞家族蛋白表達(dá)量的影響進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，旨在拓展針灸療法治療各類疾病機(jī)制的證據(jù)，為后期研究提供參考。

1資料與方法

1.1檢索策略兩名研究人員通過計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Embase、Web of Science、CNKI、Wanfang數(shù)據(jù)庫(kù)并且進(jìn)行手工檢索圖書館管目錄，查找電針、灸法、貼敷相關(guān)療法影響TRPV表達(dá)量的相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。中文檢索式為（針刺or電針or艾灸or針灸）and TRPV and動(dòng)物；英文檢索式為（acupuncture or moxibustion or massage）and TRPV and animal。見框1。

1.2納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1研究對(duì)象不同疼痛類型的動(dòng)物模型鼠（大鼠、小鼠）。

1.2.2結(jié)局指標(biāo)不同組織中TRPV家族各成員的表達(dá)量。

1.2.3納入標(biāo)準(zhǔn)①與針刺、艾灸、針灸相關(guān)以及與TRPV相關(guān)的研究；②設(shè)置干預(yù)組和對(duì)照組；③有相關(guān)表達(dá)量數(shù)據(jù)。

1.2.4排除標(biāo)準(zhǔn)①不相關(guān)文獻(xiàn)；②相關(guān)的綜述類文獻(xiàn)；③未設(shè)置對(duì)照組；④無(wú)相關(guān)表達(dá)量數(shù)據(jù)。

1.3文獻(xiàn)納入篩選由兩位獨(dú)立研究者嚴(yán)格按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)對(duì)文獻(xiàn)進(jìn)行篩選并提取資料，通過文獻(xiàn)管理軟件Endnote7進(jìn)行文獻(xiàn)導(dǎo)入，通過標(biāo)題的瀏覽初步篩除綜述、明顯不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)；隨后閱讀摘要剔除文獻(xiàn)中的隨機(jī)或者對(duì)照組設(shè)置不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)，將剩余文獻(xiàn)下載全文，無(wú)法獲取全文的通過郵件與作者聯(lián)系獲取全文，仔細(xì)閱讀，比對(duì)納入標(biāo)準(zhǔn)，通過篩選確定最后納入文獻(xiàn)。然后兩名研究者交叉核對(duì)，如遇到分歧則交由第三方解決，如遇資料缺如則聯(lián)系文獻(xiàn)作者或通訊作者咨詢。

1.4資料提取采用Excel表格設(shè)計(jì)文獻(xiàn)資料的提取。提取的數(shù)據(jù)信息中包括：作者、發(fā)表年份、研究對(duì)象、干預(yù)措施、檢測(cè)方法、指標(biāo)、試驗(yàn)組和對(duì)照組的樣本量、均值、標(biāo)準(zhǔn)差和其它信息等。

1.5納入研究的偏移風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工具是目前唯一專門用于評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)固有真實(shí)性的工具，它避免了在評(píng)估偏差風(fēng)險(xiǎn)時(shí)系統(tǒng)評(píng)估動(dòng)物干預(yù)所產(chǎn)生的差異。評(píng)估由兩名研究人員獨(dú)立進(jìn)行，然后進(jìn)行檢查。如有異議，可與第三方進(jìn)行討論或協(xié)商。評(píng)估的結(jié)果以“是（Y）”“否（N）”以及“不確定（U）”來(lái)代表低風(fēng)險(xiǎn)偏倚、高風(fēng)險(xiǎn)偏倚以及不確定風(fēng)險(xiǎn)偏倚。

1.6統(tǒng)計(jì)分析采用Revman 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。采用表達(dá)倍數(shù)和樣本量計(jì)算效應(yīng)量，采用Z檢驗(yàn)分析研究結(jié)果間的異質(zhì)性，當(dāng)I2<50%時(shí)，異質(zhì)性較小，當(dāng)I2>50%時(shí)，異質(zhì)性較大，采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行合并分析，并采用亞組分析解釋異質(zhì)性來(lái)源。采用Begg's漏斗圖檢驗(yàn)發(fā)表偏倚。Meta分析的檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2結(jié)果與分析

2.1文獻(xiàn)檢索結(jié)果一共檢索到了121篇中文文獻(xiàn)和55篇英文文獻(xiàn)，根據(jù)標(biāo)題和摘要初篩剔除后還有28篇文獻(xiàn)，通過全文瀏覽最后是納入18項(xiàng)［3-20］研究。文獻(xiàn)篩選流程和結(jié)果圖如圖1所示。

2.2納入研究的基本特征本研究共納入18篇文獻(xiàn)；納入研究的動(dòng)物模型主要以炎性疼痛、神經(jīng)病理性痛癥為主，干預(yù)措施包括針刺（手針和電針）、艾灸（隔藥灸、溫和灸）等針灸相關(guān)治療方法。納入研究的基本特征見表1。

2.3納入研究的偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估偏倚評(píng)估說(shuō)明：SYRCLE動(dòng)物偏見風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工具由10個(gè)項(xiàng)目組成，如果沒有在研究中提到，所有這些項(xiàng)目都被評(píng)為不確定偏倚風(fēng)險(xiǎn)。其中，一般資料的基線水平根據(jù)動(dòng)物鼠的性別、年齡、飼養(yǎng)環(huán)境3個(gè)方面進(jìn)行評(píng)估，如果有1項(xiàng)信息缺失則評(píng)委“不確定”。詳見表2。

2.4Meta分析

2.4.1TRPV的整體表達(dá)量干預(yù)組相較于對(duì)照組TRPV的表達(dá)量下降（SMD=-2.28，95%CI=-2.95～-1.61，P<0.01；異質(zhì)性χ²=404.04，I²=90%，隨機(jī)效應(yīng)模型）。如圖2所示。

2.4.2 TRPV1的表達(dá)量TRPV1干預(yù)組相較于對(duì)照組TRPV1的表達(dá)量下降（17篇文獻(xiàn)）（SMD=-1.77，95%CI=-2.53～-1.01，P<0.01；異質(zhì)性χ²=230.63，I²=89%，隨機(jī)效應(yīng)模型）。如圖3所示。

2.4.3TRPV2的表達(dá)量TRPV2干預(yù)組相較于對(duì)照組TRPV2的表達(dá)量下降（2篇文獻(xiàn)）（SMD=-13.50，95%CI=-24.72～-2.29，P<0.00001；異質(zhì)性χ²=32.33，I²=94%，隨機(jī)效應(yīng)模型）。如圖4所示。

2.4.4TRPV4的表達(dá)量TRPV4干預(yù)組相較于對(duì)照組TRPV4的表達(dá)量下降（6篇文獻(xiàn)）。（SMD=-2.68，95%CI=-4.03～-1.33，P<0.01；異質(zhì)性χ²=97.28，I²=89%，隨機(jī)效應(yīng)模型）。如圖5所示。

2.4.5亞組分析所有數(shù)據(jù)合并后顯示異質(zhì)性較大，故須探究異質(zhì)性來(lái)源，根據(jù)可能的因素，產(chǎn)生異質(zhì)性的原因包括不同的檢測(cè)方法、不同的動(dòng)物模型、不同的干預(yù)措施，故根據(jù)以上因素進(jìn)行亞組分析。

2.4.5.1不同檢測(cè)方法采用western blot檢測(cè)法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果：SMD=-2.72，95%CI=-3.85～-1.59，P<0.01；異質(zhì)性χ²=127.44，I2=88%，隨機(jī)效應(yīng)模型，采用PT-PCR檢測(cè)法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果SMD=-1.63，95%CI=-2.47～-0.79，P<0.00001；異質(zhì)性χ²=28.84，I²=76%，隨機(jī)效應(yīng)模型，采用免疫組化檢測(cè)法，結(jié)果：SMD=-2.46，95%CI=-3.71～-1.21，P<0.01；異質(zhì)性χ²=245.32，I²=93%，隨機(jī)效應(yīng)模型。三組亞組分析顯示，無(wú)論何種檢測(cè)方法都顯示針灸治療能夠降低TRPV的表達(dá)。三組亞組異質(zhì)性檢驗(yàn)（test for subgroup differences：Chi²=2.66 df=2（P=0.26），I²=24.9%）

2.4.5.2不同干預(yù)方法電針治療法結(jié)果：SMD=-1.93，95%CI=-2.54～-1.32，P<0.01；異質(zhì)性χ²=150.09，I²=83%，隨機(jī)效應(yīng)模型，間接灸法進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果：SMD=-3.63，95%CI=-5.42～-1.84，P<0.01；異質(zhì)性χ²==101.38，I²=91%，隨機(jī)效應(yīng)模型，隔物灸進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果：SMD=-370，95%CI=-7.11～-0.30，P<0.01；異質(zhì)性χ²==114.91，I²=96%，隨機(jī)效應(yīng)模型，三組亞組異質(zhì)性檢驗(yàn)［Test for subgroup differences：Chi²=3.93，df=2（P=0.14），I²=49.1%］。

2.4.5.3不同動(dòng)物模型在神經(jīng)病理性疼痛模型中，結(jié)果SMD=-1.33，95%CI=-2.16～-0.50，P<0.01；異質(zhì)性χ²=152.86，I²=87%，隨機(jī)效應(yīng)模型；在癌性疼痛模型中，結(jié)果SMD=-5.87，95%CI=-17.51～-5.77，P>0.01；異質(zhì)性χ²==21.61，I²=95%，隨機(jī)效應(yīng)模型；在炎癥疼痛模型中，結(jié)果SMD=-3.44，95%CI=-4.55～-2.32，P<0.01；異質(zhì)性χ²==219.60，I²=91%，隨機(jī)效應(yīng)模型；三組亞組異質(zhì)性檢驗(yàn)［Test for subgroup differences：Chi²=9.21，df=2（P=0.77），I²=78.3%］。

2.5發(fā)表偏倚漏斗圖分析顯示，研究存在發(fā)表偏倚。如圖6所示。

3討論

針灸在臨床上運(yùn)用廣泛，尤其是在治療各種類型的疼痛疾病中效果突出，如腰突癥、急性胃痛、偏頭痛等。針灸在鎮(zhèn)痛方面是確實(shí)有效的，但是針灸鎮(zhèn)痛的機(jī)制仍然不是十分明確。

通過文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，針灸能夠調(diào)節(jié)TRPV的通道的活性，可能是針灸鎮(zhèn)痛的機(jī)制之一。目前研究［21］表明TRPV通道亞家族成員均能響應(yīng)各種理化刺激，作為感受器參與各種傷害后的反應(yīng)，因此，TRPV通道被認(rèn)為是參與疼痛反應(yīng)中的重要環(huán)節(jié)之一，也是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。TRPV家族是哺乳動(dòng)物溫度感受密切相關(guān)的離子通道，其中TRPV1通道參與溫度感受、鈣穩(wěn)態(tài)、細(xì)胞增殖、分化和凋亡等過程。TRPV1通道響應(yīng)多種傷害性刺激而參與痛覺感知。TRPV4能夠介導(dǎo)多種原因?qū)е碌臋C(jī)械痛和熱敏痛；而溫度和電刺激能夠直接調(diào)節(jié)TRPV1通道與TRPV4通道的活性。電針或者艾灸能夠通過溫?zé)嵝?yīng)或者電刺激降低TRPV通道的活性提高痛閾而具有預(yù)防多種疼痛的效應(yīng)。為了證實(shí)針灸對(duì)于TRPV通道的調(diào)控，筆者進(jìn)行文獻(xiàn)篩選，納入符合標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，來(lái)進(jìn)一步研究針灸與TRPV亞家族的關(guān)系，為針灸鎮(zhèn)痛的機(jī)制提供循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

3.1針灸能夠降低疼痛疾病中的TRPV通道活性本次共納入文獻(xiàn)的18篇，包括4篇英文文獻(xiàn)，14篇中文文獻(xiàn)，都采取了隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，都未提及盲法的使用，18篇文獻(xiàn)分別測(cè)量了TRPV家族不同蛋白的表達(dá)。筆者將18篇文獻(xiàn)數(shù)據(jù)提取出來(lái)，通過Meta分析發(fā)現(xiàn)，針灸療法對(duì)于TRPV家族的表達(dá)下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（SMD=-2.28，95%CI=-2.95～-1.61），并且針灸治療方法降低包括TRPV1通道（SMD=-1.22，95%CI=-1.46～-0.98，P<0.01）、TRPV4通道（SMD=-1.34，95%CI=-1.74～-0.93，P<0.01）和TRPV2通道（SMD=-6.13，95%CI=-7.75～-4.50，P<0.00001）的活性亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

針灸鎮(zhèn)痛的可能機(jī)制包括減少致痛物質(zhì)的表達(dá)［22］，而TRPV是重要的致痛物質(zhì)之一，本研究也證實(shí)了針灸，無(wú)論電針亦或者是艾灸（溫和灸、隔物灸）均能夠降低TRPV家族痛的活性，這也在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面提供了針灸通過降低TRPV痛的活性而改善疼痛效應(yīng)的證據(jù)。尤其是研究較多的TRPV1和TRPV4。

3.2TRPV通道與多種疾病相關(guān)TRPV1與心血管疾病、高血壓、癌癥、消化系統(tǒng)疾病息息相關(guān)［23］；TRPV2在維持心臟的結(jié)構(gòu)與功能中意義重大，TRPV2基因敲除小鼠會(huì)出現(xiàn)心力衰竭［24-25］，TRPV3與皮膚的生理病理密切相關(guān)，介導(dǎo)皮膚疼痛、瘙癢等感覺的信號(hào)傳導(dǎo)，影響角質(zhì)細(xì)胞的增殖分化和毛囊發(fā)育的生理過程［26-28］；TRPV4參與骨骼生長(zhǎng)過程中的機(jī)械傳導(dǎo)、血管舒張和血壓調(diào)節(jié)過程。TRPV亞家族與人體諸多疾病相關(guān)，而各種疾病的病理改變皆會(huì)引起不同程度的疼痛，如胃痛、偏頭痛、骨骼肌肉疼痛。所以針灸鎮(zhèn)痛作用與調(diào)節(jié)TRPV亞家族的通道的活性存在相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，針灸治療能夠降低TRPV亞家族TRPV4、TRPV1和TRPV2的活性，而TRPV亞家族蛋白可能作為致痛因素的一個(gè)重要環(huán)節(jié)成為針灸鎮(zhèn)痛的靶點(diǎn)之一。

3.3針灸治療急性疼痛效果較好針灸療法在癌痛的Meta分析顯示，SMD=-5.87，95%CI=-17.51～-5.77，P>0.01，通過兩篇文獻(xiàn)的Meta分析，筆者發(fā)現(xiàn)針灸治療在癌痛的緩解上，TRPV的降低，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明針灸在癌痛的治療上未能降低TRPV通道的活性。臨床上也發(fā)現(xiàn)，針灸對(duì)于如炎性疼痛或者神經(jīng)病理性疼痛的急性疼痛效果較好，而癌痛為慢性疼痛，針灸效果不明顯。對(duì)于長(zhǎng)時(shí)間的疼痛，在TRPV通道的調(diào)節(jié)上，針灸存在一定的局限性，這也提示針灸具有耐受性，對(duì)于初次接受針灸鎮(zhèn)痛效果較好。

3.4異質(zhì)性來(lái)源可能18篇文獻(xiàn)的異質(zhì)性較高（χ²=404.04，I²=90%），為了探究異質(zhì)性來(lái)源，筆者進(jìn)行了進(jìn)一步的數(shù)據(jù)分析，根據(jù)可能的異質(zhì)性來(lái)源，進(jìn)行了亞組分析，來(lái)挖掘原因。

根據(jù)不同的檢測(cè)方法，分為3個(gè)亞組，通過亞組分析，筆者發(fā)現(xiàn)，無(wú)論何種檢測(cè)方法下，針灸對(duì)于TRPV的表達(dá)下降都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且組間異質(zhì)性降低［（Test for subgroup differences：Chi²=2.66 df=2（P=0.26），I²=24.9%］。而據(jù)不同的干預(yù)方式，分為3個(gè)亞組，分別為電針組、間接灸組和隔物灸治療組，3種干預(yù)方式法對(duì)于TRPV的表達(dá)下降具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且在亞組間的異質(zhì)性檢驗(yàn)中，3組之間的異質(zhì)性出現(xiàn)降低［Chi²=3.93，df=2（P=0.14），I²=49.1%］。根據(jù)不同的動(dòng)物模型分組，無(wú)論是炎性疼痛還是神經(jīng)病理性疼痛，TRPV的表達(dá)下降都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而癌性疼痛亞組中，針灸對(duì)于TRPV表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組間的組間異質(zhì)性較大［Chi²=9.21，df=2（P=0.77），I²=78.3%］。從亞組分析，不同的檢測(cè)方法能夠消除組間異質(zhì)性，故認(rèn)為異質(zhì)性來(lái)源可能是檢測(cè)方式的不同，導(dǎo)致最后得出的數(shù)據(jù)出現(xiàn)了異質(zhì)性。

從目前的證據(jù)分析來(lái)看，針灸療法中溫針、電針、艾灸療法能夠降低動(dòng)物模型中的TRPV1、TRPV4的表達(dá)，而TRPV2、TRPV3的表達(dá)研究文獻(xiàn)比較少，還不能夠支持針灸治療能夠有效降低這兩種蛋白的表達(dá)的說(shuō)法；而根據(jù)敏感性分析，TRPV3的文獻(xiàn)僅有一篇，而本文獻(xiàn)對(duì)于Meta分析的結(jié)果沒有影響，說(shuō)明針灸療法的能夠降低TRPV家族的活性。從文獻(xiàn)搜索來(lái)看，TRPV1和TRPV4是目前疼痛疾病研究的靶點(diǎn)之一。也是研究熱點(diǎn)，而針灸療法目前在臨床上較多用于鎮(zhèn)痛的治療，TRPV家族離子通道的活性影響致痛物質(zhì)的釋放，而針灸治療能夠調(diào)節(jié)TRPV的活性，從而起到鎮(zhèn)痛的作用。在文獻(xiàn)篩選的過程中，筆者發(fā)現(xiàn)有文獻(xiàn)研究灸法治療肛門瘙癢小鼠的模型，檢測(cè)TPRV1的表達(dá)，而TRPV3與皮膚生理病理密切相關(guān)，并且介導(dǎo)瘙癢感覺信號(hào)的傳導(dǎo)，故考慮文獻(xiàn)測(cè)量指標(biāo)出現(xiàn)偏差故未納入，根據(jù)亞組分析的異質(zhì)性檢驗(yàn)，考慮異質(zhì)性可能來(lái)源于針灸療法中不同的檢測(cè)和不同的動(dòng)物模型之間的差異。

3.5針灸對(duì)TRPV1、TRPV4調(diào)節(jié)影響較大本次研究中所述的TRPV家族于1997年首次被報(bào)道［29］。TRPV家族中被研究較多的TRPV1和TRPV4通道，兩者都與鈣離子內(nèi)流有關(guān)。關(guān)于針灸對(duì)于TRPV的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，也證實(shí)了TRPV1的研究最多，其次是TRPV4。通過Meta分析結(jié)果，也發(fā)現(xiàn)兩者的研究結(jié)果數(shù)據(jù)中的可信區(qū)間范圍較TRPV2小，所以針灸對(duì)TRPV1和TRPV4的調(diào)節(jié)占主要作用，而TPRV2的研究較少，并且可信區(qū)間范圍較大，從而說(shuō)明針灸對(duì)于TRPV2的調(diào)節(jié)可能不是主要作用。TRPV1通道激活后，鈣離子大量?jī)?nèi)流，引起一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路被激活，TRPV4也可直接介導(dǎo)細(xì)胞鈣離子的內(nèi)流，通過影響膜電位和鈣離子內(nèi)向驅(qū)動(dòng)力等間接參與鈣離子的內(nèi)流［30］，這兩種蛋白在疼痛的產(chǎn)生中發(fā)揮重要作用［31］。炎癥反應(yīng)過程中產(chǎn)生的蛋白酶、5-羥色胺、組胺、TNF-α、IL-17等可以通過促進(jìn)TRPV4向質(zhì)膜轉(zhuǎn)移、磷酸化以及產(chǎn)生內(nèi)源性TRPV4激動(dòng)劑等方式使免疫細(xì)胞上TRPV4表達(dá)增加或功能增強(qiáng)［32］。細(xì)菌表面的脂多糖（LPS）也被證實(shí)可直接激活TRPV4［33］。所以針灸鎮(zhèn)痛機(jī)制主要與TRPV1和TRPV4通道調(diào)節(jié)相關(guān)。

4研究展望

所納入文獻(xiàn)動(dòng)物模型可以分為炎性疼痛的模型（大多數(shù)與腸道疾病有關(guān)），以及神經(jīng)病理性疼痛（與脊柱骨關(guān)節(jié)相關(guān)），針灸鎮(zhèn)痛的靶點(diǎn)也主要與TRPV1和TRPV4的調(diào)節(jié)相關(guān)。而TRPV1廣泛分布于三叉神經(jīng)節(jié)、背根神經(jīng)節(jié)等神經(jīng)組織中以及腸胃、骨骼肌肉中；TPRV4也在皮膚、腎臟、肺、脾臟多個(gè)組織器官中表達(dá)，這也與疼痛產(chǎn)生的位置相同。通過不同TPRV亞家族的分析，筆者發(fā)現(xiàn)針灸主要影響TRPV1和TRPV4通道。TRPV1通道一直是開發(fā)治療疼痛新藥物的主要TRP通道。很多前期臨床研究［34］表明，不同類別的TRPV1通道拮抗劑如AMG-517、AZD1386，均會(huì)使體溫升高，而這種不良反應(yīng)是阻礙其臨床發(fā)展的最主要原因［34］。而針灸沒有此副作用，所以可以替代藥物作為TRPV1鎮(zhèn)痛的方法之一。

綜上，通過大量搜索針灸療法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的研究，在各類疾病中與研究中，針灸鎮(zhèn)痛的效果較好，而Meta分析結(jié)果顯示針灸能夠降低TRPV亞家族的活性，給針灸療法鎮(zhèn)痛機(jī)制提供新的依據(jù)，并且其中占主要影響的是TRPV1和TRPV4通道；同時(shí)發(fā)現(xiàn)針灸也可用于其他疾病的治療例如瘙癢以及血脂的調(diào)節(jié)［35-36］，但是研究的靶點(diǎn)可能出現(xiàn)異質(zhì)性。所以，可以通過另外的研究分析給針灸治療疾病提供更多思路，并且可以找尋新的TRPV1和TRPV4上下游信號(hào)通路來(lái)進(jìn)一步研究針灸鎮(zhèn)痛和治療疾病的機(jī)制。

由于本次納入的文獻(xiàn)都是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，尚不能評(píng)價(jià)針灸治療疼痛的真正機(jī)制，但是給未來(lái)的研究指明了一種可能性，由于各研究間干預(yù)方式不同，檢驗(yàn)方法不同以及疼痛模型種類的差異，合并結(jié)果存在較高的異質(zhì)性風(fēng)險(xiǎn)，通過敏感性分析和亞組分析，異質(zhì)性未完全解決。并且在Meta分析過程中，不可回避的一個(gè)問題是發(fā)表偏移。本研究存在發(fā)表偏移，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的過程中，實(shí)驗(yàn)員盡可能會(huì)尋找陽(yáng)性的結(jié)果，并且可能由于一些陰性結(jié)果沒有發(fā)表，或者在處理過程中忽略的陰性結(jié)果導(dǎo)致發(fā)表偏移，但是針灸療法鎮(zhèn)痛也是有大量的臨床數(shù)據(jù)得到支持的。參考文獻(xiàn)

［1］周開升，趙光海，南偉，等.TRPV1通道在病理性疼痛中的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2021，27（11）：841-844，850.

［2］YU W，LIAO Y，HUANG Y，et al.Endogenous hydrogen sulfide enhances carotid sinus baroreceptor sensitivity by activating the transient receptor potential cation channel subfamily V member 1（TRPV1）channel［J］.Journal of the American Heart Association，2017，6（5）：e004971.

［3］HSU H C，TANG N Y，LIN Y W，et al.Effect of electroacupuncture on rats with chronic constriction injury-induced neuropathic pain［J］.The Scientific World Journal，2014，2014（1）：129875.

［4］LIN J G，HSIEH C L，LIN Y W，et al.Analgesic Effect of Electroacupuncture in a Mouse Fibromyalgia Model：Roles of TRPV1，TRPV4，and pERK［J］.Plos One，2015，10（6）：e0128037.

［5］ZHANG Z，WANG C，GU G，et al.The effects of electroacupuncture at the ST36（Zusanli）acupoint on cancer pain and transient receptor potential vanilloid subfamily 1 expression in Walker 256 tumor-bearing rats［J］.Anesthesia&Analgesia，2012，114（4）：879.

［6］ZOU W，HUA L，LIU W，et al.Moxibustion relieves visceral hyperalgesia via inhibition of transient receptor potential vanilloid 1（TRPV1）and heat shock protein（HSP）70 expression in rat bone marrow cells［J］.Acupuncture in Medicine，2016，34（2）：114-119.

［7］鄧多喜，譚潔，張泓，等.針刺合募配穴對(duì)腸易激綜合征大鼠結(jié)腸內(nèi)臟高敏相關(guān)因子的影響［J］.針刺研究，2018，43（8）：485-491.

［8］符翠萍，劉愛玲，楊興霞，等.艾灸“大腸俞”對(duì)大鼠內(nèi)臟痛敏及骨髓細(xì)胞瞬時(shí)感受器電位香草酸受體亞型1表達(dá)的影響［J］.針刺研究，2013，38（1）：14-19.

［9］洪玨，魏凱，張丹，等.艾灸對(duì)克羅恩病大鼠穴區(qū)TRPV表達(dá)的影響［J］.光明中醫(yī)，2016，31（2）：214-216，230.

［10］李春靜，張曉寧，馬玉俠.臍療對(duì)寒凝血瘀型痛經(jīng)大鼠子宮TRPV受體表達(dá)的影響［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2018，33（3）：1085-1088.

［11］穆敬平，劉莉，周立志，等.艾灸對(duì)炎癥性腸病大鼠結(jié)腸黏膜肥大細(xì)胞和TRPV1的影響［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2014，41（8）：1749-1752.

［12］潘亞輝，李姝婧，馬玉寧，等.臍療對(duì)寒凝血瘀型痛經(jīng)大鼠扭體反應(yīng)及神闕穴區(qū)TRPV1的影響［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2018，29（10）：2556-2559.

［13］沈曉煒.經(jīng)穴反應(yīng)性時(shí)間動(dòng)態(tài)變化與不同部位TRPV1，TRPV4表達(dá)的相關(guān)研究［D］.成都：成都中醫(yī)藥大學(xué)，2017.

［14］譚莉華，李凱歌，吳艷英，等.電針“印堂”“天樞”穴對(duì)腸易激綜合征大鼠行為學(xué)及結(jié)腸辣椒素受體的影響［J］.針刺研究，2017，42（2）：136-140，167.

［15］王陸軍，于巖瀑，高樹中，等.臍療對(duì)IBS-D模型大鼠結(jié)腸TRPV受體表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2015，26（11）：2807-2810.

［16］尹業(yè)輝，李思婷，王少軍，等.針刺可調(diào)控酵母聚糖誘導(dǎo)的高敏感模型直結(jié)腸部位TRPV1與NGF的表達(dá)［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2018，45（7）：1529-1533

［17］張莘，張選平，杜玉茱，等.不同刺灸法對(duì)功能性便秘大鼠結(jié)腸組織腸神經(jīng)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響［J］.針刺研究，2017，42（5）：407-412.

［18］張亞楠，王世軍，盧巖，等.電針對(duì)便秘型腸易激綜合征大鼠結(jié)腸TRPV1mRNA表達(dá)的影響［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，8（8）：778-780，783.

［19］張招娣，王坤，顧廣英，等.電針刺“環(huán)跳”穴對(duì)大鼠癌性疼痛及瞬時(shí)受體電位香草酸亞型1mRNA表達(dá)的影響［J］.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，45（6）：567-570.

［20］周敏杰，劉楠楠，趙征宇，等.不同時(shí)間針刺足三里穴對(duì)炎性大鼠脊髓，背根神經(jīng)節(jié)中TRPV4蛋白表達(dá)的影響［J］.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，42（4）：6.

［21］MCGOLDRICK L L，SINGH A K，SAOTOME K，et al.Opening of the human epithelial calcium channel TRPV6［J］.Nature，2017，553（7687）：233-237.

［22］李志元，張丹，楊延婷，等.基于MAPKs信號(hào)通路的針灸鎮(zhèn)痛作用機(jī)制研究進(jìn)展［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2017（35）：3005-3009.

［23］YANG D，LUO Z，MA S，et al.Activation of TRPV1 by dietary capsaicin improves endothelium-dependent vasorelaxation and prevents hypertension［J］.Cell Metabolism，2010，12（2）：130-141.

［24］KATANOSAKA Y，IWASAKI K，UJIHARA Y，et al.TRPV2 is critical for the maintenance of cardiac structure and function in mice［J］.Nature Communications，2014，5（1）：3932

［25］AGUETTAZ E，BOIS P，COGNARD C，et al.Stretch-activated TRPV2 channels：role in mediating cardiopathies［J］.Progress in Biophysics and Molecular Biology，2017（130）：273-280.

［26］XU H，RAMSEY I S，KOTECHA S A，et al.TRPV3 is a calcium permeable temperature-sensitive cation channel［J］.Nature，2002，418（6894）：181-186.

［27］CATERINA M J.TRP channel cannabinoid receptors in skin sensation，homeostasis，and inflammation［J］.ACS Chemical Neuroscience，2014，5（11）：1107-1116.

［28］TTH B I，OLH A，SZLLSI A G，et al.TRP channels in the skin［J］.British Journal of Pharmacology，2014，171（10）：2568-2581.

［29］BLAND，JEREMY D P.Nerve Conduction Studies for Carpal Tunnel Syndrome：Gold Standard or Unnecessary Evil？［J］.Orthopedics，2017，40（4）：198.

［30］盧凱，廖杰，吳瓊峰，等.免疫細(xì)胞上TRPV4通道研究進(jìn)展［J］.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2021，37（22）：2704-2709.

［31］LINLEY J E，ROSE K，OOI L，et al.Understanding inflammatory pain：ion channels contributing to acute and chronic nociception［J］.Pflügers Archiv-European Journal of Physiology，2010，459（5）：657-669.

［32］WHITE J P M，CIBELLI M，URBAN L，et al.TRPV4：molecular conductor of a diverse orchestra［J］.Physiol Rev，2016，96（3）：911-973.

［33］ALPIZAR Y A，BOONEN B，SANCHEZ A，et al.TRPV4 activation triggers protective responses to bacterial lipopolysaccharides in airway epithelial cells［J］.Nat Commun，2017，8（1）：1059.

［34］GARAMI A，SHIMANSKY Y P，RUMBUS Z，et al.Hyperthermia induced by transient receptor potential vanilloid-1（TRPV1）antagonists in human clinical trials：Insights from mathematical modeling and Meta analysis［J］.Pharmacol Ther，2020（208）：107474.

［35］徐利，葛瓊翔，林國(guó)強(qiáng).溫和灸對(duì)肛門瘙癢模型小鼠背根節(jié)TRPV1表達(dá)的影響［J］.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2018，21（30）：3749-3752.

［36］王桂英，王耀帥，高建蕓，等.不同溫度艾灸對(duì)高脂血癥大鼠血脂及背根神經(jīng)節(jié)瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1mRNA表達(dá)的影響［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2017，24（11）：44-47.

（收稿日期：2023-02-02編輯：徐雯）