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寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)方案建立及探討

2023-11-22 12:47:12熊彥紅曹建平鄭彬
熱帶病與寄生蟲學(xué) 2023年5期
關(guān)鍵詞:寄生蟲病規(guī)范化實驗室

熊彥紅,曹建平,鄭彬

中國疾病預(yù)防控制中心寄生蟲病預(yù)防控制所(國家熱帶病研究中心),國家衛(wèi)生健康委員會寄生蟲病原與媒介生物學(xué)重點實驗室,世界衛(wèi)生組織熱帶病合作中心,國家級熱帶病國際聯(lián)合研究中心,上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院國家熱帶病研究中心全球健康學(xué)院,上海 200025

《中華人民共和國生物安全法》提出加強(qiáng)生物安全能力建設(shè)可以有效應(yīng)對生物安全事件[1]。遵循《病原微生物實驗室生物安全管理條例》[2]相關(guān)要求,在寄生蟲病原實驗室開展規(guī)范化的生物安全培訓(xùn),可以有效提高實驗室人員的生物安全意識和安全技能,防止實驗室發(fā)生生物安全事故[3-4],避免實驗室人員因培訓(xùn)不到位而發(fā)生實驗室獲得性感染[5]。此外,系統(tǒng)化、規(guī)范化的培訓(xùn)也可以優(yōu)化工作流程,提高工作效率[6]。為此,筆者采用問卷調(diào)查法及訪談法開展了寄生蟲病原實驗室安全培訓(xùn)項目需求分析,明確了寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估培訓(xùn)的必要性,初步建立了寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)方案,確立了培訓(xùn)目的、培訓(xùn)對象、培訓(xùn)內(nèi)容、培訓(xùn)方式及培訓(xùn)評估方法,以期為各地寄生蟲病原實驗室開展風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)提供參考。

1 寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估培訓(xùn)的必要性

為了解寄生蟲病原實驗室安全培訓(xùn)需求,筆者在對寄生蟲病原實驗室獲得性感染案例進(jìn)行歸納總結(jié)的基礎(chǔ)上[5,7-8],設(shè)計了寄生蟲病原實驗室安全培訓(xùn)項目需求調(diào)查問卷(表1)。共發(fā)放22 份問卷,回收率為100.00%。調(diào)查對象主要為從事寄生蟲病病原研究的專家,其中高級職稱20 人、中級職稱2 人;21 人從事實驗室相關(guān)工作年限超過10年,1人超過5年;實驗室管理人員18 人,實驗室業(yè)務(wù)人員4人。經(jīng)統(tǒng)計計分后,再發(fā)放20份問卷給從事相關(guān)領(lǐng)域?qū)嶒炑芯咳藛T,問卷回收率為100.00%。通過2 輪調(diào)查后,各指標(biāo)的意見基本一致,變異度較小。

表1 寄生蟲病原實驗室安全培訓(xùn)項目需求調(diào)研結(jié)果Table 1 Results of investigation on the requirements of safety training program for parasite pathogenic laboratories

調(diào)查結(jié)果顯示,寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估迫切程度(4.80±0.41)分,必要程度(4.85±0.37)分,可行程度(4.60±0.50)分(滿分均為5 分)(表1)。提示開展寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估培訓(xùn)工作很有必要。實驗室生物安全風(fēng)險評估可使實驗室相關(guān)人員預(yù)先分析在實驗操作中存在的各種風(fēng)險并提前預(yù)防、主動應(yīng)對,以降低實驗室生物安全事件發(fā)生的可能性[9-11]。為全面梳理實驗室生物安全風(fēng)險評估工作的要點,筆者進(jìn)一步開展了調(diào)研訪談(調(diào)研訪談對象共計20 人,主要為從事寄生蟲病原相關(guān)實驗研究人員,其中高級職稱14 人、中級職稱4 人、初級職稱2 人;實驗室管理人員12 人,實驗室業(yè)務(wù)人員8 人),并結(jié)合既往需求,探索建立寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)方案。

2 寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)主要內(nèi)容

為確保實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)的有效實施,本研究初步建立相關(guān)培訓(xùn)方案,具體包括培訓(xùn)目的、培訓(xùn)對象、培訓(xùn)內(nèi)容、培訓(xùn)方式及培訓(xùn)評估方法。

2.1 培訓(xùn)目的 通過寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估的規(guī)范化培訓(xùn),提升防范實驗室風(fēng)險的管理水平及技術(shù)能力。

2.2 培訓(xùn)對象 培訓(xùn)對象包括寄生蟲病原實驗室管理人員和業(yè)務(wù)人員、實驗動物飼養(yǎng)和處理人員、實驗設(shè)施設(shè)備運(yùn)行維護(hù)人員及廢物管理處置人員。設(shè)置培訓(xùn)及考核項目應(yīng)具有針對性,根據(jù)實驗室不同崗位設(shè)置不同培訓(xùn)重點,比如實驗室管理者的培訓(xùn)要側(cè)重實驗室管理體系、人員監(jiān)督方案和應(yīng)急處置方案等;技術(shù)崗如生物二級實驗室人員需培訓(xùn)BSL2 級生物實驗室結(jié)構(gòu)、布局、設(shè)備及設(shè)施要求,感染性樣本接收、分裝、轉(zhuǎn)運(yùn)、保藏、銷毀、滅菌,實驗室生物安全柜操作與維護(hù)以及感染性材料意外濺灑處理等內(nèi)容。資深人員可能因個人習(xí)慣忽視部分操作規(guī)范,從而產(chǎn)生實驗室安全問題,需通過督查發(fā)現(xiàn)問題并強(qiáng)化培訓(xùn);新進(jìn)人員大多能嚴(yán)格遵守操作規(guī)范,但缺乏實踐經(jīng)驗,需加強(qiáng)培訓(xùn)。

2.3 培訓(xùn)內(nèi)容 生物安全風(fēng)險評估培訓(xùn)具體內(nèi)容包括生物學(xué)背景資料、實驗活動、實驗室操作與防護(hù)、實驗人員及其他相關(guān)因素的風(fēng)險分析。生物學(xué)背景資料涵蓋生物學(xué)特性、流行狀況、致病性、傳播途徑、易感者、感染階段、檢測及治療方法。實驗活動包括寄生蟲病原采樣、保藏、運(yùn)輸、操作、消毒滅菌、廢物處理等環(huán)節(jié)。因此需重點將寄生蟲病原實驗室的生物安全風(fēng)險點納入培訓(xùn)內(nèi)容。目前已報道的感染案例主要是寄生蟲原蟲,獲得性蠕蟲的實驗室感染案例相對報道較少。寄生蟲病原獲得性感染風(fēng)險很大程度取決于寄生蟲感染性階段是否污染[12]。寄生蟲原蟲(如瘧原蟲、利什曼原蟲、錐蟲、巴貝蟲和弓形蟲等)的感染階段(子孢子、前鞭毛體、錐鞭毛體、子孢子、卵囊等)可能存在于培養(yǎng)物和勻漿中,因而寄生蟲病原實驗意外感染大多由污染的針或利器割傷、戳傷、劃傷等引發(fā)[13]。如從事利什曼原蟲研究相關(guān)實驗室人員在操作過程中,若其破損皮膚黏膜直接接觸了感染的白蛉、培養(yǎng)的利什曼原蟲以及感染的人或動物樣本,就可能發(fā)生獲得性感染[14]。因而開展實驗前需進(jìn)行安全防護(hù)培訓(xùn),內(nèi)容包括預(yù)防措施及意外處置方案,積極預(yù)防意外發(fā)生,如意外發(fā)生時可及時治療避免更嚴(yán)重的后果。另外,弓形蟲研究人員可能會意外將感染性樣本濺入眼睛或被實驗動物(如兔)咬傷感染,佩戴護(hù)目鏡及規(guī)范動物實驗操作可以有效預(yù)防此類感染的發(fā)生[15]。腸道原蟲(如溶組織內(nèi)阿米巴、藍(lán)氏賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲、等孢子蟲、環(huán)孢子蟲和等孢球蟲等)的感染階段(包囊、卵囊、孢子等)可能存在于糞便和/或其他體液(例如膽汁)和組織中,可能因誤攝入(如糞口途徑)或不明原因氣溶膠意外感染而導(dǎo)致實驗室獲得性感染。如隱孢子蟲研究相關(guān)實驗人員在開展動物實驗時,可能因混有病原的液體噴濺到臉部而感染,頭面部防護(hù)則可以起到預(yù)防效果;實驗人員開展相關(guān)實驗后可能因未做好手部清潔后經(jīng)口發(fā)生感染,做好手部清潔就非常有必要[16]。寄生蟲蠕蟲(如血吸蟲、糞類圓線蟲、鉤蟲、蛔蟲、蟯蟲和肝片形吸蟲等)的感染階段(尾蚴、幼蟲、蟲卵、囊蚴等)可能存在于水、植物、培養(yǎng)物或糞便標(biāo)本中,因而可能會誤吸入或經(jīng)口、皮膚而發(fā)生獲得性感染,故進(jìn)行相關(guān)研究時,需防止皮膚、黏膜接觸被污染液體,如意外沾染皮膚,應(yīng)迅速擦干,再用90%乙醇擦洗皮膚,對于實驗結(jié)束后的樣本,應(yīng)妥善處置后續(xù)廢物。

2.4 培訓(xùn)方式 寄生蟲病原實驗室生物安全風(fēng)險評估規(guī)范化培訓(xùn)應(yīng)將理論與實踐有效結(jié)合,針對不同人員采用不同培訓(xùn)方式。如對于實驗室管理者,模擬管理所需掌握的場景;對于技術(shù)人員則根據(jù)其崗位的不同來進(jìn)行場景模擬,結(jié)合實驗室可能存在的風(fēng)險點進(jìn)行培訓(xùn)。同時,應(yīng)采用多樣化的培訓(xùn)手段,如科普視頻觀看、現(xiàn)場實踐、突發(fā)應(yīng)急模擬演練等,為受訓(xùn)人員提供較為真實的培訓(xùn)場景;另外實施小班授課,增加互動性,最大程度調(diào)動受訓(xùn)人員的培訓(xùn)積極性,提高學(xué)習(xí)效果,并且適當(dāng)安排答疑,解決培訓(xùn)中的困惑。培訓(xùn)課程分為必修課及選修課,如管理者必修課為體系建設(shè)和應(yīng)急處置等,而技術(shù)人員必修課為設(shè)備操作風(fēng)險點及實驗室操作風(fēng)險點等,設(shè)置必修分值,達(dá)標(biāo)時才能進(jìn)行培訓(xùn)考核。

2.5 培訓(xùn)評估 培訓(xùn)前應(yīng)開展培訓(xùn)知識相關(guān)問卷,了解受訓(xùn)人員知識儲備薄弱環(huán)節(jié),培訓(xùn)時可以有所側(cè)重;培訓(xùn)中應(yīng)依據(jù)答疑來評估培訓(xùn)情況;培訓(xùn)后要開展培訓(xùn)考核,以評估培訓(xùn)的知識掌握程度??己朔绞綉?yīng)多樣化,包括試卷考核、交流觀察、方案設(shè)計、報告分享等。培訓(xùn)半年后觀察對比培訓(xùn)行為變化,每半年到一年進(jìn)行繼續(xù)教育。此外,要以無記名形式開展過程滿意度評估,評估內(nèi)容包括培訓(xùn)效果以及培訓(xùn)老師和受訓(xùn)人員的滿意度,以持續(xù)改進(jìn)培訓(xùn)方案。

3 結(jié) 語

雖然寄生蟲病原未列入《人間傳染的病原微生物目錄》[17],大部分寄生蟲病原實驗在BSL1 級生物實驗室開展,但在寄生蟲病原感染階段開展的相關(guān)研究,如蟲體收集和培養(yǎng)、病原檢測及血清學(xué)檢測等,仍存在實驗室獲得性感染的風(fēng)險,因此建議實驗室人員在BSL2 級生物實驗室開展相關(guān)研究。Gottstein[18]等提出在開展含有棘球絳蟲蟲卵糞便的相關(guān)研究時,建議實驗室人員在BSL3 級生物實驗室進(jìn)行操作。

根據(jù)寄生蟲病原特點進(jìn)行實驗室生物安全風(fēng)險評估的規(guī)范化培訓(xùn),要求培訓(xùn)內(nèi)容設(shè)置要盡量有效適用。開展血液和組織內(nèi)原蟲相關(guān)實驗前需加入安全防護(hù)培訓(xùn)內(nèi)容,如預(yù)防措施及意外處置方案、動物實驗操作規(guī)范等;開展腸道原蟲相關(guān)實驗前,培訓(xùn)項目應(yīng)涵蓋手部清潔等內(nèi)容;開展寄生蟲蠕蟲如血吸蟲相關(guān)實驗研究前,對相關(guān)實驗人員的培訓(xùn)內(nèi)容需增加尾蚴操作培訓(xùn)及實驗結(jié)束后的樣本處置培訓(xùn)等。有針對性的培訓(xùn)可使實驗室從業(yè)人員主動了解開展實驗的風(fēng)險點,增強(qiáng)其安全意識,提高安全防護(hù)能力,提前做好相應(yīng)防護(hù)措施。培訓(xùn)形式直接影響培訓(xùn)效果,適宜的培訓(xùn)方式能讓受訓(xùn)人員更好地掌握培訓(xùn)內(nèi)容,針對不同崗位人員,培訓(xùn)內(nèi)容與方式應(yīng)有所不同,更利于結(jié)合實際發(fā)揮培訓(xùn)效果。培訓(xùn)評估要貫穿評估前、中、后三個過程,以便動態(tài)調(diào)整培訓(xùn)內(nèi)容以達(dá)到更好的培訓(xùn)效果。此外,寄生蟲病的流行呈區(qū)域性分布特點,故不同區(qū)域開展的寄生蟲病原實驗研究側(cè)重點不同,其相應(yīng)的實驗室生物安全培訓(xùn)項目需求也會有所不同,培訓(xùn)方案中實驗室風(fēng)險評估的寄生蟲病原也要有所側(cè)重。

利益沖突聲明全部作者聲明無利益沖突

作者貢獻(xiàn)聲明熊彥紅負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)收集、分析和論文撰寫;鄭彬負(fù)責(zé)論文修改與審核;曹建平負(fù)責(zé)論文指導(dǎo)

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