丁興龍 , 李慶妍, 霍 青, 杜沙莎, 張先娥, 李洪春

徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院1.檢驗(yàn)科;2.藥劑科,江蘇 徐州 221006;3.徐州醫(yī)科大學(xué) 醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院,江蘇 徐州 221000

乳腺癌為臨床常見(jiàn)惡性腫瘤之一,我國(guó)乳腺癌發(fā)病率呈遞增趨勢(shì),以45～49歲較為高發(fā)[1-3]。盡早診斷乳腺癌對(duì)提高治療效果及改善預(yù)后尤為重要。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是用于惡性腫瘤篩查與預(yù)后評(píng)估的常用手段,其中以糖類抗原153(carbohydrate antigen 153,CA153)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)在乳腺癌診斷中較為常用。有研究報(bào)道,血清三葉因子(trefoil factor family 1,TFF1)、程序性死亡配體1(programmed death-ligand-1,PD-L1)在乳腺癌中呈較高表達(dá),在乳腺細(xì)胞增殖、凋亡中有一定的調(diào)控作用[4]。本研究旨在探討TFF1、PD-L1、CA153、CEA在乳腺癌診斷及預(yù)后中的表達(dá)及意義,為臨床診治提供參考?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院自2020年9月至2021年9月收治的200例可疑性乳腺癌患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn):因乳腺腫塊、疼痛、乳頭溢液、糜爛或皮膚凹陷等癥狀就診;經(jīng)影像學(xué)檢查有明確活檢指征或手術(shù)指征后,行病理穿刺活檢或手術(shù)病理檢查;資料完整且能配合隨訪。排除標(biāo)準(zhǔn):既往有病灶切除史者;合并其他惡性腫瘤或存在放化療史者;檢查前1個(gè)月存在影響相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)藥物治療史者;合并嚴(yán)重免疫性、血液性疾病或其他嚴(yán)重器官疾病者。根據(jù)病理檢查結(jié)果將患者分為良性組(n=133)與惡性組(n=67)。良性組:平均年齡(50.8±8.5)歲;平均體質(zhì)量指數(shù)(23.46±24.57)kg/m2;合并糖尿病23例。惡性組:平均年齡(51.1±9.0)歲;平均體質(zhì)量指數(shù)(23.16±3.01)kg/m2;合并糖尿病11例。兩組患者一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法 采集所有患者空腹靜脈血5 ml,以3 000 r/min離心15 min后,獲得血清樣本,并將血清樣本分為2份,置于-20℃冰箱中保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)對(duì)患者血清TFF1水平進(jìn)行檢測(cè)。采用免疫組化法對(duì)PD-L1進(jìn)行檢驗(yàn),根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占組織所有細(xì)胞比例與陽(yáng)性細(xì)胞染色深淺進(jìn)行計(jì)分。顯色細(xì)胞占比<5%為0分;顯色細(xì)胞占比5%～25%為1分;顯色細(xì)胞占比26%～50%為2分;顯色細(xì)胞占比51%～75%為3分;顯色細(xì)胞占比>75%為4分。陽(yáng)性細(xì)胞染色深淺計(jì)分:無(wú)顯色為0分;淺黃色(1+)為1分;棕色(2+)為2分;深褐色(3+)為3分。采用化學(xué)發(fā)光免疫法對(duì)患者血清CA153、CEA進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組患者TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平,并評(píng)估其診斷效能[5]。對(duì)惡性組患者進(jìn)行為期1年的隨訪,統(tǒng)計(jì)其存活率。分析TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平表達(dá)對(duì)患者預(yù)后的判斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平比較 惡性組患者TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平均高于良性組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平比較

2.2 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)乳腺癌診斷效能比較 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合診斷的ROC曲線見(jiàn)圖1。ROC曲線顯示,TFF1+PD-L1+CA153+CEA聯(lián)合診斷的ROC曲線下面積(area under the curve,AUC)、靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度高于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表2。

圖1 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合診斷乳腺癌的ROC曲線

表2 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)乳腺癌診斷效能比較

2.3 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)預(yù)后診斷效能 隨訪1年后,67例惡性組患者中,17例死亡,50例存活,存活率為74.63(50/67)。TFF1+PD-L1+CA153+CEA聯(lián)合對(duì)預(yù)后診斷的AUC、靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較高。見(jiàn)表3。

表3 TFF1、PD-L1、CA153、CEA單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)預(yù)后診斷效能

3 討論

近年來(lái),乳腺癌發(fā)病率不斷升高且呈年輕化趨勢(shì),加強(qiáng)對(duì)乳腺癌的篩查成為臨床關(guān)注的焦點(diǎn)。遺傳、婚育、飲食模式、肥胖等均可成為誘發(fā)乳腺癌的因素[6-7]。

乳腺鉬靶攝片、病理活檢是目前臨床用于鑒別乳腺良惡性腫瘤的主要方式,但由于價(jià)格、操作便捷性以及創(chuàng)傷性等問(wèn)題,用于早期篩查有一定的局限性[8]。與影像學(xué)或病理活檢相比,腫瘤標(biāo)志物由于檢測(cè)便捷、可重復(fù)操作以及能夠?qū)︻A(yù)后起到一定的預(yù)測(cè)作用,逐漸成為臨床診斷惡性腫瘤的常用手段。CA153、CEA是乳腺癌診斷的常用腫瘤標(biāo)志物,在陽(yáng)性患者中通常呈高表達(dá)。有研究報(bào)道,TFF1、PD-L1均參與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展,對(duì)臨床診斷與疾病預(yù)后監(jiān)測(cè)有一定效果[9-10]。

本研究結(jié)果顯示,惡性組患者TFF1、PD-L1、CA153、CEA水平均高于良性組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這提示,TFF1、PD-L1、CA153、CEA表達(dá)水平與乳腺癌惡性程度具有相關(guān)性,乳腺惡性腫瘤細(xì)胞的增殖及腫瘤組織的擴(kuò)大均會(huì)持續(xù)刺激機(jī)體產(chǎn)生TFF1、PD-L1、CA153及CEA。有研究報(bào)道,TFF1為腫瘤抑制因子,但在乳腺癌中的表達(dá)水平變化表明其可能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展具有正相關(guān)性[11]。本研究中ROC曲線發(fā)現(xiàn),各項(xiàng)指標(biāo)診斷乳腺癌的AUC≥0.78,特異度、靈敏度均較高,準(zhǔn)確度≥75%。這說(shuō)明,乳腺癌患者CA153、CEA、TFF1、PD-L1水平呈高表達(dá)狀態(tài),對(duì)腫瘤良惡性均具有一定的鑒別診斷價(jià)值。CA153是由癌細(xì)胞粘蛋白1基因表達(dá)的特異性腫瘤標(biāo)志物,當(dāng)腺體細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí),激活細(xì)胞膜上的糖基轉(zhuǎn)化酶,造成唾液酶、蛋白酶活性升高,繼而使得腺體細(xì)胞骨架、癌細(xì)胞膜上CA153過(guò)量表達(dá),導(dǎo)致淋巴因子激活殺傷細(xì)胞和細(xì)胞毒性細(xì)胞被抑制[9-10]。CEA是一種非特異性腫瘤標(biāo)志物,其在健康人群肝、胰腺組織中有少量表達(dá)[11]。TFF1作為三葉因子家族成員之一,主要在胃腸道黏膜表達(dá),其能夠與黏膜蛋白結(jié)合,起到保護(hù)、修復(fù)胃腸道屏障功能的作用。在正常的乳腺組織中,TFF1往往呈低表達(dá)狀態(tài),當(dāng)其水平升高時(shí),可造成雌激素分泌紊亂,并促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá),由此加速細(xì)胞增殖,誘發(fā)乳腺癌發(fā)生[12]。程序性死亡受體1(programmed cell death protein-1,PD-1)屬于免疫調(diào)控分子,主要在活化的T細(xì)胞中表達(dá),起到抑制T細(xì)胞活性以調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)平衡的作用。PD-L1主要在抗原遞呈細(xì)胞、活化的T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞中表達(dá),能夠抑制T細(xì)胞增值與細(xì)胞因子產(chǎn)生的作用[13-16]。當(dāng)PD-L1與PD-1結(jié)合后,可反向活化T細(xì)胞傳遞抑制型號(hào),誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡,從而促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn),TFF1+PD-L1+CA153+CEA聯(lián)合對(duì)預(yù)后診斷的AUC、靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度均較高。這說(shuō)明,CA153、CEA、TFF1、PD-L1的表達(dá)對(duì)惡性患者預(yù)后的預(yù)測(cè)有一定價(jià)值。隨著CA153、CEA、TFF1、PD-L1水平升高,機(jī)體對(duì)于免疫細(xì)胞、T細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng),進(jìn)而導(dǎo)致免疫系統(tǒng)對(duì)癌細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)移的抑制作用減弱,并形成惡性循環(huán),進(jìn)一步增加CA153、CEA、TFF1、PD-L1的表達(dá)水平[17-20]。

綜上所述,血清TFF1、PD-L1、CA153、CEA均在乳腺惡性腫瘤中呈高表達(dá),4者聯(lián)合用于乳腺癌診斷及其預(yù)后評(píng)估效果較好。