黃彬勝 王大鵬 唐章生 高雪梅 李 青 盧智發(fā) 項(xiàng)桂德 陸專靈　

不同餌料對克氏原螯蝦親蝦繁育性能的影響

黃彬勝1,2王大鵬1,2唐章生1,2高雪梅1,2李 青1,2盧智發(fā)1,2項(xiàng)桂德1,2陸專靈1,2

（1.廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院，廣西 南寧 530021；2.廣西水產(chǎn)遺傳育種與健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西 南寧 530021）

開展了魚肉（YR）、豬肝（ZG）、黃豆（HD）和飼料（SL）四種不同餌料對克氏原螯蝦養(yǎng)殖水體、抱卵率及卵巢發(fā)育指數(shù)的試驗(yàn)研究，比較分析了在YR中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亞硒酸鈉維生素E（0.02%）對克氏原螯蝦抱卵率及抱卵時(shí)間影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示：YR、ZG組的氨氮值顯著高于HD、SL組，溶解氧顯著低于HD、SL組（＜0.05）；YR組卵巢發(fā)育指數(shù)顯著高于HD、SL組（＜0.05）；YR組抱卵率最高（58.33%），SL組抱卵率最低（11.11%），YR和ZG組的抱卵率顯著高于HD和SL組（＜0.05）；YR中添加dl-α-生育酚乙酸酯或亞硒酸鈉維生素E和對照組相比顯著提高抱卵率并且短抱卵時(shí)間（＜0.05）。YR添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亞硒酸鈉維生素E（0.02%），能促進(jìn)克氏原螯蝦雌蝦的卵巢生殖發(fā)育，提高抱卵率，縮短抱卵時(shí)間。

克氏原螯蝦；餌料；抱卵率；水質(zhì)；卵巢發(fā)育指數(shù)

引言

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），屬于節(jié)肢動物門，螯蝦科，原螯蝦屬，原產(chǎn)于墨西哥北部和美國南部，俗稱淡水小龍蝦[1]，具有環(huán)境適應(yīng)力強(qiáng)、雜食性、生長快、成熟早、繁殖力高、耐低溫低氧和病害少等特點(diǎn)，是產(chǎn)業(yè)扶貧和鄉(xiāng)村振興的主推品種。克氏原螯蝦營養(yǎng)豐富、肉質(zhì)鮮嫩、味道鮮美，成為目前市場上暢銷的水產(chǎn)品。近年來，我國克氏原螯蝦的市場需求量逐步提升，養(yǎng)殖面積不斷增加，養(yǎng)殖模式呈多樣化，其中由于克氏原螯蝦稻田綜合種養(yǎng)模式簡單、基礎(chǔ)設(shè)施易改造、可操作性強(qiáng)等特點(diǎn)，我國多數(shù)省份都在大面積推廣。

在自然條件下，克氏原螯蝦出苗時(shí)間集中在11月至次年4月，廣西因氣候優(yōu)勢主推冬閑田養(yǎng)殖模式，秋冬季小龍蝦苗種供應(yīng)緊張，是制約產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問題之一。目前，克氏原螯蝦的工廠化繁育，一般從9月開始選種交配，10月抱卵，11月孵化，冬前即進(jìn)入稚苗培育階段[2]，如能夠提早在秋季大量培育出克氏原螯蝦苗種，廣西則可以利用地域優(yōu)勢在春節(jié)前后大量上市商品蝦，將會產(chǎn)生極大的經(jīng)濟(jì)效益。因此，開展克氏原螯蝦繁育性能的研究是行業(yè)密切關(guān)注的焦點(diǎn)，本研究通過開展魚肉（YR）、豬肝（ZG）、黃豆（HD）和飼料（SL）四種基礎(chǔ)餌料對克氏原螯蝦生殖及水質(zhì)氨氮的試驗(yàn)研究，以及添加dl-α-生育酚乙酸酯或亞硒酸鈉維生素E對克氏原螯蝦抱卵率和抱卵時(shí)間的影響的試驗(yàn)研究，為克氏原螯蝦室內(nèi)親蝦培育期的餌料選擇提供科學(xué)數(shù)據(jù)，為克氏原螯蝦早苗繁育提供科學(xué)借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)地點(diǎn)為廣西北海市合浦縣公館鎮(zhèn)合浦冠新農(nóng)業(yè)科技有限公司鐵山稻蝦養(yǎng)殖基地，基礎(chǔ)餌料投飼試驗(yàn)時(shí)間從2020年8月29日開始至2020年10月24日結(jié)束，共55天；促性腺發(fā)育添加劑試驗(yàn)時(shí)間從2020年8月29日開始，至2020年10月14日結(jié)束，共45天。

試驗(yàn)車間內(nèi)設(shè)置有養(yǎng)殖塑料筐（長46 cm×寬34 cm×內(nèi)高13 cm，有白色筐門，可打開方便投喂餌料和進(jìn)行試驗(yàn)操作，靠近筐門內(nèi)沿處呈現(xiàn)小斜坡，筐內(nèi)有溢水口，水深最深為7 cm，淺水區(qū)水深2 cm）底部呈漏斗狀可排干水，8個(gè)試驗(yàn)用的養(yǎng)殖筐疊架成1列。每個(gè)養(yǎng)殖筐上部接進(jìn)水管，底部的排水口處接排水管，每排養(yǎng)殖筐用同一根進(jìn)水管，同一根出水管，同一排養(yǎng)殖筐可同時(shí)進(jìn)水、同時(shí)排水，筐與筐之間不會相互影響（圖1）。試驗(yàn)車間內(nèi)裝有空調(diào)，可通過調(diào)節(jié)車間內(nèi)氣溫，使水溫維持(23±0.5) ℃，試驗(yàn)用的克氏原螯蝦雌蝦取自養(yǎng)殖基地稻蝦田，存放于大水池暫養(yǎng)5天后，選擇大小規(guī)格為(25±1) g，附肢完好，體格健康的雌蝦放入養(yǎng)殖塑料筐中，每筐放6只，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置需要共投放試驗(yàn)蝦252只。

圖1 試驗(yàn)車間

1.2 方法

基礎(chǔ)餌料投飼試驗(yàn)，共設(shè)置4個(gè)餌料組，每個(gè)餌料組設(shè)3個(gè)平行組，每組2個(gè)養(yǎng)殖筐共12只蝦。四個(gè)餌料組分別為：魚肉組（YR）、豬肝組（ZG）、黃豆組（HD）和飼料組（SL）。將新鮮羅非魚肉、新鮮豬肝、黃豆（浸泡12 h以上）、人工配合飼料打碎成顆粒制作為試驗(yàn)餌料。日常管理：每天下午5時(shí)投喂餌料，記錄投喂量，次日上午8時(shí)采用納氏試劑光度法測定各筐水體氨氮值并記錄，采用衡欣AZ86031水質(zhì)檢測儀檢測水體的溶解氧，9時(shí)撈出殘餌碎屑稱重記錄殘餌重量，每日換水一次，換水量100%；每日觀察記錄雌蝦吃食和抱卵情況，發(fā)現(xiàn)有抱卵，及時(shí)記錄并撿出來單獨(dú)飼養(yǎng)。試驗(yàn)結(jié)束后，用剪刀鑷子取出各組未抱卵蝦的卵巢并稱重（濕重）。

促性腺發(fā)育添加劑試驗(yàn)，試驗(yàn)以魚肉為基礎(chǔ)餌料，設(shè)置3個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別為T1組（添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%））、T2組（添加亞硒酸鈉VE（0.02%））、T3（對照組不添加），每組設(shè)3個(gè)平行組，每個(gè)平行組12只蝦。將新鮮羅非魚肉打碎制作成基礎(chǔ)餌料，然后根據(jù)試驗(yàn)設(shè)置，按基礎(chǔ)餌料重量的0.02%分別添加dl-α-生育酚乙酸酯、亞硒酸鈉VE制作成實(shí)驗(yàn)組所需餌料。

1.3 試驗(yàn)指標(biāo)的測定

卵巢發(fā)育指數(shù)＝雌蝦卵巢濕重／雌蝦體濕重×100％

抱卵率＝抱卵蝦個(gè)數(shù)/雌蝦個(gè)數(shù)×100％

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用單因素方差分析法One-Way ANOVA對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，用多重比較LSD檢驗(yàn)法，＜0.05表示差異顯著，＞0.05表示差異不顯著。

2 結(jié)果與討論

2.1 各餌料組中克氏原螯蝦抱卵蝦個(gè)數(shù)、卵巢發(fā)育指數(shù)、氨氮、溶解氧的數(shù)值統(tǒng)計(jì)

在基礎(chǔ)餌料投飼試驗(yàn)中，單個(gè)餌料組有2個(gè)養(yǎng)殖筐，每筐放置6只雌蝦，共12只。試驗(yàn)期間，每日上午8時(shí)檢測記錄各組養(yǎng)殖筐中水體的氨氮、溶解氧，然后排干凈每組筐內(nèi)水體，后加入新的養(yǎng)殖用水（氨氮值＜0.02 mg/L，溶解氧＞7.60 mg/L），換水量100%。在試驗(yàn)進(jìn)行34天后，開始有雌蝦抱卵并轉(zhuǎn)移出筐外養(yǎng)殖，為避免因筐內(nèi)小龍蝦數(shù)量不同而對氨氮、溶解氧數(shù)值產(chǎn)生額外影響，這兩種水質(zhì)指標(biāo)只選用抱卵前（實(shí)驗(yàn)前33天）的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。試驗(yàn)共進(jìn)行55天，獲得抱卵蝦52只，抱卵蝦數(shù)量、卵巢發(fā)育指數(shù)、氨氮、溶解氧平均值統(tǒng)計(jì)如表1所示。

表1 各餌料組抱卵蝦數(shù)量、卵巢繁育指數(shù)、氨氮、溶解氧數(shù)值統(tǒng)計(jì)表

注Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ為相同餌料平行組；投飼試驗(yàn)結(jié)束后，由于YR（Ⅲ）魚肉組未抱卵雌蝦最少（4只），因此各組隨機(jī)抽選4只，稱整只雌蝦的濕重，單獨(dú)取出卵巢稱卵巢濕重（如圖2），計(jì)算各組卵巢發(fā)育指數(shù)平均值。

圖2 解剖雌蝦，取出整個(gè)卵巢組織

2.2 各餌料組中水質(zhì)氨氮、溶解氧、抱卵率、卵巢發(fā)育指數(shù)方差分析

各餌料組養(yǎng)殖筐內(nèi)不放置增氧設(shè)施，每日換水后各組養(yǎng)殖筐內(nèi)水體的溶解氧＞7.60 mg/L，氨氮值＜0.02 mg/L，筐與筐之間水質(zhì)指標(biāo)不會相互影響。養(yǎng)殖筐內(nèi)容積較小，水體少，溶解氧24 h最低值（0.28 mg/L）較低，但克氏原螯蝦沒有出現(xiàn)由于缺氧導(dǎo)致死亡的情況，其原因在于養(yǎng)殖筐中水位較淺，小龍蝦可將頭甲部露出水面，直接利用空氣中的氧。經(jīng)方差分析如表2，可知：YR、ZG兩組的氨氮值顯著高于HD、SL組（＜0.05），且YR、ZG兩組的溶解氧顯著低于HD、SL組（＜0.05）。說明一定時(shí)間內(nèi)，投飼魚肉或豬肝水質(zhì)中氨氮值易升高，殘餌及小龍蝦飼用該類餌料后糞便分泌物等易消耗水體中溶解氧，會加速養(yǎng)殖水質(zhì)的惡化；而投飼黃豆或飼料可以維持較好的水質(zhì)。

表2 各餌料組氨氮、溶解氧、抱卵率、卵巢發(fā)育指數(shù)方差分析

注同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母a、b、c表示差異顯著（＜0.05）；肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著（＞0.05）。

同時(shí)表2顯示，YR組的抱卵率（58.33%）遠(yuǎn)高于其他各組，SL組的抱卵率最低（11.11%），YR和ZG組對比HD組能顯著提高抱卵率（＜0.05）；YR和ZG組對比SL組能顯著提高抱卵率（＜0.05）；HD組對比SL組能顯著提高抱卵率（＜0.05）；YR和ZG兩組對抱卵率的影響相互對比差異不顯著（＞0.05）。YR組卵巢發(fā)育指數(shù)顯著高于HD組和SL組（＜0.05），而ZG組卵巢發(fā)育指數(shù)與其他各組差異不顯著。

2.3 促性腺發(fā)育添加劑對克氏原螯蝦抱卵率及抱卵時(shí)間的影響

以魚肉為基礎(chǔ)餌料，T1組［添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）］、T2組［添加亞硒酸鈉VE（0.02%）］、T3（對照組不添加），試驗(yàn)共進(jìn)行45天，收集到抱卵蝦57只，組內(nèi)抱卵率達(dá)到30%用時(shí)天數(shù)d最少為33天，各實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)記錄如表3。

表3 添加劑試驗(yàn)各組收獲抱卵蝦數(shù)量及組內(nèi)達(dá)到30%抱卵率的用時(shí)天數(shù)

注Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ為相同添加劑平行組。

通過方差分析表4可知，魚肉中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亞硒酸鈉VE（0.02%）在養(yǎng)殖繁育期，兩種添加劑對比無添加劑組T3可顯著增加克氏原螯蝦群體抱卵比例（＜0.05），提高抱卵率；兩種添加劑作用效果相互對比差異不顯著（＞0.05）。預(yù)設(shè)試驗(yàn)組內(nèi)克氏原螯蝦群體到達(dá)30%抱卵率為時(shí)間節(jié)點(diǎn)，魚肉中添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亞硒酸鈉VE（0.02%）兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組的克氏原螯蝦群體達(dá)到指定抱卵率所用天數(shù)顯著少于對照組（＜0.05）；兩種添加劑的作用效果相互比較差異不顯著（＞0.05）。

表4 添加劑對抱卵率及抱卵時(shí)間的影響方差分析

注同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母a、b表示差異顯著（＜0.05）；肩標(biāo)相同字母表示差異不顯著（＞0.05）。

2.4 討論

自然條件下，克氏原螯蝦雜食性，以食草和小型水生動物為主，本研究在餌料對比試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，克氏原螯蝦喜食魚肉，且食魚肉可加快其生殖發(fā)育。因此，人工養(yǎng)殖繁育期，可給克氏原螯蝦投喂新鮮魚肉，促進(jìn)其性腺發(fā)育。在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中，養(yǎng)殖規(guī)模大，投喂量大，新鮮魚肉難以滿足需求，此時(shí)可選擇投喂冰鮮餌料魚，但由于這類冰鮮餌料魚常帶有致病菌，克氏原螯蝦在攝食后易患病，如腸炎病及肝膽腫大等，因此在投喂此類冰鮮餌料魚前，先進(jìn)行消毒殺菌，可在解凍冰鮮魚時(shí)選用水產(chǎn)專用消毒殺菌類藥液進(jìn)行殺菌處理。

在克氏原螯蝦養(yǎng)殖過程中，投喂魚肉易導(dǎo)致水質(zhì)氨氮值升高，溶解氧易消耗，養(yǎng)殖水體易惡化，因此在養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中需控制好魚肉的投喂量。在研究冰鮮下雜魚與配合飼料對大口黑鱸養(yǎng)殖水質(zhì)指標(biāo)的影響中，也發(fā)現(xiàn)冰鮮魚對水質(zhì)的氨氮、總氮、總磷等指標(biāo)的影響比配合飼料大[3]。劉國興等[4]認(rèn)為養(yǎng)殖克氏原螯蝦的水體水質(zhì)指標(biāo)（總氮、總磷、氨氮和亞硝酸鹽氮）隨放養(yǎng)密度增大而升高，因此在親蝦的室內(nèi)培育過程中，應(yīng)控制好養(yǎng)殖密度，通過多種方法調(diào)節(jié)好養(yǎng)殖水質(zhì)各項(xiàng)指標(biāo)，通過投喂魚肉，加快克氏原螯蝦的生殖發(fā)育。

在動物餌料添加劑中，維生素E作為一種天然的生物抗氧化劑，可預(yù)防細(xì)胞膜和亞細(xì)胞膜中磷脂、膽固醇等多種不飽和脂肪酸的過氧化反應(yīng)，從而影響動物的性腺成熟、產(chǎn)卵、胚胎發(fā)育和孵化等[5]；同時(shí)維生素E是一種脂溶性維生素，是4種形態(tài)生育酚和4種形態(tài)生育三烯酚的總稱，能有效清除機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的過多的自由基，降低因自由基過多而導(dǎo)致的氧化應(yīng)激及疾病發(fā)生率，提高動物免疫力與生產(chǎn)性能，其中活性最高的是α-生育酚[6-10]?？紤]到維生素E和α-生育酚都能影響克氏原螯蝦抱卵，為對比兩者對克氏原螯蝦抱卵率的影響值，做了對比研究試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，兩種添加劑能促進(jìn)克氏原螯蝦生殖發(fā)育，促進(jìn)產(chǎn)卵，這與前人的研究相符合。試驗(yàn)不足之處是試驗(yàn)過程沒有對這兩種添加劑設(shè)置用量梯度，直接選擇用量為0.02%，主要是基于有研究表明基礎(chǔ)餌料中添加VE的量為0.02%時(shí)，可提高單個(gè)克氏原螯蝦的產(chǎn)卵量，同時(shí)提高抱卵雌蝦的比例[11]。而關(guān)于dl-α-生育酚乙酸酯單獨(dú)用于促進(jìn)克氏原螯蝦繁育生殖用量的研究較少，在用量梯度方面還要進(jìn)一步研究。在兩者用量相同，均為0.02%的情況下，可增加克氏原螯蝦抱卵率同時(shí)縮短抱卵時(shí)間，兩者使用的效果對比差異不顯著。

3 結(jié)論

本研究開展了四種餌料對克氏原螯蝦養(yǎng)殖水體的氨氮和溶解氧、卵巢發(fā)育及抱卵率的影響試驗(yàn)；同時(shí)開展dl-α-生育酚乙酸酯、亞硒酸鈉維生素E兩種促性腺發(fā)育添加劑對克氏原螯蝦抱卵率以及抱卵時(shí)間的影響試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行55天，試驗(yàn)結(jié)果表明，投飼魚肉添加dl-α-生育酚乙酸酯（0.02%）或亞硒酸鈉維生素E（0.02%）可以促進(jìn)克氏原螯蝦雌蝦的卵巢生殖發(fā)育，縮短雌蝦抱卵的時(shí)間同時(shí)提升群體抱卵率。該餌料制作成本低，容易獲得，操作簡單，在養(yǎng)殖繁育期可以推廣應(yīng)用，使出苗時(shí)間提前，解決部分地區(qū)苗種供應(yīng)難的問題，為蝦農(nóng)創(chuàng)造更大的養(yǎng)殖收益。

[1] 沈嘉瑞. 中國的蝦蟹[M]. 北京: 科學(xué)出版社，1976.

[2] 徐增洪，邴旭文，趙朝陽，等. 克氏原螯蝦卵巢發(fā)育與產(chǎn)卵周期變化的觀察[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，26(6): 1304-1307.

[3] 王廣軍，吳銳全，謝駿，等. 大口黑鱸投喂兩種不同飼料對水質(zhì)指標(biāo)的影響[J]. 水產(chǎn)學(xué)雜志，2009，22(1): 35-37.

[4] 劉國興，李玲，彭剛，等. 放養(yǎng)密度對克氏原螯蝦生長和養(yǎng)殖水質(zhì)的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，26(4): 86-89.

[5] 栗志民，胡賢德，吳琴瑟，等. 蝦類維生素E營養(yǎng)研究新進(jìn)展[J]. 集美大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，15(2): 103-108.

[6] 詹騰飛，韓云勝，湯超華，等. 富維生素E轉(zhuǎn)基因玉米對肉雞生長性能、生化指標(biāo)及抗氧化功能的影響[J]. 中國畜牧獸醫(yī)，2019，46(9): 2608-2617.

[7] ZINGG J M. Vitamin E: An overview of major research directions[J]. Molecular Aspects of Medicine, 2007, 28(5): 400-422.

[8] COLOMBO M L. An update on vitamin E, tocopherol and tocotrienol-perspectives[J]. Molecules, 2010, 15(4): 2103-2113.

[9] PISOSCHI A M, POP A. The role of antioxidants in the chemistry of oxidative stress: A review[J]. European Journal of Medicinal Chemistry, 2015, 46(31): 55-74.

[10] POPRAC P, JOMOVA K, SIMUNKOVA M, et al. Targeting free radicals in oxidative stress-related human diseases[J]. Trends in Pharmacological Sciences, 2017, 38(7): 592-607.

[11] 李銘，董衛(wèi)軍，徐加元，等. 維生素E對克氏原螯蝦生殖的影響[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2007(S1): 65-68.

Effects of Different Baits on the Breeding Performance of Parent Procambarus Clarkii

The effects of fish (YR), pig liver (ZG), soybean (HD) and feed (SL) on water, ovulation rate and ovarian development index of Procambarus clarkii were studied. The effects of adding DL-α-tocopherol acetate (0.02%) or sodium selenite vitamin E (0.02%) to YR on ovulation rate and ovulation time of Procambarus clarkii were compared and analyzed. The results showed as follows: the ammonia nitrogen value in YR and ZG groups was significantly higher than that in HD and SL groups, and the dissolved oxygen was significantly lower than that in HD and SL groups (<0.05). The ovarian development index in YR group was significantly higher than that in HD and SL groups (<0.05). The ovulation rate of YR group was the highest (58.33%), and the ovulation rate of SL group was the lowest (11.11%) . The ovulation rate of YR and ZG groups was significantly higher than that of HD and SL groups (<0.05). The addition of DL-α-tocopherol acetate or sodium selenite vitamin E in YR significantly increased the ovulation rate and shorter ovulation time compared with the control group (<0.05). In conclusion, the addition of DL-α-tocopherol acetate (0.02%) or sodium selenite vitamin E (0.02%) in YR can promote the ovarian reproductive development, increase the rate of ovulation and shorten the time of ovulation in female Procambarus clarkii.

Procambarus clarkii; bait; ovulation rate; water quality; ovarian development index

S963

A

1008-1151(2023)09-0085-04

2022-12-20

廣西創(chuàng)新驅(qū)動發(fā)展專項(xiàng)（桂科AA20302019-2）。

黃彬勝（1988－），男，廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院助理農(nóng)藝師，從事水產(chǎn)苗種餌料培育技術(shù)研究工作。

陸專靈（1982－），男，廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究院副研究員，博士，從事水產(chǎn)苗種繁育技術(shù)研究工作。