蔣亞男 張金鳳 邵紫賢 魏楚洪 文 芳 陳日玲

1.廣東醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院，廣東湛江 524011；

2.廣東醫(yī)科大學(xué)順德婦女兒童醫(yī)院 佛山市順德區(qū)婦幼保健院新生兒科，廣東佛山 528300

地中海貧血（thalassemias）簡(jiǎn)稱地貧，根源在于珠蛋白基因缺失或突變引起的肽鏈合成障礙，進(jìn)而導(dǎo)致溶血性貧血。Xu 等[1]的研究顯示地貧基因缺陷的發(fā)生率在我國(guó)南方許多區(qū)域可以達(dá)到2.5%～20%，尤其是在廣東、廣西地區(qū)分別高達(dá)10%和20%。地貧兒童普遍生長(zhǎng)發(fā)育滯后，營(yíng)養(yǎng)不良率以及營(yíng)養(yǎng)風(fēng)險(xiǎn)均較高，低體重率達(dá)72.9%，生長(zhǎng)遲緩率為52.5%，消瘦率為89.8%[2]。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝入與兒童的身高、體重密切相關(guān)，適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)和熱量是保證兒童體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和微量元素充足的先決條件，應(yīng)根據(jù)兒童的年齡和個(gè)人情況給予營(yíng)養(yǎng)飲食[3-4]。氨基酸和酰基肉堿是兒童能量代謝的重要物質(zhì)，在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝中亦起重要作用。本研究采用串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)地中海貧血兒童血液中氨基酸、酰基肉堿等代謝物進(jìn)行分析，旨在研究地貧兒童與正常嬰兒代謝水平的差異，為探索地貧兒童的最佳營(yíng)養(yǎng)計(jì)劃提供依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2021 年7—12 月于廣東醫(yī)科大學(xué)順德婦女兒童醫(yī)院新生兒疾病篩查中心進(jìn)行新生兒血紅蛋白電泳篩查的新生兒3314 例，選取新生兒血紅蛋白電泳篩查陽(yáng)性，同時(shí)進(jìn)行遺傳代謝病篩查并排除出生時(shí)并發(fā)癥及合并癥的新生兒，入組349 例，經(jīng)地貧基因檢測(cè)陽(yáng)性207 例，根據(jù)分型分為α 地貧組（n=163）、β 地貧組（n=44），142 例地貧基因陰性新生兒為對(duì)照組。其中α 地貧組、β 地貧組、對(duì)照組性別（男/女）分別為（95/68）例、（22/22）例、（81/61）例，出生體重分別為（3.139±0.497）kg、（3.129±0.469）kg、（3.123±0.403）kg，胎齡分別為（38.669±1.626）周、（38.636±1.116）周、（38.507±1.384）周，三組新生兒性別（χ2=1.772，P=0.412）、胎齡（F=0.905，P=0.405）、出生體重（F=0.080，P=0.923）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。本研究已獲得廣東醫(yī)科大學(xué)順德婦女兒童醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審核編號(hào)：2022019）。

1.2 遺傳代謝病檢測(cè)指標(biāo)

遺傳代謝病檢測(cè)指標(biāo)包括11 種氨基酸：丙氨酸（alanine，Ala）、甘氨酸（glycine，Gly）、亮氨酸（leucine，Leu）、蛋氨酸（methionine，Met）、脯氨酸（proline，Pro）、纈氨酸（valine，Val）、苯丙氨酸（phenylalanine，Phe）、瓜氨酸（citrulline，Cit）、酪氨酸（tyrosine，Tyr）、鳥(niǎo)氨酸（ornithine，Orn）、精氨酸（arginine，Arg）；和12 種?；鈮A：游離肉堿（C0）、乙酰肉堿（C2）、丙酰肉堿（C3）、丁酰肉堿（C4）、異戊酰肉堿（C5）、己酰肉堿（C6）、辛酰肉堿（C8）、葵酰肉堿（C10）、月桂酰肉堿（C12）、肉豆蔻酰肉堿（C14）、棕櫚酰肉堿（C16）、十八碳酰肉堿（C18）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用方差分析，控制相關(guān)影響因素，估算不同分組間各指標(biāo)的調(diào)整測(cè)量值的分布范圍差異，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。非正態(tài)分布的計(jì)量資料以中位數(shù)（四分位數(shù)）[M（P25，P75）] 描述，多組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗(yàn)。經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)性使用Pearson 相關(guān)分析，不符合正態(tài)使用Spearman 相關(guān)分析。計(jì)數(shù)資料以[n（%）] 表示，P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組間氨基酸水平比較

將各組間氨基酸水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示除Leu、Met、Pro、Arg 及Orn 外，其余氨基酸水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），其中α 地貧組Ala、Gly、Val、Phe、Tyr 低于對(duì)照組；β 地貧組Gly、Phe低于對(duì)照組，而Cit 高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組間氨基酸水平比較

2.2 各影響因素與氨基酸指標(biāo)的相關(guān)性分析

將各影響因素與氨基酸指標(biāo)進(jìn)行Spearman 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，Gly（r=0.076，P=0.049）、Met（r=0.127，P=0.001）、Pro（r=0.080，P=0.038）、Cit（r=0.172，P=0.000）、Orn（r=0.088，P=0.022）與胎齡呈正相關(guān)；Leu（r=-0.103，P=0.007）與出生體重呈負(fù)相關(guān)；Leu（r=0.088，P=0.023）、Pro（r=0.103，P=0.007）、Val（r=0.127，P=0.001）、Cit（r=0.094，P=0.015）、Orn（r=0.089，P=0.020）與母妊娠期、圍生期疾病、手術(shù)史呈正相關(guān)；Arg（r=-0.184，P=0.000）與胎齡、新生兒期疾病史呈負(fù)相關(guān)。

2.3 各組間?；鈮A代謝水平比較

α 地貧組C0、C2、C4、C5、C8、C14、C16、C18高于對(duì)照組；β 地貧組C4、C5 高于對(duì)照組，C12低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。見(jiàn)表2。

表2 各組間?；鈮A代謝水平比較（）

表2 各組間?；鈮A代謝水平比較（）

注 同對(duì)照組比較，aP ＜ 0.05

?

2.4 各影響因素與肉堿指標(biāo)的相關(guān)性分析

將各影響因素與肉堿指標(biāo)進(jìn)行Spearman 相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，C14（r=0.127，P=0.001）、C16（r=0.173，P=0.000）、C18（r=0.109，P=0.004）與胎齡呈正相關(guān)，C2（r=-0.087，P=0.023）與胎齡呈負(fù)相關(guān)；C16（r=0.122，P=0.001）與出生體重呈正相關(guān)，C5（r=-0.174，P=0.000）與出生體重呈負(fù)相關(guān)；C2（r=-0.129，P=0.001）、C5（r=-0.125，P=0.001）與新生兒期疾病史呈負(fù)相關(guān)。

3 討論

兒童營(yíng)養(yǎng)代謝失衡是地貧基本特征之一[5]。胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育主要是通過(guò)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（主要為葡萄糖、氨基酸）-胰島素-胰島素樣因子（IGR）代謝軸的調(diào)節(jié)，其中氨基酸比葡萄糖發(fā)揮著更重要的意義[6]。氨基酸與嬰兒的生長(zhǎng)發(fā)育和疾病的發(fā)生密切相關(guān)[7]，氨基酸紊亂容易導(dǎo)致胎兒死亡和宮內(nèi)生長(zhǎng)受限[8]。有研究顯示在新生兒氨基酸代謝中，Phe、Met 因酶活性不足，導(dǎo)致轉(zhuǎn)變成Tyr 和胱氨酸（cystine，Cys）的功能低下，因此Cys 和Tyr 對(duì)新生兒也是必需氨基酸[6]。本研究發(fā)現(xiàn)α 地貧組Ala、Gly、Val、Phe、Tyr 低于對(duì)照組；β 地貧組Gly、Phe 低于對(duì)照組，Cit 高于對(duì)照組。Gly、Tyr、Arg、Phe 在蛋白質(zhì)合成、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育以及作為神經(jīng)遞質(zhì)等方面發(fā)揮重要作用。兩組Phe、Gly 水平均低于對(duì)照組，α 組Val、Tyr 也低于對(duì)照組，這可能與妊娠后期從母體輸送給胎兒的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)減少有關(guān)。

Tyr 屬于芳香族氨基酸，可以由苯丙氨酸羥化產(chǎn)生，同時(shí)也是腎上腺素、甲狀腺素等多種激素和功能物質(zhì)的重要原料，能夠與Phe 一起合成激素和神經(jīng)遞質(zhì)，并參與人體的糖代謝和脂肪代謝。Tyr 異常對(duì)新生兒疾病篩查結(jié)果也會(huì)有一定的影響。Val 屬于支鏈氨基酸范疇，是人體必需的氨基酸之一，可以通過(guò)轉(zhuǎn)氨基、氧化脫羧及β 氧化等參與三羧酸循環(huán)，因此在地貧患兒營(yíng)養(yǎng)中適當(dāng)補(bǔ)充芳香族氨基酸和支鏈氨基酸有利于生長(zhǎng)發(fā)育。相反，地貧患兒體內(nèi)某些氨基酸的濃度太高，又會(huì)導(dǎo)致一些疾病的發(fā)生[9]，因此需要?jiǎng)討B(tài)監(jiān)測(cè)血液中代謝物的水平。Wang 等[10]的研究發(fā)現(xiàn)Cit、蘇氨酸（threonine，Thr）等氨基酸濃度降低是極低出生體重兒宮外發(fā)育遲緩的危險(xiǎn)因素，而且Cit 濃度降低的程度與蛋白質(zhì)和能量缺陷存在正相關(guān)。而在本研究中，β 地貧組患兒中Cit、Arg 升高于對(duì)照組，由此推測(cè)β 地貧患兒在宮內(nèi)存在尿素代謝的不平衡，與極低出生體重兒的尿素代謝存在差異。Ala、Gly、Met、Cit、Val、Arg、Phe、Pro 與胎齡、出生體重、母妊娠期、圍生期疾病、手術(shù)史及新生兒期疾病史具有相關(guān)性。有研究顯示胎齡、出生體重、母孕期、圍生期疾病史是影響地貧患兒宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的重要因素，也需要重點(diǎn)關(guān)注[11-12]。

?；鈮A是肉堿與脂肪酸、氨基酸代謝物結(jié)合的一類酯類物質(zhì)，分為短鏈（C4-C6）、中鏈（C8-C12）、長(zhǎng)鏈（C14 以上）?；鈮A。本研究顯示α 地貧組C0、C2、C4、C5、C8、C14、C16、C18 高于對(duì)照組，β 地貧組C4、C5也高于對(duì)照組。α 地貧組以中長(zhǎng)鏈?；鈮A增高為主，C0 是將中鏈和長(zhǎng)鏈脂肪酸從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到線粒體進(jìn)行脂肪酸β 氧化的必要載體，在體內(nèi)急劇增加[8]；而β地貧組短鏈脂肪酸代謝為主，對(duì)C0 依賴性小，與對(duì)照組差別不明顯。推測(cè)地貧患兒胎兒期從母體獲得氨基酸減少，自身中長(zhǎng)鏈脂肪酸動(dòng)員增強(qiáng)。同時(shí)，血酰基肉堿水平與胎齡、出生體重、取樣日齡等因素有關(guān)[13]。Gucciardi等[14]研究發(fā)現(xiàn)血液中長(zhǎng)鏈酰基肉堿水平與胎齡呈正相關(guān)，早產(chǎn)兒出生后1 ～2 d 內(nèi)血液中C4-OH 和C5 水平隨胎齡變化[15]。本研究發(fā)現(xiàn)C14、C16、C18 與胎齡呈正相關(guān)。不同胎齡體重兒血氨基酸和?；鈮A的差異較大，應(yīng)盡早為小于胎齡的地貧新生兒補(bǔ)充氨基酸，促進(jìn)其追趕生長(zhǎng)。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)氨基酸、肉堿代謝水平是改善地貧患兒出生后生長(zhǎng)發(fā)育的有利措施。

本研究顯示，佛山市順德區(qū)地中海貧血患兒體內(nèi)氨基酸、肉堿水平與對(duì)照組相比呈現(xiàn)不同的代謝差異，孕期芳香族氨基酸和支鏈氨基酸的補(bǔ)充及生后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)氨基酸代謝水平也許是改善地貧患兒生長(zhǎng)發(fā)育的有利措施。后續(xù)研究將對(duì)不同胎齡體重的地貧患兒生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)與氨基酸和酰基肉堿代謝水平的相關(guān)性進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。