于志海,何書(shū)成,董文軒,石明芝,袁葉鑫,張美星,黃名正,劉曉柱,劉曉輝,龔 勛
(貴州理工學(xué)院 食品藥品制造工程學(xué)院,貴州 貴陽(yáng) 550003)
火龍果是熱帶和亞熱帶的重要水果[1],常見(jiàn)栽培品種為紅皮紅肉火龍果(Hylocereus polyrhizus)、黃皮白肉火龍果(H.megalanthus)和紅皮白肉火龍果(H.undatus)。貴州地處中國(guó)西南部,屬亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候,年平均氣溫14~16 ℃[2],在海拔700 m以下的南盤(pán)江、北盤(pán)江、紅水河流域及海拔低于500 m的赤水河流域均適合火龍果的種植,貴州種植面積比較廣的品種為紅肉火龍果,主要分布在關(guān)嶺、貞豐、羅甸、望謨、鎮(zhèn)寧、冊(cè)亨6縣,總面積超6 666.67 hm2[3]。
火龍果富含甜菜素等功能性物質(zhì),具有抗氧化[4-5]、抗病毒[6]和抗癌活性[7],并且紅肉火龍果提取物可降低雄性大鼠劇烈運(yùn)動(dòng)后的乳酸水平和肌酸激酶活性[8]和增強(qiáng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖與成骨分化[9],改善胃潰瘍[10],降低心血管疾病風(fēng)險(xiǎn),改善個(gè)體的內(nèi)皮功能和動(dòng)脈硬度[11-12]?;瘕埞械奶鸩怂豙10]作為著色劑以及火龍果肉逐漸以更重要的角色加入到人類(lèi)的日常飲食中[11]。火龍果發(fā)酵酒是以火龍果為原料經(jīng)酒精發(fā)酵后釀造成的果酒[13]。風(fēng)味是評(píng)價(jià)果酒品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo),目前,已有火龍果發(fā)酵酒風(fēng)味研究的相關(guān)報(bào)道,程志華等[14]研究了以廣東市售新鮮紅心火龍果為原料釀造的火龍果發(fā)酵酒中的香氣物質(zhì),結(jié)果表明,其香氣物質(zhì)主要為醇類(lèi)和酯類(lèi)物質(zhì),包括乙醇、癸酸乙酯、苯乙醇、正癸酸等;陳爍[15]以貴州紅心火龍果為原料,采用酵母一次發(fā)酵、紅曲二次發(fā)酵的工藝釀造發(fā)酵酒的特征風(fēng)味成分為乙酸乙酯、乙酸異戊酯、乳酸乙酯等;李凱等[16]以越南紅心火龍果為原料釀造的火龍果發(fā)酵酒中的香氣物質(zhì)主要為己酸乙酯、乙酸異戊酯、辛酸乙酯等,不同產(chǎn)地的紅心火龍果所釀造的發(fā)酵酒的主要香氣成分存在較大差異。
為了進(jìn)一步探明產(chǎn)地和采收時(shí)間對(duì)紅肉火龍果發(fā)酵酒品質(zhì)的影響,本實(shí)驗(yàn)室前期利用貴州省3個(gè)產(chǎn)地(關(guān)嶺、羅甸和貞豐)和3個(gè)采收時(shí)間(8月、9月、10月)的紅肉火龍果釀造了發(fā)酵酒,并對(duì)其火龍果酒的基本質(zhì)量進(jìn)行了評(píng)價(jià)[1]。本研究在此基礎(chǔ)上利用智能感官技術(shù)(電子鼻和電子舌)對(duì)不同采收時(shí)間(8月、9月、10月)及貴州產(chǎn)地(關(guān)嶺、羅甸、貞豐)火龍果的發(fā)酵酒氣味及滋味特征進(jìn)行研究,對(duì)其進(jìn)行主成分分析(principal component analysis,PCA),并采用頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜(headspace solidphase microextraction-gas chromatography-mass spectrometer,HSSPME-GC-MS)聯(lián)用儀對(duì)其揮發(fā)性風(fēng)味成分進(jìn)行分析,以期揭示不同產(chǎn)地和采收季節(jié)火龍果釀造發(fā)酵酒的風(fēng)味差異規(guī)律,為貴州省火龍果發(fā)酵酒的品質(zhì)控制提供參考。
火龍果發(fā)酵酒:關(guān)嶺地區(qū)8、9、10月產(chǎn)火龍果釀造酒(編號(hào)為G8、G9、G10)、羅甸地區(qū)8、9、10月產(chǎn)火龍果釀造酒(編號(hào)為L(zhǎng)8、L9、L10)、貞豐地區(qū)8、9、10月產(chǎn)火龍果釀造酒(編號(hào)為Z8、Z9、Z10),貴州理工學(xué)院釀制而成[1];無(wú)水乙醇、無(wú)水硫酸鈉、氯化鈉、氯化鉀(均為分析純):成都金山化學(xué)試劑有限公司;酒石酸(分析純):天津市優(yōu)普化學(xué)試劑有限公司。
DL-5M低速大容量冷凍離心機(jī):湖南平凡科技有限公司;SA402b型電子舌味覺(jué)分析系統(tǒng):日本INSENT公司;PEN3型電子鼻:德國(guó)AIRSENSE公司;FA224型分析天平:上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;HH-4D型數(shù)顯恒溫水浴鍋:常州奧華儀器有限公司;PAL型自動(dòng)頂空固相微萃取裝置(HS-SPME)、TQ8040NX型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)儀:日本島津公司。
1.3.1 電子鼻的測(cè)定
電子鼻是一種仿生嗅覺(jué)技術(shù),可無(wú)損、快速和靈敏地對(duì)樣品中揮發(fā)性氣味信息進(jìn)行全面評(píng)估[12]。取樣品10 mL于電子鼻專(zhuān)用進(jìn)樣瓶中,富集氣體15 min,用電子鼻專(zhuān)用采集與數(shù)據(jù)處理軟件Winmuster 1.6.2進(jìn)行檢測(cè)分析。電子鼻程序設(shè)置為清洗200 s;歸零5 s;準(zhǔn)備5 s;進(jìn)樣測(cè)量100 s,氣體流量為200 mL/min。電子鼻傳感器響應(yīng)的敏感物質(zhì)見(jiàn)表1。
表1 電子鼻傳感器響應(yīng)的敏感物質(zhì)Table 1 Sensitive substances responded by electronic nose sensors
1.3.2 電子舌的測(cè)定
電子舌是一種仿生味覺(jué)分析設(shè)備,能基于人工味覺(jué)傳感器陣列脂膜電勢(shì)的變化,客觀地反映食品滋味的變化[17]。每個(gè)樣品取70 mL,分在兩個(gè)樣品杯中待測(cè)。在室溫環(huán)境下,檢測(cè)樣品的酸味、咸味、苦味、澀味、鮮味、苦味后味、澀味后味和味覺(jué)豐富度8種味覺(jué)響應(yīng)值,每個(gè)樣品重復(fù)檢測(cè)4次,舍棄第1次的測(cè)量值,取后3次測(cè)量值的平均值為最后結(jié)果。電子舌程序設(shè)置為電極清洗1:90 s;電極清洗2:120 s;電極清洗3:120 s;傳感器自檢:30 s,傳感器電信號(hào)輸出值在0±0.5之內(nèi)視為自檢通過(guò),否則重新進(jìn)行自檢,直到自檢通過(guò);樣品測(cè)量:30 s;電極清洗4:3 s;電極清洗5:3 s;后味測(cè)量:30 s。電子舌傳感器的性能見(jiàn)表2。
表2 電子舌傳感器的性能Table 2 Performance of electronic tongue sensors
1.3.3 HS-SPME-GC-MS分析
采用HS-SPME-GC-MS檢測(cè)火龍果發(fā)酵酒的揮發(fā)性風(fēng)味成分。
HS-SPME條件:取8 mL火龍果酒置于20 mL頂空瓶中,同時(shí)加入2.0 g NaCl和2 μL環(huán)己酮(內(nèi)標(biāo)物),用聚四氟乙烯隔墊密封。40 ℃平衡15 min后,保持40 ℃頂空萃取30 min,之后插入GC進(jìn)樣口以不分流模式解吸2 min。
GC-MS條件:InertCap Wax毛細(xì)管柱(60 m×0.25 mm,0.25 μm);升溫程序?yàn)槌跏紲囟?0 ℃保持3 min,以3 ℃/min升至230 ℃,保持2 min;載氣為高純氦氣(He)(≥99.999%),流速為1.88 mL/min;進(jìn)樣口溫度240 ℃。電子電離(electron ionization,EI)源;電子能量70 eV;離子源溫度230 ℃;質(zhì)譜接口溫度250 ℃;質(zhì)量掃描范圍29~500 m/z。
定性定量分析:利用揮發(fā)性成分檢索系統(tǒng)美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院(national institute of standards and technology,NIST)譜庫(kù),選取相似度>90%的化合物進(jìn)行初步定性,并采用線性保留指數(shù)(linear retention index,LRI)進(jìn)一步定性,結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)資料確定火龍果酒中的揮發(fā)性成分。采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)揮發(fā)性成分的含量進(jìn)行相對(duì)定量。目標(biāo)化合物的峰面積與內(nèi)標(biāo)物(環(huán)己酮)的峰面積之比與內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度的乘積即為目標(biāo)化合物的相對(duì)質(zhì)量濃度[11]。其計(jì)算公式如下:
式中:AS為內(nèi)標(biāo)物的峰面積;Ai為目標(biāo)化合物的峰面積;ρs為內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量濃度,μg/L;ρi為目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度,μg/L。
為了明確火龍果發(fā)酵酒樣品揮發(fā)性風(fēng)味化合物的貢獻(xiàn)度,分析了各種火龍果發(fā)酵酒的相對(duì)風(fēng)味活性值(relative odour activity value,ROAV)。相對(duì)風(fēng)味活性值可評(píng)價(jià)特定揮發(fā)性化合物對(duì)酒體的貢獻(xiàn)度,ROAV>1時(shí),該化合物對(duì)酒體香氣有突出貢獻(xiàn),反之ROAV<1表明該化合物對(duì)酒體香氣的貢獻(xiàn)不突出[18]。利用當(dāng)前能查到的閾值計(jì)算了火龍果酒中主要揮發(fā)性風(fēng)味化合物的OAV。
1.3.4 數(shù)據(jù)處理
利用Origin 8.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,GraphPad Prism 9.0作圖。
火龍果發(fā)酵酒的電子鼻傳感器響應(yīng)雷達(dá)圖和主成分分析散點(diǎn)圖見(jiàn)圖1。由圖1a可知,傳感器W1C、W3C、W6S、W5C和W2W對(duì)所有樣品的響應(yīng)值均較低,說(shuō)明樣品中均含有較低含量的芳香成分化合物、氨類(lèi)化合物、氫化物、短鏈烷烴類(lèi)化合物和有機(jī)硫化合物。傳感器W1S、W1W、W3S、W2S、W5S對(duì)所有火龍果發(fā)酵酒的響應(yīng)值較高,尤其在樣品L9中的響應(yīng)值最高,說(shuō)明樣品中的甲基類(lèi)化合物、無(wú)機(jī)硫化合物、長(zhǎng)鏈烷烴、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)、氮氧化合物的含量較高。
圖1 火龍果發(fā)酵酒的電子鼻傳感器響應(yīng)雷達(dá)圖(a)和主成分分析散點(diǎn)圖(b)Fig.1 Electronic nose sensor response radar diagram (a) and principal component analysis scatter diagram (b) of fermented dragon fruit wine
由圖1b可知,主成分(principal component,PC)1和PC2的方差貢獻(xiàn)率分別為76.07%和14.95%,累計(jì)方差貢獻(xiàn)率為91.02%,各個(gè)樣品主要集中在3個(gè)區(qū)域,除了樣品L9以外,樣品G8、L8、Z8,樣品G9、Z9及樣品G10、L10、Z10分別集中在一個(gè)區(qū)域,說(shuō)明在該組樣品中,采收季節(jié)是影響火龍果發(fā)酵酒風(fēng)味特征的關(guān)鍵因素,而產(chǎn)地的影響效力不及采收季節(jié);樣品L9及Z10在橫軸上不能區(qū)分,且二者均位于象限交界處,說(shuō)明二者具有類(lèi)似的風(fēng)味特征,這可能與貞豐和羅甸幾乎位于同一緯度有關(guān)[1]。
不同產(chǎn)地和采收時(shí)間的火龍果發(fā)酵酒電子舌傳感器響應(yīng)雷達(dá)圖見(jiàn)圖2。由圖2a~2c可知,8月份采收火龍果制備的發(fā)酵酒的酸味響應(yīng)值均比9、10月份高,其余滋味的響應(yīng)值均最低。關(guān)嶺地區(qū)9、10月份采收火龍果的發(fā)酵酒滋味響應(yīng)值由高到低為咸味、鮮味、苦味、后味A、后味B、澀味、豐富度、酸味,9月份采收火龍果的發(fā)酵酒各滋味響應(yīng)值均低于10月份樣品,貞豐和羅甸地區(qū)火龍果發(fā)酵酒的滋味響應(yīng)值類(lèi)似于關(guān)嶺地區(qū),但貞豐地區(qū)9、10月份采收火龍果的發(fā)酵酒的滋味響應(yīng)值更接近。結(jié)果表明,同一產(chǎn)地不同采收季節(jié)火龍果的發(fā)酵酒滋味特征存在著明顯差異,說(shuō)明采收季節(jié)對(duì)火龍果酒的風(fēng)味影響較大。為了進(jìn)一步確定導(dǎo)致這種差異的因素,考察不同產(chǎn)地同一采收季節(jié)火龍果發(fā)酵酒的滋味特征,由圖2d~2f可知,不同產(chǎn)地同一采收時(shí)間火龍果發(fā)酵酒的滋味特征幾乎一致,但不同采收時(shí)間火龍果發(fā)酵酒的電子舌傳感器響應(yīng)值卻有著明顯差異,8月份采收火龍果的發(fā)酵酒酸味響應(yīng)值要明顯高于其他兩個(gè)采收月份,而在9、10月份采收火龍果的發(fā)酵酒的咸味、鮮味和苦味響應(yīng)值要明顯高于8月份。
圖2 火龍果發(fā)酵酒的電子舌傳感器響應(yīng)雷達(dá)圖Fig.2 Electronic tongue sensor response radar diagram of fermented dragon fruit wine
結(jié)果表明,影響火龍果發(fā)酵酒滋味特征的環(huán)境因素中,采收時(shí)間要比產(chǎn)地更突出。進(jìn)一步對(duì)不同產(chǎn)地、不同采收時(shí)間的火龍果發(fā)酵酒進(jìn)行主成分分析,結(jié)果見(jiàn)圖3。由圖3可知,不同采收時(shí)間的火龍果發(fā)酵酒在PC1上具有良好的區(qū)分度,同一采收時(shí)間不同產(chǎn)地火龍果發(fā)酵酒在PC2上的區(qū)分度不及采收時(shí)間。
圖3 基于電子舌檢測(cè)結(jié)果火龍果發(fā)酵酒的主成分分析散點(diǎn)圖Fig.3 Principal component analysis scatter diagram of fermented dragon fruit wine samples based on electronic tongue detection results
綜上,采收季節(jié)對(duì)火龍果酒的滋味影響大于產(chǎn)地因素,8月份采收火龍果的發(fā)酵酒酸味值高于其余兩個(gè)月份,而咸味、鮮味和苦味值卻不及9月和10月。
不同火龍果發(fā)酵酒樣品中的揮發(fā)性風(fēng)味成分種類(lèi)和含量見(jiàn)表3。由表3可知,從火龍果發(fā)酵酒樣品中共檢出67種揮發(fā)性化合物,其中,酯類(lèi)35種、醇類(lèi)17種、酸類(lèi)2種、芳香族化合物3種、醛酮類(lèi)化合物3種和其他類(lèi)7種,樣品G8中的揮發(fā)性風(fēng)味成分種類(lèi)最多,為54種,樣品G10中的揮發(fā)性風(fēng)味成分種類(lèi)最少,為39種。對(duì)于同一產(chǎn)地采收火龍果所釀造的發(fā)酵酒,除了貞豐地區(qū)樣品外,關(guān)嶺、羅甸地區(qū)樣品揮發(fā)性風(fēng)味成分的種類(lèi)均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。不同產(chǎn)地同一采收時(shí)間火龍果的發(fā)酵酒樣品中的揮發(fā)性風(fēng)味成分種類(lèi)數(shù)多少排序?yàn)闃悠稧8(54)>L8(49)>Z8(40),樣品G9(53)>Z9(49)>L9(48),樣品L10(44)>Z10(40)>G10(39)。
表3 不同火龍果發(fā)酵酒樣品中的揮發(fā)性風(fēng)味成分種類(lèi)及含量Table 3 Types and contents of volatile flavor compounds in different fermented dragon fruit wine samples
從不同樣品中揮發(fā)性風(fēng)味成分的含量水平來(lái)看,酯類(lèi)物質(zhì)和醇類(lèi)物質(zhì)是所有樣品中揮發(fā)性風(fēng)味成分的主要成分,其中酯類(lèi)物質(zhì)含量為1.24~10.14 mg/L,醇類(lèi)物質(zhì)含量為4.33~10.78 mg/L。在同一種樣品中,這2種揮發(fā)性風(fēng)味成分的含量均分別顯著高于其余各類(lèi)揮發(fā)性物質(zhì)的含量,這與廣東市售新鮮紅心火龍果釀造的發(fā)酵酒主要香氣成分的研究結(jié)果一致[14]。
為了進(jìn)一步明確上述主要揮發(fā)性風(fēng)味成分中對(duì)風(fēng)味的呈現(xiàn)有突出貢獻(xiàn)的物質(zhì),對(duì)這些樣品中的揮發(fā)性風(fēng)味成分進(jìn)行ROAV分析,火龍果發(fā)酵酒樣品的ROAV見(jiàn)表4。由表4可知,9種發(fā)酵酒樣品中ROAV>1的揮發(fā)性風(fēng)味成分共14種,共有揮發(fā)性風(fēng)味成分為4種,分別為乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和(Z)-2,3-丁二醇。樣品G8中ROAV>1的物質(zhì)共10種,含5種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、壬酸乙酯和辛酸異戊酯)、4種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇、芳樟醇、香葉醇和2-十七醇]和1種芳香族化合物(2-甲基萘),其中壬酸乙酯、香葉醇和2-甲基萘為其獨(dú)有。樣品L8中ROAV>1的物質(zhì)共7種,含5種酯類(lèi)物質(zhì)(2-甲基丁酸乙酯、3-甲基丁酸乙酯、乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯和辛酸乙酯)和2種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇和芳樟醇]。樣品Z8中ROAV>1的物質(zhì)共5種,含3種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯和辛酸乙酯)和2種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇和2-庚醇],其中2-庚醇為其獨(dú)有。樣品G9中ROAV>1的物質(zhì)共8種,含5種酯類(lèi)物質(zhì)(2-甲基丁酸乙酯、3-甲基丁酸乙酯、乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯和辛酸乙酯)、3種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇、芳樟醇和2-十七醇]。樣品L9中ROAV>1的物質(zhì)共5種,含4種酯類(lèi)物質(zhì)(3-甲基丁酸乙酯、乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯)和1種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇]。樣品Z9中ROAV>1的物質(zhì)共7種,含5種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯、辛酸異戊酯和月桂酸乙酯)、2種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇和2-十七醇],其中月桂酸乙酯為其獨(dú)有。樣品G10中ROAV>1的物質(zhì)共5種,含3種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯和辛酸乙酯)、2種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇和芳樟醇]。樣品L10中ROAV>1的物質(zhì)共5種,含4種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和辛酸異戊酯)、1種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇]。樣品Z10中ROAV>1的物質(zhì)共5種,含3種酯類(lèi)物質(zhì)(乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯和辛酸乙酯)、2種醇類(lèi)物質(zhì)[(Z)-2,3-丁二醇和芳樟醇]。結(jié)果表明,乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和(Z)-2,3-丁二醇在火龍果發(fā)酵酒中穩(wěn)定存在,是貴州紅肉火龍果發(fā)酵酒的特征香氣成分,不受采收季節(jié)和產(chǎn)地因素的影響。另外10種揮發(fā)性風(fēng)味成分會(huì)受相應(yīng)影響,綜合來(lái)看,關(guān)嶺產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣最馥郁,特別是關(guān)嶺8月份產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣最馥郁,羅甸和貞豐產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣馥郁程度相差不大。
表4 火龍果發(fā)酵酒樣品的相對(duì)氣味活度值Table 4 Relative odour active value of fermented dragon fruit wine samples
本研究利用智能感官技術(shù)(電子鼻和電子舌)及頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HS-SPME-GC-MS)對(duì)貴州產(chǎn)地(關(guān)嶺、羅甸和貞豐)和采收時(shí)間(8月、9月和10月)的火龍果所釀造發(fā)酵酒的揮發(fā)性風(fēng)味成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明,火龍果發(fā)酵酒富含甲基類(lèi)化合物、無(wú)機(jī)硫化合物、長(zhǎng)鏈烷烴、醇類(lèi)和醛酮類(lèi)、氮氧化合物,8月份采收火龍果的發(fā)酵酒酸味響應(yīng)值高于9月和10月。樣品中共檢出67種揮發(fā)性化合物,包括酯類(lèi)35種、醇類(lèi)17種、酸類(lèi)2種、芳香族化合物3種、醛酮類(lèi)3種和其他類(lèi)7種。其中,ROAV>1的揮發(fā)性風(fēng)味成分共14種,貴州產(chǎn)紅肉火龍果發(fā)酵酒的特征香氣成分為乙酸-3-甲基丁酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和(Z)-2,3-丁二醇。關(guān)嶺產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣最馥郁,特別是關(guān)嶺8月份產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣最馥郁,羅甸和貞豐產(chǎn)火龍果發(fā)酵酒的香氣馥郁程度相差不大。采收季節(jié)對(duì)滋味和風(fēng)味的影響大于產(chǎn)地因素,但二者對(duì)貴州紅肉火龍果的特征揮發(fā)性風(fēng)味成分沒(méi)有影響。本研究對(duì)貴州省火龍果發(fā)酵酒的品質(zhì)控制具有參考價(jià)值,同時(shí)對(duì)火龍果發(fā)酵酒行業(yè)的發(fā)展提供了有價(jià)值的參考。