牛東玲,趙格格,馬 佳,胡永強(qiáng),蘇玉兵

(1 寧夏大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,銀川 750021;2 固原市六盤山林業(yè)局,寧夏固原 756000)

寧夏位于中國(guó)西北地區(qū)東部,地處蒙古高原、黃土高原和青藏高原的交匯處,其特殊的地理位置和過(guò)渡性特征,造就了該區(qū)復(fù)雜多樣的生態(tài)系統(tǒng)。如南部六盤山地區(qū)的森林生態(tài)系統(tǒng)及灌叢生態(tài)系統(tǒng),中北部地區(qū)的草原、荒漠及沙地等生態(tài)系統(tǒng)[1],這些生態(tài)系統(tǒng)為地衣型真菌提供了非常多樣的生存條件。有關(guān)寧夏地衣的報(bào)道可追朔到1964年[2],當(dāng)時(shí)僅描述了梅花衣屬(Parmelia)的1個(gè)種,現(xiàn)在隸屬于黃梅屬(Xanthoparmelia)。之后,在1991年,魏江春在《中國(guó)地衣綜覽》一書中,對(duì)之前中國(guó)所有地衣的研究進(jìn)行了整理,收錄了寧夏地衣4屬7個(gè)種[3],均為葉狀地衣,主要附生于樹干或巖石上,對(duì)于具體的采集地點(diǎn)沒(méi)有詳細(xì)的記錄。到了21世紀(jì),涉及寧夏地衣的報(bào)道逐漸增多,在最新出版的《中國(guó)地衣型真菌綜覽》(2020)中[4],收錄了47種分布在寧夏的地衣。根據(jù)筆者對(duì)寧夏賀蘭山東麓地衣資源的調(diào)查,僅賀蘭山東麓荒漠草原區(qū)就有74種地衣型真菌[5],而實(shí)際的物種多樣性要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于這個(gè)數(shù)字。隨著對(duì)標(biāo)本逐步深入的研究,新記錄、新物種還將不斷地被發(fā)現(xiàn)。本研究報(bào)道的3個(gè)種就是近期在對(duì)采自寧夏賀蘭山和六盤山含有蒽醌類化合物的地衣物種進(jìn)行標(biāo)本整理過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的中國(guó)新分布。

1 材料和方法

1.1 材 料

標(biāo)本采集于寧夏賀蘭山和六盤山國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū),存放在寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物標(biāo)本室(NXAC)。

1.2 方 法

經(jīng)典分類學(xué)研究:采用體視顯微鏡(OLYMPUS SZX16)觀察形態(tài)結(jié)構(gòu),利用奧林巴斯數(shù)碼顯微照相系統(tǒng)(OLYMPUS DP 26)進(jìn)行拍照。通過(guò)對(duì)子囊盤徒手切片制作臨時(shí)裝片,置于光學(xué)顯微鏡OLYMPUS BX43F觀察顯微結(jié)構(gòu)并拍照。通過(guò)顯色反應(yīng)(CT) 和薄層層析(TLC) 鑒定次生代謝產(chǎn)物[6]。

分子生物學(xué)研究:DNA提取采用Biospin植物基因組DNA提取試劑盒從干燥的樣本中獲得。rDNA內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS1-2)使用ITS1F[7]和ITS4[8]為引物經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)進(jìn)行擴(kuò)增,PCR混合物(25 μL)由25 μg BSA、1 U Taq DNA聚合酶、dNTP (0.2 mmol/L)、引物(每個(gè)0.5 μmol/L)和PCR緩沖液,用H2O調(diào)節(jié)至25 μL。PCR反應(yīng)程序:96 ℃預(yù)變性2 min,隨后96 ℃變性10 s,52 ℃退火10 s,60 ℃延伸30 s,循環(huán)30次,循環(huán)結(jié)束后60 ℃延伸4 min,4 ℃保存。擴(kuò)增產(chǎn)物純化鑒定后使用ABI3730XL自動(dòng)測(cè)序儀進(jìn)行測(cè)序。根據(jù)雙向測(cè)序結(jié)果,采用Sequencher 4.1.4軟件(Gene Codes, USA)拼接完整序列,并進(jìn)行人工校正,通過(guò)BanKit在線提交序列至NCBI,獲得登錄號(hào)(表1)。

表1 3個(gè)樣品的登錄號(hào)及憑證標(biāo)本信息

2 結(jié)果與討論

2.1 亞洲黃燭衣(新擬)

CandelariaasiaticaD. Liu &J.-S Hur,Mycobiology, 46(4): 308(2018)。常附生于樹干或其他地衣體上(圖1,A),小型葉狀,貼生于基物,直徑0.2～2.0 cm,常在基物上連接成片;裂片背腹性明顯,貼生或直立,上表面亮黃色,下表面白色,具不規(guī)則鋸齒狀邊緣,末級(jí)裂片分枝短,寬約0.1～0.2 mm,裂片頂端可見(jiàn)類似于酵母的出芽體,單一或連續(xù)成串(圖1,B),芽體直徑約0.05 mm;上皮層明顯,10～12.5 μm厚,為假薄壁組織,藻胞層不均勻分布,50～75 μm厚,髓層白色,30～50 μm厚,下皮層白色,不連續(xù),細(xì)胞近等徑,排列緊密,常生有假根,假根單一,0.1～0.3 mm長(zhǎng)(圖1,C、D);未見(jiàn)子囊盤及分生孢子器。

A. 生境; B. 裂片邊緣(示芽體); C. 帶假根的下表面; D. 地衣體橫切面。標(biāo)尺: A～C = 0.5 mm; D = 10 μm。

化學(xué)特性: 皮層K-,含未知色素成分;髓層 K-,KC-,C-,PD-,主要含卡里堿和枕酸。

生境和分布:發(fā)現(xiàn)于寧夏六盤山國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū),附生于海拔 1 859 m的榆樹樹干上。在韓國(guó)[9]和日本[10]有分布。

引證標(biāo)本:中國(guó)寧夏,涇源,六盤山,海拔1 859 m,2017-05-26,牛東玲17-0003。

亞洲黃燭衣(Candelariaasiatica)和同色黃燭衣(C.concolor)在形態(tài)上比較相似,二者均為小型葉狀地衣,但是前者在末級(jí)裂片頂端常溢縮形成芽體,不同于同色黃燭衣形成的粉芽結(jié)構(gòu),其在裂片邊緣常形成多量細(xì)顆粒狀粉芽。根據(jù)相關(guān)報(bào)道[9],亞洲黃燭衣不同于同色黃燭衣的另一個(gè)特征是具有粗糙、粉狀的上表面。但據(jù)筆者觀察,這個(gè)形態(tài)區(qū)別尚需通過(guò)對(duì)更多材料的觀察進(jìn)一步確認(rèn)其分類價(jià)值。

2.2 黃厚膜衣(新擬)

Placolecisloekoesiana(S.Y. Kondr., Farkas, J.J. Woo &Hur) An. C. Yin,Mycobiology, 47(4): 406(2019)。地衣體殼狀,黃棕色至橄欖黃色,地衣體中心網(wǎng)格狀,裂紋明顯;中央裂片較短、窄,常凸起呈半球形,直徑約1 mm,裂片聚集或分散,周圍裂片明顯輻射狀;上皮層的外側(cè)覆有一多糖樣薄層,7.5～12.5 μm厚,上面分布有明顯的孔道(圖2,A);上皮層由假薄壁組織構(gòu)成,厚約30～37.5 μm,外側(cè)2～3層細(xì)胞呈淡黃褐色;藻胞層45～57.5 μm厚,藻細(xì)胞圓球形或橢球形,(8～12) μm×(9～15) μm;髓層亮黃色,115～125 μm厚,無(wú)下皮層(圖2,B);無(wú)裂芽或粉芽;子囊盤側(cè)生,網(wǎng)衣型,黑色,無(wú)柄,半球形或盤面平,直徑0.2～1.0 mm(圖2,B);子實(shí)層無(wú)色,遇I+呈藍(lán)色;側(cè)絲頂端細(xì)胞膨大如頭狀,內(nèi)部形成明顯色素帽(圖2,C);子囊狹棒狀,8孢,孢子單胞,無(wú)色,橢圓形,(5～6) μm×(7～11) μm(圖2,D)。

A. 中央裂片縱切面(示上皮層上方薄層及通道); B. 子囊盤和地衣體 (示黃色的髓); C. 側(cè)絲 (示具有色素帽的頂端細(xì)胞); D. 子囊和子囊孢子; E. 分生孢子; F. 生境。

分生孢子器埋生,梨形,100 μm×125 μm,在上表面僅留1個(gè)黑色出口,分生孢子無(wú)色,桿狀,3～5 μm長(zhǎng)(圖2,E)。

化學(xué)特性:髓層K+紫色,C-,I+藍(lán)色。髓層含有蒽醌類物質(zhì),主要有大黃素,地衣紅素和 fragilin等。

生境與分布:附生于中國(guó)寧夏賀蘭山海拔1 300～2 200 m的巖石表面(圖2,F),在韓國(guó)有分布[11]。

引證標(biāo)本:中國(guó)寧夏,銀川,賀蘭山,海拔2 189 m,2017-07-10,牛東玲 17-0454; 賀蘭山,海拔1 366 m,2010-09-24,牛東玲10-0275;賀蘭山,海拔1 500 m,2014-10-09, 牛東玲19-0002。

該種和Placolecisopaca非常像,但是該種地衣體顏色更黃,裂片則較短狹,同時(shí)髓層為亮黃色。而后者地衣體顏色偏棕色,髓層為赭色,裂片較長(zhǎng)。

2.3 粉橙衣(新擬)(圖3)

A. 生境; B. 粉芽堆。

CaloplacalenaeS?chting &Figueras,Lichenologist, 39(1): 8 (2007)。地衣體石生,殼狀,緊密貼附于基物,土黃色或棕黃色(圖3,A),小團(tuán)塊存在或連接成片,邊緣裂片明顯;中部龜裂狀,龜裂片直徑約1 mm,連續(xù),平展或凸起,表面粗糙,微粉霜;上皮層由假薄壁組織構(gòu)成,菌絲交織,排列致密,約30～100 μm厚,淡黃褐色,藻細(xì)胞穿插于髓層,不連續(xù);龜裂片邊緣或上表面常形成大量的粉芽堆,粉芽堆唇狀或橢圓狀(圖3,B),粉芽亮黃色,近球形,直徑約40～50 μm;未見(jiàn)子囊盤和分生孢子器。

化學(xué)特性:髓層 K+紫紅色,C-。髓層含有蒽醌類物質(zhì),主要有大黃素,石黃酮和fragilin等。

生境與分布:常附生于賀蘭山和六盤山海拔1 700～2 910 m裸露的垂直巖面上。在蒙古共和國(guó)、西伯利亞、雅庫(kù)提亞、阿爾泰共和國(guó)及俄羅斯有分布[12]。

引證標(biāo)本:中國(guó)寧夏,銀川,賀蘭山,海拔2 906 m,2017-07-18,牛東玲17-0657; 固原,六盤山,海拔1 715 m,2022-05-28,牛東玲22052812。

粉橙衣(Caloplacalenae)與C.ehrenbergii在地衣體比較相似,但是前者形成豐富的粉芽堆,后者不形成;并且,前者的分生孢子器較之后者顏色更深一些;分布于阿爾泰共和國(guó)的粉橙衣既有粉芽堆,又有有性繁殖結(jié)構(gòu)子囊盤[12]。國(guó)內(nèi)采集的標(biāo)本僅見(jiàn)粉芽堆,未見(jiàn)到分生孢子器和子囊盤。

致謝：野外調(diào)查得到了歷屆學(xué)生的幫助,在此表示衷心感謝!