彭政忠 張麗艷 潘 梅 盧禮平 楊 桃 唐靖雯*

1.貴州中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽 550025；2.貴州威門藥業(yè)股份有限公司，貴州 貴陽 550018

經(jīng)典名方二冬湯出自于清代程國彭的《醫(yī)學(xué)心悟》，是《古代經(jīng)典名方目錄(第一批)》第80首[1]，是《古代經(jīng)典名方關(guān)鍵信息表(7 首方劑)》第7首[2]，具有潤肺清胃的功效，主治上消。癥見煩渴不止，小便頻數(shù)，脈數(shù)無力等。處方由天冬二錢(去心)，麥冬三錢(去心)，花粉一錢，黃芩一錢，知母一錢，甘草五分，人參五分，荷葉一錢組成。二冬湯在臨床上廣泛應(yīng)用，治療糖尿病具有較好的臨床療效[3]，開發(fā)價值較大。文獻報道經(jīng)典名方二冬湯基本上為臨床應(yīng)用，其次為藥理作用方面，但缺乏對其全方化學(xué)組成[4]、制備工藝、質(zhì)量標準等方面的報道。因此，為了更加深入地開發(fā)經(jīng)典名方二冬湯，全面了解其研究現(xiàn)況，本文通過中國知網(wǎng)論文數(shù)據(jù)庫、中國知識產(chǎn)權(quán)局網(wǎng)站、國家中醫(yī)藥管理局網(wǎng)站，檢索“二冬湯”“二冬膏”“二冬加減方”等關(guān)鍵關(guān)鍵檢索詞，對本方近二十年的文獻進行分析，分析角度包括處方概況、藥味組成及研究，以及制備工藝及質(zhì)量控制、藥理作用、臨床應(yīng)用、專利情況等方面，以期為二冬湯的后續(xù)研究提供參考。二冬湯研究概況思維導(dǎo)圖如圖1所示。

圖1 二冬湯研究概況思維導(dǎo)圖

1 處方概況

二冬湯處方現(xiàn)代折算計量為天冬7.46 g，麥冬11.19 g，天花粉3.73 g，黃芩3.73 g，知母3.73 g，荷葉3.73 g，人參1.87 g，甘草1.87 g；炮制規(guī)格：天冬、麥冬、天花粉等組成處方的8味藥材，炮制品均為生品；用法用量：水煎服[2]。方中麥冬、天冬、天花粉養(yǎng)陰清肺，生津潤燥；黃芩、知母、荷葉清除肺熱；人參、甘草補益肺氣。全方扶正祛邪并用，共奏養(yǎng)陰清熱，生津止渴之效。

2 藥味組成及研究

2.1 天冬 天冬為百合科植物天冬Asparaguscochinchinensis(Lour.)Merr.的干燥塊根[2]。用于肺燥干咳，頓咳痰黏，腰膝酸痛，骨蒸潮熱，內(nèi)熱消渴，熱病津傷，咽干口渴，腸燥便秘[5]。天冬主要成分有氨基酸[6]、多糖[7]、皂苷[8]等。現(xiàn)代研究表明，天冬具有抗氧化、延緩衰老[9-11]、抗腫瘤[12-14]、抑菌抗炎[15-16]、降糖[17-18]、鎮(zhèn)咳及祛痰[19]等藥理作用。

2.2 麥冬 麥冬為百合科植物麥冬Ophiopogonjaponicus(L.f)Ker-Gawl.的干燥塊根[2]。用于肺燥干咳，陰虛癆嗽，喉痹咽痛，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，心煩失眠，腸燥便秘[5]。從麥冬中成功提取、分離出多種活性成分，包括70余種甾體皂苷類化合物，30余種黃酮類化合物，10余種多糖類化合物和多種揮發(fā)油、有機酸類物質(zhì)[20]，其中甾體皂苷是麥冬的主要活性成分，其具有改善心腦血管疾病、抗衰老、抗腫瘤等多種作用[21]。

2.3 天花粉 天花粉為葫蘆科植物栝樓TrichosantheskirilowiiMaxim.或雙邊栝樓TrichosanthesrosthorniiHarms的干燥根[2]。用于熱病煩渴，肺熱燥咳，內(nèi)熱消渴，瘡瘍腫毒[5]。目前從天花粉中分離得到的主要有蛋白質(zhì)、多糖、皂苷、氨基酸等成分[22]，具有抗腫瘤、終止妊娠、降血糖、調(diào)節(jié)免疫等多種藥理活性[23]。

2.4 黃芩 黃芩為唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根[2]。用于濕溫、暑濕，胸悶嘔惡，濕熱痞滿，瀉痢，黃疸，肺熱咳嗽，高熱煩渴，血熱吐衄，癰腫瘡毒，胎動不安[5]。黃酮及其苷類是黃芩的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，目前黃芩中的黃酮及黃酮苷類成分有130余種，常見的化學(xué)成分包含黃芩素、查爾酮及二氫黃酮等[24]，其中黃酮及黃酮醇類有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷、漢黃芩素等[25]；含有多種倍半萜木脂素苷類及二萜類化合物[26]。現(xiàn)代研究證明，黃芩具有抗疲勞[27]、抗菌抗炎[28-30]、抗腫瘤[31-32]、增強免疫功能[33]等藥理作用。

2.5 知母 知母為百合科植物知母AnemarrhenaasphodeloidesBge.的干燥根莖[2]。用于外感熱病，高熱煩渴，肺熱燥咳，骨蒸潮熱，內(nèi)熱消渴，腸燥便秘[5]。知母的化學(xué)成分主要為皂苷類、雙苯吡酮類、生物堿類[34]、氨基酸類[35]、黃酮類[36]、揮發(fā)油類[37]等化合物，具有抗血小板血栓、改善阿爾茨海默癥、抗腫瘤、抗炎、解熱等作用[38]。

2.6 荷葉 荷葉為睡蓮科植物蓮NelumbonuciferaGaertn.的干燥葉[2]。用于暑熱煩渴，暑濕泄瀉，脾虛泄瀉，血熱吐衄，便血崩漏[5]。荷葉化學(xué)成分主要為生物堿[39]、黃酮[40-41]、揮發(fā)油[42]等，具有減肥降脂、抗氧化、抑菌、止痙等多種功效[43]。

2.7 人參 人參為五加科植物人參PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根和根莖[2]。用于體虛欲脫，肢冷脈微，脾虛食少，肺虛喘咳，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，氣血虧虛，久病虛羸，驚悸失眠，陽痿宮冷[5]。人參主要化學(xué)成分有多糖、皂苷、揮發(fā)油、微量元素、有機酸、蛋白質(zhì)等[44]，有抗疲勞、抗衰老、抗氧化和提高免疫力等藥理作用[45]。

2.8 甘草 甘草為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.的干燥根和根莖[2]。用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心悸氣短，咳嗽痰多，脘腹、四肢攣急疼痛，癰腫瘡毒，緩解藥物毒性、烈性[5]。甘草主要化學(xué)成分以三萜皂苷類和黃酮類為主，還有香豆素、生物堿、氨基酸、揮發(fā)性成分和多糖等[46]?，F(xiàn)代藥理研究[47]表明，甘草具有抗氧化、抗癌、抑菌、神經(jīng)保護、調(diào)控血糖血脂以及抗抑郁等生物活性。

3 制備工藝及質(zhì)量控制

二冬湯處方所用藥味均為法定標準收載，無毒性藥材，符合按照“來源于古代經(jīng)典名方的中藥復(fù)方制劑”開展中藥新藥研究的要求，但對其制備工藝及質(zhì)量控制研究相對較少。張國青等[48]以黃芩苷、甘草酸、總皂苷、總多糖、浸膏率、乙醇可溶物、正丁醇可溶物為指標，考察二冬湯顆粒的最佳提取工藝，試驗結(jié)果，最佳提取工藝為各飲片加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2 h；第二次加8倍量水，煎煮1 h。陳以新等[49]采用正交試驗考察藥液濃縮程度、pH 值、殼聚糖用量、絮凝沉降時保溫的溫度對殼聚糖絮凝沉降法精制二冬湯煎煮液的影響，并與乙醇沉淀法進行比較，試驗結(jié)果，殼聚糖絮凝沉降法和乙醇沉淀法可以明顯降低二冬湯煎煮液的浸膏率，但除殼聚糖澄清劑對總多糖的影響較小之外，二者均造成了二冬湯中活性成分的較大損失，故應(yīng)該慎重對待殼聚糖絮凝沉降法。薛曉霞等[50]以指標成分芒果苷、黃芩苷、甘草酸為含量測定指標及以知母皂苷BⅡ、原新薯蕷皂苷與原薯蕷皂苷之和為含量測定指標，分別采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器法(HPLC-DAD)、HPLC-蒸發(fā)光散射檢測器法(ELSD)，探索二冬湯的飲片與基準樣品間指標成分的量值傳遞規(guī)律，試驗結(jié)果，15批飲片與二冬湯基準樣品間各指標成分(甘草酸除外)的轉(zhuǎn)移率一致性較好。程佳慧等[51]通過單因素試驗及正交設(shè)計考察二冬滴丸的制備工藝，試驗結(jié)果，藥物與基質(zhì)配比為1∶4，滴距為15cm，冷凝液的溫度為7℃，所得滴丸圓整度較好，色澤均勻，溶散時限平均為210.8s，丸重差異平均為2.22%，符合《中國藥典》中滴丸劑項下的要求。姜建輝等[52]制備了二冬保健口服液并建立質(zhì)量控制方法。

4 藥理作用

4.1 降糖作用 袁新國等[53]探究二冬湯和有氧運動對2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代謝和脂代謝作用的影響，試驗結(jié)果，與模型組相比較，有氧運動聯(lián)合二冬湯組的大鼠總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血清胰島素(Ins)、谷胱甘肽(GSH)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性顯著升高(P<0.05)，大鼠空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、高密度脂蛋白(HDL-C)和丙二醛(MDA)水平顯著降低(P<0.01)，表明有氧運動與二冬湯結(jié)合可明顯降低T2DM模型大鼠血糖和血脂水平，促進血胰島素的分泌，增強體內(nèi)抗氧化酶活性，從而糾正和改善T2DM模型大鼠糖代謝和脂代謝紊亂。劉哲丞等[54]探究二冬顆粒改善與防治糖尿病脂代謝紊亂的作用機理，試驗結(jié)果，與正常組相比，模型組大鼠血清載脂蛋白AI(ApoAI)含量及胰島素敏感指數(shù)(ISI)均降低，血清載脂蛋白B(ApoB)、空腹血清胰島素(FINS)含量升高，差異均具有顯著性(P<0.05或P<0.01)，給二冬顆粒后均有明顯改善，說明二冬顆?？稍谝欢ǔ潭壬夏芨纳坪头乐翁悄虿≈x紊亂。

4.2 抗癌作用 趙益等[55]研究二冬湯含藥血清對肺癌細胞A549的抑制作用、最佳給藥方案及誘導(dǎo)細胞凋亡，試驗結(jié)果，二冬湯含藥血清對人肺癌細胞A549具有抑制作用，其中中劑量組[7.99 g/(kg·d)]給藥5 d、10 d，末次給藥2 h的含藥血清與細胞培養(yǎng)48 h后的抑制作用最明顯，抑制率分別為42.27%和39.67%，與空白血清組比較，差異均有非常顯著性意義(P<0.01)；FITC/PI雙染法顯示二冬湯含藥血清對A549的凋亡總計為(28.45±0.68)%，與空白血清組(6.75±0.46)%比較，差異有顯著性意義(P<0.01)。

4.3 其他藥理作用 董永強等[56]采用二冬膏對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠肺泡巨噬細胞分泌腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)及水通道蛋白1(AQP1)的影響，結(jié)果表明，二冬膏明顯抑制TNF-α和IL-6 mRNA的水平(P<0.05或P<0.01)，顯著促進AQP1 mRNA的表達(P<0.05或P<0.01)，通過上調(diào)AQP1蛋白的水平(P<0.01)，抑制TLR4/MyD88/NF-κB信號通路，從而抑制炎性因子的表達及釋放，發(fā)揮抗炎作用。趙益等[57]研究二冬湯對大鼠內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的影響，試驗結(jié)果，給藥5 d、10 d后引起變化的生物標記物，與給藥前1 d比較，均有明顯的變化，且給藥5 d 后二冬湯對大鼠尿液中內(nèi)源性物質(zhì)的代謝產(chǎn)生顯著性影響，其中，內(nèi)源性物質(zhì)含量變化上升的有16個，下降的有17個，其生物學(xué)功能可能涉及到提高機體免疫力、促進機體的能量代謝、抗菌、抗病毒、抑制腫瘤細胞轉(zhuǎn)移等。

5 臨床應(yīng)用

5.1 糖尿病前期 糖尿病前期指的是葡萄糖代謝介于正常人與糖尿病之間的一種異常狀態(tài)，可病變轉(zhuǎn)化為糖尿病，該類患者使用二冬湯后，可以顯著降低患者的胰島素抵抗，提高胰島素敏感性，改善胰島功能，從而有效治療糖尿病前期病變[58-59]。胡成玉等[60]運用二冬湯對糖尿病前期胰島素敏感性影響隨機平行對照研究，結(jié)果表明，治療組總有效率95.45%，對照組總有效率60.87%，治療組優(yōu)于對照組(P<0.05)，且治療組胰島素水平與治療前相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，對照組無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

5.2 糖尿病及并發(fā)癥 二冬湯加減方在治療糖尿病(2型糖尿病)及并發(fā)癥方面(甲狀腺功能亢進癥、視網(wǎng)膜病變、便秘、周圍神經(jīng)病變等)有顯著的臨床療效。詳見表1。

表1 二冬湯加減方在糖尿病及并發(fā)癥方面的臨床應(yīng)用歸納表

5.3 甲亢方面應(yīng)用 魏小玲[66]運用二冬湯加減可以調(diào)節(jié)陰虛火旺型甲狀腺功能亢進癥激素水平，而有效治療疾病。傅寶君等[67]運用二冬湯加減配合西藥(丙基硫氧嘧啶)治療老年甲亢，試驗結(jié)果，二冬湯組治療后失眠多夢、食欲不振、口干咽燥、倦怠乏力等癥狀的改善況明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)，臨床效果滿意。

5.4 其他臨床應(yīng)用 采用二冬湯加減方對青年人特發(fā)性室性期前收縮[68-69]、防治鼻咽癌放療患者放射性腦損傷[70]、治療慢性支氣管炎[71-72]、頓咳及百日咳[73-76]、慢性腎病等[77-78]治療具有顯著的臨床療效。

6 專利情況

在中國知識產(chǎn)權(quán)局網(wǎng)站、中國知網(wǎng)作檢索平臺，選擇“摘要”或“主題”作為檢索項，以“二冬”作檢索詞檢索關(guān)于醫(yī)藥方面的國內(nèi)外專利。結(jié)果發(fā)現(xiàn)國內(nèi)申請相關(guān)專利18項(申請國家發(fā)明專利16項，申請外觀設(shè)計專項2項)，其中視為撤回專利8項，授權(quán)專利6項，實質(zhì)審查的生效專利4項，目前國外暫無二冬湯專利的報道。詳見表2，專利情況如圖2所示。

表2 授權(quán)專利情況表

圖2 申請的專利情況圖

7 總結(jié)

目前對二冬湯處方組成的各藥材在化學(xué)成分、藥理作用方面研究較多，但對全方的化學(xué)成分、制備工藝及質(zhì)量控制、藥理作用等方面研究相對較少。本方在降糖、抗炎、抗癌等方面有較好的藥理作用，目前在臨床上多用于糖尿病及并發(fā)癥的治療。因此，對本方開發(fā)具有一定的市場需求。

二冬湯古籍記載為“水煎服”，沒有具體的工藝制法，故在崇經(jīng)尚典的基本原則下，具體問題具體分析，做到“遵古而不泥古”，逐步實現(xiàn)生產(chǎn)的標準化、產(chǎn)業(yè)化、國際化[85]。其中，提取作為中藥制劑生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié)，與中藥的質(zhì)量和療效有著密切的關(guān)系，在以尊重經(jīng)典古方的提取條件下，設(shè)計出合理工藝路線，選擇合適提取技術(shù)，才能提高顆粒劑的品質(zhì)[86]。經(jīng)典名方主要以湯劑的形式使用，大都選擇砂鍋、陶瓷器具煎煮，如需將其開發(fā)成制劑，可采用現(xiàn)代的提取工藝，評價指標包括出膏率、有效(或指標)成分的轉(zhuǎn)移率等[87]，將二冬湯向現(xiàn)代轉(zhuǎn)化，制備成實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的復(fù)方顆粒。

發(fā)揮出經(jīng)典名方的整體觀原則，對“君-臣-佐-使”藥材所對應(yīng)多成分[88]，結(jié)合現(xiàn)代技術(shù)，充分表達出中藥質(zhì)量的整體性、一致性、藥效物質(zhì)的傳遞規(guī)律[85]。對二冬湯如何選擇藥材-飲片-基準樣品-復(fù)方顆粒劑的相關(guān)性指標，建立多指標含量測定、指紋圖譜評價方法，形成工藝制備全過程的質(zhì)量評價體系。

二冬湯全方藥材的主要活性成分集中在皂苷、多糖[48]，但全方化學(xué)成分尚不清楚，可采用高效液相色譜儀(UPLC)、四極桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜儀(Q-TOF-MS)、高效液相色譜儀(HPLC)等現(xiàn)代技術(shù)進一步解析二冬湯的化學(xué)成分，了解其質(zhì)量概貌，建立專屬性較強的有效質(zhì)量控制方法，并探索藥效物質(zhì)基礎(chǔ)-藥理作用-臨床應(yīng)用方面的相關(guān)性，進一步全面、系統(tǒng)、深入研究，為二冬湯產(chǎn)業(yè)化、藥理研究，探索新的適應(yīng)癥提供支撐。