岳 彬

（阜新市細(xì)河區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，遼寧 阜新 123000）

豬丁型冠狀病毒是一種長(zhǎng)源性、高接觸性傳染病，嘔吐、脫水、腹瀉為主要臨床癥狀，對(duì)哺乳期仔豬造成嚴(yán)重威脅。此病易同其他豬病混合感染或繼發(fā)感染其他疾病，嚴(yán)重影響生豬養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)收益?，F(xiàn)對(duì)豬丁型冠狀病毒的病原特征與綜合防止做簡(jiǎn)要介紹，為養(yǎng)殖戶提供該病的防控參考。

1 病原學(xué)特征

豬丁型冠狀病毒為δ 冠狀病毒屬成員之一，是不分節(jié)段的單鏈正股有包膜的RNA病毒，病毒顆粒呈典型的冠狀病毒的球形，半徑60～90納米，囊膜上有凸起的“皇冠”狀結(jié)構(gòu)，其基因組是冠狀病毒中最小的，為25.4～31.7 kb。豬丁型冠狀病毒對(duì)外界溫度比較敏感，在50℃的環(huán)境中1小時(shí)或60℃中半小時(shí)可失活，經(jīng)酸處理后病毒的穩(wěn)定性略有下降，但是對(duì)氯仿不敏感。本病毒在25℃的環(huán)境中，能夠在飼料和原料中生存21天，21天以后病毒存活量略有減少。

豬丁型冠狀病毒的毒株為50余種，全基因的遺傳進(jìn)化關(guān)系為，中國(guó)毒株、韓國(guó)毒株和美國(guó)毒株同屬一個(gè)分支，韓國(guó)毒株同美國(guó)毒株關(guān)系更近，全基因的同源率高達(dá)99.6%；泰國(guó)毒株屬于另一分支。

豬丁型冠狀病毒能夠用豬腎上皮細(xì)胞與豬睪丸細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，一般情況下，對(duì)此病毒進(jìn)行分離培養(yǎng)較難，應(yīng)添加胰腺酶或胰酶等，細(xì)胞病變后表現(xiàn)為呈圓形、匯集，直至脫落。

2 病毒的致病性

豬丁型冠狀病毒能夠引發(fā)腹瀉、嘔吐、嗜睡等癥狀，偶見采食量減少、體表溫度升高的癥狀，與豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉的臨床癥狀難以區(qū)分，應(yīng)借助實(shí)驗(yàn)室診斷加以辨別診斷。有報(bào)道，兩周齡以內(nèi)的仔豬易感染此病毒，通常伴有輕中度腹瀉，病變部位為小腸；隨后腹瀉情況嚴(yán)重、嘔吐，排泄病毒并伴隨較重的萎縮性腸炎，證實(shí)豬丁型冠狀病毒具備一定的腸道致病性。人工感染與自然感染引發(fā)的生豬的臨床表現(xiàn)極為相似。人工感染無菌小豬的腹瀉癥狀較為嚴(yán)重，感染21天后在普通仔豬排泄物中仍可檢測(cè)到病毒。

3 流行特點(diǎn)

2012年此病毒首次在中國(guó)香港被報(bào)道，兩年后在美國(guó)首次在乳豬和母豬糞便中檢測(cè)到此病毒，臨床表現(xiàn)為厭食、脫水、腹瀉，甚至死亡。隨后在韓國(guó)與我國(guó)腹瀉豬的糞便中檢測(cè)到此病毒。有研究證實(shí)豬丁型冠狀病毒為腸道性病原體，不同年齡的生豬均可感染，其臨床癥狀同豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉類似，但是死亡率低于后兩者。目前豬丁型冠狀病毒已在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)廣泛流行，常與豬流行性腹瀉混合感染。

4 臨床癥狀

該病毒能夠感染各個(gè)年齡段的生豬，通過糞-口和被污染的飼養(yǎng)用具等非生物媒介傳染給健康豬只。日齡越小的仔豬臨床表現(xiàn)越顯著。主要癥狀為腹瀉、嘔吐和脫水，同博卡病毒、庫布病毒的癥狀相比較輕，并能引發(fā)肺部炎癥。若5～15日齡的生豬感染此病，發(fā)病較重，迅速蔓延，持續(xù)腹瀉3～4日后，造成脫水衰竭死亡。成年豬染病后癥狀較輕，可耐過自愈，但是其飼料轉(zhuǎn)化率與生長(zhǎng)性能受到嚴(yán)重的影響。

5 病理變化

豬丁型冠狀病毒主要感染空腸與回腸，剖檢可見小腸內(nèi)壁變薄，盲腸與結(jié)腸腫脹，充滿黃色物質(zhì)，小腸與胃內(nèi)可見尚未完全消化的乳凝塊，病情嚴(yán)重者可見胸腔和腹腔出現(xiàn)積水，胸腺萎縮，小腸和腸系膜充血。

6 病毒的檢測(cè)

豬丁型冠狀病毒、豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉引發(fā)的生豬的臨床表現(xiàn)與病理變化比較相似，難以分辨，需要借助實(shí)驗(yàn)室診斷開展鑒別診斷。此病毒的檢測(cè)方法主要有血清學(xué)和病毒學(xué)方法。血清學(xué)檢測(cè)方法包括間接熒光抗體測(cè)定、熒光微球免疫實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、病毒中和試驗(yàn)。病毒學(xué)檢測(cè)方法為電子顯微鏡檢測(cè)病毒顆粒、檢測(cè)或病毒、檢測(cè)病毒核酸和檢測(cè)病毒抗原。

6.1 血清學(xué)檢測(cè)方法

第一，中和試驗(yàn)。將豬丁型冠狀病毒毒株混合連續(xù)倍比稀釋的等量血清，在37℃的環(huán)境下中和1小時(shí)，接種于培養(yǎng)板上的單層豬睪丸細(xì)胞或豬腎細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)，中和效價(jià)等于或大于1∶2即可判定為陽性。此方法靈敏度高，但操作程序復(fù)雜，受到細(xì)胞與技術(shù)水平等條件的限制，臨床應(yīng)用存在一定的困難。

第二，免疫熒光試驗(yàn)。研究人員使用免疫熒光染色試驗(yàn)已在豬丁型冠狀病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)中，進(jìn)行病毒分離。此技術(shù)檢測(cè)效率高、敏感度較高、特異性強(qiáng)，但操作步驟繁瑣，且尚未解決非特異性染色問題。

6.2 病原學(xué)檢測(cè)方法

第一，電子顯微鏡。通過電子顯微鏡能夠觀察到此病毒的形態(tài)。但電鏡敏感度低，且對(duì)病毒顆粒數(shù)量要求較多，且設(shè)備價(jià)格昂貴，需要專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行操作，因而不適合用于臨床常規(guī)檢測(cè)方法。

第二，PCR檢測(cè)法。利用豬睪丸細(xì)胞和豬腎細(xì)胞對(duì)豬丁型冠狀病毒進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)后，通過PCR進(jìn)行鑒定。RT-PCR檢測(cè)法無需分離病毒，其優(yōu)點(diǎn)為靈敏度高、省時(shí)、省力、高效。實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法的優(yōu)勢(shì)為特異性強(qiáng)、敏感度高、定量準(zhǔn)確、檢測(cè)速度快、重復(fù)性佳、全封閉反應(yīng)等。目前商業(yè)化的實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒，可進(jìn)行豬丁型冠狀病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬流行性腹瀉病毒的鑒別檢測(cè)，適合應(yīng)用于此病毒的常規(guī)檢測(cè)。

7 綜合防控

7.1 早發(fā)現(xiàn)早治療

豬丁型冠狀病毒可引發(fā)養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)生豬產(chǎn)生腹瀉，其預(yù)防措施和有針對(duì)性的治療仍處于探索階段，也未研發(fā)出商品化疫苗以控制該病，臨床治療參照豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉的治療方案。此病的防治應(yīng)遵循“早發(fā)現(xiàn)早治療”的原則，在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)開展生物安全防控，發(fā)現(xiàn)染病豬只，立即隔離，阻斷傳播途徑，臨床上通常采用止瀉、補(bǔ)液、防止酸中毒和脫水的措施。對(duì)染病生豬可采用抗生素治療，如恩諾沙星、氟哌酸、磺胺類等藥物、體液電解質(zhì)、吸附劑等藥物，以減少因該病造成的病毒與細(xì)菌繼發(fā)感染而導(dǎo)致仔豬的死亡。此外，對(duì)新生仔豬灌服康復(fù)豬的全血或血清，有一定的防治效果。

7.2 強(qiáng)化飼養(yǎng)管理

應(yīng)強(qiáng)化生豬的飼養(yǎng)管理，建立健全生豬養(yǎng)殖生物安全體系，投喂?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)豐富的全價(jià)飼料，少食多餐，嚴(yán)禁投喂質(zhì)量不佳或霉變飼料，保證豬只機(jī)體健康，提升機(jī)體抗病能力。定期為豬舍及周圍環(huán)境進(jìn)行消毒，保證舍內(nèi)干凈整潔，通風(fēng)良好，及時(shí)清理產(chǎn)房與保育舍的排泄物，定期沖洗飼喂工具等。堅(jiān)持“自繁自養(yǎng)”原則，禁止從發(fā)生過疫病的養(yǎng)殖場(chǎng)引種，減少病原引入概率，引入健康種豬需要進(jìn)行全面健康檢測(cè)，隔離飼養(yǎng)1個(gè)月以上。加強(qiáng)母源抗體，在母豬分娩前3周采用肌注或鼻內(nèi)接種豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉疫苗，使仔豬通過采食初乳獲得被動(dòng)免疫，通過人工固定乳頭幫助仔豬盡早吸吮初乳。

8 結(jié)束語

豬丁型冠狀病毒為養(yǎng)豬場(chǎng)廣泛流行的病毒，其高致病力引發(fā)飼養(yǎng)人員的高度關(guān)注。因此，重視與加強(qiáng)豬丁型冠狀病毒的監(jiān)測(cè)、疫苗與特效治療藥物的研發(fā)以減少此病的傳播與蔓延。