王鑫慈， 李軍喬， 李晨芹， 田甜， 曲俊儒

（青海民族大學(xué)生態(tài)環(huán)境與資源學(xué)院，青藏高原蕨麻產(chǎn)業(yè)研究院，西寧 810007）

蕨麻（Potentilla anserinaL.）屬于薔薇科（Rosacrae）委陵菜屬（Potentilla）多年生匍匐草本植物，為鵝絨委陵菜（Potentilla anserinaL.）的變種。野生蕨麻主要分布于青藏高原地區(qū)，高品質(zhì)資源主要集中于青海省。蕨麻是典型的匍匐莖克隆植物，其匍匐莖和分株在生長(zhǎng)過(guò)程中能夠迅速覆蓋地面，具有優(yōu)秀的氣候適應(yīng)性，且耐寒、耐旱、抗鹽堿能力較強(qiáng)，因此可以蓄水保墑、防風(fēng)固沙，具有一定的生態(tài)價(jià)值[1-2]。此外，蕨麻全草可入藥，具有收斂止血、生津利痰、補(bǔ)血益氣的功效，是藏藥中的主要藥材，有重要的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。近年來(lái)，眾多學(xué)者對(duì)蕨麻的種質(zhì)資源、繁殖栽培技術(shù)、藥用成分等展開(kāi)研究[2-6]；蕨麻的人工栽培規(guī)模也日漸擴(kuò)大，在青海、甘肅等地推廣的3個(gè)審定品種其種植面積已達(dá)10萬(wàn)余畝（0.67萬(wàn)hm2），作為當(dāng)?shù)氐男屡d產(chǎn)業(yè)，帶動(dòng)當(dāng)?shù)剞r(nóng)民脫貧致富。隨著蕨麻的推廣種植和連作年限的增加，近幾年人工種植的蕨麻出現(xiàn)了塊根腐敗及黑斑的癥狀，對(duì)蕨麻的產(chǎn)量及品質(zhì)產(chǎn)生了較大影響[7-8]。造成根腐病的病原有真菌、細(xì)菌及線蟲(chóng)，其中真菌是主要致病菌[9-10]。由真菌侵染感病的植株較健康植株生長(zhǎng)緩慢，莖葉最初會(huì)變黃，然后逐漸枯萎，最后根部腐敗[11-12]。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)蕨麻病害的相關(guān)研究較少，因此明確蕨麻根腐病病原菌的種類及生物學(xué)特性，進(jìn)一步了解該病害的發(fā)病規(guī)律，可為制定蕨麻根腐病綜合防治策略提供有效手段。

本研究以采自中國(guó)青海省西寧市門源回族自治縣蕨麻人工種植基地的感染根腐病的塊根中分離的1株菌株為研究對(duì)象，對(duì)該菌株進(jìn)行生物學(xué)特性研究，主要包括病原菌的分離鑒定及在不同生長(zhǎng)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)條件下研究該菌株的生長(zhǎng)速率及產(chǎn)孢量，以期為今后蕨麻根腐病的監(jiān)測(cè)和治理提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗(yàn)材料

根腐病病原菌株MY-BSX4-1從青海省門源回族自治縣蕨麻人工種植基地蕨麻根腐病發(fā)病部位分離純化獲得?；亟又参锊牧蠟橥坏攸c(diǎn)的健康蕨麻塊根。

1.1.1 供試培養(yǎng)基 供試培養(yǎng)基包括馬鈴薯培養(yǎng)基（potato dextrose agar, PDA）、查氏（Czapek）培養(yǎng)基、pH梯度培養(yǎng)基、蕨麻煎汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基，各培養(yǎng)基的配制如下。

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蒸餾水1000 mL，自然pH，121 ℃高壓滅菌20 min。

查氏培養(yǎng)基：KCl 0.5 g，F(xiàn)e2SO40.01 g，K2HPO41 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，蔗糖30 g，NaNO32 g，瓊脂粉20 g，蒸餾水1000 mL，在此基礎(chǔ)上，用不同碳源替代蔗糖、不同氮源替代硝酸鈉，作為不同營(yíng)養(yǎng)條件處理。其中碳源包括缺碳對(duì)照、葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉、果糖、甘露醇；氮源包括缺氮對(duì)照、甘氨酸、磷酸氫銨、硝酸銨、硫酸銨、蛋白胨、牛肉浸膏。

pH梯度培養(yǎng)基：將配好的PDA液體培養(yǎng)基每50 mL分裝入100 mL錐形瓶，用0.1 mol·L-1的NaOH和HCl調(diào)節(jié)pH分別為3、4、5、6、7、8、9、10、11、12（用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定），然后加入瓊脂粉0.5 g·瓶-1。

蕨麻煎汁培養(yǎng)基：蕨麻塊根200 g，瓊脂20 g，蒸餾水1000 mL，自然pH，121℃高壓滅菌20 min。其中加葡萄糖的蕨麻煎汁培養(yǎng)基添加20 g葡萄糖作為碳源；加硝酸鈉的蕨麻煎汁培養(yǎng)基添加2 g硝酸鈉作為氮源。

LB（Luria-Bertani）培養(yǎng)基：酵母提取物5 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，瓊脂粉20 g，蒸餾水1000 mL，pH 7.0。

1.1.2 供試試劑 Taq DNA Polymerase等擴(kuò)增所用試劑均購(gòu)自TaKaRa公司；PCR Purification Kit購(gòu)自Promega；引物由華大基因合成；DNA提取試劑盒購(gòu)自北京博友順生物技術(shù)有限公司。

1.1.3 供試儀器 PCR儀為Biometra公司生產(chǎn)的Tgradient；測(cè)序儀3730為ABI公司生產(chǎn)；凝膠成像儀由DNR BIO IMAGING SYSTEM以色列DNR成像系統(tǒng)有限公司生產(chǎn)；熒光顯微鏡Nikon EXCLIPSEND為日本Nikon公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 分離與純化 采用組織分離法[13-14]進(jìn)行病原菌的分離純化。首先將患病塊根用自來(lái)水充分沖洗干凈，濾紙吸干；然后切取病健交界處組織塊，用75%乙醇進(jìn)行塊根的表面消毒5 s，無(wú)菌水充分沖洗3次后，置于PDA平板上，25 ℃培養(yǎng)4 d后挑取菌落邊緣菌絲到新PDA平板，重復(fù)純化操作2次；最后將純化后菌株接種于PDA培養(yǎng)基，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 分離物的形態(tài)學(xué)觀察 用直徑5 mm打孔器，從預(yù)培養(yǎng)4 d的菌落邊緣打取菌餅，并接種到PDA平板中央位置，在25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)15 d，觀察病原菌特征，主要觀察菌落的形狀、顏色、菌絲致密度等。首先在載玻片上滴加少量無(wú)菌水，用接種針?lè)謩e在病原菌菌落邊緣和中央挑取少量菌絲，置于載玻片上的無(wú)菌水中，將蓋玻片蓋在無(wú)菌水的位置制成臨時(shí)玻片；然后在生物熒光相差顯微鏡（10×40）下觀察分離物的分子孢子梗、分生孢子形態(tài)，并拍照記錄[15]。

1.2.3 分離物的分子生物學(xué)鑒定 采用CTAB法提取病原菌DNA；然后以提取的DNA作為PCR模板，以真菌通用引物ITS1(5’-TCCGTAGGAACCTGCGG-3’)和ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR程序?yàn)椋?4 ℃ 3 min；94 ℃1 min，55 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min，30個(gè)循環(huán)；72 ℃5 min。PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5 %瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后由北京博友順生物技術(shù)有限公司完成測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在BLAST中進(jìn)行序列比對(duì)，用MEGA軟件中的neighbor joining（NJ）程序構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。

1.2.4 分離物的致病性測(cè)定與再分離 采用孢子液涂抹接種法[16]進(jìn)行致病性測(cè)定。首先用直徑5 mm 打孔器，從預(yù)培養(yǎng)4 d的菌落邊緣打取菌餅，并接種到PDA平板中央位置，在25 ℃恒溫條件下培養(yǎng)7 d后，每個(gè)培養(yǎng)皿添加5 mL無(wú)菌水，利用涂布器使無(wú)菌水充分接觸菌落，并刮取分生孢子，4層無(wú)菌紗布過(guò)濾后獲得孢子懸液；然后利用血球計(jì)數(shù)板測(cè)定其含量，并將孢子懸液稀釋至107個(gè)·mL-1；最后將孢子液均勻涂抹在蕨麻塊根上，重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)接種5個(gè)塊根，保濕并室溫培養(yǎng)，觀察發(fā)病情況。若接種塊根發(fā)病則再分離致病菌，完成柯赫法則驗(yàn)證。

1.2.5 病原菌生物學(xué)特性研究 溫度對(duì)病原菌生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響：用直徑5 mm 打孔器，從預(yù)培養(yǎng)4 d的菌落邊緣打取菌餅，并接種到PDA平板中央位置，分別置于 5、10、15、20、25、28、30、35 ℃溫度條件下，倒置培養(yǎng)，每個(gè)處理3次重復(fù)。分別在培養(yǎng)3、5 d時(shí)用直尺十字交叉法測(cè)量并記錄菌落生長(zhǎng)直徑。培養(yǎng)5 d后用直徑5 mm 打孔器在菌落上打取4個(gè)菌餅，將4個(gè)菌餅置于1.5 mL EP管中，加入1 mL ddH2O充分震蕩，洗下孢子，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法測(cè)定產(chǎn)孢量[17]。

光照對(duì)病原菌生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響：接種方法同上，培養(yǎng)條件分別為24 h光照、12 h光照+12 h黑暗、24 h黑暗，溫度設(shè)定為25 ℃，每個(gè)處理3次重復(fù)。菌落生長(zhǎng)直徑和產(chǎn)孢量的測(cè)定方法同上。

pH對(duì)病原菌生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響：將配制好pH分別為3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0的PDA培養(yǎng)基高壓滅菌。接種方法同上，溫度設(shè)定為25 ℃，每個(gè)處理3次重復(fù)。菌落生長(zhǎng)直徑和產(chǎn)孢量的測(cè)定方法同上。

碳源對(duì)病原菌生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響：以查氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別用等量葡萄糖、乳糖、淀粉、果糖、甘露醇替換基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的蔗糖。接種方法同上，溫度設(shè)定為25 ℃，每個(gè)處理3次重復(fù)。菌落生長(zhǎng)直徑和產(chǎn)孢量的測(cè)定方法同上。

氮源對(duì)病原菌生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響：以查氏培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別用等量甘氨酸、磷酸氫銨、硝酸銨、硫酸銨、蛋白胨、牛肉浸膏替換基礎(chǔ)培養(yǎng)基中的硝酸鉀。接種方法同上，溫度設(shè)定為25 ℃，每個(gè)處理3次重復(fù)。菌落生長(zhǎng)直徑和產(chǎn)孢量的測(cè)定方法同上。

1.3 數(shù)據(jù)分析

利用Origin 2021對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖表制作，用SPSS 24對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間癥狀觀察與病原菌分離

菌株MY-BSX4-1引起的蕨麻根腐病的主要癥狀部位為蕨麻的根部和莖基部。在發(fā)病初期，植株地上莖葉部分枯萎變黃，個(gè)別枝葉萎蔫枯死，病部表面常聚生大量黑色凸起小顆粒，莖基部和根部逐漸變?yōu)楹稚?、腐爛；后期植株莖葉枯萎變黃加重，甚至全株枯死，根部腐爛壞死（圖1）。

2.2 形態(tài)學(xué)鑒定

在門源進(jìn)行田間蕨麻根腐病病害調(diào)查時(shí)，發(fā)現(xiàn)病部后期表面常聚生大量黑色小顆粒（圖2A）。將病原菌在PDA平板上培養(yǎng)，菌落初為白色，質(zhì)地致密，之后菌落中心顏色逐漸加深呈紅棕色，菌落背面外緣白色，中間為橙紅色至紅棕色（圖2B和C）。

圖2 菌株MY-BSX4-1的形態(tài)學(xué)鑒定Fig. 2 Morphological identification of MY-BSX4-1

經(jīng)顯微鏡觀察，可見(jiàn)子囊殼近球形，表面具粗糙疣狀物，直徑117～184 μm（圖2D）；菌絲為無(wú)隔菌絲，直徑4.0～6.0 μm（圖2E）。大型分生孢子呈鐮刀形，中部細(xì)胞寬，頂胞漸尖，兩端較鈍，具2～4 個(gè)分隔，大小為(13.9～28.5) μm×(5.2～8.3) μm（圖2F）。小型分生孢子多為單細(xì)胞，橢圓形，大小為(7.15～12.04) μm×(2.68～3.88) μm（圖2G）。產(chǎn)孢方式為單瓶梗產(chǎn)孢，分生孢子梗樹(shù)枝狀（圖2H）。根據(jù)病原菌的菌落形態(tài)特征、子囊殼及分生孢子的形態(tài)特征，初步鑒定該菌為Thelonectria屬真菌。

2.3 分子生物學(xué)鑒定

采用真菌通用引物ITS1和ITS4進(jìn)行PCR擴(kuò)增，凝膠電泳后，在500 bp處得到1條清晰的條帶（圖3）。將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序其大小為517 bp，利用BLAST對(duì)序列進(jìn)行比對(duì)分析，選取相似性較高的序列，用MEGA構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（圖4），結(jié)合其形態(tài)學(xué)特征，進(jìn)一步確定該病原菌為乳突赤殼屬（Thelonectria olida）。

圖3 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果Fig. 3 Results of PCR amplification products

圖4 菌株MY-BSX4-1的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig. 4 Phylogenetic tree of MY-BSX4-1

2.4 致病性與柯赫氏法則驗(yàn)證

將菌株分別接種于蕨麻離體塊根部和活體蕨麻植株塊根部，并將活體蕨麻植株土培，觀察并記錄發(fā)病情況。結(jié)果（圖5）表明，將菌株MY-BSX4-1接種到離體的蕨麻塊根上，與對(duì)照相比，有傷口和無(wú)傷口的蕨麻塊根均具有發(fā)病癥狀，產(chǎn)生黑色病斑，并長(zhǎng)出白色菌絲，塊根出現(xiàn)腐爛（圖5A～H）。將菌株MY-BSX4-1接種在盆栽蕨麻植株上，接種7～15 d后植株染病，逐漸萎蔫變黃，根部產(chǎn)生黑色斑點(diǎn)，發(fā)病癥狀與田間相似，對(duì)照不發(fā)?。▓D5I～N）。對(duì)離體和活體回接后發(fā)病病樣的病健交界處再次分離，獲得與原接種分離物一致的病原菌。根據(jù)柯赫氏法則可以確定菌株MY-BSX4-1為蕨麻根腐病的致病菌。

圖5 人工接種MY-BSX4-1后蕨麻植株的發(fā)病癥狀Fig. 5 Symptoms of diseased plant after artificial inoculation of MY-BSX4-1

2.5 MY-BSX4-1 的生物學(xué)特性

2.5.1 不同溫度、光照及pH對(duì)MY-BSX4-1生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響 將病原菌在5～35 ℃培養(yǎng)5 d，結(jié)果表明病原菌具有較寬的溫度適應(yīng)范圍。其中，在5～10 ℃溫度范圍內(nèi)菌絲生長(zhǎng)緩慢且未產(chǎn)孢；在10～35 ℃范圍內(nèi)菌絲均可較好生長(zhǎng)，但在35 ℃時(shí)未產(chǎn)孢。25 ℃時(shí)菌絲生長(zhǎng)速率最高，產(chǎn)孢量最大，因此最適生長(zhǎng)和產(chǎn)孢溫度均為25 ℃。5～25 ℃菌絲生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量隨著培養(yǎng)溫度的升高而增大，在25 ℃條件下達(dá)到峰值；當(dāng)溫度高于30 ℃后菌株的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量呈下降趨勢(shì)。

光照對(duì)病原菌有一定影響（圖6B）。3種光照條件下病原菌均可生長(zhǎng)和產(chǎn)孢，其中，在24 h光照條件下病原菌的菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢量顯著高于24 h黑暗。

圖6 不同生物學(xué)特性下MY-BSX4-1菌絲的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢Fig. 6 Mycelium growth and sporulation of MY-BSX4-1 under different biological characteristics

由圖6C可知，病原菌pH適應(yīng)范圍較寬，在pH為4～12時(shí)均可生長(zhǎng)，最適pH為6～9，表明病原菌在中性條件下生長(zhǎng)活躍。pH在5～12時(shí)，菌落直徑差異較小，但pH為3時(shí)，菌落生長(zhǎng)受到明顯抑制。菌株在pH 4～12時(shí)均可產(chǎn)孢，當(dāng)pH為8時(shí)，產(chǎn)孢量達(dá)到峰值。

2.5.2 不同碳源、氮源及培養(yǎng)基對(duì)MY-BSX4-1生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量的影響 在不同碳源的培養(yǎng)基上，病原菌的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量存在顯著差異，其中最適生長(zhǎng)碳源為可溶性淀粉；最適產(chǎn)孢碳源為乳糖（表1）。對(duì)不同碳源培養(yǎng)基進(jìn)行比較，菌株的生長(zhǎng)速率表現(xiàn)為可溶性淀粉＞葡萄糖＞蔗糖＞乳糖＞甘露醇＞缺碳對(duì)照＞果糖；產(chǎn)孢量表現(xiàn)為乳糖＞葡萄糖＞果糖＞淀粉＞缺碳對(duì)照＞蔗糖＞甘露醇。

表1 不同碳源下MY-BSX4-1的菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢Table 1 Growth and sporulation of MY-BSX4-1 mycelium under different carbon source

在不同氮源的培養(yǎng)基上，病原菌的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量差異顯著，其中最適生長(zhǎng)氮源為牛肉浸膏；最適產(chǎn)孢氮源為蛋白胨，而缺氮或以甘氨酸為氮源時(shí)不產(chǎn)孢（表2）。對(duì)不同氮源培養(yǎng)基進(jìn)行比較，生長(zhǎng)速率表現(xiàn)為牛肉浸膏＞蛋白胨＞硫酸銨、缺氮對(duì)照＞甘氨酸＞磷酸氫銨＞硝酸銨；產(chǎn)孢量表現(xiàn)為蛋白胨＞硫酸銨＞牛肉浸膏＞磷酸氫銨＞硝酸銨。

表2 不同氮源下MY-BSX4-1的菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢Table 2 Mycelium growth and sporulation of MY-BSX4-1 under different nitrogen source

由表3可知，在不同供試培養(yǎng)基上，病原菌的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量顯著不同，其中在蕨麻煎汁培養(yǎng)基和含硝酸鈉的蕨麻煎汁培養(yǎng)基上，菌絲的生長(zhǎng)速率和產(chǎn)孢量均顯著優(yōu)于其他培養(yǎng)基，25 ℃下培養(yǎng)5 d，菌落直徑分別可達(dá)6.82和7.00 cm，產(chǎn)孢量分別為0.45×107和0.43×107個(gè)·mL-1。在含葡萄糖的蕨麻煎汁培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)情況較好，但產(chǎn)孢量低于另2種蕨麻煎汁培養(yǎng)基。在LB、PDA和查氏培養(yǎng)基中，菌絲的生長(zhǎng)情況表現(xiàn)為PDA培養(yǎng)基＞查氏培養(yǎng)基＞LB培養(yǎng)基，但這3種培養(yǎng)基對(duì)產(chǎn)孢量無(wú)顯著影響（表3）。

表3 不同培養(yǎng)基下MY-BSX4-1菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢Table 3 Mycelium growth and sporulation of MY-BSX4-1 under different mediums

2.5.3 菌絲致死溫度測(cè)定 MY-BSX4-1的菌絲經(jīng)過(guò)35～45 ℃恒溫水浴10 min處理后，菌絲尚有活性，能夠在PDA培養(yǎng)基上繼續(xù)生長(zhǎng)；當(dāng)恒溫水浴溫度高于50 ℃后，菌絲失活，不能在培養(yǎng)基上繼續(xù)生長(zhǎng)。由此能夠初步確定，MY-BSX4-1菌絲的致死溫度在45～50 ℃之間。在45～50 ℃范圍內(nèi)，以1 ℃為梯度，設(shè)置6個(gè)溫度梯度繼續(xù)恒溫水浴處理，結(jié)果（圖7）顯示，在45～47 ℃菌絲能夠繼續(xù)生長(zhǎng)，高于47 ℃菌絲不能繼續(xù)生長(zhǎng)，因此可以確定MY-BSX4-1菌絲致死溫度為47 ℃（10 min）。

圖7 MY-BSX4-1的菌絲致死溫度Fig. 7 Fatal temperature of MY-BSX4-1 mycelium

3 討論

蕨麻是青藏高原地區(qū)特有的植物，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值與生態(tài)價(jià)值，由于其地域局限性較大，所以栽培面積有限。前人對(duì)蕨麻病害的研究較少，種植者對(duì)其病害的防治也不夠重視。目前對(duì)真菌引起的植物根腐病研究較多，如紫花苜蓿、地黃、黃芪、三七、丹參等物種上已有較多相關(guān)報(bào)道[18-23]。明確病原是研究病害發(fā)生規(guī)律和制定有效防治措施的前提。李晨芹等[24]研究發(fā)現(xiàn)，鐮孢菌（Fusarium perseae）可引起蕨麻根腐病，該病原引起的病害典型癥狀是植株生長(zhǎng)緩慢，且莖葉枯萎變黃，根部腐爛壞死。本實(shí)驗(yàn)室從青海省門源回族自治縣蕨麻人工種植基地蕨麻根腐病發(fā)病部位分離純化獲得1株原菌株MY-BSX4-1，該菌株引發(fā)的病害特征為患病處外表皮會(huì)附著黑色斑點(diǎn)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)黑斑多，根部逐漸腐爛壞死。結(jié)合形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)和致病性驗(yàn)證方法將其鑒定為乳突赤殼屬（Thelonectria olida）病原真菌。人工接種該菌株后，蕨麻發(fā)病癥狀與蕨麻根腐病田間癥狀一致，且該菌株在蕨麻損傷和非損傷情況下均能對(duì)蕨麻塊根致病。據(jù)報(bào)道，乳突赤殼屬真菌主要分布于熱帶、亞熱帶及溫帶地區(qū)，部分種類是植物病原菌，能夠?qū)е轮参餄僛25]。乳突赤殼屬真菌還能夠引起葡萄黑根病、闊葉樹(shù)及灌木的一些病害[26-27]，該病害的高發(fā)期為6-7月。本研究表明，菌株MY-BSX4-1的適宜生長(zhǎng)溫度為25～30 ℃；合理光照更有利于菌絲體生長(zhǎng)，但對(duì)孢子萌發(fā)無(wú)顯著影響；pH 6～9時(shí)有利于菌絲體生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)；該菌株的可利用碳源和氮源也較為廣泛，其中最有利于該菌生長(zhǎng)的碳源為可溶性淀粉和葡萄糖，最適氮源為牛肉浸膏。病原菌生物學(xué)特性的研究為防治藥劑的篩選和田間管理提供了理論依據(jù)。