陳 賽, 倪敏姿, 崔 峰, 陳 杰

(浙江農(nóng)林大學(xué) 林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院 生物農(nóng)藥高效制備技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室，杭州 311300)

干旱脅迫是影響植物生長(zhǎng)、發(fā)育和作物產(chǎn)量的主要非生物脅迫之一[1-2]。據(jù)報(bào)道，僅因干旱造成的作物產(chǎn)量損失就超過所有植物疾病的總和[3]。研究表明，干旱脅迫會(huì)誘導(dǎo)植物產(chǎn)生一系列生理和代謝反應(yīng)，如活性氧 (ROS) 的產(chǎn)生、細(xì)胞損傷增加以及抗氧化酶失活等[4]，從而影響植物的正常生長(zhǎng)發(fā)育。

蠶豆Vicia fabaL.為一年生作物，是西北干旱缺水地區(qū)的重要食用豆類之一，其播種時(shí)間一般在多干旱少雨的10 月初至11 月初[5]，因而其產(chǎn)量和質(zhì)量受到干旱的嚴(yán)重威脅。解決這一問題的主要手段是制定有效的栽培管理辦法，如采用滴灌、噴灌、疏通渠道等。此外，通過分子育種獲得耐旱新品種是減輕作物受干旱脅迫影響的另一途徑，然而育種工作存在耗時(shí)長(zhǎng)、投入大，短期內(nèi)難以見效等諸多問題。當(dāng)前，使用具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)、提高植物抗逆性的微生物制劑來增強(qiáng)植物對(duì)生物和非生物脅迫的耐受性已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的重要措施[6-7]。

施用生物菌肥可以有效提高植物對(duì)極端自然環(huán)境的耐受性，在可持續(xù)農(nóng)業(yè)的發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用[8]。木霉屬Trichodermaspp.根際真菌是一種對(duì)農(nóng)業(yè)和環(huán)境非常重要的真菌，在促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育[9]、誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性[10-11]以及作為真菌病害的生防劑[12]等方面效用顯著。已有研究表明，棘孢木霉T34 能夠緩解干旱對(duì)玉米種子萌發(fā)的影響[13]。此外，接種棘孢木霉GF332 能增加甘蔗對(duì)干旱脅迫的耐受性，減少ROS 對(duì)甘蔗造成的損害[14]。然而，大多數(shù)研究局限于陸生木霉對(duì)作物的影響，關(guān)于海洋木霉作為促生菌在提高作物抗旱性方面的研究鮮有報(bào)道。

TCS007 菌株由本實(shí)驗(yàn)室分離自南極海洋沉積物，鄭柯斌等[15]通過研究確定了該菌株為具有抗逆性能的棘孢木霉T.asperellum，其對(duì)黃瓜和水稻分別具有抗寒和抗鹽作用。本研究通過測(cè)定干旱脅迫下經(jīng)TCS007 孢子懸浮液處理的蠶豆株高、株重、根系活力和根重以及植株葉片中光合色素、總糖和總蛋白含量、抗氧化代謝酶活性和植物激素含量等指標(biāo)，評(píng)估TCS007 對(duì)蠶豆在干旱脅迫下的影響，以期為該菌株開發(fā)成生物菌肥產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與儀器

1.1.1 供試菌株 海洋生境棘孢木霉T.asperellumTCS007 由本實(shí)驗(yàn)室分離自南極海洋沉積物，已對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)馴化和復(fù)合誘變育種并鑒定，菌株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心 (CGMCC)，保藏號(hào)CGMCC No.15677。

1.1.2 供試植物 蠶豆Vicia fabaL.。

1.1.3 試劑與培養(yǎng)基 蒽酮、考馬斯亮藍(lán)-G250、植物吲哚乙酸 (IAA) 和脫落酸(S-誘抗素，ABA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒、植物過氧化物酶 (POD) 、超氧化物歧化酶 (SOD) 和丙二醛 (MDA) 酶聯(lián)免疫分析試劑盒，均購自武漢賽培生物有限公司。馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) 培養(yǎng)基參照文獻(xiàn)方法[16]配制，用于TCS007 菌株的培養(yǎng)。

1.1.4 主要儀器 人工氣候箱 (上海一恒科學(xué)儀器有限公司)；紫外分光光度計(jì)U2801 (日本日立公司)；ME104E1/1000 電子天平 (賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；SW-CJ-2FD 型潔凈工作臺(tái) (蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司)；ZQZY-CF 型振蕩培養(yǎng)箱 (上海知楚儀器有限公司)；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀 (上海賽默飛世爾科技公司)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 TCS007 孢子懸浮液制備 用無菌水清洗培養(yǎng)7 d 的TCS007 PDA 平板，將得到的菌懸液通過2 層無菌紗布過濾，得到孢子懸浮液，用血球計(jì)數(shù)板法測(cè)定其濃度后，再用無菌水稀釋到1 ×1010CFU/mL，備用。

1.2.2 蠶豆苗種植 蠶豆種子在75%的乙醇溶液中浸泡30 min 后，用蒸餾水洗凈，轉(zhuǎn)移至清水中浸泡。待種子發(fā)芽后播種至大盆中。發(fā)芽期結(jié)束(約15 d) 后，選取大小一致的蠶豆苗移栽到塑料花盆中，盆中裝有2/3 的珍珠巖、蛭石及育苗混合培養(yǎng)基質(zhì) (其質(zhì)量比為1 : 1 : 1) 的營(yíng)養(yǎng)土，置于人工氣候室培養(yǎng)，隔天適量補(bǔ)水。氣候室的光照強(qiáng)度設(shè)為200 μmol.m-2.s-1，光周期為12 h (光照)/12 h (黑暗)，溫度為24 ℃ (晝) /21 ℃ (夜)，相對(duì)濕度為70%。

1.2.3 蠶豆苗處理 待蠶豆種子播種15 d 后出芽期結(jié)束時(shí)，選取大小一致的蠶豆苗分為4 組。空白對(duì)照組 (CK) A 和C 用無菌水、處理組B 和D 用1 × 1010CFU/mL 的TCS007 孢子懸浮液對(duì)蠶豆苗進(jìn)行浸根處理。將蠶豆幼苗根系浸泡在無菌水或TCS007 孢子懸浮液中5 min，隨后移栽到盆中，各組浸根用液量均為400 mL。每處理設(shè)置15 盆重復(fù)，共計(jì)60 盆蠶豆幼苗。對(duì)處理組C 和D 的蠶豆苗采取中度干旱處理 (土壤水分含量為土壤最大持水量的30%～40%) 15 d。如圖1 所示。

1.2.4 土壤水分含量保持 參照高靜[17]的方法測(cè)量土壤含水量 (W)。稱量鋁盒，質(zhì)量記為m1，把采集的濕土樣裝入鋁盒中，稱量鋁盒及濕土的總質(zhì)量，記為m2，隨后，將裝有濕土的鋁盒去蓋后置于105 ℃恒溫干燥箱中烘干。約12 h 后取出鋁盒，帶蓋稱量鋁盒及干土的總質(zhì)量，記為m3。按公式 (1) 計(jì)算土壤含水量。每一土樣至少重復(fù)測(cè)量3 次。

正常澆水處理：保持土壤含水量為其最大持水量的70%～80%。中度干旱處理：土壤水分含量為其最大持水量的30%～40%。用稱重法進(jìn)行水分控制，每2 d 補(bǔ)充損失水分以控制土壤水分達(dá)到處理?xiàng)l件。

1.2.5 蠶豆形態(tài)指標(biāo)測(cè)定

株高：采用毫米刻度尺測(cè)定幼苗根基部到生長(zhǎng)點(diǎn)的距離。

株重：將幼苗從花盆中取出，用自來水洗凈(避免傷根)。用紙巾吸去多余水分后稱重。

1.2.6 蠶豆根參數(shù)測(cè)定 參考朱秀云等[18]的方法測(cè)定蠶豆的各項(xiàng)根參數(shù)指標(biāo)：根體積采用排水法測(cè)定；利用清水反復(fù)沖洗根系，再用吸水紙吸干稱量根系鮮重；利用烘箱將蠶豆根系烘干至恒重，再稱量各處理組根系干重；根系活力采用氯化三苯基四氮唑 (TTC) 法測(cè)定。

1.2.7 蠶豆葉片葉綠素含量測(cè)定 處理7 d 后，采用分光光度法[19]測(cè)定各處理組蠶豆葉片中的葉綠素含量，分別根據(jù)公式 (2)～(4) 計(jì)算蠶豆苗中葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素的質(zhì)量濃度，再根據(jù)公

式 (5) 統(tǒng)一將其換算為葉綠素含量。

式中：Ca、Cb分別為葉綠素a、b 的質(zhì)量濃度，mg/L；A為吸光度；CT為總?cè)~綠素質(zhì)量濃度，mg/L；V為提取液總體積，mL；Chl素為葉綠素含量，mg/g。

1.2.8 蠶豆葉片可溶性糖和可溶性蛋白含量測(cè)定

可溶性糖 (soluble sugar, SS) 含量采用蒽酮乙酸乙酯法[20]測(cè)定，可溶性蛋白 (soluble protein, SP)含量采用考馬斯亮藍(lán)法[21]測(cè)定。

1.2.9 蠶豆根、莖和葉中IAA 和ABA 含量測(cè)定

采用植物IAA 和ABA 酶聯(lián)免疫分析試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法[22]分別于干旱處理后1、5、10 和15 d 測(cè)定各處理組蠶豆根、莖和葉中 IAA 和ABA的含量。用純化的IAA 和ABA 抗體包被微孔板制成固相抗體，向包被單抗的微孔中依次加入IAA 和ABA，再與辣根過氧化物酶 (HRP 酶) 標(biāo)記的IAA 和ABA 抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺 (TMB) 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IAA 和ABA 呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 (OD 值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物激素IAA 和ABA的質(zhì)量濃度。

1.2.10 蠶豆根、莖和葉中POD、SOD 活性和MDA

含量測(cè)定 采用植物POD 、SOD 和MDA 酶聯(lián)免疫分析試劑盒，于干旱處理后15 d 分別測(cè)定各處理組蠶豆根、莖和葉中的 POD、SOD 活性和MDA 含量。

1.2.11 蠶豆葉片失水率的測(cè)定 采用離體測(cè)量法[23]測(cè)定。于干旱處理后第10 天，取各處理組的蠶豆葉片 (盡量選取每株同一位置的葉片)，并于葉片摘取后0、20、40、60、80、100、120、140、160、180 和200 min 分別稱量其質(zhì)量。按公式 (6) 計(jì)算失水率 (X)。每處理 3 個(gè)重復(fù)。

式中：m5表示葉片摘取時(shí)的質(zhì)量，g；m6表示離體葉片在某個(gè)離體時(shí)間的質(zhì)量，g。

1.2.12 蠶豆葉片相對(duì)含水量測(cè)定 分別于處理第1、5、10 和15 天取各處理組蠶豆葉片，測(cè)定其鮮重、干重和葉片飽水重，按公式 (7) 計(jì)算相對(duì)含水量 (RWC)。

式中：m1表示葉片鮮重，g；md表示葉片烘干后恒重，g；mt表示葉片飽水重，g。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用Excel 整理數(shù)據(jù)，用SPSS 22.0 軟件制作相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)曲線，用Graphpad prism 9 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析 (ANOVA) 與繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 TCS007 對(duì)蠶豆生長(zhǎng)與形態(tài)指標(biāo)的影響

在非干旱脅迫 (圖2A) 與干旱脅迫 (圖2B) 條件下，用1 × 1010CFU/mL 的TCS007 孢子懸浮液浸根處理15 d 后，蠶豆植株的株高和根系生長(zhǎng)相比用無菌水浸根的處理組均有顯著提高 (圖2)，其在干旱脅迫下株高、株重、根鮮重、根干重、根體積和根系活力分別增加了28.7%、42.9%、34.2%、17.1%、39.6%和61.7%；在非干旱脅迫下株高、株重、根鮮重、根干重、根體積和根系活力分別增加了25.5%、15.8%、22.1%、18.4%、34.9%和27.5% (圖3)。

圖3 不同處理組蠶豆苗株高 (A)、株重 (B)、根鮮重 (C)、根干重 (D)、根體積 (E) 和根系活力 (F)Fig.3 Plant height (A), plant weight (B), root fresh weight (C), root dry weight (D), root volume (E) and root viability (F) of fava bean seedlings with different treatments

2.2 TCS007 對(duì)蠶豆葉片光合色素含量的影響

不同處理組蠶豆葉片的光合色素含量不同。在干旱脅迫條件下，接種TCS007 的蠶豆葉片中葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素的含量較無菌水處理組分別提高了16.0%、42.6%和26.2%。在非干旱脅迫條件下，接種TCS007 的蠶豆葉片中葉綠素b 和總?cè)~綠素的含量，分別提高了15.0% 和8.8%，葉綠素a 的含量無明顯變化 (圖4)。

圖4 不同處理組蠶豆葉片葉綠素a (A)、葉綠素b (B) 和總?cè)~綠素 (C) 含量Fig.4 Chlorophyll a (A), chlorophyll b (B) and total chlorophyll (C) content in fava bean leaves with different treatments

2.3 TCS007 對(duì)蠶豆根、莖和葉中SOD、POD 酶活性和MDA 含量的影響

干旱脅迫下，接種TCS007 能顯著提高蠶豆苗根、莖、葉中SOD、POD 的活性并降低MDA的含量，SOD 在蠶豆苗根、莖和葉中分別提高28.8%、13.3%和8.0%，POD 在蠶豆苗根、莖和葉中分別提高10.8%、22.4%和14.8%，MDA 分別降低37.2%、14.7%和12.1%。干旱脅迫組的SOD、POD 活性和MDA 含量均高于非脅迫組。非干旱脅迫條件下，接種TCS007 對(duì)蠶豆根、莖和葉的SOD、POD 活性和MDA 含量無明顯影響(圖5)。

圖5 各處理組蠶豆根、莖和葉超氧化物歧化酶 (A)、過氧化物酶 (B) 活性和丙二醛 (C) 含量Fig.5 Superoxide dismutase (A), peroxidase (B) activity and malondialdehyde (C) content in fava bean roots,stems and leaves with different treatments

2.4 TCS007 對(duì)蠶豆葉片總糖含量的影響

在干旱脅迫與非脅迫下，蠶豆葉片中總糖的含量在接種TCS007 后1、5、10 和15 d 均顯著提高，且非脅迫組總糖含量均高于脅迫組。在干旱脅迫組中，蠶豆葉片在經(jīng)TCS007 處理后1、5、10、15 d，總糖含量較無菌水處理組分別提高24.6%、42.1%、11.1%和106.0%，相同趨勢(shì)在非干旱脅迫組中亦被觀測(cè)到 (圖6)。

圖6 不同處理天數(shù)各組蠶豆葉片總糖含量變化Fig.6 Total sugar content in fava bean leaves after different days of treatments

2.5 TCS007 對(duì)蠶豆葉片總蛋白含量的影響

在干旱脅迫與非脅迫下，接種TCS007 后第1、5 和10 天，蠶豆苗葉片中總蛋白的含量較無菌水處理組均顯著增加。非脅迫組總蛋白含量在第1、10 和15 天均高于脅迫組，而在處理的第5天，脅迫組蛋白含量高于非脅迫組。在接種TCS007后的第1 天，干旱脅迫與非脅迫組總蛋白含量分別增加了68.8% 和39.4%，第5 天分別增加了67.3% 和31.7%，第10 天分別增加了38.0% 和10.2% (圖7)。

圖7 不同處理天數(shù)各組蠶豆葉片總蛋白含量變化Fig.7 Total protein content in fava bean leaves after different days of treatments

2.6 TCS007 對(duì)蠶豆根、莖和葉中IAA 和ABA含量的影響

無論是在干旱脅迫還是非脅迫下，接種TCS007 在處理初期的第1 和5 天對(duì)蠶豆根中IAA 含量均無明顯影響，而在接種TCS007 后第10 和15 天，蠶豆根中IAA 含量較無菌水處理組分別增加了29.0%、29.9%和20.9%、41.6% (圖8A)。接種TCS007 均顯著增加了蠶豆苗根中ABA 的含量，在接種TCS007 后第5 天，干旱脅迫與非脅迫組的ABA 含量分別增加了21.1%和35.7%，第10 天分別增加了33.2%和31.4%，第15 天分別增加了31.4%和21.0% (圖8B)。

圖8 不同處理天數(shù)各組蠶豆根中IAA (A) 和ABA (B) 含量變化Fig.8 IAA (A) and ABA content (B) in fava bean roots after different days of treatments

在干旱脅迫下，較無菌水處理組，接種TCS007在處理第1 和5 天都顯著增加了蠶豆莖中IAA 的含量，而在處理后第10 和15 天對(duì)莖中IAA 含量影響不顯著。相反，在非脅迫下，接種TCS007在處理后第1 和5 天無明顯影響，而在處理后第10 和15 天顯著增加了蠶豆莖中IAA 的含量。在第1 和5 天，干旱脅迫下接種TCS007 其IAA 含量分別增加了37.3% 和19.7%。第10 和15 天，非脅迫下接種TCS007，其IAA 含量分別增加了38.9%和8.9% (圖9A)。在干旱脅迫與非脅迫條件下，接種TCS007 的蠶豆莖中ABA 的含量較無菌水處理組在第5 天增加了60.6% 和36.9%，第10 天增加了44.9%和34.6%，且非脅迫組ABA含量均高于脅迫組 (圖9B)。

圖9 不同處理天數(shù)各組蠶豆莖中IAA (A) 和ABA (B) 含量變化Fig.9 IAA (A) and ABA (B) content in fava bean stems after different days of treatments

在干旱脅迫下，接種TCS007 在處理后第1、5、10 和15 天蠶豆葉片中IAA 的含量較無菌水處理組分別增加了17.2%、23.8%、15.7%和11.1%；在非脅迫下，接種TCS007 后第10 和15 天蠶豆葉片中IAA 的含量分別增加了35.5% 和29.4%(圖10A)。在干旱脅迫下，接種TCS007 后第1 天對(duì)蠶豆葉片中ABA 含量無明顯影響，而在第5、10 和15 天，ABA 的含量分別增加了78.7%、28.2%和30.9%；在非干旱脅迫下，接種TCS007的蠶豆葉片中ABA 的含量分別增加了25.9%、37.9%和18.9% (圖10B)。

圖10 不同處理天數(shù)各組蠶豆葉片中IAA (A) 和ABA (B) 含量變化Fig.10 IAA (A) and ABA (B) content in fava bean leaves after different days of treatments

2.7 TCS007 對(duì)蠶豆葉片相對(duì)含水量和失水率的影響

在干旱脅迫下，隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)各處理組葉片相對(duì)含水量逐漸降低，但較于無菌水處理組，接種TCS007 的處理組在處理后第1、5、10、15天蠶豆葉片中的相對(duì)含水量分別增加了7.0%、18.9%、11.0%和19.0%；而在非干旱脅迫下，接種TCS007對(duì)蠶豆葉片中的相對(duì)含水量無明顯影響 (圖11A)。

圖11 不同處理組蠶豆葉片相對(duì)含水量(A)和失水率(B) 變化Fig.11 The relative water content (A) and water loss rate (B) in fava bean leaves with different treatments

在干旱脅迫和非脅迫下各處理組的失水率均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加，但較于無菌水處理組，接種TCS007 的處理組的失水率均低于未接種的處理組 (圖11B)。

3 結(jié)論與討論

干旱脅迫是導(dǎo)致植物生理生化變化、影響植物生長(zhǎng)和降低作物產(chǎn)量的主要環(huán)境脅迫因素之一[2]。據(jù)報(bào)道，木霉菌可以在非生物脅迫下提高番茄[24]、小麥[6]、水稻[11,25]和玉米[13,26]的產(chǎn)量和質(zhì)量。本研究結(jié)果表明，在干旱脅迫下，TCS007 處理能顯著提高蠶豆的株高、株重和根重，且處理組蠶豆植株的光合作用能力、葉片總糖和總蛋白含量、抗氧化代謝能力和植物激素的水平均高于對(duì)照組，與前人的研究結(jié)果一致。

葉綠素含量被廣泛用作衡量作物非生物耐受性的重要指標(biāo)[27]。處于干旱脅迫下的植物通常由于葉綠素的快速降解而表現(xiàn)出明顯的黃化[6]，導(dǎo)致植物生長(zhǎng)遲緩。本研究結(jié)果顯示，蠶豆植株中的葉綠素含量在干旱脅迫條件下顯著低于非脅迫條件下，而接種TCS007 的蠶豆植株中葉綠素含量均顯著高于對(duì)照組，由此推測(cè)接種TCS007 可能通過提高蠶豆的光合作用效率而促進(jìn)其生長(zhǎng)。接種TCS007 的植株中總糖和總蛋白含量顯著高于對(duì)照組，這一現(xiàn)象的發(fā)生可能是由于TCS007 促進(jìn)了蠶豆根部對(duì)養(yǎng)分的吸收，且碳水化合物作為滲透保護(hù)劑和信號(hào)分子，可與抗氧化代謝協(xié)同作用而減輕干旱脅迫對(duì)蠶豆所造成的負(fù)面影響[28-29]，因此，蠶豆組織中總糖和總蛋白含量的增加能提高其在干旱脅迫下的耐受性。

干旱脅迫下，在接種TCS007 的蠶豆植株中，葉綠素降解的減少和光合作用效率的增加也可能與抗氧化系統(tǒng)抗性的增加有關(guān)。植物在受到干旱脅迫刺激時(shí)會(huì)產(chǎn)生ROS，而ROS 的過量產(chǎn)生會(huì)導(dǎo)致植物蛋白質(zhì)、核酸等大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損害[30]，并形成具有細(xì)胞毒性的氧化終產(chǎn)物MDA。本研究評(píng)估了蠶豆植株中抗氧化酶SOD、POD 的活性和MDA 含量。接種TCS007 能在干旱脅迫條件下顯著提高蠶豆根、莖和葉中SOD、POD 的活性并降低MDA 的含量。由此推測(cè)蠶豆植株中SOD、POD 活性的增加可以幫助清除ROS 自由基并保護(hù)植物細(xì)胞免受氧化[6]，從而提高蠶豆對(duì)非生物脅迫的抗性。

木霉屬真菌 (Trichodermaspp.) 被認(rèn)為是植物激素合成器，其產(chǎn)生的化合物有助于與植物激素IAA 共同促進(jìn)植物細(xì)胞壁的擴(kuò)張[8]，并能促進(jìn)根和小根的發(fā)育以及對(duì)水和養(yǎng)分的吸收，從而增加植物地上部的干重[10]。木霉菌除了能誘導(dǎo)宿主體內(nèi)激素合成外，它們自己還會(huì)產(chǎn)生少量的植物激素來提高植物的抗逆性。有研究表明，哈茨木霉T115 和綠木霉T49 可以在添加或不添加色氨酸的培養(yǎng)基中產(chǎn)生不同水平的植物激素ABA、IAA、水楊酸 (SA)、赤霉素 (GA1和GA4)[31]。棘孢木霉也能在培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)分泌ABA、IAA 和GA，其對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)有促進(jìn)作用和緩解鹽脅迫的影響[32]。因此，產(chǎn)生ABA 和IAA 的木霉可以促進(jìn)寄主植物的生長(zhǎng)和減輕非生物脅迫的不利影響，本研究結(jié)果表明，無論是在干旱脅迫還是非脅迫下，接種TCS007 都可以在不同時(shí)期顯著增加蠶豆根、莖和葉中IAA 和ABA 的含量。因此，推測(cè)接種TCS007 可以促進(jìn)蠶豆根部對(duì)水分和養(yǎng)分的吸收，從而提高蠶豆的株高和根重。ABA 是一種重要的植物激素，與氣孔開閉運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)有關(guān)，當(dāng)植物葉片中的ABA 達(dá)到一定含量時(shí)，其能調(diào)節(jié)氣孔關(guān)閉，從而調(diào)控葉片的蒸騰速率[30]。蠶豆氣孔導(dǎo)度的變化也可以從蠶豆葉片相對(duì)含水量和失水率的結(jié)果中得到印證。在干旱脅迫下，相較于CK，接種TCS007 在處理過程中均能顯著增加蠶豆葉片的相對(duì)含水量。在干旱脅迫和非脅迫下各處理組的失水速率均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加，但相較于CK，接種TCS007 的處理組的失水速率均低于未接種的處理組。接種TCS007 能增加蠶豆ABA 含量，使之能夠獲得較高的氣體交換效率，減輕干旱脅迫的威脅，從而促進(jìn)蠶豆地下和地上部的發(fā)育。

綜上所述，接種TCS007 能促進(jìn)蠶豆的生長(zhǎng)發(fā)育，顯著增加蠶豆的株高、株重、根重、根體積和根系活力，且接種TCS007 可顯著提高蠶豆的葉綠素含量、葉片總糖、總蛋白含量、水分利用效率、抗氧化酶活性和植物激素水平從而增強(qiáng)蠶豆對(duì)干旱脅迫的耐受性。由此可見，TCS007 具有促進(jìn)蠶豆生長(zhǎng)提高其抗旱性的作用，具有開發(fā)成生物木霉制劑的潛力，而這種作用是否具有普遍性和田間條件下的適用性還有待深入探究，以驗(yàn)證TCS007 在田間對(duì)蠶豆植株等其它作物靶標(biāo)的作用。