余月書，胡靜涵，王鍵鑫，張志國

（上海應用技術大學 生態(tài)工程與技術學院, 上海 201418）

農(nóng)藥、肥料引入農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的目的是為了控制有害生物對植物發(fā)育的影響，提高農(nóng)作物產(chǎn)量與質量，為農(nóng)業(yè)安全生產(chǎn)保駕護航。研究表明，農(nóng)藥與肥料的使用能夠抑制害蟲與病害的發(fā)生，促進作物生長[1-4]，氮肥、鉀肥及磷肥能夠提高植物的抗病性[5-6]。萱草（Hemerocallis fulva）葉枯病是近年來萱草中發(fā)生的一種重要病害，有些品種中其危害率可達70%以上，對萱草的應用推廣產(chǎn)生了極大的影響[7-8]。本試驗以萱草（品種：12029）為供試對象，研究農(nóng)藥與肥料組合處理對萱草葉枯病的控制作用，以期為萱草的生產(chǎn)及在園林綠化上的應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

萱草、復合肥及25%多菌靈粉劑，均由上海應用技術大學生態(tài)技術與工程學院溫室提供。

1.2 試驗設計

1.2.1 萱草種植

試驗于2020年3～6月在上海應用技術大學試驗田內(nèi)進行。3月1日，將苗齡相同、長勢基本一致的萱草植株從試驗田中移出，去除枯葉，以清水洗凈根部泥土。自然晾干后，種植于裝有基質（蛭石∶珍珠巖∶草炭=1∶1∶3）的塑料盆（直徑25 cm，高40 cm）中，每盆2株，放于室外，常規(guī)管理。

1.2.2 試驗方法

萱草培育45 d后，以多菌靈有效成分1 000 mg/kg分別與復合肥0、160、240、320 kg/hm2組合使用處理萱草（分別對應圖表中0、160、240、320處理）。分別于處理后0、7、14、21、28、35、42 d時，鑒定其病情指數(shù)。每種處理選用2盆長勢基本一致的樣本重復3次。以不施肥、噴清水處理的樣本作為對照（CK）。常規(guī)管理。

1.3 病情分級及病情指數(shù)調(diào)查

1.3.1 病情分級

以葉片有無病斑及病斑占葉片面積的百分比為標準，將病情分成0、1、2、3、4共5個級別，其代表值相應為0、1、2、3、4。具體參照余月書等[9]方法。

1.3.2 病情指數(shù)調(diào)查方法

本試驗病情指數(shù)鑒定依據(jù)包括兩個部分：①老葉病情指數(shù)：萱草處理前在同一植株上選定并標記5片葉片（稱為老葉）。分別于處理后0（處理當天）、7、14、21、28、35、42 d時，以這些葉片作為觀察對象，鑒定其病情指數(shù)。②新生葉病情指數(shù)：對萱草進行處理之后7 d起，研究老葉病害發(fā)展情況的同時，研究同一植株上所有新生葉的病情指數(shù)。

1.3.3 病情指數(shù)計算方法

病情指數(shù)以各級病葉數(shù)乘各級代表值，并相加。以此值除以調(diào)查總葉片數(shù)與發(fā)病最重級別代表值之積計算。具體計算方法對照余月書等[9]提出的方法。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)使用Excel與DPS軟件進行處理與顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 多菌靈與復合肥組合處理對萱草葉枯病病情指數(shù)影響的時間效應

2.1.1 多菌靈與復合肥組合處理對萱草老葉病情指數(shù)影響的時間效應

圖1是老葉病情指數(shù)變化 的時間效應。由圖1可知，多菌靈與復合肥組合處理后，萱草老葉病情指數(shù)隨處理后時間的延長而上升，表現(xiàn)出明顯的時間效應。方差分析結果顯示，處理21 d后病情指數(shù)顯著高于處理14 d內(nèi)的病情指數(shù)，表明農(nóng)藥與肥料混合作用對老葉的有效保護期在14 d內(nèi)。

圖1 老葉病情指數(shù)變化的時間效應Fig. 1 The time effect of the change in the disease index of old leaf

2.1.2 多菌靈與復合肥組合處理對萱草新生葉病情指數(shù)影響的時間效應

圖2 是新葉指數(shù)變化的時間效應。由圖2可知，多菌靈與復合肥組合處理后，萱草新生葉病情指數(shù)隨處理后時間延長，同樣表現(xiàn)出上升趨勢，表現(xiàn)出明顯的時間效應。方差分析結果顯示，處理過35、42 d后病情指數(shù)顯著高于處理后28 d內(nèi)的病情指數(shù)，表明農(nóng)藥與肥料混合作用對新生葉的有效保護期在28 d內(nèi)。

圖2 新葉病情指數(shù)變化的時間效應Fig. 2 The time effect of the change in the disease index of new leaf

2.2 多菌靈與復合肥不同組合處理對萱草病情指數(shù)的影響

2.2.1 多菌靈與復合肥不同組合處理對萱草老葉病情指數(shù)的影響

圖3是不同處理對老葉病情指數(shù)的影響結果。方差分析顯示，與對照相比，多菌靈與復合肥各組合處理后，萱草老葉葉枯病病情指數(shù)顯著下降（見圖3）。與對照相比，多菌靈與復合肥0、160、240、320 kg/hm2組合處理萱草后老葉葉枯病病情指數(shù)分別下降27.80%、39.35%、48.96%及37.53%。同時，分析表明與僅以多菌靈（即多菌靈與復合肥0 kg/hm2混合處理）處理相比，多菌靈與復合肥其他水平混合處理能夠降低老葉病情指數(shù)。160、240、320 kg/hm2復合肥與多菌靈復合處理與僅多菌靈處理相比，病情指數(shù)分別下降16.00%、7.01%及13.48%，表明肥藥組合能夠進一步控制葉枯病病情發(fā)展。

圖3 不同處理對老葉病情指數(shù)的影響Fig. 3 The effect of the different treatments on the disease index of the old leaf

表1是同一處理不同時間對萱草老葉病情指數(shù)的影響。由表1可知，僅以多菌靈1 000 mg/kg處理，與處理當天相比，藥后21 d時，萱草老葉病情指數(shù)顯著上升。但是，在多菌靈與復合肥其它組合施用條件下，老葉病情指數(shù)顯著上升的時間明顯推遲。隨著復合肥使用量的上升，老葉病情指數(shù)顯著上升的時間依次推遲到處理后35、35及28 d，表明以復合肥與農(nóng)藥混合施用能夠增強萱草植株對葉枯病的抗性。

表1 同一處理不同時間對萱草老葉病情指數(shù)的影響Tab. 1 The effect of the same treatment on the disease index of the old leaf in the different time

2.2.2 多菌靈與復合肥不同組合處理對萱草新生葉病情指數(shù)的影響

圖4是不同處理對新生葉病情指數(shù)影響結果。方差分析結果表明，多菌靈與復合肥不同水平組合處理間存在顯著差異性（p＜0.01）。由圖4可知，與對照相比，多菌靈與復合肥各水平組合處理后，萱草新生葉病情指數(shù)呈現(xiàn)出下降趨勢。多菌靈與0、240、320 kg/hm2復合肥組合處理后萱草新葉病情指數(shù)分別比對照顯著下降40.07%、53.31%及55.02%。同時，分析表明與僅以多菌靈處理相比，多菌靈與復合肥240 、320 kg/hm2混合施用能夠降低新生葉病情指數(shù)。240 、320 kg/hm2復合肥使用量與多菌靈混合處理與僅多菌靈處理相比，病情指數(shù)分別下降22.09%及24.95%，表明240 、320 kg/hm2復合肥與多菌靈組合能夠進一步控制新生葉病情的發(fā)展。

圖4 不同處理對新生葉病情指數(shù)影響Fig. 4 The effect of the different treatments on the disease index of the new leaf

表2為固定多菌靈，變化復合肥量的處理方式下，不同時間對萱草新生葉病情指數(shù)的影響情況。表2結果表明，僅以多菌靈1 000 mg/kg處理，與處理后7 d相比，藥后28 d時，萱草新生葉葉病情指數(shù)顯著上升。但是，在多菌靈與復合肥160、240 、320 kg/hm2組合施用條件下，新生葉病情指數(shù)顯著上升的時間明顯推遲。隨著復合肥使用量的上升，病情指數(shù)顯著上升的時間依次推遲到處理后35、35 及42 d 。

表2 同一處理不同時間對萱草新生葉病情指數(shù)的影響Tab. 2 Effect of the same treatment on the disease index of the new leaf in the different time

3 結語

研究報道植物病害發(fā)生與溫度、pH及濕度有關，還與肥料相關[10-12]）。本課題組研究表明，氮磷鉀肥的不同配比對萱草葉枯病的病葉率及病情指數(shù)存在顯著影響[9]。本試驗在之前研究的基礎上，運用不同復合肥水平與農(nóng)藥組成不同組合對萱草進行處理，研究萱草葉枯病老葉與新生葉的病情指數(shù)變化情況。結果表明，無論是老葉，還是新生葉，在藥肥組合處理后，隨著處理后時間的延長，葉枯病病情指數(shù)逐步上升，呈現(xiàn)出明顯的時間效應。老葉在處理后21 d，病情指數(shù)顯著高于處理當天；新生葉在處理后35 d，病情指數(shù)顯著高于處理后7 d。這表明，藥肥組合處理對葉枯病控制作用對老葉的有效作用期在21 d內(nèi)，在這期限內(nèi)，藥肥混合處理可有效抑制葉枯病的發(fā)展；對新生葉的保護期在35 d內(nèi)，在這期限內(nèi)，處理可顯著抑制病菌對新生葉的侵染。

不同處理對病情指數(shù)的方差分析結果表明，不同處理間對病情指數(shù)的影響存在顯著差異。與對照相比，各處理能夠顯著降低老葉的病情指數(shù)；多菌靈與0、240、320 kg/hm2復合肥組合處理能夠顯著抑制病菌對新生葉的危害。僅以農(nóng)藥處理，藥后21 d，老葉病情指數(shù)顯著高于處理當天（藥后0 d）；新生葉病情指數(shù)則在處理后28 d顯著高于藥后7 d的調(diào)查結果。而農(nóng)藥與肥料混合處理后，老葉與新生葉病情指數(shù)的顯著上升時間依次向后推遲了7、14 d。因此，根據(jù)試驗結果，生產(chǎn)上對萱草葉枯病的防治建議在葉枯病發(fā)生期以多菌靈1 000 mg/kg與復合肥320 kg/hm2組合處理有利于控制萱草葉枯病危害。同時，肥藥復合處理延長了農(nóng)藥對病害的有效控制時間，這對于農(nóng)藥的減量化使用研究具有重要意義。

本試驗僅研究了藥肥結合對萱草葉枯病病情指數(shù)的影響，對于藥肥結合導致病情指數(shù)產(chǎn)生變化的原因未作深入研究。盡管有研究報道，植物病害發(fā)生與植物抗病性之間存在相關性[13-14]。農(nóng)藥通過阻止病原菌的生命物質合成過程而對病原菌產(chǎn)生抑制作用，或是由于病原菌體內(nèi)蛋白質與農(nóng)藥的親和性下降，從而減輕病害發(fā)生[15]。田間施用肥料不僅有利于植物生長，還可以通過改善土壤微生物數(shù)量及微生物多樣性從而從生態(tài)水平上降低植物病害發(fā)生[16]。從本試驗的研究結果分析，萱草葉枯病病情指數(shù)下降與發(fā)生期延遲，可能是由于肥藥結合產(chǎn)生的復合效應所導致的結果，但究竟是藥肥結合施用改變了萱草體內(nèi)生化物質的含量或阻礙葉枯病菌生命物質合成而誘導植物抗病性上升，還是在藥肥混合作用下，通過改善土壤微生物種群狀況降低葉枯病發(fā)生有待進一步研究證實。