李 燕，馮軍花，趙紅崢，張金艷，滿宏偉

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院，河北 石家莊 050011)

口腔頜面部惡性腫瘤是指口腔、面部、頸部等部位發(fā)生的惡性腫瘤，占全身惡性腫瘤的3%～5%[1]。多數(shù)口腔頜面部惡性腫瘤具有侵蝕性強(qiáng)、生長迅速、易轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)，近年來的發(fā)病和死亡病例不斷增加，已成為公共衛(wèi)生領(lǐng)域重視的問題。

人血清半胱氨酸蛋白酶抑制劑S(cysteine protease inhibitor S，CST4)是一種由141 個(gè)氨基酸組成的分泌蛋白，屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族(cystatins，CSTs)。CST4 主要存在于腮腺和其他腺體中，并特異性與半胱氨酸蛋白酶結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)的水解[2]，其通過蛋白水解機(jī)制參與癌癥的發(fā)展和進(jìn)展[3-4]。有研究表明CST4 通過降解細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白質(zhì)以及通過處理各種生長因子和細(xì)胞因子重塑腫瘤微環(huán)境并促進(jìn)腫瘤生長、侵襲、血管生成和轉(zhuǎn)移[5-8]。已有研究表明，血清中CST4 含量對胃癌、結(jié)腸癌等具有一定的診斷和預(yù)后判斷價(jià)值[9]，而血清中鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC)、糖類抗原19-9(carbohydrate antigen，CA19-9)、細(xì)胞角蛋白19 片段(cytokeratin 19 fragment，CYFRA21-1)含量對肺癌、肝癌等具有一定的診斷和預(yù)后判斷價(jià)值[10-11]。關(guān)于上述腫瘤標(biāo)志物在口腔頜面部惡性腫瘤方面的研究鮮見報(bào)道。因此，本研究以口腔頜面部惡性腫瘤患者、口腔頜面部良性腫瘤患者及健康體檢者為研究對象，分析初診時(shí)CST4、SCC、CA19-9 及CYFRA21-1表達(dá)水平，驗(yàn)證其在口腔頜面部惡性腫瘤中的診斷價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2022年1—11月就診于河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院的232 例口腔頜面部惡性腫瘤患者、49 例口腔頜面部良性腫瘤患者及同時(shí)期的40例健康體檢者為研究對象。

1.2 分組設(shè)計(jì)

病例納入標(biāo)準(zhǔn)為：①良、惡性口腔頜面部腫瘤均經(jīng)病理確診，診斷結(jié)果符合中國臨床腫瘤學(xué)會(huì)(CSCO)頭頸部腫瘤診療指南(2021 版)；②良、惡性口腔頜面部腫瘤患者均為初次診斷，之前未接受手術(shù)、放化療及其他治療；③無其他器官疾病或功能障礙；④患者各項(xiàng)臨床資料完整。健康體檢者體檢及血清腫瘤標(biāo)志物等均未見異常。排除標(biāo)準(zhǔn)為：①入院前接受過手術(shù)或放療、化療等其他抗腫瘤治療；②患有其他惡性腫瘤者；③孕婦及哺乳期患者；④黃疸、溶血、乳糜血的樣本。

以口腔頜面部惡性腫瘤為試驗(yàn)組，將口腔頜面部良性腫瘤和健康人群作為對照組進(jìn)行比較。收集研究對象外周血標(biāo)本檢測結(jié)果，用于分析CST4、SCC、CA19-9、CYFRA21-1 對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷價(jià)值。

1.3 實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)及臨床病例資料的收集

本研究是回顧性、對照研究，通過河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院電子病例系統(tǒng)收集病例資料并記錄各組樣本的年齡、性別、發(fā)病部位、病理類型和CST4、SCC、CA19-9、CYFRA21-1 的濃度水平等資料。SCC、CA19-9、CYFRA21-1 采用電化學(xué)發(fā)光檢測，CST4 采用酶聯(lián)免疫吸附測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料不符合正態(tài)分布，采用中位數(shù)(M)[四分位數(shù)]表示，兩組間比較采用Wilcoxon 秩和檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗(yàn)。繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線評價(jià)不同腫瘤標(biāo)志物對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷效能。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料

本研究共納入232 例口腔頜面部惡性腫瘤患者，其中男138 例，女94 例，年齡45～78 歲，平均(58.9±14.5)歲；49 例口腔頜面部良性腫瘤患者，其中男22例，女27 例，年齡46～80 歲，平均(52.6±16.7)歲；以及同時(shí)期的健康體檢者40 例為對照組，其中男21例，女19 例，年齡36～71 歲，平均(53.1±15.4)歲。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，3 組人群在年齡、性別方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

2.2 血清中CST4、SCC、CA19-9 和CYFRA21-1的表達(dá)水平比較

各組CST4、SCC 和CYFRA21-1 檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，進(jìn)而兩兩比較，口腔頜面部惡性腫瘤組CST4、SCC 和CYFRA21-1 的中位值均明顯高于口腔頜面部良性腫瘤組和健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，3 組人群CA19-9 中位數(shù)無明顯差異(P＞0.05)，見表1。

表1 各組患者血清CST4、SCC、CYFRA21-1和CA19-9濃度的比較[M(P25，P75)]

2.3 不同部位和不同病理類型口腔頜面部惡性腫瘤中CST4的表達(dá)水平比較

多個(gè)獨(dú)立樣本非參數(shù)Kruskal-WallisH檢驗(yàn)結(jié)果顯示，舌癌、牙齦癌、口底癌、頰癌、唇癌、腮腺癌患者血清CST4 的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；鱗癌、腺樣囊性癌、未分化癌、淋巴上皮癌、涎腺導(dǎo)管癌患者血清CST4 的表達(dá)水平差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 CST4在不同部位和不同病理類型惡性腫瘤患者血清中的濃度比較[M(P25，P75)]

2.4 CST4、SCC 及CYFRA21-1 對口腔頜面部惡性腫瘤的ROC曲線分析

根據(jù)口腔頜面部惡性腫瘤組血清CST4、SCC、CYFRA21-1 的表達(dá)水平繪制ROC 曲線，分析其對口腔頜面部惡性腫瘤的預(yù)測價(jià)值。結(jié)果顯示，CST4 的ROC曲線下面積最大，提示該指標(biāo)對口腔頜面部惡性腫瘤臨床診斷的預(yù)測比其他指標(biāo)更為準(zhǔn)確。且CST4、SCC和CYFRA21-1聯(lián)合檢測對口腔頜面部惡性腫瘤的臨床診斷效能更高，特異性更好(AUC=0.962，敏感度為97.5%，特異度為82.76%)，見圖1和表3。

圖1 CST4、SCC、CYFRA21-1及其聯(lián)合檢測預(yù)測口腔頜面部惡性腫瘤患者的ROC曲線

表3 CST4、SCC、CYFRA21-1及三者聯(lián)合檢測對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷價(jià)值

3 討論

頭頸部腫瘤是人類常見腫瘤之一，其中大部分發(fā)生于口腔頜面部，即口腔頜面部腫瘤。全球每年新發(fā)病例約為35.5 萬例，死亡約為17.7 萬例[12]。目前口腔頜面部惡性腫瘤組的治療主要采取以手術(shù)切除為主的治療措施，然而術(shù)后易復(fù)發(fā)影響了患者的生活質(zhì)量。有研究表明早期口腔頜面部惡性腫瘤患者的5年生存率高達(dá)80%以上，而晚期惡性患者3年生存率僅在50%左右[13-14]。因此尋找一個(gè)有效的腫瘤標(biāo)志物對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷具有重要的臨床價(jià)值。

本研究回顧性分析了232 例口腔頜面部惡性腫瘤初診時(shí)血清腫瘤標(biāo)志物檢測指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)血清CST4、SCC 和CYFRA21-1 水平相對較高。3 組對象人群CST4、SCC 和CYFRA21-1 檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，進(jìn)而兩兩比較，口腔頜面部惡性腫瘤組CST4、SCC 和CYFRA21-1 的中位值均明顯高于口腔頜面部良性腫瘤組和健康對照組。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)進(jìn)行性的過程，CST4在腫瘤的良、惡性階段表現(xiàn)出不同的水平，可能成為用于區(qū)分不同階段口腔頜面部腫瘤的參考，預(yù)示CST4 可能作為診斷口腔頜面部惡性腫瘤的生物分子標(biāo)志物。

CST4作為胱抑素超家族的一員，在唾液、腮腺和其他腺體中大量存在，通過與半胱氨酸蛋白酶相結(jié)合，抑制蛋白酶發(fā)生水解反應(yīng)[15]，當(dāng)這種平衡被打破，唾液、腮腺等其他腺體組織中半胱氨酸蛋白水解酶高表達(dá)，可以促進(jìn)細(xì)胞膜基質(zhì)的破壞及滲透，侵入周圍組織并發(fā)生轉(zhuǎn)移[16]。本研究血清CST4在口腔頜面部惡性腫瘤患者中高表達(dá)，可能促進(jìn)了上述過程的發(fā)生。已有研究顯示，CST4在胃癌細(xì)胞中的異位表達(dá)能夠促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，通過調(diào)節(jié)ELFN2 信號(hào)傳導(dǎo)通路增強(qiáng)胃癌的侵襲性[17]。Yoneda等[18]發(fā)現(xiàn)，與正常樣本相比，胱抑素SN(CST1)在結(jié)直腸癌組織中基因表達(dá)顯著上調(diào)，并提出了將CST1、CEA 及CA19-9 聯(lián)合起來進(jìn)行檢測的更靈敏的酶聯(lián)免疫吸附測定系統(tǒng)。

對口腔癌患者的血液、唾液腫瘤標(biāo)志物研究也有很多，但敏感性和準(zhǔn)確性不高。本研究中SCC 和CYFRA21-1的中位值均明顯高于口腔頜面部良性腫瘤組和健康對照組，可能成為預(yù)測口腔頜面部惡性腫瘤的重要指標(biāo)。CY211主要表達(dá)于上皮細(xì)胞，可用于鼻咽癌的分期和預(yù)后分析[19]。SCC是鱗狀細(xì)胞癌的特異性標(biāo)志物，是宮頸鱗狀細(xì)胞癌的獨(dú)立預(yù)后因素[20]，也與口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)密切相關(guān)[21]，OSCC 是口腔最常見的上皮源性惡性腫瘤。CYFRA21l是口腔鱗狀細(xì)胞癌的有效腫瘤標(biāo)志物，聯(lián)合檢測CYFRA21l 及鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原SCC 對于判斷腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移具有重要的臨床意義[22]。

為進(jìn)一步研究CST4、SCC 和CYFRA21-1 對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷價(jià)值，通過ROC曲線分析各個(gè)標(biāo)志物的診斷效能。當(dāng)3項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測時(shí)，CST4診斷效能最佳(AUC=0.9541，敏感度為97.5%，特異度為78.45%，截?cái)嘀禐?4.68 ng/mL)。當(dāng)3 項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測時(shí)，診斷效能略高于CST4 單獨(dú)檢測(AUC=0.9617，敏感度為97.5%，特異度為82.76%)，結(jié)果顯示CST4在口腔頜面部惡性腫瘤診斷方面具有一定的臨床應(yīng)用潛力，但3 項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測對口腔頜面部惡性腫瘤的診斷效能更高，且特異性更好。

另外，本研究沒有足夠的血清樣本用于確定傳統(tǒng)血液生物標(biāo)記物SCC、CYFRA21-1 與CST4 之間的臨床檢測是否存在顯著差異。CST4的臨床試驗(yàn)應(yīng)在更大的臨床樣本隊(duì)列(以及SCC 和CYFRA21-1 等的比較研究)上進(jìn)行，以驗(yàn)證其在口腔頜面部惡性腫瘤中的診斷意義。但是我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CST4 在口腔頜面部惡性腫瘤顯示出較高的靈敏性及特異性，為今后進(jìn)一步研究CST4與口腔頜面部惡性腫瘤的關(guān)系提供了一定的理論依據(jù)。