潘玉平，鄧瑞雪，胡小慧，賈懷杰，安芳蘭，劉學榮

（1.中農威特生物科技股份有限公司，甘肅 蘭州 730046；2.中國農業(yè)科學院 蘭州獸醫(yī)研究所，甘肅 蘭州 730046）

牛結節(jié)性皮膚?。↙umpy skin disease，LSD）按病程可分為急性、亞急性和慢性3類，是由痘病毒科的牛結節(jié)性皮膚病病毒（Lumpy skin disease virus，LSDV）感染引起、發(fā)生在牛身上的傳染性疾病，可由蟲媒傳播。主要臨床癥狀有皮膚水腫、發(fā)熱、淋巴腫大、表皮和黏膜以及內臟器官表面出現(xiàn)結節(jié)。該病可損傷動物的皮膚，導致病畜發(fā)育遲緩、公畜不育及孕畜流產(chǎn)等，造成重大經(jīng)濟損失，是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）法定報告的動物疫病，農業(yè)農村部暫時將其列為二類疫病進行防控，在我國屬于外來疫病，是進境動物檢疫的一類傳染病。

目前，沒有特效藥物可以治療牛結節(jié)性皮膚病，接種疫苗是預防該病最有效的方法，然而對于牛結節(jié)性皮膚病疫苗的使用并不完善。本文主要概述了牛結節(jié)性皮膚病的流行趨勢和防控，介紹了當前疫苗的研究情況。

1 牛結節(jié)性皮膚病流行概況

1929年牛結節(jié)性皮膚病首次在贊比亞出現(xiàn)，之后在非洲地區(qū)呈現(xiàn)地方流行性。1943—1945年，南非出現(xiàn)牛結節(jié)性皮膚病，該病被確定為傳染性疾病。1989年牛結節(jié)性皮膚病首次傳出非洲大陸，2006年在埃及暴發(fā)，導致近30萬頭牛發(fā)病，政府采用羊痘弱毒疫苗進行免疫接種后，疫情才逐漸得到控制。2012年黎巴嫩和土耳其報告了牛結節(jié)性皮膚病疫情，2013年傳播進入多個亞歐交界國家，在歐洲地區(qū)流行擴散。2015年該病首次在希臘和俄羅斯暴發(fā)。2017年OIE通報牛結節(jié)性皮膚病發(fā)病次數(shù)2 464次，嚴重危害養(yǎng)牛業(yè)。2019年牛結節(jié)性皮膚病在印度、孟加拉國和中國暴發(fā)。2020年，我國臺灣和香港暴發(fā)了牛結節(jié)性皮膚病疫情。2017—2021年，OIE報告全球共有57個國家發(fā)生了牛結節(jié)性皮膚病疫情，新增首次發(fā)病國家13個。2020—2022年，全球共有39個國家/地區(qū)通報發(fā)生疫情，亞洲新發(fā)病國家數(shù)量持續(xù)增加[1]。2019年我國新疆伊犁地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)牛結節(jié)性皮膚病，疫情迅速傳播和擴散，給我國養(yǎng)牛業(yè)帶來巨大損失[1]。

2 牛結節(jié)性皮膚病的防控

牛結節(jié)性皮膚病主要通過接觸傳播[2]。養(yǎng)殖場群體之間及運輸過程中的接觸是直接接觸。因此，對確診病例應及時進行撲殺并無害化處理，同時監(jiān)測同群牛的健康狀況，對養(yǎng)殖場所及周圍環(huán)境進行消毒，限制同群牛的移動，禁止疫區(qū)活牛調出，防止疫情擴散。同時，加強入境檢疫，禁止從有疫情的國家引進活牛及肉制品和皮毛等動物產(chǎn)品。此外，做好疫情監(jiān)測和緊急免疫接種工作，以防健康牛群受到感染。間接接觸是通過媒介物傳播，包括無生命的媒介物，如病畜的場所及周圍環(huán)境、用具及動物產(chǎn)品等[3]，有生命的媒介物主要指如蠅類、蚊類、蜱類等。因此，做好感染動物的無害化處理和媒介昆蟲的流調監(jiān)測工作是防控牛結節(jié)性皮膚病的有效措施。

3 牛結節(jié)性皮膚病疫苗研究進展

目前，治療牛結節(jié)性皮膚病沒有特效藥，也沒有滅活疫苗，預防該病主要使用羊痘疫苗[4]。由于山羊痘病毒的交叉保護性，其減毒活疫苗也可用于防控綿羊痘、山羊痘和牛結節(jié)性皮膚病，農業(yè)農村部規(guī)定可用5倍劑量的山羊痘疫苗進行緊急免疫接種。牛結節(jié)性皮膚病病毒基因組較大，編碼基因較多，目前沒有發(fā)現(xiàn)基因缺失疫苗和亞單位疫苗有良好的保護效果[5]。研究人員嘗試將LSDV作為一種載體，研究重組活載體疫苗，但目前沒有取得好的進展[6]。滅活疫苗的研究取得了一定成果，但安全性和免疫性仍需進一步臨床試驗。

LSDV與綿羊痘病毒（SPPV）和山羊痘病毒（GTPV）同屬于痘病毒屬（CaPV），其基因組相似性約為97%[7]。因此，許多國家對牛結節(jié)性皮膚病的防控主要使用羊痘疫苗。目前已有疫苗減毒株包括南非Neethling毒株（LSDV）、肯尼亞綿羊和山羊KSGP O-180和KSGP O-240毒株（LSDV）、Mysore和Gorgan毒株（GTPV）、羅馬尼亞毒株（SPPV）、南斯拉夫RM-65毒株（SPPV）等，它們都是通過細胞或動物傳代將自然分離的毒株致弱而形成的分離株[8]。

弱毒活疫苗存在生物安全隱患，長期使用可以通過與強毒株重組而重新獲得毒力，將增加該病在非流行地區(qū)傳播的風險。此外，動物在發(fā)病或潛伏期內接種活毒疫苗株風險更大。如果該疫苗株與田間野毒株在動物體內發(fā)生重組，可恢復毒力或產(chǎn)生毒力更強的新毒株[9]。

3.1 弱毒活疫苗Neethling株

在動物細胞和雞胚尿囊膜中，LSDV野毒株連續(xù)傳代形成弱毒活疫苗Neethling株，其安全有效性在牛體內得到驗證，該疫苗株被廣泛使用。多年來，許多公司生產(chǎn)了多種不同的Neethling株疫苗制品，這些疫苗株制品的免疫有效性已經(jīng)被廣泛評估。如塞爾維亞出現(xiàn)牛結節(jié)性皮膚病疫情，接種Neethling疫苗取得了很好的防控效果[10]。巴爾干地區(qū)6個國家評估該疫苗的免疫有效性（vaccinee effeciveness，VE），其平均VE為79.8%，VE最低的是阿爾亞（62.5%），VE最高的是保加利亞和塞爾維亞（大于97%）[11]。近年來，在非洲和中東地區(qū)，Neethling疫苗株的使用率較高。但該疫苗株的缺陷也被不斷報道，它可以與田間的強毒株發(fā)生重組，實現(xiàn)毒力反轉或產(chǎn)生毒力更強的新毒株。

3.2 綿羊痘病毒（SPPV）和山羊痘病毒（GTPV）疫苗

20世紀70年代，研究者從肯尼亞感染綿羊痘和山羊痘的羊身上分離得到了KSGP-180和KSGP-240毒株，這些疫苗株已成功應用于防控綿羊痘和山羊痘。但近年來有關該疫苗株的免疫調查情況表明，它們也許不適用于防控牛結節(jié)性皮膚病疫情。在埃塞俄比亞，牛群接種該疫苗后發(fā)病率為22.9%，死亡率為2.31%[12]，調查還發(fā)現(xiàn)，在牛結節(jié)性皮膚病疫情流行期間，動物接種此疫苗出現(xiàn)了二次感染。研究發(fā)現(xiàn)，牛接種KSGP-180疫苗，50%有明顯的不良反應。以色列給牛接種KSGP-240疫苗也出現(xiàn)了不良反應，表現(xiàn)出典型的牛結節(jié)性皮膚病臨床癥狀，如牛發(fā)熱、全身性皮膚結節(jié)、淋巴結腫大、產(chǎn)奶量下降和食欲不振等[13]。

在中東各地區(qū)，RM 65疫苗株被廣泛用于防控牛結節(jié)性皮膚病，臨床研究發(fā)現(xiàn)該疫苗的保護效力還需進一步評估。研究證明，接種RM 65可以有效控制牛結節(jié)性皮膚病的蔓延，但也會出現(xiàn)非常明顯的副作用。如2006—2007年，以色列暴發(fā)牛結節(jié)性皮膚病疫情，緊急接種該疫苗后，部分牛出現(xiàn)產(chǎn)奶量下降、體表結節(jié)等癥狀[14]，在其他國家和地區(qū)也得到了相似論證。研究證明，對牛的免疫保護效力，GTPV疫苗要比SPPV疫苗效果更好[7]。基于伊朗GTPV弱毒株產(chǎn)生了Gorgan GTP疫苗株，比較LSDV Neethling株、KSGP-180株和Gorgan GTP株三者的免疫效力，發(fā)現(xiàn)Gorgan GTP疫苗在牛群中產(chǎn)生了更強的免疫反應，且未觀察到明顯的副作用[7]。分析基因組發(fā)現(xiàn)，GTPV和LSDV的關系更為密切，因此，Gorgan GTP可以作為防控牛結節(jié)性皮膚病的候選疫苗，但安全性和有效性還需進一步驗證[7]。目前，我國對于牛結節(jié)性皮膚病疫情防控采用山羊痘減毒活疫苗株AV41（5×）緊急免疫接種，該毒株（GTPV-AV40株）于1959年在青海省分離得到，后通過綿羊睪丸細胞制備而成，被廣泛應用于羊痘的防控，但它對牛結節(jié)性皮膚病的免疫效力還有待進一步評價[14]。使用同源重組和Cre（環(huán)化重組酶）/Loxp系統(tǒng)合成山羊痘病毒AV41株（GTPV-AV41），試驗結果表明，該毒株比野生型GTPV-AV41安全，具有令人滿意的免疫原性，并且可以保護山羊免受GTPV-AV40的強毒感染。因此，可作為潛在的新型疫苗和病毒載體，具有良好的安全性和免疫原性[15]。

3.3 滅活疫苗

弱毒活疫苗存在潛在致病風險，因此不建議在沒有羊痘疫情的國家使用，安全有效的滅活疫苗成為防控牛結節(jié)性皮膚病的最佳選擇。研究表明，弱毒活疫苗可以刺激產(chǎn)生更強的免疫保護性，而為了與單次接種弱毒活疫苗產(chǎn)生相當?shù)谋Ｗo效果，滅活疫苗則需要2次以上免疫[14]。Hamdi等[16]用油性佐劑研制了一種Neethling株的滅活疫苗，產(chǎn)生了很好的保護效力，未發(fā)現(xiàn)明顯的不良反應，初步表明該疫苗具有一定的保護效力及安全性，但進一步證明還需更多臨床試驗數(shù)據(jù)。

3.4 基因工程疫苗

目前，對牛結節(jié)性皮膚病亞單位疫苗的研究較少，國內尚無安全有效的基因工程疫苗。由于LSDV基因組較大，可以作為載體系統(tǒng)攜帶其他病毒并表達多種病原微生物抗原，如小反芻獸疫病毒、藍舌病病毒、裂谷熱病毒和牛流行熱病毒等，因此它可以作為重組亞單位疫苗的骨架，誘導機體產(chǎn)生高效的免疫保護作用，免疫一次可預防多種疫病，但目前還沒有商品化的牛結節(jié)性皮膚病載體疫苗。

4 結語

牛結節(jié)性皮膚病疫情呈現(xiàn)逐年蔓延趨勢，特別是近年來隨著國際貿易的不斷發(fā)展，動物及動物產(chǎn)品交易頻繁，牛結節(jié)性皮膚病疫情已傳入我國并在多地暴發(fā)，使我國面臨更加嚴峻的防控局面。相關部門應將早發(fā)現(xiàn)、早確診、早處理的防控措施落到實處，防止疫情擴散蔓延。接種疫苗是預防和控制牛結節(jié)性皮膚病最有效的手段，理想的疫苗應是安全、有效且無副作用的，要盡快加大牛結節(jié)性皮膚病滅活疫苗和基因工程疫苗的研發(fā)力度，建立移動群體篩查和診斷技術，構建牛結節(jié)性皮膚病網(wǎng)絡監(jiān)測系統(tǒng)和接種后免疫應答評估系統(tǒng)，積極探討有效的疫病根除和凈化措施。同時，建立健全流行病學調查機制，查清疫情來源，對疫情傳播方向進行預測，及時消除疫情傳播風險，保障養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展。