黃玉淑，莫靜華，黎劍威，謝 婷，韋成威，韋建華

（河池市動物疫病預(yù)防控制中心，廣西 河池 547000）

2018 年，針對非洲豬瘟國家出臺了許多政策、法規(guī)，以及技術(shù)支持。2019 年3 月，國家出臺了《農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于加強屠宰環(huán)節(jié)非洲豬瘟檢測工作的通知》，通知中要求各省、自治區(qū)、直轄市及部屬有關(guān)事業(yè)單位，貫徹落實國務(wù)院非洲豬瘟防控工作專題會議精神，切實做好屠宰環(huán)節(jié)非洲豬瘟檢測工作。我國應(yīng)上級領(lǐng)導(dǎo)的指示要求，對本市范圍內(nèi)生豬屠宰企業(yè)的獸醫(yī)化驗人員進行非洲豬瘟實驗室檢測實操培訓(xùn)內(nèi)容，從2019 年開始至今，在經(jīng)歷了多次的實操培訓(xùn)之后，對生豬屠宰企業(yè)進行飛行檢查與常規(guī)抽樣調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在實際中，生豬屠宰企業(yè)仍然存在不少問題，培訓(xùn)的內(nèi)容與實際中工作的操作相差甚遠，是哪個環(huán)節(jié)出現(xiàn)了問題，使得培訓(xùn)成為了紙上談兵，市場上PCR 商品化試劑盒簡單化，在如此形勢下檢測非洲豬瘟應(yīng)該相較簡單，但卻經(jīng)常接到各種電話咨詢非洲豬瘟實驗室檢測的問題，于是通過調(diào)查，反思培訓(xùn)的內(nèi)容發(fā)現(xiàn)，培訓(xùn)的內(nèi)容與實際生產(chǎn)中的檢測存在一定差異，這些是集中培訓(xùn)的時候，沒有辦法具體統(tǒng)一講解的內(nèi)容，現(xiàn)歸納如下：

1 儀器方面的問題

1.1 統(tǒng)一培訓(xùn)存在的問題最大差異來自于儀器方面，因為各個屠宰企業(yè)所購置的熒光PCR 儀器不同，在培訓(xùn)中統(tǒng)一培訓(xùn)儀器的使用是不現(xiàn)實的，并且也脫離實際情況，變成空談，各個化驗人員回到自己的實驗室后，面對熒光PCR 儀仍然不知所措，出現(xiàn)機器運行出錯，軟件設(shè)置出問題等情況，自己沒辦法解決，實驗沒辦法開展下去，一臉茫然。這是集中統(tǒng)一培訓(xùn)弊端之一；統(tǒng)一培訓(xùn)只能夠傳授大家共通的知識，基本操作，對個人私企的PCR 儀器，作為培訓(xùn)講師不可能說的清楚，具體的問題具體分析，各自的PCR 儀問題，還得自己想辦法解決。作為培訓(xùn)教學(xué)者，也不是所有市場上的PCR 儀器都使用過，面對市場上琳瑯滿目、各式各樣的熒光PCR 儀,也很難真正去解決企業(yè)的PCR 儀存在的問題，至多在培訓(xùn)的解答疑惑互動環(huán)節(jié)提出存在的問題，有針對性的去推敲問題的答案，或給出解決的途徑。

1.2 建 議（1）利用PCR 賣家的售后服務(wù)電話進行咨詢，因本市地理位置屬于偏遠山區(qū)，上門售后不在本地，唯有通過電話或是微信視頻等方式探討問題的解決辦法。（2）屠宰企業(yè)或是第三方公司可以邀請專家或是業(yè)內(nèi)人士到他們的實驗室進行現(xiàn)場實操指導(dǎo)，這種現(xiàn)場培訓(xùn)是很具有時效性的，培訓(xùn)效果也很好，相較于大家集中統(tǒng)一培訓(xùn)，親臨現(xiàn)場培訓(xùn)教學(xué)，收到的效果要好很多，針對性也很強，遇見問題，立馬可以當場解決，效果立竿見影，經(jīng)過一次實操培訓(xùn)下來，非洲豬瘟檢測實驗均可順利展開，培訓(xùn)人員只需要多練習(xí)幾次，熟練之后，完全可以獨自開展這項操作。

2 試劑方面的問題

2.1 試劑存在的問題（1）試劑廠家的不同導(dǎo)致在培訓(xùn)的時候沒辦法集中講解教學(xué)，與儀器差異一樣，生豬屠宰企業(yè)選擇不同試劑廠家，方法步驟會不同，雖然原理一樣，但是面對的是沒有基礎(chǔ)的學(xué)員，培訓(xùn)的老師也難以教學(xué)到位。（2）試劑反復(fù)凍融。多個屠宰企業(yè)實驗室了解其試劑使用情況，發(fā)現(xiàn)一盒非洲豬瘟檢測試劑盒，一般需要使用5 次以上才使用完，而化驗員也沒有意識到反復(fù)凍融對試劑的影響，試劑失效也不清楚是什么原因，詢問化驗員是否仔細看試劑說明書上的注意事項，多數(shù)表示只看說明書上的操作部分。（3）試劑保存不當，在觀看化驗員實操過程中發(fā)現(xiàn)，部分化驗員在檢測試劑盒使用結(jié)束后，沒有及時將試劑放回冰箱中保存，而是長時間置于室溫環(huán)境中。

2.2 建 議（1）各個生豬屠宰企業(yè)選擇與筆者培訓(xùn)相同的試劑廠商，所推薦的試劑也是經(jīng)過國家農(nóng)業(yè)部審核、考核通過后公開的廠商產(chǎn)品。（2）一般試劑說明書上表明，試劑不宜反復(fù)凍融超過三次以上，化驗員在第一次開封檢測試劑盒是將試劑進行分裝，降低反復(fù)凍融回試劑的影響。（3）試劑使用結(jié)束后及時放回冰箱，防止試劑長時間置于室溫環(huán)境中而導(dǎo)致試劑失效。

3 試驗污染方面的問題

3.1 試驗污染問題污染一直都是實驗中比較頭疼的問題。在屠宰企業(yè)，獸醫(yī)實驗室布局比較簡單，通常是一間房間一張桌子，一臺冰柜或是冰箱，沒有隔間，PCR 儀器放在桌子角，所有的操作，包括樣品處理，核酸釋放、核酸提取等的操作都在PCR 儀旁邊開展；筆者在部分屠宰場發(fā)現(xiàn)，實驗人員將檢測試劑盒與樣品存放在同一冰柜中，這在PCR 實驗中是絕對不被允許的；部分實驗人員在每次試驗結(jié)束后，并沒有對實驗臺進行消毒，或者只是拿抹布簡單擦拭實驗臺，這樣很難保證下一次實驗過程是否被污染。按照上級文件要求，市級獸醫(yī)實驗室至少要劃分為三個區(qū)域，樣品處理區(qū)，試劑配制區(qū)，反應(yīng)擴增區(qū)，要求比較嚴格的還要有負壓區(qū)域。相較于屠宰企業(yè)的簡單布局，在污染問題上已經(jīng)沒辦法從物理上進行隔絕。一旦形成污染，將會是比較麻煩的事情，尤其是屠宰量較大的企業(yè)，每天都要進行PCR 非瘟檢測，很難保證沒有污染，另一個問題是，化驗員是否有意識到實驗室已經(jīng)被污染了，污染并不是試驗陰性對照跳變?yōu)殛栃?，亦或是在重?fù)做同樣試驗的時候，得不到同一的結(jié)果。

3.2 建 議（1）對實驗室進行簡單的功能分區(qū)，為降低成本，可以用玻璃做墻，在房間內(nèi)進行簡單隔離，同時加裝排氣扇，通風透氣，有條件的安裝空調(diào)，但不建議安裝電扇；（2）將樣品與非洲豬瘟試劑盒分開保存，添加多一臺冰柜或是冰箱，專門存放樣品或是專門存放試劑。（3）實驗室里面配備紫外燈或紫外燈車，每次實驗結(jié)束后，對實驗室臺面進行紫外燈照射殺菌消毒30 min 以上，并用含氯消毒劑進行擦拭桌面、移液器內(nèi)管等。

4 人員方面的問題

4.1 人員年齡與專業(yè)能力問題第一，生豬屠宰企業(yè)內(nèi)部員工大多數(shù)為非專業(yè)人員，屠宰企業(yè)能招到獸醫(yī)專業(yè)的人選，但未必可以勝任該項檢測非洲豬瘟的工作；第二，PCR 實驗雖然簡化很多步驟，商品化試劑盒也都簡單化，也有預(yù)分裝好的，實驗人員仍然弄錯，原因是，這些化驗員都是屠宰企業(yè)從屠宰工中挑選的，有些工作人員年齡較大，視力減弱，看細微的東西看不清楚，PCR 反應(yīng)酶僅需要幾微升的量，非常少，如不仔細辨認，容易出錯。

4.2 建 議（1）招聘獸醫(yī)相關(guān)專業(yè)的畢業(yè)生，有一定的知識儲備，能較好的勝任非洲豬瘟檢測工作，但并非絕對是專業(yè)人員，積極主動、勤奮好學(xué)的人員，通過培訓(xùn)，多次實操練習(xí)，也可以很好的勝任非洲豬瘟檢測工作；（2）從事非洲豬瘟檢測的人員，需要細心、有耐心、認真負責；（3）不要經(jīng)常變更化驗人員，讓專業(yè)的人做專業(yè)的事。

5 生物安全方面的問題

5.1 企業(yè)與員工生物安全意識較差屠宰企業(yè)管理混亂，雖然實驗室的制度釘在了最顯眼的地方，但是管理層也大多是松散管理；做實驗沒有專門的工作服，屠宰企業(yè)工作服都是統(tǒng)一配置，進入實驗室應(yīng)該更換專門的衣服；PCR 實驗室要求較嚴格。進行PCR 實驗時有些工作人員嫌麻煩不戴口罩、手套的情況在屠宰場很常見，在培訓(xùn)的時候，重點強調(diào)生物安全的知識，這是很重要的一塊內(nèi)容。在許多屠宰場，企業(yè)員工很少有意識去防護自己。生物安全問題自始至終都是擺在大家面前的頭等大事。屠宰企業(yè)每天屠宰幾百上千頭豬，豬又來自各地，不可能都是無病的，比如說炭疽，是一種人畜共患病，如果不嚴格要求員工做好個人防護，皮膚直接接觸感染炭疽的豬，或吸入帶大量炭疽芽孢的氣溶膠等，均可能感染炭疽。因此，每次培訓(xùn)的時候，都一直在強調(diào)生物安全問題。

5.2 建 議（1）屠宰企業(yè)管理層應(yīng)重視生物安全問題，組建生物安全委員會，制定生物安全制度，向員工強調(diào)生物安全問題，學(xué)習(xí)生物安全知識，定期培訓(xùn)；（2）配備工作服、口罩、手套等防護用品之后在上崗工作，嚴格要求員工做好個人防護；（3）管理層要加強管理力度，不定期檢查化驗員在實驗室進行實驗時，是否做好個人防護。

6 技術(shù)知識方面的問題

6.1 關(guān)于非洲豬瘟的知識欠缺非洲豬瘟在中國也經(jīng)歷了幾年時間，大大小小的教學(xué)、實操培訓(xùn)也有很多次了，但是筆者在生豬屠宰企業(yè)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，有些化驗員經(jīng)過培訓(xùn)之后，仍然搞不清陰陽曲線。

屠宰企業(yè)的熒光PCR 不會很復(fù)雜，現(xiàn)在試劑又簡單化，非常簡單的幾步驟，結(jié)果判定，說明書寫得很簡單明了，實驗過程也沒問題，但是問及結(jié)果，還是有化驗員表示不會判定分析。

6.2 建 議（1）招聘具有相關(guān)專業(yè)知識的員工，有知識基礎(chǔ)能夠較快上手非洲豬瘟檢測工作，但并非一定是專業(yè)人員，積極主動、勤奮好學(xué)的人員，通過培訓(xùn)，多次實操練習(xí)，也可以很好的勝任非洲豬瘟檢測工作；（2）屠宰企業(yè)要制定培訓(xùn)計劃，加強對化驗員的崗前培訓(xùn)，通過對化驗員進行考核通過后上崗，組織化驗員參與非洲豬瘟檢測技術(shù)培訓(xùn)，讓化驗員熟練掌握非洲豬瘟檢測技術(shù)，不僅做到檢測準確，還要對實驗結(jié)果進行準確的判定分析。

7 總 結(jié)

通過對集中統(tǒng)一培訓(xùn)與到屠宰企業(yè)進行現(xiàn)場實操培訓(xùn)進行比較，各有優(yōu)缺點，其中集中統(tǒng)一培訓(xùn)可以講解一些非洲豬瘟理論方面的知識，比如非洲豬瘟的臨床癥狀，解剖的病理現(xiàn)象，非洲豬瘟病原學(xué)特點，流行病學(xué)特點以及國家對非洲豬瘟的防控政策等理論方面的知識，而對實操檢測統(tǒng)一培訓(xùn)就捉襟見肘了，正如文中提到的由于各個生豬屠宰企業(yè)的硬件條件不同，琳瑯滿目的PCR 儀，集中統(tǒng)一培訓(xùn)儀器、試劑是不現(xiàn)實的，但是實操檢測這一塊內(nèi)容又是非常重要的，是屬于實戰(zhàn)內(nèi)容，筆者在培訓(xùn)操作時候也只能一邊講解一邊與大家討論各自的PCR 儀器特點，希望盡可能的與他們實際工作同步。而如果有機會到現(xiàn)場指導(dǎo)培訓(xùn)，則其中的益處很明了，手把手教學(xué)，不僅可以立馬解決實際困難，而且只需教學(xué)一次，學(xué)員多練習(xí)幾次，就可以開展非洲豬瘟檢測工作了，這是集中統(tǒng)一教學(xué)培訓(xùn)所不能比的，因此，很多學(xué)員再培訓(xùn)之后，回去自己仍然無法開展檢測，原因就在于此；如何將集中統(tǒng)一的實操培訓(xùn)更貼近于學(xué)員的實際工作，這也是筆者做好培訓(xùn)教學(xué)努力的方向，既要說共同點，有要說各種不同點，兩者兼顧是難點，也值得深思。