李敏潔, 張 琛, 李曉慧, 李思蒙, 陳雪英,王 琦, 鄭鷺飛, 金 芬

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與食物安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所，北京 100081)

農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防控有害生物的重要手段，但是幾乎所有化學(xué)合成的農(nóng)藥原藥均不可直接使用，必須添加其他輔助成分才能加工成實(shí)際使用的農(nóng)藥制劑。這些添加到制劑中、有助于提高藥效或改善產(chǎn)品物理化學(xué)性質(zhì)的物質(zhì)，被統(tǒng)稱為農(nóng)藥助劑[1-2]。農(nóng)藥助劑種類繁多，目前全球共有3000 多種。按照功能可分為配方助劑和噴霧助劑；按照表面活性劑性質(zhì)則可分為表面活性劑類和非表面活性劑類。研究表明，部分農(nóng)藥助劑及其代謝物具有內(nèi)分泌干擾毒性[3-4]、生殖毒性[5]以及致畸效應(yīng)[6]等，其對(duì)環(huán)境和人體的暴露風(fēng)險(xiǎn)引起了廣泛關(guān)注，已成為近年來農(nóng)藥學(xué)領(lǐng)域和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。

牛脂胺聚氧乙烯醚 (polyoxyethylene tallow amine，POE-tallowamine) 作為表面活性劑類助劑，通過促進(jìn)農(nóng)藥活性成分穿透葉片角質(zhì)層而發(fā)揮作用，廣泛使用于草甘膦和2,4-D 等除草劑[7-9]，含量約占草甘膦制劑的3%～18%[10-12]。此外，牛脂胺聚氧乙烯醚在塑料、紡織、涂料等行業(yè)應(yīng)用也很廣泛[13-16]。歐洲食品安全局 (European Food Safety Authority，EFSA) 報(bào)告及多項(xiàng)研究表明，牛脂胺聚氧乙烯醚可引起生殖毒性、遺傳毒性、肝臟損傷等，其毒性大于有效成分草甘膦，且草甘膦制劑的毒性大小與牛脂胺聚氧乙烯醚的含量密切相關(guān)[9,17-19]。因此美國(guó)和加拿大分別規(guī)定牛脂胺聚氧乙烯醚在除草劑中的含量不得超過25% 和20%[20-21]，歐盟已將其列入農(nóng)藥助劑的負(fù)面清單[22]。本文擬就牛脂胺聚氧乙烯醚在農(nóng)藥制劑領(lǐng)域的研究及應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，通過介紹其結(jié)構(gòu)、毒性以及在環(huán)境中的殘留分布研究進(jìn)展，并重點(diǎn)闡述不同介質(zhì)中牛脂胺聚氧乙烯醚的分析方法，以期為牛脂胺聚氧乙烯醚在農(nóng)藥制劑領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用以及開展其在農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境中的殘留水平和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估研究提供參考。

1 概述

牛脂胺聚氧乙烯醚為淡黃色至黃色液體至固體，CAS 號(hào)為61791-26-2，可作為表面活性劑使用，具有優(yōu)良的乳化、分散、增溶和潤(rùn)滑等性能。其結(jié)構(gòu)見圖式1，主要由1 個(gè)氮原子連接1 條直鏈脂肪鏈和2 條乙氧基鏈組成。其中，直鏈脂肪鏈R 由C12～C18的飽和及不飽和脂肪酸組成，主要包括硬脂酸 (C18∶0)、棕櫚酸 (C16∶0) 和油酸 (C18∶1，ω-9)；2 條乙氧基鏈中的乙氧基(ethoxylate，EO) 數(shù)目m和n可能相同也可能不同，因此商業(yè)化的牛脂胺聚氧乙烯醚產(chǎn)品是具有不同聚合度和同分異構(gòu)體的混合物。與已知具有內(nèi)分泌干擾效應(yīng)的壬基酚聚氧乙烯醚相比，牛脂胺聚氧乙烯醚不含苯環(huán)，沒有紫外吸收作用，含有氮原子且R 基團(tuán)不同，含2 條乙氧基鏈，結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜。

圖式 1 牛脂胺聚氧乙烯醚結(jié)構(gòu)式Scheme 1 The structural formula of polyoxyethylene tallow amine

2 牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性

國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu) (International Agency for Research on Cancer，IARC) 于2015 年將草甘膦列為可能的人類致癌物 (2A 組，致癌可能性較大)[23]，然而EFSA 認(rèn)為，現(xiàn)有證據(jù)并不能支持對(duì)草甘膦致癌性進(jìn)行分類[24]。造成兩者分歧的主要原因是評(píng)估對(duì)象的差異——IARC 評(píng)估的是包含牛脂胺聚氧乙烯醚等農(nóng)藥助劑在內(nèi)的草甘膦制劑，而EFSA僅評(píng)估了其活性成分草甘膦。應(yīng)歐盟的要求，EFSA對(duì)牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性進(jìn)行了審查，發(fā)現(xiàn)在以草甘膦為基礎(chǔ)的配方中，牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性明顯大于草甘膦，且牛脂胺聚氧乙烯醚還可能造成DNA 損傷[17]。因此，越來越多的研究者開始關(guān)注農(nóng)藥制劑中牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性[25-28]。本文針對(duì)牛脂胺聚氧乙烯醚的受試生物，按照水生生物、兩棲動(dòng)物、軟體動(dòng)物、微生物及細(xì)胞等進(jìn)行分類，概述了相關(guān)生物的體內(nèi)及體外毒性研究進(jìn)展 (表1)。

左小龍一個(gè)手搖搖晃晃開到了雕塑園，在回程的路上，這太平洋夏日的暖風(fēng)都變涼了，吹得左手抽疼?；氐搅怂麄兊淖∷?，大帥在園里看電視。因?yàn)闆]有有線電視，所以只能收到固定的幾個(gè)頻道，但左小龍和大帥都覺得這樣看電視反而更容易有滿足感。左小龍把腫大的中指伸出來給大帥一比劃，大帥道：骨折了。

表1 牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性Table 1 Toxicity of polyoxyethylene tallow amine

2.1 體內(nèi)毒性試驗(yàn)

Wang 等[46]研究了孟山都公司生產(chǎn)的含68%牛脂胺聚氧乙烯醚的農(nóng)藥助劑MON (0818)對(duì)斑馬魚的急性毒性，發(fā)現(xiàn)暴露于該助劑 96 h 后，斑馬魚的死亡率在43%～83% 之間。Rodrigues 等[45]的研究表明，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)斑馬魚的致死中濃度 (96 h-LC50) 為5.49 mg/L，且具有遺傳毒性，可對(duì)虹鱒魚生殖腺-2 (RTG-2) 細(xì)胞的DNA 造成損傷。Brausch 等[29-30]研究發(fā)現(xiàn)，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)圓頭魚的48 h-LC50值 (2.01～5.17μg/L) 遠(yuǎn)低于對(duì)斑馬魚的97.0～849.4 μg/L，表明牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)圓頭魚的急性毒性更高。Eslava-Mocha等[39]研究了2 種牛脂胺聚氧乙烯醚助劑 (TA15 和TH30) 對(duì)淡水白鯧的毒性，96 h-LC50值分別為2.08 和47.32 mg/L，相差高達(dá)23 倍，其原因可能與2 種商業(yè)化助劑中牛脂胺聚氧乙烯醚的聚合度和不飽和度等結(jié)構(gòu)組成不同有關(guān)。Brausch 等[29]的研究表明，隨著牛脂胺聚氧乙烯醚脂肪鏈中碳鏈長(zhǎng)度的增長(zhǎng)，其對(duì)水生生物的毒性減弱。Mottier等[33]對(duì)太平洋牡蠣的不同的生命階段進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)牡蠣幼體發(fā)育具有毒性，半數(shù)最大效應(yīng)濃度 (EC50) 值為262 μg/L，對(duì)變態(tài)過程的EC50值為3027 μg/L，該研究結(jié)果與Séguin 等的一致[34]。綜上所述，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)水生生物的急性毒性較大，且具有一定的遺傳毒性。值得注意的是，由于水中沉積物對(duì)牛脂胺聚氧乙烯醚具有較強(qiáng)的吸附性，因此自然水環(huán)境中的牛脂胺聚氧乙烯醚暴露對(duì)水生生物的影響可能較試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果小[46-47]。

例2 取ag某物質(zhì)在氧氣中完全燃燒,將其產(chǎn)物跟足量的過氧化鈉固體完全反應(yīng),反應(yīng)后固體的質(zhì)量恰好也增加了ag。下列物質(zhì)中不能滿足上述結(jié)果的是( )。

目前關(guān)于牛脂胺聚氧乙烯醚在草甘膦制劑、土壤、沉積物及動(dòng)物血漿中的殘留檢出已有報(bào)道，但在農(nóng)作物和農(nóng)產(chǎn)品中尚未見報(bào)道。Schreuder等[51]在荷蘭市場(chǎng)上銷售的草甘膦制劑中檢出了牛脂胺聚氧乙烯醚。Corbera 等[52]測(cè)定了西班牙市場(chǎng)上的4 種草甘膦制劑，發(fā)現(xiàn)牛脂胺聚氧乙烯醚的質(zhì)量濃度水平為99.4～98.1 g/L。2013 年，Tush 等[53]對(duì)平均聚合度分別為2、5 和15 的牛脂胺聚氧乙烯醚進(jìn)行了表征，并在此基礎(chǔ)上調(diào)查了美國(guó)市場(chǎng)上使用最廣泛的10 種農(nóng)業(yè)用草甘膦制劑和6 種住宅環(huán)境用草甘膦制劑，發(fā)現(xiàn)農(nóng)業(yè)草甘膦制劑中牛脂胺聚氧乙烯醚的檢出率為70%，其中4 種制劑的聚合物分布與平均聚合度為15 的牛脂胺聚氧乙烯醚標(biāo)準(zhǔn)品相似，1 種制劑的聚合物分布與平均聚合度為5 的標(biāo)準(zhǔn)品相似，2 種制劑中檢出的牛脂胺聚氧乙烯醚聚合單體分布介于平均聚合度為5 和15 的標(biāo)準(zhǔn)品之間，這可能是因?yàn)楦呔酆隙鹊呐Ｖ肪垩跻蚁┟寻l(fā)生了降解，也可能是由于2 種制劑中使用的牛脂胺聚氧乙烯醚聚合單體分布不同于所購買的標(biāo)準(zhǔn)品；而住宅用草甘膦制劑中牛脂胺聚氧乙烯醚的檢出率為67%，其中3 種牛脂胺聚氧乙烯醚的組成分布與平均聚合度為15 的標(biāo)準(zhǔn)品相似。Tush 等在美國(guó)喬治亞州、夏威夷州、愛荷華州等地區(qū)種植玉米和大豆的土壤中檢測(cè)到了牛脂胺聚氧乙烯醚的廣泛存在，其殘留量超過1 mg/kg，而在附近的農(nóng)業(yè)和城市地區(qū)河流沉積物中也檢測(cè)到了一定水平的牛脂胺聚氧乙烯醚殘留。其中，他們發(fā)現(xiàn)農(nóng)田土壤中不飽和牛脂胺聚氧乙烯醚聚合物的含量比飽和聚合物的含量低很多，這可能與不飽和牛脂胺聚氧乙烯醚在自然環(huán)境下通過光降解或生物降解的速度更快有關(guān)[48]。目前，關(guān)于植物和動(dòng)物體內(nèi)牛脂胺聚氧乙烯醚殘留和分布的研究報(bào)道很少，僅Hornek-Gausterer 等[54]報(bào)道在歐洲捕獲的野生棕兔血漿中檢測(cè)到了牛脂胺聚氧乙烯醚殘留。鑒于牛脂胺聚氧乙烯醚在美國(guó)農(nóng)田土壤中的殘留濃度水平及廣泛分布，因此急需加快推動(dòng)我國(guó)土壤、農(nóng)作物和野生動(dòng)植物中牛脂胺聚氧乙烯醚的殘留分布調(diào)查，并開展其降解規(guī)律等相關(guān)研究，以期為我國(guó)制定相應(yīng)的管理措施提供科學(xué)依據(jù)。

2.2 體外毒性試驗(yàn)

Nobels 等[32]比較了11 種常用農(nóng)藥助劑對(duì)大腸桿菌的影響，發(fā)現(xiàn)在所有測(cè)試物質(zhì)中，牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性最大，可造成細(xì)胞膜及DNA 損傷，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)，具有遺傳毒性。農(nóng)田土壤中牛脂胺聚氧乙烯醚的廣泛存在，對(duì)植物有益土壤微生物群落具有潛在的不利影響，該問題已引起研究者的關(guān)注[48-49]。Mendonca 等[38]研究了3 種惡臭假單胞菌種 (KT2440、S12 和Pf-5) 在常見根分泌物琥珀酸中的生長(zhǎng)和代謝作用，發(fā)現(xiàn)與僅含琥珀酸的培養(yǎng)基相比，添加牛脂胺聚氧乙烯醚可導(dǎo)致假單胞菌生物量增長(zhǎng)速率降低60%；而在同時(shí)含有牛脂胺聚氧乙烯醚和草甘膦的情況下，假單胞菌生物量的增長(zhǎng)速率與僅添加牛脂胺聚氧乙烯醚的處理相同或降低了5%～15%；表明牛脂胺聚氧乙烯醚可顯著抑制假單胞菌種的生長(zhǎng)。該研究進(jìn)一步采用代謝組學(xué)手段，證明了暴露于牛脂胺聚氧乙烯醚的細(xì)胞可在關(guān)鍵生物合成途徑中積累核糖核苷酸并消耗氨基酸，從而導(dǎo)致假單胞菌種生長(zhǎng)受到抑制。

一是明確鎮(zhèn)村干部權(quán)責(zé)。建立明晰的鎮(zhèn)村干部權(quán)責(zé)清單，既要促使他們積極履職，避免不作為，也要明確其行為紅線，嚴(yán)防其借助服務(wù)項(xiàng)目之名亂作為。二是積極培育文明鄉(xiāng)風(fēng)。回鄉(xiāng)創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目因其落地地域的專屬性，也就使得文明鄉(xiāng)風(fēng)營(yíng)造顯得尤其重要。引導(dǎo)廣大農(nóng)村黨員干部群眾關(guān)心農(nóng)村事業(yè)發(fā)展，關(guān)心家鄉(xiāng)建設(shè)，積極支持項(xiàng)目建設(shè)，合理有序表達(dá)利益訴求。三是嚴(yán)厲打擊不法行為。積極響應(yīng)中央部署的掃黑除惡專項(xiàng)行動(dòng)，讓全面從嚴(yán)管理深入農(nóng)村，嚴(yán)防農(nóng)村惡勢(shì)力、宗族勢(shì)力等干擾村級(jí)事務(wù)、農(nóng)村經(jīng)濟(jì)建設(shè)，為回鄉(xiāng)能人創(chuàng)業(yè)營(yíng)造良好的環(huán)境氛圍。

此外，Torres-Badia 等[19]發(fā)現(xiàn)，牛脂胺聚氧乙烯醚可顯著降低豬精子的移動(dòng)性，但精子活力未見損傷。Hao 等[41-42]以肺癌A549 細(xì)胞為吸入暴露模型，發(fā)現(xiàn)牛脂胺聚氧乙烯醚可誘導(dǎo)人A549 細(xì)胞的自噬作用，抑制A549 細(xì)胞增殖的能力，凋亡細(xì)胞的比例顯著增加，并且可引起細(xì)胞線粒體凋亡和DNA 損傷。Mesnage 等[43]發(fā)現(xiàn)，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)肝臟、胚胎和胎盤3 種人類細(xì)胞的毒性強(qiáng)弱與其濃度成正比，作為表面活性劑的牛脂胺聚氧乙烯醚可與細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)產(chǎn)生膠束化現(xiàn)象，破壞細(xì)胞膜，進(jìn)而還可誘導(dǎo)線粒體改變。此外，Defarge 等[44]的研究表明，牛脂胺聚氧乙烯醚還可抑制人胎盤細(xì)胞JEG3 芳香化酶的活性，對(duì)細(xì)胞的毒性是草甘膦的1200～2000 倍。

綜上所述，草甘膦制劑中助劑牛脂胺聚氧乙烯醚的毒性較其有效成分草甘膦的毒性更大，由于草甘膦除草劑的施用，農(nóng)田土壤可能成為牛脂胺聚氧乙烯醚的重要載體，因此，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)農(nóng)田生態(tài)環(huán)境中微生物及非靶標(biāo)生物的影響和作用應(yīng)引起更多關(guān)注。

Langrand 等[50]比較分析了法國(guó)毒物控制中心(French Poison Control Centres，PCC) 連續(xù)7 年接到的關(guān)于含牛脂胺聚氧乙烯醚草甘膦制劑 (TA) 和不含牛脂胺聚氧乙烯醚草甘膦制劑 (NTA) 口腔暴露中毒病例的報(bào)告，發(fā)現(xiàn)在429 例急性中毒病例中，含牛脂胺聚氧乙烯醚的草甘膦制劑 (TA) 引發(fā)了更嚴(yán)重的癥狀，如皮膚刺激和嚴(yán)重的眼和粘膜刺激，甚至出現(xiàn)了嚴(yán)重的呼吸道癥狀，引發(fā)呼吸衰竭；在相同的暴露量情況下，TA 重癥病例為7.8%，且死亡5 例，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于NTA 的重癥病例 (1.9%)。

3 牛脂胺聚氧乙烯醚的分布狀況

Howe 等[10]將兩棲動(dòng)物暴露于含牛脂胺聚氧乙烯醚和不含牛脂胺聚氧乙烯醚的不同配方草甘膦制劑中，發(fā)現(xiàn)含牛脂胺聚氧乙烯醚的草甘膦制劑急性毒性最大，可造成蝌蚪變態(tài)期延長(zhǎng)、體長(zhǎng)變短、尾部損傷及性腺異常。Lopes 等[37]也發(fā)現(xiàn)，蝌蚪暴露于10 μg/L 的牛脂胺聚氧乙烯醚96 h 后全部死亡，且發(fā)現(xiàn)牛脂胺聚氧乙烯醚具有顯著的遺傳毒性、致突變和肝臟損傷毒性。此外，牛脂胺聚氧乙烯醚也可抑制軟體動(dòng)物蝸牛產(chǎn)卵，對(duì)成年蝸牛的觸角可造成可見的損傷，但在實(shí)際環(huán)境濃度下其風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小[36]。Bedná?ová等[7]將果蠅分別暴露于亞致死效應(yīng)濃度的草甘膦原藥、牛脂胺聚氧乙烯醚以及含牛脂胺聚氧乙烯醚的草甘膦制劑Roundup? Concentrate Plus (RCP)中，結(jié)果表明：牛脂胺聚氧乙烯醚和RCP 制劑的毒性均大于草甘膦原藥，且發(fā)現(xiàn)牛脂胺聚氧乙烯醚可損傷細(xì)胞活力，從而抑制果蠅的繁殖能力。此外，牛脂胺聚氧乙烯醚還可造成小鼠TM4 細(xì)胞死亡，影響其生殖功能[11]。綜上，體內(nèi)毒性研究表明，牛脂胺聚氧乙烯醚對(duì)兩棲動(dòng)物等具有一定的生殖及發(fā)育毒性。

4 牛脂胺聚氧乙烯醚的分析技術(shù)

4.2.1 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 (LC-MS) 技術(shù)是目前檢測(cè)牛脂胺聚氧乙烯醚最常用的方法，具有選擇性好、靈敏度高等特點(diǎn)。Krogh 等[57]采用LC-MS 方法測(cè)定了土壤中的牛脂胺聚氧乙烯醚殘留，但該方法運(yùn)行時(shí)間長(zhǎng)達(dá)1h，因而限制了其在高通量環(huán)境監(jiān)測(cè)和毒理學(xué)研究中的應(yīng)用。Ross 等[56]采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS) 方法分析了沉積物中的牛脂胺聚氧乙烯醚殘留，LOQ 為2.5 ng/g，與Krogh 等[57]所用的LC-MS 方法 (LOQ 為24～43 ng/g) 相比，LC-MS/MS 的LOQ 降低了一個(gè)數(shù)量級(jí)，靈敏度得到顯著提高。Tush 等[49]采用飛行時(shí)間質(zhì)譜 (TOF-MS) 作為檢測(cè)器，發(fā)現(xiàn)TOF-MS 可以全譜采集樣品中所有目標(biāo)物的m/z，提升了數(shù)據(jù)的采集效率。然而，由于目前關(guān)于牛脂胺聚氧乙烯醚分析的所有研究中采用的液相色譜分離系統(tǒng)均為反相色譜系統(tǒng)，主要是根據(jù)目標(biāo)物中碳鏈 (R) 的長(zhǎng)度進(jìn)行分離，因而造成了碳鏈相同但不同乙烯醚聚合度單體的共流出，使得方法的選擇性較差，限制了其在環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品樣品中的應(yīng)用。因此，如何在一個(gè)方法中同步實(shí)現(xiàn)不同碳鏈長(zhǎng)度和不同聚氧乙烯醚聚合度牛脂胺聚氧乙烯醚的分離，成為了牛脂胺聚氧乙烯醚分析研究領(lǐng)域亟待解決的難題。

4.1 不同基質(zhì)的前處理技術(shù)

4.1.1 農(nóng)藥制劑及水中牛脂胺聚氧乙烯醚的前處理技術(shù) 直接稀釋法是目前提取農(nóng)藥制劑產(chǎn)品中牛脂胺聚氧乙烯醚的主要方法。Schreuder 等[51]將草甘膦制劑采用表2 所述等度洗脫流動(dòng)相直接稀釋后進(jìn)樣檢測(cè)，方法定量限 (LOQ) 為25 ng；Corbera等[52]采用0.1 mol/L 的鹽酸直接稀釋草甘膦制劑樣品后進(jìn)行檢測(cè)，LOQ 為500 ng；Tush 等[53]分別用乙腈和乙腈/水 (V/V，1∶1) 稀釋農(nóng)業(yè)用草甘膦制劑和住宅環(huán)境用草甘膦制劑，用水進(jìn)一步稀釋至適宜濃度后進(jìn)行檢測(cè)，從部分草甘膦制劑樣品中檢出了牛脂胺聚氧乙烯醚。同時(shí)，直接稀釋法也是目前提取水樣中牛脂胺聚氧乙烯醚的主要方法之一。Wang 等[46]采用直接測(cè)定法測(cè)定水中的牛脂胺聚氧乙烯醚，方法回收率為82%～98%，LOQ為0.05 mg/L；Ross 等[56]采用甲醇按體積比1 : 1稀釋淡水和海水，離心后取上清液進(jìn)行檢測(cè)，方法平均回收率為93%，LOQ 分別為0.5 和2.9 ng/mL。Krogh 等[55]采用不同填料的固相萃取技術(shù) (SPE)測(cè)定了土壤間隙水、地下水和地表水中的牛脂胺聚氧乙烯醚殘留，發(fā)現(xiàn)采用極性更強(qiáng)的Porapak Rdx 小柱代替常用的C18柱，提取凈化效果更好，目標(biāo)物回收率為28%～96%，LOQ 為0.3～6 μg/L。與Wang 等[46]的直接稀釋前處理方法相比，Krogh等[55]的固相萃取法能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)樣品的富集，靈敏度提高了8～166 倍，但由于目標(biāo)物是由不同聚合度和碳鏈長(zhǎng)度組合成的混合物體系，極性差異較大，導(dǎo)致了部分聚合度的牛脂胺聚氧乙烯醚的回收率較低。因此，針對(duì)固相萃取技術(shù)，需重點(diǎn)研發(fā)適合這類極性跨度大的目標(biāo)物的新型固相萃取填料，從而提高不同聚合度和碳鏈長(zhǎng)度牛脂胺聚氧乙烯醚的回收率，實(shí)現(xiàn)水中痕量目標(biāo)物的提取凈化。

表2 牛脂胺聚氧乙烯醚分析技術(shù)Table 2 Analytical methods of polyoxyethylene tallow amine

4.1.2 土壤及沉積物中牛脂胺聚氧乙烯醚的前處理技術(shù) Krogh 等[57]采用加速溶劑提取 (ASE) 連續(xù)兩步法提取大麥田土壤樣品中的牛脂胺聚氧乙烯醚，先用100%甲醇萃取后，在樣品中加入含75 mmol/L 乙酸和100 mmol/L 三乙胺的正己烷/丙酮 (V/V，1 : 1) 混合溶劑繼續(xù)萃取，土壤中牛脂胺聚氧乙烯醚的回收率為27%～109%；而Tush 等[49]采用相同方法前處理，土壤中牛脂胺聚氧乙烯醚的回收率卻僅為33%～39%。表明部分聚合度的牛脂胺聚氧乙烯醚回收率低成為了制約其土壤樣品分析的主要瓶頸。2015 年，Ross 等[56]采用含5 mmol/L KH2PO4的水/甲醇 (V/V，1∶7) 混合溶劑加速提取沉積物中的牛脂胺聚氧乙烯醚，平均回收率提升至75%。Rodriguez-Gil 等[58]比較了超聲提取法和加速溶劑提取法，以及不同溶劑——水、甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷和正己烷及其不同組合對(duì)沉積物樣品中牛脂胺聚氧乙烯醚的提取效果，發(fā)現(xiàn)超聲提取法的提取效率較低，平均回收率均小于26%，而采用甲醇/乙腈 (V/V，1 : 1)混合溶劑進(jìn)行加速溶劑提取，牛脂胺聚氧乙烯醚的最大回收率可達(dá)52%，檢出限 (LOD) 為0.78 ng/g，LOQ 為2.5 ng/g。

這些血緣親人們?cè)谖膶W(xué)作品中的出現(xiàn)，也許是作者加工潤(rùn)色下的形象的展示，也許僅僅作為創(chuàng)作的需要，也許僅為達(dá)到某個(gè)創(chuàng)作目的而施行的表達(dá)策略，如此等等。但不管沈從文出于什么目的，這么多血緣親人稱謂如此大量出現(xiàn)在作品中卻是不爭(zhēng)的事實(shí)。對(duì)比他的自傳，我們可以毫不猶豫地肯定，沈從文大量的血親稱謂作品就是以沈從文的生活環(huán)境為基礎(chǔ)，以沈從文所熟悉或親身經(jīng)歷的人事為依據(jù)創(chuàng)作出來的。這么多血緣親人稱謂出現(xiàn)在如此多的作品中，緣由值得關(guān)注與深思。

4.2 檢測(cè)技術(shù)

鑒于牛脂胺聚氧乙烯醚的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，檢測(cè)方法的建立成為了開展其殘留污染水平調(diào)查及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估等各項(xiàng)研究工作的技術(shù)瓶頸。目前，雖然關(guān)于水、沉積物、土壤等環(huán)境樣品及農(nóng)藥制劑中牛脂胺聚氧乙烯醚分析方法的研究較多 (表2)，但有關(guān)農(nóng)作物及動(dòng)物產(chǎn)品中牛脂胺聚氧乙烯醚殘留分析方法的研究還比較缺乏；另一方面，雖然關(guān)于牛脂胺聚氧乙烯醚總濃度分析的報(bào)道較多，但針對(duì)其不同聚合度單體的分離檢測(cè)技術(shù)研究也較少。

綜上所述，無論是采用加速溶劑提取法還是超聲提取法，對(duì)土壤或沉積物樣品中牛脂胺聚氧乙烯醚的提取效果均不理想，回收率普遍偏低，這可能是因?yàn)榕Ｖ肪垩跻蚁┟言谕寥乐邪l(fā)生了較強(qiáng)的吸附和結(jié)合作用，其Freundlich 吸附常數(shù)大于10 000[48]，從而導(dǎo)致目標(biāo)物與土壤形成了較為穩(wěn)定的結(jié)合態(tài)，因而難以被常規(guī)溶劑提取。

4.2.2 其他檢測(cè)技術(shù) 由于牛脂胺聚氧乙烯醚沒有發(fā)色基團(tuán)，不能產(chǎn)生紫外吸收，因此，在早期，Schreuder 等[51]采用液相色譜-熒光分析(HPLC-FLD) 法測(cè)定目標(biāo)物，也有采用液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè) (HPLC-ELSD) 法測(cè)定目標(biāo)物[59]。由于該系列方法的液相色譜系統(tǒng)也采用C18等的反相色譜系統(tǒng)，無法有效將不同牛脂胺聚氧乙烯醚聚合單體進(jìn)行分離，且由于這兩種方法對(duì)樣品基質(zhì)干擾要求高，方法靈敏度較低，近年來已逐漸被LC-MS 技術(shù)所取代。總之，由于牛脂胺聚氧乙烯醚中聚合單體聚合度分布不同，最高聚合度可達(dá)到39，不同碳鏈最長(zhǎng)可達(dá)到18，因此其同分異構(gòu)體達(dá)上千種以上，這給牛脂胺聚氧乙烯醚的分離帶來了較大難度，因此如何實(shí)現(xiàn)不同聚合度牛脂胺聚氧乙烯醚同分異構(gòu)體的分離仍是未來研究的重點(diǎn)之一。

地圖因其內(nèi)容的特殊性，對(duì)印刷要求嚴(yán)格，在印刷時(shí)通常要針對(duì)具體內(nèi)容進(jìn)行分析，制訂印刷方案，包括以下幾方面的內(nèi)容：

5 牛脂胺聚氧乙烯醚的管控措施

針對(duì)牛脂胺聚氧乙烯醚的殘留，不同國(guó)家和地區(qū)均采取了相對(duì)比較嚴(yán)格的管控措施。如法國(guó)于2016 年已經(jīng)禁止使用含牛脂胺聚氧乙烯醚的草甘膦制劑[60]。德國(guó)推薦的其操作人員允許接觸水平 (AOEL)、急性中毒參考劑量 (ARfD) 和每日允許攝入量 (ADI) 均較低，僅為0.1 mg/kg·bw/d，但EFSA 認(rèn)為還需要進(jìn)一步研究確定[17]。歐盟于2021 年已將牛脂胺聚氧乙烯醚列入農(nóng)藥助劑負(fù)面清單，要求其成員國(guó)在2023 年3 月之前逐步淘汰該產(chǎn)品[22]。美國(guó)目前雖然尚未禁止在農(nóng)藥產(chǎn)品中使用牛脂胺聚氧乙烯醚，但規(guī)定其在除草劑、殺蟲劑和殺菌劑農(nóng)藥產(chǎn)品中的含量分別不能超過25%、10%和10%[20]。加拿大的管控措施與美國(guó)相近，規(guī)定草甘膦制劑中的牛脂胺聚氧乙烯醚含量不得超過20%[21]。

我國(guó)針對(duì)農(nóng)藥助劑的管理起步相對(duì)較晚，在工業(yè)和信息化部發(fā)布的化工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)——HGT 4576—2013《農(nóng)藥乳油中有害溶劑限量》中，僅僅規(guī)定了農(nóng)藥乳油中苯、甲苯、二甲苯、乙苯、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺和萘的限量[61]；我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥檢定所起草的《農(nóng)藥助劑禁限用名單》(征求意見稿) 中僅禁止使用壬基酚聚氧乙烯醚及壬基酚[62]。迄今為止，我國(guó)尚未對(duì)牛脂胺聚氧乙烯醚制定相應(yīng)的管控措施。

（2）CO2含量：前文已經(jīng)提到，碳酸鹽巖的溶蝕作用是徹底的，要使其徹底，就要使流動(dòng)的水不斷侵蝕，必須有足夠的CO2。CO2與水相互作用形成碳酸，才能將碳酸鹽巖溶解。

6 結(jié)論與展望

牛脂胺聚氧乙烯醚作為第一大類除草劑草甘膦中廣泛使用的農(nóng)藥助劑，適用范圍廣，且其毒性比活性成分草甘膦大，目前在農(nóng)藥制劑和環(huán)境樣品中均已被檢出，所建立的分析方法也主要集中在這兩類基質(zhì)中，目前美國(guó)和歐盟等均已對(duì)其制定了嚴(yán)格的管控措施，但我國(guó)尚未針對(duì)該助劑制定相應(yīng)的管控措施，因此，關(guān)于牛脂胺聚氧乙烯醚在我國(guó)的研究應(yīng)引起重視。華東理工大學(xué)已開展對(duì)其毒性的研究，但該助劑在我國(guó)環(huán)境與食品中的研究仍未見報(bào)道。復(fù)雜的化學(xué)結(jié)構(gòu)制約了牛脂胺聚氧乙烯醚分析方法的研究開發(fā)，因此亟須建立其不同聚合單體在不同基質(zhì)中的分析方法，同時(shí)開展環(huán)境與食品領(lǐng)域該物質(zhì)的相關(guān)基礎(chǔ)研究，以便為制定符合我國(guó)實(shí)際需求的牛脂胺聚氧乙烯醚管控措施提供科學(xué)依據(jù)。