徐 楊 寧 麗 尹航賢

（大連市友誼醫(yī)院，遼寧 大連 116001）

結(jié)核病是由結(jié)核桿菌引起的慢性傳染病，是我國重點控制的疾病類型，在我國的發(fā)病率較高，位于全球第2位。早發(fā)現(xiàn)、早治療是結(jié)核病控制的關(guān)鍵。當前臨床診斷結(jié)核病的相關(guān)技術(shù)都在不斷升級，為提高臨床診斷價值，為早期治療提供有效依據(jù)，還需要重視新技術(shù)的應(yīng)用[1]。外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗是以高靈敏度的酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)為檢驗措施，檢驗結(jié)核分歧桿菌感染情況的新技術(shù)。該技術(shù)為活動性結(jié)核的早期診斷提供了新的技術(shù)支持與檢驗方向，為研究外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗在活動性結(jié)核臨床檢驗方法的診斷價值[2-3]。本研究以我院檢驗科2018年5月至2019年5月收治的疑似結(jié)核病患者50例為研究對象進行試驗，詳細報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院檢驗科2018年5月至2019年5月收治的疑似結(jié)核病患者50例對研究對象，對患者進行試驗研究。將患者以隨機分組法分為試驗組與對照組。試驗組患者男性13例，女性12例，平均年齡為（43.80±5.30）歲，患者平均病程為7 d～3個月。對照組患者男性12例，女性13例，平均年齡為（44.50±6.10）歲，患者平均病程為7 d～3個月。試驗組患者中發(fā)熱待查的患者18例，肺部感染性病變患者6例，腹腔積液患者7例。對照組患者中發(fā)熱待查的患者15例，肺部感染性病變患者9例，腹腔積液患者6例。兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入與排除標準 納入標準：患者自愿參與本次試驗研究，了解試驗研究目的與內(nèi)容，簽署同意書；患者經(jīng)過臨床診斷確認為結(jié)核病；患者未感染其他傳染性疾病，不對試驗研究形成影響。排除標準：抗結(jié)核治療無效；非結(jié)核性疾??；具有認知障礙或精神疾病、家族遺傳病史。

1.3 方法 試驗組患者接受外周血結(jié)合感染T細胞斑點試驗，通過對患者外周靜脈采血的方式，采集患者血液5 mL，從患者血液中分離外周單個核細胞，并添加陽性細胞培養(yǎng)液、植物血凝素、分泌靶細胞抗原于微量板孔中，送入培養(yǎng)箱孵育2 h，于2 h后洗脫PBS，并進行顯色處理，通過放大計斑點樹木的方式，進行檢出率分析與判斷。其中，計數(shù)孔點數(shù)大于陰性對照2倍的為陽性，或計數(shù)孔點數(shù)多出陰性對照5個點的為陽性。對照組患者接受結(jié)核干擾素酶免檢驗，取新鮮采集肝素鈉抗凝血8 mL，放置6 h后加入刺激物，后于4 ℃冰箱內(nèi)放置過夜，隔天取出，在取出的培養(yǎng)物中置入發(fā)光底物液，對培養(yǎng)物進行光分析，在發(fā)光底物液置入后5 min時讀取培養(yǎng)物的發(fā)光強度，記錄數(shù)據(jù)。

1.4 觀察指標 通過對試驗組患者與對照組患者的試驗研究，收集試驗指標指數(shù)，對比兩組患者的敏感度、特異度、準確度、動脈血壓變異率（PPV）、NPV、LR+、LR-指標。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行分析。計量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗；計數(shù)資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗；P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

試驗組即以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗患者在檢驗敏感度上為87.9%，特異度為84.1%，PPV、NPV指標分別為73.8%、94.9%，準確度達84.2%，LR+為（6.10±0.31），LR-為（0.13±0.30）；對照組即以結(jié)核干擾素酶免試驗的患者在檢驗敏感度上為57.9%，特異度為57.3%，PPV、NPV指標分別為42.5%、74.9%，準確度達59.2%，LR+為（1.59±0.29），LR-為（0.68±2.31）。經(jīng)對比發(fā)現(xiàn)，試驗組檢驗指標明顯優(yōu)于對照組檢驗指標，且兩組指標間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

結(jié)核病作為慢性傳染病，具有傳染性，若患者未及時接受治療，將造成結(jié)核桿菌的耐藥性，難以治愈，并危及生命[4]。在結(jié)核病發(fā)病早期，采用不同的診斷方法得到的診斷效果也是不同的。為了提高臨床診斷的價值，需要在結(jié)核病的診斷措施中不斷優(yōu)化與完善[5]。以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗進行活動性結(jié)核的臨床診斷是一種新的技術(shù)，其通過在外周血標本中的檢測對機體感染結(jié)核桿菌后分泌干擾素的T淋巴細胞水平來判斷機體是否感染結(jié)核桿菌[6]。其技術(shù)原理如下：結(jié)核分歧桿菌在侵入并感染人體后，首先會被機體非特異度抗體的第2道防線中吞噬細胞吞噬，但吞噬細胞不能完全清除結(jié)核分歧桿菌，在吞噬細胞凋亡后將釋放出大量的特異度抗原，激發(fā)機體的特異度免疫，結(jié)核分歧桿菌特異度抗原刺激特異度免疫中的T細胞，造成T細胞致敏，同時激活并釋放大量的γ干擾素[7]。在臨床醫(yī)學(xué)診斷中，將結(jié)核抗原刺激下特異度分泌γ干擾素的T細胞為檢驗標志物，能夠形成對結(jié)核分歧桿菌感染的認識，具體是通過檢測外周血中受結(jié)核分歧桿菌特異度抗原刺激后分泌γ干擾素的T淋巴細胞水平判斷機體是否感染結(jié)核分歧桿菌[8]。

為分析外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗對活動性結(jié)核的臨床診斷價值，本文通過試驗研究的方式，對比外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗與結(jié)核干擾素酶免試驗，通過試驗的對比與分析發(fā)現(xiàn)，以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗進行試驗研究的患者在采集的數(shù)據(jù)上明顯由于干擾素酶免試驗的患者數(shù)據(jù)[9]。外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗在活動性結(jié)核的臨床診斷中具有較高的敏感度，特別是患者自身機體的免疫狀態(tài)對外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗形成影響較少，即使患者接種過卡介苗也不形成明顯的影響[10-11]。通過外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗?zāi)軌驒z驗患者的活動性肺結(jié)核、腹腔結(jié)核、免疫抑制結(jié)核等癥狀，在臨床檢驗上速度較快，效率較高，一般在檢驗后24 h即可得出結(jié)果，所以將外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗應(yīng)用于活動性結(jié)核的早期診斷中是具有較高的臨床診斷價值的，其能夠更早的發(fā)現(xiàn)患者的結(jié)核病情況[12]。

為進一步分析外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗在活動性結(jié)核的臨床診斷價值，從其優(yōu)劣勢中進行深入探討：①從外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗的優(yōu)點上來分析，其診斷的速度快，能夠在診斷后的24 h出診斷報告，便于臨床診斷研究與分析；其能夠檢測的結(jié)核病類型多，應(yīng)用較為廣泛，可以應(yīng)用于活動性肺結(jié)核、肺外結(jié)核、結(jié)核性漿膜炎、免疫抑制結(jié)核患者中，都能夠形成有效的診斷與分析報告；其臨床診斷的靈敏度較高，能夠?qū)Y(jié)核病患者的結(jié)核分歧桿菌狀態(tài)形成具體認識，具有較高的特異度，不受患者是否接種卡介苗的影響或環(huán)境分歧桿菌的影響，在診斷準確率上較高，且不受患者機體免疫狀態(tài)的影響；通過檢驗?zāi)軌蛐纬莎熜У脑u估，在患者接受結(jié)核病治療后，再次進行外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗，若患者T細胞斑點數(shù)目減少或呈陰性，這表示為患者接受的治療有實際效果，能夠為患者治療情況形成有效評價[13]。②外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗也具有一定的不足，由于該技術(shù)的產(chǎn)生不久，在技術(shù)流程上還相對繁瑣，技術(shù)應(yīng)用的成本較高，并且對于實驗室技術(shù)與操作水平的要求較高。如在試驗用的標本上，需要室溫保存與運輸血液樣本過程中都能夠保持溫度在18～25 ℃，不能進行冷凍或冷藏處理，且患者的血液樣品采集后8 h內(nèi)需要完成檢測工作，超時則不具有檢測價值；另外，當前以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗進行臨床試驗的數(shù)據(jù)還較為缺乏，難以形成有效的數(shù)據(jù)對比效果，在數(shù)據(jù)分析上缺少依據(jù)。所以在外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗的臨床應(yīng)用中還需要與其他檢測進行聯(lián)合檢測與判斷，臨床上以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗檢驗為陰性結(jié)果的也不能夠直接排除暴露或感染結(jié)核桿菌的可能性；再者，外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗還無法高質(zhì)量的鑒別結(jié)核病的活動性與潛伏性，當前并無統(tǒng)一的界值能夠用于潛伏結(jié)核感染與活動性肺結(jié)核中，所以存在一定的不確定性因素；最重要的是，外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗不能夠確定患者的病變部位，所以在檢驗的針對性上還不強，需要加以技術(shù)完善與改進[14-15]。

但不可忽視的是，結(jié)核病的預(yù)防對于結(jié)核病患者生活質(zhì)量的改善與身體功能的早期調(diào)節(jié)具有積極的意義。外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗在活動性結(jié)核的臨床診斷上具有一定價值，能夠在結(jié)核病患者早期發(fā)病周期內(nèi)準確的提供患者感染結(jié)核雙歧桿菌的依據(jù)，幫助患者積極的控制病情，以利于降低患者受結(jié)核病影響的概率，有效控制結(jié)核病患者病死率。外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗作為一種新的檢驗技術(shù)，在結(jié)核雙歧桿菌的檢測上具有良好檢驗優(yōu)勢，其應(yīng)用酶聯(lián)免疫學(xué)的技術(shù)基礎(chǔ)形成檢驗，在敏感度與特異度上較早期的PPD試驗都有所提高，在試驗檢測的效率上也更高，針對于早期結(jié)核病患者的診斷價值更高[16]。相關(guān)報道發(fā)現(xiàn)，在臨床癥狀較為不典型的結(jié)核病患者中，以PPD檢測診斷難以形成較好診斷效果時，通過外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗?zāi)軌驇椭_診結(jié)核病感染情況。這說明，外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗作為一種新的檢驗技術(shù)，其在結(jié)核病的檢驗上具有一定技術(shù)優(yōu)勢，應(yīng)用于活動性結(jié)核的早期診斷上能夠提高早期診斷的科學(xué)性，形成較高的臨床診斷價值[17]。

總的來說，以外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗對活動性結(jié)核進行臨床診斷，其具有技術(shù)優(yōu)勢，在試驗數(shù)據(jù)的準確性上較高，且試驗數(shù)據(jù)報告的出具較快。該試驗技術(shù)具有較強的靈敏度與特異度，形成了以傳統(tǒng)檢驗技術(shù)的明顯對比，能夠為結(jié)核病患者的早期診斷提供有力依據(jù)。盡管外周血結(jié)核感染T細胞斑點試驗具有流程繁瑣、成本較高等不足，但在活動性結(jié)核的臨床診斷中依舊是具有較高的診斷價值，其能夠提高對結(jié)核病患者早期診斷的效率，從而為患者及時治療，減輕患者病痛，提高治療質(zhì)量。