溫欣怡，鄒瀟瀟，羅永康，譚雨青*

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京 100083）

乳作為哺乳動(dòng)物用于哺育后代幼體的乳腺分泌物，其成分復(fù)雜且營(yíng)養(yǎng)豐富，較全面地涵蓋了糖類、蛋白、脂質(zhì)、無機(jī)鹽及微量元素等常見的生命維持所需營(yíng)養(yǎng)物，同時(shí)還可提供低聚糖、免疫球蛋白等重要的活性物質(zhì)。其中，占比3%～5%的乳脂肪是乳的重要組成成分，主要以乳脂球的形式存在于乳中。包裹乳脂球外表的膜結(jié)構(gòu)即為乳脂球膜（milk fat globule membrane，MFGM），其膜結(jié)構(gòu)共包括3 層，從內(nèi)到外分別為由極性脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成的單層膜結(jié)構(gòu)及來自頂端質(zhì)膜的脂雙層膜結(jié)構(gòu)[1-2]。單層膜結(jié)構(gòu)內(nèi)膜包裹著乳脂球的內(nèi)核脂滴，雙層膜的內(nèi)表面則附著有電子致密的蛋白質(zhì)[3-4]。

近年來，有關(guān)MFGM的成分研究越來越多，并且隨著分離、純化和分析技術(shù)逐漸發(fā)展，對(duì)于MFGM的成分有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。MFGM是由許多生物活性成分組成的，如蛋白質(zhì)、磷脂、膽固醇等[1,5]。其中磷脂、鞘磷脂、蛋白質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成分具有促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育[5-7]、調(diào)節(jié)機(jī)體代謝和免疫[1,8-10]、改善腸道功能等多種有益功能。MFGM不僅能提供包含膜結(jié)合蛋白在內(nèi)的多種蛋白質(zhì)[11]，還能提供包括磷脂在內(nèi)的生物膜組成成分[12]，除了有助于幼兒大腦發(fā)育外，在被其他人群攝入后可能還會(huì)發(fā)揮潛在的益智功效[13-14]。此外，由于現(xiàn)代的快節(jié)奏生活，常常使得人們難以及時(shí)休息調(diào)整，長(zhǎng)此以往形成慢性疲勞綜合癥，嚴(yán)重時(shí)可能引起生物調(diào)節(jié)紊亂等多種疾病，甚至導(dǎo)致“過勞死”[15-17]。目前，休息、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充和藥物治療等方法可以緩解機(jī)體的疲勞[18]。而天然來源的抗疲勞功能性成分由于毒副作用小、生物活性高及安全性高，受到了學(xué)者的廣泛關(guān)注和研究。

本研究分別以2 種不同的MFGM為原料，以BALB/c雄性小鼠作為動(dòng)物模型，分別設(shè)置處理組1（MFGM1）、處理組2（MFGM2）和空白組（生理鹽水），通過水迷宮實(shí)驗(yàn)、腦指數(shù)測(cè)定、力竭游泳實(shí)驗(yàn)、自由泳實(shí)驗(yàn)、血清生化指標(biāo)測(cè)定[19-21]、血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定[22-27]和能量?jī)?chǔ)備指標(biāo)測(cè)定[28]，比較不同種類MFGM對(duì)小鼠益智、抗疲勞及抗氧化的調(diào)節(jié)作用差異，以期為食源性活性成分新產(chǎn)品的開發(fā)提供新的思路參考，為研發(fā)MFGM相關(guān)的功能保健食品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

24 只7 周齡、健康的SPF級(jí)BALB/c雄性小鼠，體質(zhì)量18～22 g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)技術(shù)有限公司。動(dòng)物喂養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)嚴(yán)格按照《北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》執(zhí)行，并經(jīng)過北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部倫理委員會(huì)審核通過（批準(zhǔn)號(hào)：LA2021477）。

MFGM1 丹麥Arla公司；MFGM2 美國(guó)Hilmar公司。

普通維持飼料 北京科奧協(xié)力飼料有限公司；乳酸（lactic acid，LD）、血氨、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）測(cè)定試劑盒 南京建成生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

1056001水迷宮 北京眾實(shí)迪創(chuàng)科技發(fā)展有限責(zé)任公司；GL-21M高速冷凍離心機(jī) 湖南平凡科技有限公司；1-14非冷凍微離心機(jī) 德國(guó)Sigma Laborzentrifugen公司；NO.G560E旋渦混合器 美國(guó)Scientific Industries公司；SP0103A1911001多功能酶標(biāo)儀 上海閃普生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 小鼠分組及處理

將24 只健康SPF級(jí)BALB/c雄性小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后按體質(zhì)量隨機(jī)分為3 組，每組8 只。組別包括空白組（灌胃無菌生理鹽水）和2 個(gè)不同MFGM處理組（分別灌胃MFGM1和MFGM2，并命名為處理組1和處理組2）。MFGM灌胃液以無菌生理鹽水配制，質(zhì)量濃度為10 mg/mL。各組灌胃體積均為10 mL/kg[29-30]，即灌胃量為100 mg/kg，每日1 次經(jīng)口給予，連續(xù)干預(yù)18 周。在小鼠的飼養(yǎng)過程中，每3 d稱取小鼠體質(zhì)量并記錄。

1.3.2 MFGM對(duì)小鼠益智功能的影響

1.3.2.1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

Morris水迷宮是一個(gè)直徑120 cm的圓柱形水池。為便于觀察和統(tǒng)計(jì)，將迷宮池隨機(jī)劃分為4 個(gè)象限，在第1象限中放置一個(gè)圓柱型安全平臺(tái)，平臺(tái)高度為低于水面1 cm，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間平臺(tái)位置保持不變。在水迷宮上方安置一高清攝像機(jī)記錄小鼠的游泳情況，為確保儀器能準(zhǔn)確記錄小鼠的游泳情況，向水中加入20 g食用級(jí)黑色素。

實(shí)驗(yàn)前對(duì)小鼠進(jìn)行訓(xùn)練，依次從第1至第4象限將小鼠面向池壁輕放入水中，記錄其尋找并爬上平臺(tái)所需的時(shí)間（即逃避潛伏期）和游泳軌跡，規(guī)定最長(zhǎng)尋找時(shí)間為60 s，若60 s內(nèi)未找到安全平臺(tái)，則須用木棍將其引導(dǎo)至平臺(tái)上，停留10 s[31]。實(shí)驗(yàn)共訓(xùn)練5 d。訓(xùn)練結(jié)束后，進(jìn)行空間搜索實(shí)驗(yàn)。

空間搜索實(shí)驗(yàn)時(shí)將水迷宮中的安全平臺(tái)撤去，將小鼠從第3象限的同一入水點(diǎn)面向池壁放入水中，記錄小鼠在60 s內(nèi)穿越平臺(tái)總次數(shù)、目標(biāo)象限路程比和目標(biāo)象限時(shí)間比（即小鼠在原平臺(tái)所在象限的路程和時(shí)間占總路程和總時(shí)間的比率）。

1.3.2.2 腦指數(shù)測(cè)定

連續(xù)灌胃18 周后將小鼠處死，取出腦，用濾紙吸干表面血污，稱質(zhì)量并按下式計(jì)算腦指數(shù)[32]。

1.3.3 MFGM對(duì)小鼠抗疲勞功能的影響

通過力竭游泳實(shí)驗(yàn)、自由泳實(shí)驗(yàn)、血清生化指標(biāo)測(cè)定和能量?jī)?chǔ)備指標(biāo)測(cè)定，探究MFGM對(duì)BALB/c小鼠抗疲勞能力的調(diào)節(jié)作用。

1.3.3.1 力竭游泳實(shí)驗(yàn)

根據(jù)1.3.1節(jié)連續(xù)灌胃6 周和14 周后進(jìn)行力竭游泳實(shí)驗(yàn)。灌胃結(jié)束30 min后，在小鼠尾巴根部綁上質(zhì)量占體質(zhì)量7%的鉛塊，將小鼠放入游泳池中，游泳池水深30 cm以上，水溫為（25.0±1.0）℃。記錄各小鼠游泳至力竭的時(shí)間，小鼠力竭的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為鼻尖沉入水中連續(xù)7 s不能上浮[33]。

1.3.3.2 自由泳實(shí)驗(yàn)

根據(jù)1.3.1節(jié)連續(xù)灌胃16 周后進(jìn)行自由泳實(shí)驗(yàn)。灌胃結(jié)束30 min后，將小鼠放入游泳池中，游泳池水深30 cm以上，水溫為（25.0±1.0）℃。使小鼠不負(fù)重游泳60 min，取出擦干后立即頜下取血。

1.3.3.3 能量?jī)?chǔ)備指標(biāo)測(cè)定

在16 周自由泳實(shí)驗(yàn)以及18 周（禁食8 h）處死后取血，血樣在4 ℃靜置1 h后1 180×g離心10 min取血清，然后按照試劑盒說明書中的步驟，測(cè)定血清中的血糖含量。

1.3.3.4 血清生化指標(biāo)測(cè)定

在16 周自由泳實(shí)驗(yàn)并頜下取血后，血樣在4 ℃靜置1 h后1 180×g離心10 min取血清。根據(jù)各試劑盒說明書測(cè)定血清中LD、血氨、LDH和SOD的含量。

1.3.4 MFGM對(duì)小鼠抗氧化功能的影響

根據(jù)1.3.1節(jié)連續(xù)灌胃18 周后，禁食8 h，摘眼球取血。血樣在4 ℃靜置1 h后1 180×g離心10 min取血清，然后按照各試劑盒說明書中的步驟測(cè)定血清中CAT、GSH-Px、SOD活性及MDA含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 25.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。連續(xù)變量數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用單因素方差分析和Tukey法進(jìn)行各組間顯著性分析，P＜0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

體質(zhì)量與動(dòng)物的身體狀況息息相關(guān)，體質(zhì)量正常穩(wěn)定的增長(zhǎng)表明該受試物對(duì)機(jī)體沒有毒副作用，同時(shí)，體質(zhì)量穩(wěn)定且保持在一定范圍，可以保證動(dòng)物機(jī)體處于正常情況，避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成不必要的影響。由圖1可知，BALB/c小鼠在灌胃MFGM過程中，開始灌胃第1天時(shí)，各組小鼠體質(zhì)量之間無顯著差異，連續(xù)灌胃18 周后，各組的體質(zhì)量差值仍無顯著差異。說明灌胃MFGM不會(huì)導(dǎo)致小鼠體質(zhì)量的異常變化。

圖1 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響Fig.1 Effect of MFGM on the body mass of mice

2.2 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠益智功能的影響

2.2.1 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)定位航行和空間搜索的影響

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)是重要的評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)認(rèn)知能力的動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，在空間搜索實(shí)驗(yàn)中，記錄60 s內(nèi)平臺(tái)在1 min內(nèi)的被穿越次數(shù)、其所在象限的時(shí)間比及路程比，只數(shù)越多、次數(shù)越多及比值越大表明學(xué)習(xí)能力及空間記憶能力越強(qiáng)[34]。由表1可知，MFGM干預(yù)13 周后，灌胃2 種MFGM小鼠的平臺(tái)穿越總次數(shù)、目標(biāo)象限路程比和時(shí)間比均有增加。說明灌胃MFGM的小鼠具有良好的學(xué)習(xí)記憶能力，MFGM能夠改善小鼠的空間記憶和學(xué)習(xí)能力，但是2 種不同的MFGM之間沒有顯著性差異。

表1 各組小鼠穿越平臺(tái)總次數(shù)、目標(biāo)象限路程比和目標(biāo)象限時(shí)間比Table 1 Number of crossing over the platform, distance ratio of target quadrant and time ratio of target quadrant in each group of mice

由圖2可知：空白組小鼠入水后無法找到平臺(tái)所在象限（第1象限），且游泳路徑一直在水域邊緣，表明其學(xué)習(xí)記憶能力較差；而處理組1和處理組2小鼠入水后，回憶起了平臺(tái)所在地點(diǎn)，雖然平臺(tái)已經(jīng)撤去，但仍一直在平臺(tái)原有位置和所在象限（第1象限）尋找，表明其具有良好的學(xué)習(xí)記憶能力。說明MFGM能夠改善小鼠的空間記憶和學(xué)習(xí)能力。

圖2 空間搜索實(shí)驗(yàn)中小鼠典型路線圖Fig.2 Typical road maps of mice in the spatial search test

2.2.2 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠腦指數(shù)的影響

腦或神經(jīng)系統(tǒng)的大小和動(dòng)物學(xué)習(xí)認(rèn)知能力相關(guān)，腦指數(shù)的大小一定程度上反映動(dòng)物智力的大小[35]。由圖3可知，MFGM干預(yù)18 周后，2 種MFGM處理組與空白組的腦指數(shù)都出現(xiàn)顯著差異，其中處理組1和處理組2的腦指數(shù)沒有顯著性差異。有研究[35-36]表明，在一些病理情況下，如衰老、亞慢性鋁暴露會(huì)導(dǎo)致腦指數(shù)甚至海馬體指數(shù)顯著降低，大腦中相關(guān)蛋白表達(dá)受到影響，進(jìn)而引起動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)損傷，在本研究中，2 種不同的MFGM都能使BALB/c小鼠腦指數(shù)增大，結(jié)果可能預(yù)示著MFGM在非藥物性治療腦部相關(guān)疾病方面有著積極作用。2 種不同MFGM處理后小鼠的腦指數(shù)無顯著性差異，MFGM種類及生產(chǎn)加工方法是否會(huì)對(duì)其造成影響需進(jìn)一步的研究證明。

圖3 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠腦指數(shù)的影響Fig.3 Effects of MFGM on brain indices of mice

2.3 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠抗疲勞功能的影響

2.3.1 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響

在受試物的干預(yù)下，力竭游泳時(shí)間的延長(zhǎng)能夠直觀反映該物質(zhì)的抗疲勞效果[37]。由圖4可知，隨著小鼠的生長(zhǎng)，所有小組的力竭游泳時(shí)間都有一定的延長(zhǎng)，而在灌胃第6周時(shí)，處理組2的力竭游泳時(shí)間與空白組差異顯著（P＜0.05），處理組1小鼠的力竭游泳時(shí)間有所延長(zhǎng)，但是與空白組無顯著差異。灌胃第14周時(shí)，各處理組小鼠的力竭游泳時(shí)間均與空白組無顯著差異，這可能和干預(yù)用的MFGM劑量較低有關(guān)。

圖4 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠力竭游泳時(shí)間的影響Fig.4 Effects of MFGM on exhaustive swimming time of mice

2.3.2 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠能量?jī)?chǔ)備的影響

在疲勞的產(chǎn)生機(jī)制中，疲勞形成原因包含有能量供給物質(zhì)的消耗用盡，因此相關(guān)物質(zhì)的及時(shí)補(bǔ)充攝入被認(rèn)為是疲勞緩解舉措之一[38]。其中，血糖是能清晰反映機(jī)體內(nèi)能量供給狀況的重要指標(biāo)之一，在對(duì)應(yīng)的合適范圍內(nèi)，其水平的升高表明腺嘌呤核苷三磷酸的產(chǎn)出速率提升，進(jìn)而利于機(jī)體抗疲勞[28]。

由圖5可知：在第16周時(shí)，處理組1和處理組2的血糖含量比空白組有所提高，但與空白組均無顯著差異，其中處理組2的提升略高于處理組1；在第18周時(shí)，處理組2血糖含量與空白組差異高度顯著（P＜0.001），處理組1血糖含量也有所升高，但與空白組無顯著差異，且處理組2血糖含量比處理組1顯著提高（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)表明MFGM能夠顯著提升小鼠的能量?jī)?chǔ)備，提高機(jī)體的抗疲勞能力?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)支鏈氨基酸（包括纈氨酸、亮氨酸及異亮氨酸）的補(bǔ)充對(duì)于運(yùn)動(dòng)所需儲(chǔ)備能量的提供、肌肉中蛋白的合成、運(yùn)動(dòng)性疲勞的延遲及消除等具有積極的調(diào)節(jié)作用[39]。由此可推測(cè)，MFGM可能通過提供較為豐富的支鏈氨基酸以改變小鼠運(yùn)動(dòng)時(shí)體內(nèi)（尤其是血清）的支鏈氨基酸含量，進(jìn)而改變支鏈氨基酸的代謝狀況以緩解疲勞。研究結(jié)果表明，處理組2血糖含量的提高顯著優(yōu)于處理組1，即MFGM2通過提高能量?jī)?chǔ)備改善機(jī)體抗疲勞能力的效果優(yōu)于MFGM1，這可能和不同MFGM中含有的不同磷脂[40]、活性蛋白[41-43]等微量成分的種類與含量有關(guān)。

圖5 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠血糖含量的影響Fig.5 Effects of MFGM on blood glucose levels of mice

2.3.3 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)代謝產(chǎn)物的影響

在劇烈運(yùn)動(dòng)下，機(jī)體有氧代謝能力逐漸達(dá)到極限，此時(shí)機(jī)體葡萄糖的供能方式會(huì)由有氧氧化轉(zhuǎn)化為無氧酵解，而LD是后者的最終產(chǎn)物[41-43]。LD的積累會(huì)導(dǎo)致肌肉組織pH值下降，內(nèi)環(huán)境變化引起各類能量代謝酶的活力受到抑制，進(jìn)而引起疲勞[44-45]。而若運(yùn)動(dòng)過程中糖原等物質(zhì)不能得到及時(shí)補(bǔ)充，蛋白質(zhì)和氨基酸則會(huì)被消耗降解，產(chǎn)生大量氨進(jìn)入血液，此時(shí)檸檬酸脫氫酶等代謝酶的活力會(huì)受到抑制，影響機(jī)體正常的能量代謝，從而引起疲勞[46-47]。

LDH是LD代謝的關(guān)鍵酶，正常情況下存在于肌肉組織中。機(jī)體內(nèi)LD正常的代謝途徑為：經(jīng)尿液排出體外；經(jīng)過糖異生途徑轉(zhuǎn)化為葡萄糖；在LDH作用下，LD被轉(zhuǎn)化為丙酮酸，經(jīng)過三羧酸循環(huán)供能。但是，長(zhǎng)時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)會(huì)破壞肌肉細(xì)胞的通透性，致使LDH進(jìn)入血液中，導(dǎo)致血清LDH含量上升[48]。血清中LDH的含量能夠表明運(yùn)動(dòng)過程中肌肉細(xì)胞的損傷程度。

由圖6可知，處理組1和處理組2的血清LD含量與空白組相比均顯著降低，其中處理組2（P＜0.001）的改善效果顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.01），但處理組2與處理組1間無顯著差異；相比于空白組，處理組1和處理組2血氨含量均顯著降低，其中處理組2（P＜0.000 1）的改善效果顯著優(yōu)于處理組1（P＜0.01），但處理組2與處理組1間無顯著差異。這可能是因?yàn)镸FGM的干預(yù)提高了小鼠糖原的儲(chǔ)備，此時(shí)機(jī)體有氧代謝能力提升，LD的形成量減少，且相同運(yùn)動(dòng)量下蛋白質(zhì)和氨基酸消耗降解量少，即產(chǎn)生的氨也隨之減少，最終達(dá)到緩解劇烈運(yùn)動(dòng)下疲勞的效果。

圖6 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)代謝產(chǎn)物的影響Fig.6 Effects of MFGM on exercise-induced metabolites levels of mice

與空白組相比，處理組1和處理組2血清LDH含量均顯著降低，其中處理組1（P＜0.001）的改善效果較處理組2（P＜0.05）好，但處理組1與處理組2間無顯著差異。說明MFGM干預(yù)能夠緩解劇烈運(yùn)動(dòng)中的肌肉細(xì)胞損傷，提高機(jī)體的抗疲勞能力，這可能是MFGM的干預(yù)提高了小鼠糖原的儲(chǔ)備，此時(shí)機(jī)體有氧代謝能力提升，LD、血氨和LDH等代謝廢物的形成量減少，最終使得劇烈運(yùn)動(dòng)下的疲勞程度得到緩解。

2.4 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠抗氧化功能的影響

疲勞發(fā)生機(jī)制中，自由基理論受到學(xué)者們的廣泛關(guān)注和研究。自由基具有極強(qiáng)的氧化能力，主要分為活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）和脂質(zhì)自由基。在正常的機(jī)體內(nèi)，自由基會(huì)被包括抗氧化酶在內(nèi)的氧化防御體系清滅，進(jìn)而維持動(dòng)態(tài)平衡。當(dāng)失衡時(shí)，自由基會(huì)破壞細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等大分子，損壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)而引起疲勞[49]。抗氧化酶可以清除自由基，緩解機(jī)體的疲勞程度。如SOD可以催化ROS生成H2O2和O2，而GSH-Px可以進(jìn)一步催化H2O2變?yōu)镠2O和O2。因而，此類抗氧化酶的活力可以較好地用于表征生物體內(nèi)的抗氧化能力。此外，機(jī)體內(nèi)活性氧的大量積累會(huì)加劇肝臟和肌肉中的脂質(zhì)過氧化進(jìn)程，如MDA這樣活力較高的脂質(zhì)降解產(chǎn)物還能進(jìn)一步與蛋白反應(yīng)，進(jìn)而干擾組織正常結(jié)構(gòu)及功能[50]，因此其含量可較好地間接反映機(jī)體內(nèi)氧化受損狀況。

由圖7可知，在第16周自由泳后取血清測(cè)定SOD的活力，發(fā)現(xiàn)相比空白組，處理組1 SOD的活力提升10.94%（P＜0.000 1），處理組2 SOD的活力略有提升，但無顯著差異。其中處理組1的改善效果顯著優(yōu)于處理組2（P＜0.01）。連續(xù)灌胃18 周后，空腹8 h處死取血，各處理組和空白組血清中SOD活力均無顯著差異；處理組2 CAT活力相比空白組提升30.25%，但無顯著差異；處理組1和處理組2的GSH-Px活力都有極顯著提升（P＜0.01），相比空白組分別提升19.34%和26.56%；2 種MFGM均導(dǎo)致MDA含量的極顯著下降（P＜0.01），處理組1和處理組2相比空白組分別降低54.72%和54.74%，空白組小鼠血清MDA最高極可能意味著最高強(qiáng)度的機(jī)體氧化損傷。

圖7 MFGM干預(yù)對(duì)小鼠抗氧化酶活力及MDA含量的影響Fig.7 Effects of MFGM on antioxidant enzyme activities and MDA levels of mice

盡管疲勞是一個(gè)涉及多類組織的復(fù)雜生化過程，但基于自由基理論出發(fā)的許多抗氧化物質(zhì)已被證明具有抗疲勞功效，包括食源性多酚、蛋白酶解物（活性肽及氨基酸類）、多糖、維生素類、皂苷類等[51]。同樣，已有研究發(fā)現(xiàn)MFGM可通過加強(qiáng)小鼠體內(nèi)SOD活力、降低組織中MDA含量并改善線粒體功能以減輕高脂飲食誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性[52]。綜上所述，MFGM很可能通過提升機(jī)體總抗氧化力來緩解小鼠疲勞，包括抗氧化酶活力的增強(qiáng)及生物膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的抑制作用。

3 結(jié) 論

本研究比較了2 種不同的MFGM對(duì)小鼠益智、抗疲勞及抗氧化功能的影響。結(jié)果表明，MFGM1增強(qiáng)小鼠學(xué)習(xí)認(rèn)知及空間記憶能力的功能優(yōu)于MFGM2，MFGM1處理組的小鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)象限總路程比MFGM2處理組小鼠多出72.21%，且目標(biāo)象限總時(shí)間比多出57.06%；而MFGM2提高機(jī)體抗疲勞能力的功能優(yōu)于MFGM1，MFGM2處理的小鼠力竭游泳時(shí)間、血糖含量、血清LD含量、血氨含量等多個(gè)指標(biāo)改善程度均顯著優(yōu)于MFGM1。

本研究結(jié)果表明MFGM具有一定的益智、抗疲勞和抗氧化作用，MFGM的制備方法和具體成分可能會(huì)對(duì)其有益作用造成影響，研究結(jié)果能為MFGM未來的研究指出方向，有助于MFGM的產(chǎn)業(yè)化實(shí)際應(yīng)用。