馬慧娟，牛鵬飛，肖 云，朱成晶

（江蘇省生產(chǎn)力促進(jìn)中心（江蘇省理化測(cè)試中心），江蘇 南京 210042）

0 引言

二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室是基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室，在該安全級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室操作的微生物不會(huì)對(duì)健康成人、動(dòng)物和環(huán)境造成嚴(yán)重危害。為做好安全管理，應(yīng)對(duì)二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是指在風(fēng)險(xiǎn)事故發(fā)生之前，運(yùn)用各種方法系統(tǒng)地、連續(xù)地認(rèn)識(shí)所面臨的各種風(fēng)險(xiǎn)以及分析風(fēng)險(xiǎn)事故發(fā)生的潛在原因。GB 19489—2008 就對(duì)實(shí)驗(yàn)室需要建立相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、危險(xiǎn)識(shí)別等措施進(jìn)行規(guī)定[1]，雖然國(guó)家在生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估管理方面的有關(guān)法律、法規(guī)和技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)很多，但是實(shí)驗(yàn)室管理人員或者實(shí)驗(yàn)室使用人員中真正掌握和了解這些資料的卻很少。目前我國(guó)二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)立單位內(nèi)仍缺乏相關(guān)的安全管理人員對(duì)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別，開(kāi)展區(qū)域生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的更少，醫(yī)療機(jī)構(gòu)、科研院所、高校檢測(cè)機(jī)構(gòu)中的工作或管理人員，對(duì)于實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的相應(yīng)經(jīng)歷和經(jīng)驗(yàn)十分有限，很大程度上難以完成機(jī)構(gòu)風(fēng)險(xiǎn)排查這項(xiàng)工作[2]。針對(duì)工作人員在實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估或風(fēng)險(xiǎn)排查實(shí)際過(guò)程中存在的問(wèn)題和困難，本文通過(guò)收集和整理生物安全領(lǐng)域的相關(guān)法律法規(guī)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)以及相關(guān)技術(shù)規(guī)范，對(duì)國(guó)內(nèi)外有風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估經(jīng)歷和經(jīng)驗(yàn)的機(jī)構(gòu)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估內(nèi)容進(jìn)行總結(jié)，初步建立了一套標(biāo)準(zhǔn)化的生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估體系，對(duì)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)立單位開(kāi)展生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作有重要的參考意義，同時(shí)也便于設(shè)立病原微生物實(shí)驗(yàn)室的單位根據(jù)需要風(fēng)險(xiǎn)排查的幾個(gè)方面進(jìn)行自查，以便提高自身的生物安全管理水平。

根據(jù)國(guó)家對(duì)二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室的法律、規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)要求，本文一共設(shè)置了9 個(gè)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方面的相關(guān)指標(biāo)，包括組織管理體系建立和實(shí)施、人員管理、實(shí)驗(yàn)室備案、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和設(shè)施設(shè)備、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)管理、菌（毒）種和生物樣本管理、實(shí)驗(yàn)廢棄物處置、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、應(yīng)急預(yù)案和應(yīng)急設(shè)施。

1 組織管理體系建立和實(shí)施

二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)規(guī)范合理是實(shí)驗(yàn)室安全的基礎(chǔ)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室的防護(hù)設(shè)備的配置也要符合足量的要求，生物安全管理體系的建立是否完善適用也對(duì)實(shí)驗(yàn)室的安全管理起到了重要的作用。生物安全體系文件主要包括管理手冊(cè)、程序文件、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和各種操作記錄，在組織管理排查中，應(yīng)關(guān)注以下幾點(diǎn)：一是單位是否成立生物安全委員會(huì)并發(fā)文通告；二是單位法定代表人或分管領(lǐng)導(dǎo)是否為生物安全委員會(huì)負(fù)責(zé)人；三是生物安全委員會(huì)人員配備（應(yīng)包括所有相關(guān)科所負(fù)責(zé)人）是否合理；四是單位是否落實(shí)生物安全具體責(zé)任部門(mén)和管理責(zé)任人；五是單位是否建立生物安全管理體系；六是生物安全管理體系是否包括生物安全管理手冊(cè)、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書(shū)（操作規(guī)程）和快速閱讀的實(shí)驗(yàn)室安全手冊(cè)、各類(lèi)記錄表格4 個(gè)層次；七是生物安全管理體系管理要素是否完善，程序文件和作業(yè)指導(dǎo)書(shū)是否滿足實(shí)際工作需要。

2 人員管理

病原微生物檢測(cè)的檢測(cè)過(guò)程、結(jié)果判斷幾乎全部是人為操作，對(duì)檢測(cè)人員的人員素質(zhì)要求很高，在日常標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行和檢測(cè)操作過(guò)程等方面，人員在理論知識(shí)方面缺乏和操作經(jīng)驗(yàn)方面的不足，都會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果。微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員在日常管理中，一是要定期做好對(duì)人員的監(jiān)督，對(duì)于實(shí)驗(yàn)室中的檢測(cè)指標(biāo)，應(yīng)分新人和舊人對(duì)指標(biāo)檢測(cè)的全過(guò)程，如：標(biāo)準(zhǔn)的理解、檢測(cè)過(guò)程、結(jié)果判斷、原始記錄的書(shū)寫(xiě)等進(jìn)行監(jiān)督，如發(fā)現(xiàn)有掌握不足和不準(zhǔn)確的地方應(yīng)及時(shí)采取糾正措施；二是要定期做好人員的系統(tǒng)培訓(xùn)，每年年初應(yīng)制定實(shí)驗(yàn)室人員的內(nèi)部培訓(xùn)和外部培訓(xùn)計(jì)劃并按計(jì)劃實(shí)施，標(biāo)準(zhǔn)體系和生物安全管理體系隨著時(shí)間的變化在不斷完善，如果一直沿襲傳統(tǒng)的檢測(cè)或運(yùn)行方式，就難以滿足實(shí)際的需求，甚至發(fā)生嚴(yán)重的質(zhì)量事故，給實(shí)驗(yàn)室整體工作帶來(lái)極大危害；三是要每年做好人員崗位符合性評(píng)價(jià)，應(yīng)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員對(duì)應(yīng)所在的崗位職責(zé)和所從事的工作內(nèi)容進(jìn)行符合性評(píng)價(jià)，一旦發(fā)現(xiàn)人員不能勝任，應(yīng)及時(shí)調(diào)整工作崗位。

在人員管理排查中，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注：一是各類(lèi)記錄信息是否可追溯；二是法定代表人、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、關(guān)鍵管理崗位代理人、生物安全監(jiān)督員、檢驗(yàn)人員和維保人員等職責(zé)是否明確；三是檢驗(yàn)人員數(shù)量是否滿足開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的需要；四是高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)是否做到2 人及2 人以上同時(shí)操作；五是對(duì)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室操作的檢驗(yàn)人員是否經(jīng)授權(quán)上崗或?qū)徟?；六是檢驗(yàn)人員是否有生物安全上崗證；七是壓力蒸汽滅菌器操作人員（必要時(shí)）等是否具有專(zhuān)業(yè)上崗證；八是單位或科所是否每年組織相關(guān)人員（采樣、檢驗(yàn)、維保、實(shí)習(xí)、進(jìn)修人員等）進(jìn)行生物安全培訓(xùn)；九是是否建立實(shí)驗(yàn)人員（包括檢驗(yàn)人員、洗消人員、廢棄物處置人員以及其他維保人員等）健康檔案（包括與崗位相關(guān)的體檢項(xiàng)目、本底血清或特定病原的免疫功能相關(guān)記錄、必要的免疫接種資料等）并進(jìn)行健康監(jiān)護(hù)（定期體檢、開(kāi)展免疫接種等）；十是管理人員和檢驗(yàn)人員是否簽訂了安全承諾書(shū)或安全責(zé)任書(shū)；十一是檢測(cè)人員是否簽署必要的知情同意書(shū)。

3 實(shí)驗(yàn)室備案

《中華人民共和國(guó)生物安全法》第五章第四十四條規(guī)定：“設(shè)立病原微生物實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)依法取得批準(zhǔn)或者進(jìn)行備案”。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室是否在相應(yīng)屬地的衛(wèi)健委備案進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查：一是生物安全實(shí)驗(yàn)室是否按照不同區(qū)域（核心區(qū)或準(zhǔn)備區(qū)等）、不同級(jí)別（一至四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室）、不同功能（病原微生物實(shí)驗(yàn)室或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室）如實(shí)進(jìn)行備案；二是法定代表人、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、生物安全負(fù)責(zé)人、檢驗(yàn)人員、安全人員、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)（新增病原微生物檢測(cè)項(xiàng)目）、生物安全設(shè)施設(shè)備新增或計(jì)量等相關(guān)信息變化時(shí)是否在一個(gè)月內(nèi)完成備案更新；三是高致病性實(shí)驗(yàn)活動(dòng)是否每半年及時(shí)上報(bào)。

4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境和設(shè)施設(shè)備

二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)應(yīng)符合GB 19489 的規(guī)定，實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置應(yīng)符合無(wú)回路的原則，同時(shí)人流物流分開(kāi)，確保在時(shí)間和空間上有效隔離各種日常工作和檢測(cè)活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng)過(guò)濾系統(tǒng)應(yīng)符合恒溫恒濕要求，且實(shí)驗(yàn)室內(nèi)空氣應(yīng)經(jīng)過(guò)初、中、高效過(guò)濾器的過(guò)濾以符合實(shí)驗(yàn)室內(nèi)塵埃粒子、沉降菌等的要求。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度應(yīng)符合18～26 ℃，濕度符合30%～70%，應(yīng)定期進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)核心工作區(qū)沉降菌的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)通風(fēng)應(yīng)符合遠(yuǎn)端送風(fēng)、近端回風(fēng)的設(shè)計(jì)要求，每小時(shí)的換氣次數(shù)應(yīng)達(dá)到8～10 次，實(shí)驗(yàn)室核心工作區(qū)域相對(duì)于外圍區(qū)域要有-5～-10 Pa 的靜壓差。人流與物流要分開(kāi)，并且人流和物流要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的工作需要合理布局，人流與物流的方向應(yīng)為從潔凈度高的區(qū)域流向潔凈度低的區(qū)域[3]。在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和設(shè)施設(shè)備排查中，應(yīng)做到幾點(diǎn)：一是排查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置、設(shè)計(jì)和布局是否合理；二是實(shí)驗(yàn)室的主入口是否設(shè)置門(mén)禁控制設(shè)施并授權(quán)進(jìn)入；三是是否配備與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)的生物安全柜、壓力滅菌器及個(gè)人防護(hù)裝備等設(shè)施；四是實(shí)驗(yàn)區(qū)域入口及內(nèi)部各實(shí)驗(yàn)室門(mén)口是否張貼正確的生物危害警告標(biāo)識(shí)或?qū)Ｓ脴?biāo)識(shí)；五是生物安全設(shè)施設(shè)備是否按照要求進(jìn)行檢定或校準(zhǔn)，對(duì)檢定或校準(zhǔn)結(jié)果是否進(jìn)行適用性核查。

5 實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)管理

對(duì)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)管理進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，應(yīng)從以下幾個(gè)方面進(jìn)行：一是從事（高致病性）病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)是否按照規(guī)定要求經(jīng)過(guò)審批；二是實(shí)驗(yàn)活動(dòng)是否在與其防護(hù)級(jí)別相符的生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)開(kāi)展（具體按照《人間傳染的病原微生物名錄》規(guī)定執(zhí)行）；三是實(shí)驗(yàn)活動(dòng)是否嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程（作業(yè)指導(dǎo)書(shū)）等要求操作；四是是否在同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)只同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)；五是單位是否制定年度生物安全工作計(jì)劃；六是是否定期開(kāi)展生物安全內(nèi)部檢查，對(duì)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題是否及時(shí)整改并記錄。

6 菌毒種和生物樣本管理

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)菌（毒）種和生物樣本的管理是實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的重要內(nèi)容，應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)范要求進(jìn)行安全管理，在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，應(yīng)做到以下幾點(diǎn)：一是實(shí)驗(yàn)室是否建立菌（毒）種目錄；二是菌（毒）種是否做到雙人雙鎖保管，菌（毒）種和生物樣本是否做到臺(tái)賬和物品數(shù)量一致，致病性菌（毒）種和陽(yáng)性生物樣本是否做到雙人雙鎖；三是菌（毒）種和陽(yáng)性生物樣本的使用、移交、銷(xiāo)毀等是否經(jīng)過(guò)審批；四是是否具備菌（毒）種及陽(yáng)性生物樣本適宜和安全的保存區(qū)域和設(shè)備，是否具有相應(yīng)的安保措施；五是高致病性菌（毒）種和陽(yáng)性生物樣本轉(zhuǎn)運(yùn)是否辦理《準(zhǔn)運(yùn)證》，《準(zhǔn)運(yùn)證》是否與實(shí)際轉(zhuǎn)運(yùn)的微生物項(xiàng)目一致并在有效期內(nèi)，轉(zhuǎn)運(yùn)包裝是否符合要求（具體按照《人間傳染的病原微生物名錄》規(guī)定執(zhí)行）。

7 實(shí)驗(yàn)廢棄物處置

實(shí)驗(yàn)室廢棄物處置要根據(jù)是否是醫(yī)療廢棄物交由專(zhuān)門(mén)的廢棄物公司進(jìn)行處理，在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，應(yīng)從以下幾個(gè)方面進(jìn)行：一是根據(jù)病原微生物種類(lèi)、污染的對(duì)象和污染程度是否選擇適宜的消毒和滅菌方法并記錄；二是對(duì)消毒和滅菌效果是否進(jìn)行定期監(jiān)測(cè)和記錄；三是病原體的培養(yǎng)基、陽(yáng)性生物樣本和菌（毒）種保存液等高危實(shí)驗(yàn)廢棄物在移出實(shí)驗(yàn)室前是否就地進(jìn)行消毒或滅菌；四是危險(xiǎn)廢棄物的暫存區(qū)位置是否合理，是否有明顯的警示標(biāo)識(shí)和相關(guān)安保措施防止廢棄物的流失、泄露或擴(kuò)散等；五是危險(xiǎn)廢棄物的暫存區(qū)是否根據(jù)不同危險(xiǎn)廢棄物的性質(zhì)和危險(xiǎn)性（感染性、損傷性、病理性、化學(xué)性、藥物性）進(jìn)行分類(lèi)包裝、堆放、處置和標(biāo)識(shí)；六是單位和實(shí)驗(yàn)室是否由專(zhuān)人處理廢棄物，人員是否經(jīng)過(guò)培訓(xùn)并配備適當(dāng)?shù)摹⒆懔康膫€(gè)體防護(hù)裝備；七是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)危險(xiǎn)廢棄物的轉(zhuǎn)運(yùn)是否有固定的轉(zhuǎn)運(yùn)路線，廢棄物的轉(zhuǎn)載是否超過(guò)規(guī)定容量；八是銳器是否直接棄置于耐扎的容器內(nèi)；九是廢棄物的最終處置是否交由有資質(zhì)的單位集中處置；十是內(nèi)部和外部轉(zhuǎn)運(yùn)交接是否均有可追溯的記錄，記錄保存期限是否不少于3 年（特殊規(guī)定除外）；十一是廢棄物的暫時(shí)貯存設(shè)施是否定期進(jìn)行消毒和清潔。

8 實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室要對(duì)自身開(kāi)展的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)進(jìn)行生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，要做到：一是在開(kāi)展新的病原微生物項(xiàng)目或?qū)嶒?yàn)活動(dòng)（包括檢測(cè)、診斷、教學(xué)、研究）前是否進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并有記錄；二是對(duì)發(fā)現(xiàn)的風(fēng)險(xiǎn)是否及時(shí)排除和控制；三是當(dāng)相關(guān)政策、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)更新或發(fā)生生物安全事件時(shí)，是否重新進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；四是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告是否經(jīng)法定代表人批準(zhǔn)；五是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告是否包括編制人員、編制依據(jù)、編制日期、評(píng)估結(jié)論等必要的信息；六是是否定期審查風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告。

9 應(yīng)急預(yù)案和應(yīng)急設(shè)施

實(shí)驗(yàn)室建立生物安全應(yīng)急預(yù)案并開(kāi)展應(yīng)急演練，在進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排查時(shí)，應(yīng)對(duì)以下幾個(gè)方面進(jìn)行：一是是否建立了單位層面的應(yīng)急預(yù)案（包括組織、事故報(bào)告和處理、記錄要求等）；二是實(shí)驗(yàn)室是否有針對(duì)可能發(fā)生的各類(lèi)意外事件（針刺、病原微生物泄露等）處置的技術(shù)方案；三是實(shí)驗(yàn)是否配備了可正常使用的洗眼器（BSL-2）、緊急噴淋裝置（涉及刺激性或腐蝕性物質(zhì)的操作且風(fēng)險(xiǎn)較大時(shí)）、滅火器等應(yīng)急設(shè)施和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的有效的應(yīng)急物資（例如碘伏、創(chuàng)可貼、個(gè)人防護(hù)裝備等）；四是單位是否明確定點(diǎn)救治醫(yī)院；五是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)注的應(yīng)急撤離路線是否清晰；六是單位或?qū)嶒?yàn)室每年是否開(kāi)展應(yīng)急演練；七是相關(guān)人員是否參加演練；八是是否確保相關(guān)人員知曉和掌握應(yīng)急預(yù)案。

10 結(jié)語(yǔ)

生物安全風(fēng)險(xiǎn)事故發(fā)生較多，且與生物風(fēng)險(xiǎn)因子密切相關(guān)，容易引起一系列生物安全風(fēng)險(xiǎn)事故，引發(fā)的后果及其次生后果極其嚴(yán)重。因此，通過(guò)以上9 個(gè)方面的內(nèi)容對(duì)生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，通過(guò)建立的條款檢查實(shí)驗(yàn)室是否存在這些方面的問(wèn)題，并對(duì)發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題的原因進(jìn)行追究，從而提出針對(duì)性的生物安全風(fēng)險(xiǎn)防范和控制對(duì)策，對(duì)于單位的安全生產(chǎn)及員工安全有著極為重要的意義。